CS262081B1 - Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase - Google Patents
Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase Download PDFInfo
- Publication number
- CS262081B1 CS262081B1 CS873178A CS317887A CS262081B1 CS 262081 B1 CS262081 B1 CS 262081B1 CS 873178 A CS873178 A CS 873178A CS 317887 A CS317887 A CS 317887A CS 262081 B1 CS262081 B1 CS 262081B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- reactors
- synthesis
- peptides
- series
- solid phase
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Zařízení pro automatickou výrobu řady peptidů syntézou na pevné fázi, které se skládá ze zásobních lahví, ve kterých Je přetlak 20 až 50 kPa inertního plynu, spojených přes distribuční ventil se sériově zapojenými reaktory, které jsou spojeny přes čtyřcestný ventil s odpadem, a zásobník je propojen přes čtyřcestný ventil a peristaltické čerpadlo s distribučním ventilem a reaktory. Zařízení bylo s úspěchem využito pro syntézu řady peptidů současně.Equipment for automatic production of series peptide synthesis by solid phase synthesis consists of storage bottles in which it is overpressure of 20 to 50 kPa of inert gas through the distribution valve in series connected reactors that are connected via a four-way valve with waste, and a container it is connected via a four-way valve and peristaltic pump with distribution valve and reactors. The device has been successfully used for synthesis of a number of peptides simultaneously.
Description
(54) Zařízení pro automatickou výrobu řady peptidů syntézou na pevné fázi(54) Equipment for the automated production of a variety of peptides by solid phase synthesis
Zařízení pro automatickou výrobu řady peptidů syntézou na pevné fázi, které se skládá ze zásobních lahví, ve kterých Je přetlak 20 až 50 kPa inertního plynu, spojených přes distribuční ventil se sériově zapojenými reaktory, které jsou spojeny přes čtyřcestný ventil s odpadem, a zásobník je propojen přes čtyřcestný ventil a peristaltické čerpadlo s distribučním ventilem a reaktory.Installations for the automated production of a series of peptides by solid phase synthesis, consisting of storage cylinders in which an overpressure of 20 to 50 kPa of inert gas is connected through a distribution valve to series connected reactors connected via a four-way waste valve and the container is interconnected via a four-way valve and peristaltic pump with a distribution valve and reactors.
Zařízení bylo s úspěchem využito pro syntézu řady peptidů současně.The device was successfully used for synthesis of many peptides simultaneously.
Obr. <Giant. <
Vynález se týká zařízení pro automatickou výrobu řady pepidů syntézou na pevné fázi.The present invention relates to an apparatus for automatically producing a series of peptides by solid phase synthesis.
V současné době je při základním výzkumu nových preparátů peptidového charakteru kladen požadavek získat k předběžnému testování velké soubory poměrně malých množství peptidů. Jak klasické provedení syntézy peptidů na pevné fázi v míchaném reaktoru, tak kontinuální průtočné zařízení, které vyžaduje aparaturu podobnou zařízení pro vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií, tomuto trendu hevyhovují, protože syntetizují větší množství vždy jen jednoho peptidů. Připojování chráněných aminokyselin k polymernímu nosiči se provádí promývacími cykly, které většinou řídí automat. Aby bylo možné syntetizátor peptidů automaticky řídit, je nutné použít kompaktibilní cykly, takže všechny kroky syntézy jsou shodné s výjimkou připojování aminokyseliny. Tímto způsobem se syntetizují stále se opakujícími shodnými cykly jednotlivé peptidy. Současná zařízení však neumožňují přípravu několika různých peptidů vedle sebe, takže každé i sebemenší množství žádaných peptidů se musí připravovat samostatně. To je náročné hlavně časově, přitom spotřeba energie 1 surovin (zvláště rozpouštědel) je značná.Currently, in the basic research of new peptide-based preparations, it is desired to obtain large amounts of relatively small amounts of peptides for preliminary testing. Both the classical performance of solid phase peptide synthesis in a stirred reactor and a continuous flow device that requires an apparatus similar to a high performance liquid chromatography device are in keeping with this trend because they synthesize larger quantities of only one peptide at a time. Attachment of the protected amino acids to the polymeric carrier is accomplished by washing cycles, which are generally controlled by the automation. In order to be able to automatically control the peptide synthesizer, it is necessary to use compatible cycles so that all synthesis steps are identical except for the amino acid coupling. In this way, individual peptides are synthesized by repeating identical cycles. However, current devices do not allow the preparation of several different peptides side-by-side, so that even the smallest amount of peptides required must be prepared separately. This is mainly time consuming, while the energy consumption of raw materials (especially solvents) is considerable.
Uvedené nevýhody odstraňuje zařízení pro automatickou výrobu řady peptidů syntézou na pevné fázi, skládající se ze zásobních lahví pod tlakem, distribučního a vícecestného ventilu, průtočných reaktorů a peristaltického čerpadla podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že zásobní láhve, ve kterých je přetlak 20 až 50 kPa inertního plynu, jsou spojeny přes distribuční ventil se sériově zapojenými reaktory, které jsou spojeny přes vícecestný ventil s odpadem a zásobník je propojen přes vícecestný ventil a peristaltické čerpadlo s distribučním ventilem a reaktory.These disadvantages are overcome by a solid-phase synthesis process for the production of a variety of peptides consisting of pressurized storage cylinders, a distribution and multi-way valve, flow reactors, and a peristaltic pump according to the invention. up to 50 kPa of inert gas are connected via a distribution valve to series connected reactors, which are connected via a multi-way valve to the waste, and the reservoir is connected via a multi-way valve and a peristaltic pump to a distribution valve and reactors.
Zařízení podle vynálezu umožňuje současnou výrobu řady různých peptidů a tím podstatně zkracuje dobu jejich přípravy. To má hlavní výhodu v tom, že je okamžitě k dispozici např. menší množství řady peptidů, potřebných třeba pro klinické zkoušky, další syntézu nebo výzkumné práce. Zařízením podle vynálezu dojde k efektivnějšímu využití všech surovin, energie i pracovní obsluhy, protože zvláště při miniaturizaci zařízení a jeho napojení na počítač je celá výroba řízena minimálním počtem lidí a z jednoho místa. Zařízení podle vynálezu podstatně zrychluje a zjednodušuje syntézu peptidů.The device according to the invention makes it possible to produce a number of different peptides at the same time, thus significantly reducing the time required for their preparation. This has the main advantage that, for example, fewer peptides are needed, for example, for clinical trials, further synthesis or research work. The device according to the invention makes more efficient use of all raw materials, energy and labor, because especially in miniaturization of the device and its connection to the computer, the whole production is controlled by a minimal number of people and from one place. The device according to the invention substantially speeds up and simplifies the synthesis of peptides.
Na připojených výkresech je znázorněno zařízení podle vynálezu. Na obr. 1 je znázorněn v řezu jeden průtokový reaktor, na obr. 2 je schematicky nakresleno sériové zapojení řady reaktorů tak, jak bylo ověřeno v praxi autory vynálezu při přípravě řady nových peptidů.The device according to the invention is shown in the accompanying drawings. Fig. 1 is a cross-sectional view of one flow reactor; Fig. 2 schematically illustrates a series connection of a series of reactors as verified in practice by the inventors in the preparation of a number of new peptides.
Zařízení podle vynálezu se skládá ze zásobních lahví 1, ve kterých jsou připravena různá rozpouštědla a roztoky činidel jako např. DMF, DCM, DIEA v DCM, TFA v DCM apod. Ze zásobních lahví 1 jsou teflonovými hadičkami 7 přes distribuční ventil 2 napouštěny žádané roztoky do reaktorů 4, které jsou sériově propojeny a jejichž počet není omezen. V konkrétním případě je možno zařízení použít i jen pro jeden reaktor 4, přičemž velikost reaktorů 4 se řídí potřebou připravovaného množství peptidů. Z reaktorů 4 vedou teflonové hadičky 7 přes čtyřcestný ventil 3 do odpadu 8, kde se shromažďují již nepotřebná rozpouštědla. Zásobník 6, ve kterém je aktivovaná chráněná aminokyselina, je spojen teflonovými hadičkami 7, přes čtyřcestný ventil 3 a peristaltické čerpadlo 5 a distribuční ventil 2 s reaktory 4.The device according to the invention consists of storage bottles 1 in which various solvents and reagent solutions such as DMF, DCM, DIEA in DCM, TFA in DCM and the like are prepared. From the storage bottles 1 the desired solutions are filled with Teflon tubing 7 through the distribution valve 2. to reactors 4 which are connected in series and whose number is not limited. In the specific case, the apparatus can be used for only one reactor 4, the size of the reactors 4 being determined by the amount of peptides to be prepared. From the reactors 4, the Teflon tubes 7 pass through the four-way valve 3 to the waste 8, where the unnecessary solvents are collected. The container 6, in which the protected amino acid is activated, is connected by Teflon tubing 7, via a four-way valve 3 and a peristaltic pump 5 and a distribution valve 2 to the reactors 4.
Zařízení podle vynálezu pracuje tak, že ze zásobních lahví 1, které jsou pod tlakem inertního plynu, jehož hodnota se vyrovnává pojistnými tlakovými ventily, nadávkuje příslušný roztok přes distribuční ventil 2 do reaktorů 4. V reaktoru 4 je polymerní nosič, upravený benzhydrylaminovými skupinami nebo chlormetylovanými skupinami esterifikovanými karboxyterminální aminokyselinou, na který se postupně přikondenzovávají aktivní chráněné aminokyseliny, které se předem mimo připraví a shromažďují v zásobníku 6. Tyto chráněné aminokyseliny se ze zásobníku 6 vedou přes čtyřcestný ventil 3 a peristaltické čerpadlo 5 a distribuční ventil 2 do reaktorů 4. Po nadávkování chráněné aminokyseliny se přepne čtyřcestný ventil tak, aby ACA recirkulovala v okruhu, který tvoří peristal-. tické čerpadlo 5, distribuční ventil 2, reaktor 4 a čtyřcestný ventil 3. Po ukončení reakce, která se sleduje ninhydrinovým testem, se čtyřcestný ventil přepne do původní polohy a ACA se vymyje z reaktorů 4 a příslušné kontaminované části zařízení rozpouštědlem přímo do odpadu 8. Reaktory jsou určeny typem chráněné aminokyseliny, kterou je nutné kondenzovat, a proto před každým reakčním cyklem se operativně mění počet sériově zapojených reaktorů 4.The device according to the invention operates by dispensing the respective solution via the distribution valve 2 into the reactors 4 from the storage cylinders 1 which are under the pressure of an inert gas whose value is equalized by pressure relief valves. In the reactor 4 there is a polymeric carrier treated with benzhydrylamine groups or chloromethylated carboxyterminal amino acid esterified groups to which active protected amino acids are condensed sequentially, which are pre-prepared and collected in reservoir 6. These protected amino acids are passed from reservoir 6 via a four-way valve 3 and a peristaltic pump 5 and a distribution valve 2 to the reactors 4. dosing of the protected amino acid is switched by the four-way valve so that the ACA recirculates in the peristal-forming circuit. After completion of the reaction, which is monitored by the ninhydrin test, the four-way valve is brought back to its original position and the ACA is washed out of the reactors 4 and the respective contaminated part of the device with solvent directly to the waste 8. The reactors are determined by the type of protected amino acid to be condensed and therefore the number of reactors 4 connected in series is operatively changed before each reaction cycle.
Reaktor 4 je sériově vyráběná polypropylenová chromatografická kolonka, opatřená uvnitř dvěma síťkami, mezi kterými je polymerní nosič a zvenku má 2 kónické 'koncovky, které umožňují sériové zapojení reaktorů. Vlastní reaktor 4 je ovšem možné vyrobit ze skla či jiného vhodného materiálu, přičemž vždy je nutno splnit požadavek přesného zhotovení do sebe zapadajících koncovek. Velikost reaktorů je určena množstvím připravovaných peptidů.Reactor 4 is a mass-produced polypropylene chromatography column, provided with two meshes inside, with a polymeric support between them and externally having 2 conical terminals that allow serial connection of the reactors. However, the actual reactor 4 can be made of glass or other suitable material, while always meeting the requirement of precisely forming the interlocking terminals. The size of the reactors is determined by the amount of peptides being prepared.
V zařízení podle vynálezu se syntetizují peptidy na pevné fázi s použitím průtočných reaktorů zapojených do série, v kterých je umístěno malé množství polymerního nosiče a tak je možné připravit větší počet peptidů v množství dostatečném pro orientační biologické testy. Při vlastním ověřování zařízení podle vynálezu se osvědčily polypropylenové průtokové reaktory s dvojitými síťkami, zabraňujícími míšení nosiče, které se běžně používají k předchromatografii při vysokoúčinné kapalinové chromatografii (dále jen HPLC). V zařízení podle vynálezu se do reaktoru umístí polymerní nosič. Reaktory jsou opatřeny koncovkami, podobnými špičce jednorázové injekční stříkačky, které je možné do sebe zasunout. Takovouto sérií reaktorů lze protlačovat kapalinu oběma směry pouhým mírným přetlakem nosného plynu (vzduch, dusík). Syntézu je možno kdykoliv přerušit zrušením přetlaku.In the device according to the invention, solid phase peptides are synthesized using series-connected flow reactors in which a small amount of polymeric carrier is placed, and thus it is possible to prepare a plurality of peptides in an amount sufficient for indicative bioassays. In the actual verification of the device according to the invention, polypropylene flow reactors with double-meshed, anti-carrier mixers have been found to be commonly used for pre-chromatography in high performance liquid chromatography (HPLC). In the apparatus of the invention, a polymeric carrier is placed in the reactor. The reactors are equipped with tips similar to the tip of a disposable syringe that can be inserted. With this series of reactors, the liquid can be forced in both directions by a slight overpressure of the carrier gas (air, nitrogen). The synthesis can be interrupted at any time by canceling the overpressure.
Jednotlivé reaktory se mohou ze série vyřadit nebo naopak nový reaktor zařadit. Této přednosti se nejvíce používá právě při syntéze podobných peptidů, které se liší v jedné aminokyselině, případně vynecháním aminokyseliny nebo zařazením jedné aminokyseliny navíc. Principiálně lze však zařízení použít při syntéze velkého souboru peptidů (více než stoj. Reaktory se pak budou spojovat k zařazení žádané aminokyseliny nezávisle na počtu připojených aminokyselin.The individual reactors can be removed from the series or, on the contrary, a new reactor can be included. This advantage is most often used in the synthesis of similar peptides that differ in one amino acid, possibly by omitting an amino acid or by adding one extra amino acid. In principle, however, the device can be used to synthesize a large set of peptides (more than cost. The reactors will then be coupled to rank the desired amino acid independently of the number of amino acids attached.
Následující příklady provedení zařízení podle vynálezu pouze dokládají, ale nijak neomezují.The following examples illustrate, but are not limited to, the apparatus of the present invention.
Příklad 1Example 1
Do polypropylenových reaktorů (20 X 4 milimetry, volný obsah 0,7 ml) se umístí 150 mg benzhydrylaminového polymerního nosiče (0,8 mmolu/g). Reaktory se označí a zapojí do série. Cykly syntézy sestávají z následujících promývacích kroků:150 mg of benzhydrylamine polymer support (0.8 mmol / g) was charged into polypropylene reactors (20 X 4 mm, free content 0.7 ml). The reactors are labeled and connected in series. The synthesis cycles consist of the following washing steps:
1. 50 % TFA v DCM,1. 50% TFA in DCM
2. DCM,2. DCM
3. 10 % DIEA v chloroformu,3. 10% DIEA in chloroform,
4. DCM,4. DCM
5. DMF,5. DMF,
6. roztok 5 mmolů HOBt esteru aminokyseliny v DMF,6. a solution of 5 mmol of HOBt amino acid ester in DMF,
7. DCM.7. DCM.
První syntetický cyklus začíná krokem 2. V sérii jako poslední ve směru toku činidel byl zařazen reaktor, z kterého byly odebírány vzorky. V případě pozitivního· testu na volnou aminoskupinu po provedené kondenzaci byly kroky č. 6 a 7 opakovány a do roztoku aktivní komponenty bylo přidáno katalytické množství dimethylamidopyridinu (100 mg). V jednotlivých cyklech byly připojeny následující chráněné aminokyseliny:The first synthetic cycle begins with step 2. The reactor from which the samples were taken was the last in the reagent flow direction. In the case of a positive test for the free amino group after condensation, steps 6 and 7 were repeated and a catalytic amount of dimethylamidopyridine (100 mg) was added to the active component solution. The following protected amino acids were added in each cycle:
BocLeu, Boc-Pro, Boc-Asn,BocLeu, Boc-Pro, Boc-Asn
Boc-Arg(Tos), Boc-Ser(Bzl),Boc-Arg (Tos), Boc-Ser (Bzl),
Boc-Asp( OBzl], Boc-Arg(Tos),Boc-Asp (OBzl), Boc-Arg (Tos)
Boc-Tyr(Z), Boc-Tyr(Z) a Boc-Val.Boc-Tyr (Z), Boc-Tyr (Z), and Boc-Val.
Postupně byl vždy na jeden cyklus (zařazení jedné aminokyseliny) vyřazen jeden reaktor. Výjimku tvoří první a poslední reaktor ve směru toku činidel, který byl ponechán v sérii celou syntézu a na vyřazení tyrosinu ze sekvence byl použit pouze jeden reaktor. Hmotnostní přírůstek byl cca 100 miligramů na reaktor. Jednotlivé peptidyl-pryskyřice byly štěpeny kapalným fluorovodíkem s přídavkem 5 % p-kresolu, 1 horinu při 0 °C. Po odpaření fluorovodíku byl p-kresol extrahován chladným ethylacetátem a peptid byl rozpuštěn ve 20% kyselině octové. Po lyofilizaci byly surové produkty (20,2 až 47,2 mg] analyzovány na HPLC chromatografu a bylo zjištěno aminokyselinové složení. Výsledky jsou uvedeny v tabulkách č. 1 a 2.One reactor was sequentially phased out for one cycle (inclusion of one amino acid). The only exception is the first and last reactor downstream of the reagent, which was left in series for the synthesis and only one reactor was used to exclude tyrosine from the sequence. The weight gain was about 100 milligrams per reactor. Individual peptidyl resins were digested with liquid hydrogen fluoride with the addition of 5% p-cresol, 1 horine at 0 ° C. After the hydrogen fluoride was evaporated, the p-cresol was extracted with cold ethyl acetate and the peptide was dissolved in 20% acetic acid. After lyophilization, the crude products (20.2 to 47.2 mg) were analyzed by HPLC chromatography and the amino acid composition was determined and the results are shown in Tables 1 and 2.
TABULKA 1TABLE 1
Aminokyselinové analýzy jednotlivých nových peptidůAmino acid analysis of individual new peptides
Peptid Ak Aminokyselinová analýzaPeptide If Amino Acid Analysis
matografií za podmínek:with the following conditions:
(*) isokraticky 40 % methanolu ve vodě obsahující 0,1 °/o TFA, průtok 25 ml/hod., kolona 150 x 3 mm plněná silikagelem s hydrofobními uhlíkatými zbytky, detekce UV při 220 nm, (**) gradientově fáze A methanol, fáze B voda obsahující 0,1 % TFA, profil gradientu:(*) Isocratically 40% methanol in water containing 0.1% TFA, flow rate 25 ml / h, 150 x 3 mm column packed with silica gel with hydrophobic carbon residues, UV detection at 220 nm, (**) gradient phase A methanol, phase B water containing 0.1% TFA, gradient profile:
čas (min) 0 15 35 36 obsah fáze A v B (%) 23 38 38 23 průtok 0,1 ml/min, kolona 150 x 2,1 mm, detekce UV 210 nm a 280 nm, (***) peptidy č. 10 a 11 byly syntetizovány v prvním a posledním reaktoru.time (min) 0 15 35 36 phase A content in B (%) 23 38 38 23 flow rate 0.1 ml / min, column 150 x 2.1 mm, UV detection 210 nm and 280 nm, (***) peptides Nos. 10 and 11 were synthesized in the first and last reactors.
Vysvětlivky zkratek použitých v textu: Arg — argininExplanations of abbreviations used in the text: Arg - arginine
Leu — leucinLeu - leucine
ACA — aktivovaná chráněná aminokyselina Pro — prolinACA - activated protected amino acid Pro - proline
DMF — dimetylformamid Ser — serinDMF - dimethylformamide Ser - serine
DCM — dichlormetan Tyr — tyrosinDCM - dichloromethane Tyr - tyrosine
TFA — kyselina trifluoroctová Val — valinTFA - trifluoroacetic acid Val - valine
DIEA — dlisopropyletylamin Boc — t-butyloxykarbonylDIEA - dlisopropylethylamine Boc - t-butyloxycarbonyl
HOBt — hydroxybenztriazol OBzl — benzyloxyHOBt - hydroxybenztriazole OBzl - benzyloxy
Asn — asparagin Z — benzyloxykarbonylAsn - asparagine Z - benzyloxycarbonyl
Ašp — kyselina asparagováAsp - aspartic acid
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS873178A CS262081B1 (en) | 1987-05-05 | 1987-05-05 | Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS873178A CS262081B1 (en) | 1987-05-05 | 1987-05-05 | Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS317887A1 CS317887A1 (en) | 1988-07-15 |
CS262081B1 true CS262081B1 (en) | 1989-02-10 |
Family
ID=5371117
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS873178A CS262081B1 (en) | 1987-05-05 | 1987-05-05 | Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS262081B1 (en) |
-
1987
- 1987-05-05 CS CS873178A patent/CS262081B1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS317887A1 (en) | 1988-07-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dryland et al. | Peptide synthesis. Part 8. A system for solid-phase synthesis under low pressure continuous flow conditions | |
US4816513A (en) | Automated polypeptide synthesis process | |
Arshady et al. | Peptide synthesis. Part 1. Preparation and use of polar supports based on poly (dimethylacrylamide) | |
Ostresh et al. | Peptide libraries: determination of relative reaction rates of protected amino acids in competitive couplings | |
Merrifield | Solid phase synthesis (Nobel lecture) | |
US4631211A (en) | Means for sequential solid phase organic synthesis and methods using the same | |
ZUCKERMANN et al. | Design, construction and application of a fully automated equimolar peptide mixture synthesizer | |
Jung et al. | Multiple peptide synthesis methods and their applications. New synthetic methods (87) | |
DE69113484T3 (en) | METHOD AND DEVICE FOR BIOPOLYMERSYNTHESIS. | |
US5186898A (en) | Automated polypeptide synthesis apparatus | |
Pugh et al. | Effects of resin swelling and substitution on solid phase synthesis | |
US11319339B2 (en) | Multi-channel peptide synthesizer and operating method thereof | |
Le-Nguyen et al. | Renin substrates. Part 2. Rapid solid phase synthesis of the ratine sequence tetradecapeptide using BOP reagent | |
JPS6236396A (en) | Solid phase semi-automatic peptide multiple synthesizing apparatus and production of synthetic peptide by said apparatus | |
US5273715A (en) | Automated system for providing a sequence of chemicals to a reaction process | |
MELDAL et al. | Multiple column peptide synthesis, Part 2 (1, 2) | |
US5288464A (en) | Solid-phase synthesizer | |
Yeo et al. | Liquid phase peptide synthesis via one‐pot nanostar sieving (PEPSTAR) | |
Grego et al. | A microbore high‐performance liquid chromatography strategy for the purification of polypeptides for gas‐phase sequence analysis: Structural studies on the murine transferrin receptor | |
DK173633B1 (en) | Method and cannula for pipetting robot for fully automatic simultaneous synthesis of multiple polypeptides | |
CS262081B1 (en) | Device for automatic preparing peptides by synthesis on solid phase | |
Rodionov et al. | A swellographic approach to monitoring continuous-flow solid-phase peptide synthesis | |
Garbay‐Jaureguiberry et al. | Solid phase synthesis of peptides containing the non‐hydrolysable analog of (O) phosphotyrosine, P (CH2PO3H2) Phe: Application to the synthesis of 344‐357 sequences of the β2 adrenergic receptor | |
Frank et al. | Continuous flow peptide synthesis | |
Atherton et al. | Peptide synthesis. Part 3. Comparative solid-phase syntheses of human β-endorphin on polyamide supports using t-butoxycarbonyl and fluorenylmethoxycarbonyl protecting groups |