CS267633B1 - Způsob výroby enzymového čidla - Google Patents

Abstract

Řešoni se týké oboru analytické chemie, Ka nezaschlý roztok polymeru v organickém rozpouštědle se umísti nosič enzymu, nejlépe v podobě sií- ky. Po dokonalém odpařeni rozpouštědla je možno na nosič enzymu běžnými postupy zakotvit enzym nebo směs enzymů.

Description

Vynález so týká způdobu výroby enzymového čidla, tvořeného kyslíkovým planárním čidlem, sestávajícím z indikační platinové nebo zlaté elektrody a referentní chloridostříbrné elektrody, na johož povrchu je vytvořena vrstva chloridu alkalického kovu s nánosem roztoku polymeru v rozpouštědle. Enzymové čidlo je určeno pro použití především ke stanovení koncentrace organických látek.

V současné době jsou konstruována enzymová čidla, která sledují úbytek kyslíku z reakčni směsi pomocí kyslíkového čidla Clarkova typu. Enzymy jsou zakotveny na vhodných nosičích, ktoré těsno přiléhají k oddělovací membráně elektrodového systému. Membrány se zhotovují z různých materiálů v podobě folií několik mikrometrů silných. Způsob fixace enzymového nosiče a oddělovací membrány k voltameproraetrickému systému Clarkova čidla je mechanický, v důsledku toho často dochází k porušeni oddělovací membrány nebo i enzymového nosiče.

Dálo je znám způsob výroby kyslíkového čidla vycházející z planárnlho elektrodového systému sestávajícího ze zlaté nebo platinové elektrody a referenční chloridostříbrné elektrody, zalitých ve vhodné zalévací hmotě. Na planáml elektrodový systém a plochu mezi oběma elektrodami se nanese vodný roztok chloridů alkalického kovu. Po odpařeni vody se solný povlak překryje například chloroformovým roztokem polymethylmethakrylátu a chloroform se nechá při teplotě okolo 20 °C odpařit.

Další zlepšení tohoto způsobu výroby enzymového čidla přináší vynález. Jeho podstata spočívá v tom, že se na nezaschlou vrstvu roztoku polymerní látky v rozpouštědle umístí nosič enzymu, výhodně v podobě síiky, na jehož povrch se imobilizujo enzym nebo směs enzymů. Další výhodné provedení spočívá v tom, že se nosič po umístění na nezaschlou iTstvu polymerní látky a po době potřebné k jejímu zaschnutí zvlhčí čistým rozpouštědlem, ve kterém byla rozpuštěna polymerní látka po odpaření rozpouštědla se na nosič zakotvi enzym nebo nosič onzyraů. i

Vyšší účinek způsobu výroby spočívá ve snížení počtu mechanických dílů, potřebných ke zhotoveni enzymového Čidla a v jednoduchosti hromadné výroby těchto čidel.

Způsob výroby enzymového čidla je dále blíže popsán na příkladu provedeni a podle připojeného výkresu.

Čidlo sestává z tělesa £ čidla, v němž je uchycena platinová elektroda £ a referentni ohloridostříbmá elektroda na tělese 1 je umístěna polymethylmethakrylátová membrána 4, pod niž je nanesena vrstva chloridu alkalického kovu a na ni nosič 6 se zakotveným enzymem.

Součásti enzymového čidla byly zhotoveny z platinového drátku o 0 0,3 nim a stříbrného drátku o 0 0,5 mm. Jako zalévací hmota byla použita epoxidová pryskyřice. Jako nosiče enzymu bylo použito polyamidové sítky. Proudobá odezva enzymového čidla byla pomocí analogového I/U konvertoru a zaznamenávána dvoukanálovým liniovým zapisovačem. Napětí vkládané na platinovou elektrodu proti chloridostříbrné bylo - 0,6 V.

Enzymové čidlo s zmobilizovanou glukozooxidazou, případně koimobilizovanou glukozooxidazou a katalazou, byla zasunuta do dvouplášíové temperované reakční nádobky (30 °C) o objemu 1,5 ml, Do této nádobky bylo pipetováno 1,4 ml 0,1 tnol.1~¹ fosfátového pufru (pH = 5,8) s 0,05 mol,1^-1 NaCl, syceného vzdušným kyslíkem. Směs byla promíchávána magnetickým raíchadlem. Reakce byla zahájena vstřiknutím 100 ul příslušně zředěného roztoka D-glukozy. Při vyhodnocováni byla sestrojena tečna v počátku křivky a změřena velikost její směrnice, případně zaznamenána hodnota vzniklého píku derivačniho záznamu. Zjištěné údaje odpovídaly koncentraci D-glukozy v nástřiku do reakční nádobky.

Claims (2)

1, Způsob výroby enzymového čidla, tvořeného kyslíkovým planárním čidlem, sestávajícím z indikační platinová nobo zlaté elektrody a referenční chloridestříbrné elektrody, na jehož povrchu je tvořena vrstva chloridu alkalického kovu s nánosem roztoku polymeru v rozpouštědlo, vyznačující se tím, žo se na nezaschlou vrstvu roztoku polymerní látky v rozpouštědlo umístí nosič enzymu, výhodně v podobě sííky, na jehož povrch so imobilizujo onzym nobo směs enzymů.

2. Způsob výroby podlo bodu 1 vyznačující se tím, že se nosič enzymu po umístění na nezaschlou vrstvu polymerní látky a po době potřebné k jejímu zaschnutí zvlhčí čistým rozpouštědlem, vo kterém byla rozpuštěna polymerní látka a po odpaření rozpouštědla se na nosič zakotví onzym nebo směs enzymů.