CS270192B1 - Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 - Google Patents
Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270192B1 CS270192B1 CS888150A CS815088A CS270192B1 CS 270192 B1 CS270192 B1 CS 270192B1 CS 888150 A CS888150 A CS 888150A CS 815088 A CS815088 A CS 815088A CS 270192 B1 CS270192 B1 CS 270192B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- herpes simplex
- glycoprotein
- type
- simplex virus
- hybridoma
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
CS 270 192 B1 1
Vynález sa týká nového hybridimu, t»J. hybridného jednobunkového organizmu, zostroje-ného fúziou myžej myelámovéJ buňky Sp2/0 a myíej alezinovej lymfoidnej buňky,produkujúoejprotilátku vod glykoproteinu gC virusu Herpes simplex typ 1. U víruau Herpes simplex rozeznáváme dva antigénne odliSné typy Herpes simplex typ 1a typ 2. Doteraz sa protilátky /antiaára/ voSi, virusu Herpes simplex typ 1 připravovaliimunlzáciou pokusnýoh zvierat, naj8astej>ie králikov, purifikováným, alebo nepurifiková-ným virusem resp. niektorým izolovaným proteinem /Forghani B,, Sohmidt N,, Lennette E.H.1Solid phase radioimmunoassay for Identification of herpesvirus hominis types 1 and 2 fromolinioal materiál.Appl. Mioroblol. 28, /1974/ 661 - 667:' Dreesman G.R., Vatson 0.0,, Cour-tney R.J., Adam E., Melniok J.L. 1 Oeteotion of herpesvirus type-speoifio antibody by mioro-solid-phase radioimmunometrio asaayt Intervlrology 12. /1979/ 115 “ 119 )· Sérum taktoimunizovanýoh zvierat, odebrané po viaoerýoh dávkách antigénu, slúžilo ako zdroj protilátoktzv. typovoSpeoifiokýoh, ktoré sa využívali na dSkaz antigénu virusu Herpes simplex typ 1v základnom výskume a v imunodiagnostiokej praxi. Vzhíadom na to, že virusy Herpes simplextyp 1 a 2 obsahujú nielen typovoSpeoifioké, ale aj typovospoloíne antigénne determinanty,takto připravené antiséra vo8i virusu Herpes simplex typ 1 obsahujú vysoké hladiny typovo-spoloSnýoh protilátok, které slažuju resp. úplné znemožňujú správné ur&enie typu infikujú-oeho virusu pri diagnostiokom testovaní, Typovoepolo8né protilátky sa obvykle odstraňujúzo sér vysyoovaním s virusom Herpes simplex typ 2, 80 Je prooedúra velmi náro8na na mate-riál naviao len v malom po8te pripadov úspeéná. Výrobné Šarže konven8nýoh typovoSpeoifio-kýoh antisér sa dajú lažko Standardizoval a bývajú v Sirokom rozmedzi kvality. V poslednomSase sa s úspeohom použivajú na typizáoiu virusu Herpes simplex typ 1 monoklonálne proti-látky tzv, typovoSpeoifioké, ktoré sú sohopné ^etsgovaí infekoiu virusom Herpes simplextyp 1 v kliniokom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz použivanýoh postupov sa nevyskytnú, ak Je k dispozioii hybri-dámová buňková línia produkujúoa typovoSpeoifloků monoklonálnu protilátku vo8i glýkopro-einu gC virusu Herpes simplex typ 1, ktorá Je uložená v zbierke. hybridémov Virologiokéhoústavu SAV, Mlýnská dolina 1, Bratislava pod oznaSenim VÚ 96/4.
Uvedeny hybridám bol získaný sp&sobom známým z odbornéj literatúry (Kohler, G., Mil-stein, C.t Continuous oultures of fused oells seoreting antibody of predefined speoifioi-ty. Nátuře, 256, /1975/» 495,, Oerhard, V.t Fusion of oells ln euspension and outgrowthof hybride in oonditloned mediu»· Monoolonal antibodies, A nev dimension ln Biologioal ana-lyses. Kennett R. H. a spol,, eds, Nev York, Plenům Press /1980/, 370.) Hybridně buňkyzískané po fúzii mySioh myelámovýoh Sp2/0 buniek a buniek ziekanýoh zo sleziny mySi BALB/oimunizovanéJ extraktom buniek infikovaných virusom Herpes simplex typ 1, boli klonovanéa po otestovaní bol vybraný klon VÚ T96/4. Výhodou hybridámu je, že produkuje homogénnuprotilátku, tzv, monoklonálnu protilátku, ktorá Je sohopná Speoifloky reagoval s virusomHerpes simplex typ 1. Hybridám VÚ T96/4 možno kultivoval in vitro v médiaoh vhodnýoh preživoSiSne buňky alebo in vivo v perltoneálnej dutině mySi kmeňa BALB/o. Z konzerv zmraze-nýoh buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možno za8al produkoiu protilátky bez 2alSeJimunizáoie zvierala antigénom. Příklad:
Za úBelom získania va88leho množstva monoklonálnej protilátky VÚ T96/4 kultiváoiouhybridámovýoh buniek in vivo, 5x10^ buniek sa aplikovalo do perltoneálnej dutiny mySi.
Pre lepSie uohytenie buniek bo>la myS 15 dní pfed aplikáoiou buniek premedikovaná parafí-novým olejom /0,5 ml intraperitoneálne na 1 myS/. Po 10 dňooh rastu hybridámu v peritonoál-nej dutině, bola myt zabitá a vyprodukovaná asoitioká tekutina odobraná. Týmto postupemmožno priemerne získal asi 7 ml asoitiokej tekutiny obsahujuoej 8 mg/ml protilátky. Aaci-tioká tekutina obsahujúoa produkt hybridámu VÚ 96/4 vykazovala Speoifiokú vazbu k virusuHerpes simplex typ 1 v rádioimunoanalytiokom teste /RXA/, v imunoenzymatickéj analýze/ELISA/ a v imunofluoresoenáhom teste /IF/. Metodou rádioimunopreoipitáoie a elektroforézy
Claims (1)
- 2 CS 270 192 B1 v polyakrylamidovom géli aa zlatila vazba monoklonálnej protilátky na glykoprotein gCvirusu Herpes simplex typ 1. Buňky hybridámu VÚ T96/4 rastů in vitro ako polosuspenzná kultura. Majů gulatý tvara vefkosi oharakteristiokú pro myelámová buňky. Obsahujú fúzovaná buňková jadra, aú aneu-ploidná. Buňky hybridámu VÚ Týá/4 máju ultraMtruktúrny obraz typických myelámovýoh buniek,kde prevažujúoou organelou au volné a na membránu viazaná polyribozámy. Základným kulti-vaSným mádiom je Dulbeooova modifikáoia Eagleovho minimálneho esenolálneho mádla (Dulbecoo,R., Freeman, O., Virology J8 /1959/» 396 ). Toto mádlům, označovaná ako DMEM, je pre kulti-váoiu hybridámu doplněná gentamyoíhom a lnaktivovaným prekolostrálným teťaoim sárom (10%,Bioveta, Ivanovice na Haná). Hybridem je kultivovaný prl 37 °C v atmosfáre C02« Jehogeneračná doba Je přibližné 24 h. Produkovaná protilátka Je monoklonálny imunoglobulinpodtriedy IgG 2b. Hybridám VÚ T96/4 može byl využívaný ako zdroj protilátky voči glykoproteínu gC virusuHerpes simplex typ 1, ktorá sa da použil na kvalitatívny dSkaz přítomnosti virusu Herpessimplex typ 1 vo vyžetrovanom materiále, na kvantitativné stanovenle množstva Infikujúoehovirusu resp. glykoproteínu gC, pri vyhodnocováni epidemiologlokej situáoie, na purifikáoiuglykoproteínu gC z extraktov infikovanýoh buniek pomooou imunoafinitnej ohromatografie aako zdroj protilátky Jedinej podtriedy (XgC 2b) pre přípravu antisár Speoifiokýoh pre uve-denú podtrledu. PRBDMET V YN Á L B Z V MyMí lymfooytáray hybridám VÚ T96/4, produkujúoi monoklonálnu protilátku podtriedyIgG 2b voSi glykoproteínu gO virusu Herpes simplex typ 1.Opravy ve vytištěných popisech vynálezu Ve vytištěném popisu vynálezu k autorskému osvědčeníč. 270 192 (PV 8150-88,X) je vlevo dole chybněvytištěno číslo popisu. Správně : CS 270 192 B1 TISK-Konrádová 10.10.1991
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815088A1 CS815088A1 (en) | 1989-10-13 |
| CS270192B1 true CS270192B1 (sk) | 1990-06-13 |
Family
ID=5431702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270192B1 (cs) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888150A patent/CS270192B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815088A1 (en) | 1989-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walsh et al. | Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus proteins: identification of the fusion protein | |
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| Rowe et al. | Differences in B cell growth phenotype reflect novel patterns of Epstein‐Barr virus latent gene expression in Burkitt's lymphoma cells. | |
| Noble et al. | Anti-gD monoclonal antibodies inhibit cell fusion induced by herpes simplex virus type 1 | |
| US4634666A (en) | Human-murine hybridoma fusion partner | |
| EP0610250B2 (en) | Porcine reproductive respiratory syndrome (prrs) vaccine and diagnostic | |
| US4535057A (en) | Immunoassay employing monoclonal herpes simplex antibody and biotin-avidin detection system | |
| Yeargan et al. | Rapid subtyping of equine herpesvirus 1 with monoclonal antibodies | |
| Balachandran et al. | Monoclonal antibodies to two glycoproteins of herpes simplex virus type 2 | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| US4743562A (en) | Purified human cytomegalovirus protein | |
| AU735981B2 (en) | Peptide reagent for the detection of human cytomegalovirus (CMV) | |
| Bolognesi et al. | Immunological properties of avian oncornavirus polypeptides | |
| KR100523972B1 (ko) | 엡스타인-바르바이러스펩타이드및이들펩타이드에대한항체 | |
| Cui et al. | Monoclonal-antibody-mediated enzyme-linked immunosorbent assay for detection of reticuloendotheliosis viruses | |
| Lenkei et al. | High correlations of anti-CMV titers with lymphocyte activation status and CD57 antibody-binding capacity as estimated with three-color, quantitative flow cytometry in blood donors | |
| US5130232A (en) | Monoclonal antibody immunoassay kit for avian reticuloendotheliosis virus | |
| Forghani et al. | Serological reactivity of some monoclonal antibodies to varicella-zoster virus | |
| Franko et al. | Monoclonal antibodies specific for Hantaan virus. | |
| CS270192B1 (sk) | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 | |
| Forghani et al. | Antisera to human cytomegalovirus produced in hamsters: reactivity in radioimmunoassay and other antibody assay systems | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| Snyder et al. | Isolation and characterization of proteins carrying the feline oncornavirus-associated cell-membrane antigen | |
| US4572896A (en) | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 |