CS260663B1 - Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts - Google Patents

Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts Download PDF

Info

Publication number
CS260663B1
CS260663B1 CS856431A CS643185A CS260663B1 CS 260663 B1 CS260663 B1 CS 260663B1 CS 856431 A CS856431 A CS 856431A CS 643185 A CS643185 A CS 643185A CS 260663 B1 CS260663 B1 CS 260663B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
water
blood
determination
solution
serum
Prior art date
Application number
CS856431A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CS643185A1 (en
Inventor
Eva Hrboticka
Vlastimil Svoboda
Original Assignee
Eva Hrboticka
Vlastimil Svoboda
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eva Hrboticka, Vlastimil Svoboda filed Critical Eva Hrboticka
Priority to CS856431A priority Critical patent/CS260663B1/en
Publication of CS643185A1 publication Critical patent/CS643185A1/en
Publication of CS260663B1 publication Critical patent/CS260663B1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Analytický prostředek ke stanovení součástí tělních kapalin, zejména krve, sestává z nasákavého nosiče, obsahujícího všechna činidla potřebná k provedení analýzy, je opatřen semipermeabilní membránou vytvořenou ze směsi bydrofilního, ve, vodě rozpustného hydroxyalkyléteru celulózy a hydrofobní, ve vodě nerozpustné, polymerní látky ze skupiny éteru nebo esterů nebo ačetalů golyvinylalkoholu. Tentoanalytický prostředek umožňuje rychlé a účinné stanovení jednotlivých součástí krevního séra bez nutnosti pracného a zdlouhavého oddělování séra od krevních elementů.Analytical means for determination components of body fluids, especially blood, consists of an absorbent carrier containing All reagents needed to perform the analysis it is provided with a semipermeable membrane made up of a blend of water-soluble cellulose hydroxyalkyl ether and hydrophobic, water-insoluble, polymeric ether or ester compounds or acetyls of golyvinyl alcohol. Thisanalytical the device enables fast and effective determination of individual blood components serum without the need for laborious and lengthy separating the serum from the blood elements.

Description

Předmětem vynálezu je analytický prostředek ke stanovení diagnosticky významných součástí tělních kapalin, zejména krve, sestávající z nasákavého nosiče, obsahujícího všechna činidla potřebná k provedení analysy a opatřený semipexmeabilní membránou k oddělení krevních elementů, vytvořená ze směsi hydrofilního, ve vodě rozpustného hydroxy alky léteru celulosy a hydrofobní, ve vodě nerozpustné polymerní látky ze skupiny éteru nebo esteru celulosy a/nebo esteru nebo acetatů polyvinylalkoholu· Tento analytický prostředek umožňuje rychlé a účinné stanovení stanovení jednotlivých součástí krevního séra bez nutnosti pracného a zdlouhavého oddělování séra od krevních elementů·SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides an analytical device for the determination of diagnostically significant components of body fluids, particularly blood, consisting of an absorbent carrier containing all the reagents necessary for carrying out the analysis and provided with a semipexmable blood element separation membrane formed from a mixture of hydrophilic, water soluble hydrophobic, water-insoluble polymeric substances from the group of cellulose ether or ester and / or polyvinyl alcohol ester or acetates · This analytical device enables rapid and efficient determination of the determination of individual blood serum components without the need for laborious and lengthy separation of serum from blood elements.

K vyšetřování tělních kapalin, jako krve, moče nebo liquoru, se po desetiletí používají složité laboratorní metody, založené na přídavku přesného množství vzorku vyšetřoyané kapaliny k roztoku činidel s následným spektrofotometrickým vyhodnocením proběhlé - většinou barevné - reakce· Při vyšetřování krve je pak tento již sám o sobě zdlouhavý proces ještě dále komplikován o nutnost oddělení krevních elementů od séra buů odstředěním, nebo tak zvaným odbílkováním· Tyto metody jsou tudíž proveditelné pouze v dokonale vybavené klinickobiochemické laboratoři·For decades, complex laboratory methods have been used to investigate body fluids such as blood, urine or liquor, based on the addition of an accurate sample of the test fluid to the reagent solution followed by a spectrophotometric evaluation of the reaction - usually colored - the lengthy process is further complicated by the necessity of separating blood elements from serum either by centrifugation or by so-called whitening · These methods are therefore only feasible in a perfectly equipped clinical biochemistry laboratory ·

260 663260 663

K odstranění tohoto nedostatku byly v poslední době vyvinuty specielní reagenční proužky, u nichž všechna' činidla potřebná k průběhu vlastní specifické analytické reakce jsou obsažena v pevném stavu ve vhodném nasákavém nosiči, jako na příklad filtračním papíru, rouna ze syntetických vláken nebo i porézního polymeraího filmu· S použitím těchto proužků se celý postup vyšetření zjednodušil na nanesení vyšetřované kapaliny na proužek nebo namočení proužku do vyšetřované kapaliny a visuelní nebo reflektometrické vyhodnocení proběhlé specifické barevné reakce· Obecné použití však našly tyto proužky prozatím pouze při vyšetřování moče $ jejich širšímu rozšíření pro vyšetřování krve brání stále mimo jiné okolnost, že lze pomocí nich vyšetřovat pouze sérum,takže vlastnímu vyšetření musí předcházet opět oddělení krevních elementů odstředěním· Tyto proužky mohou být tudíž použity opět jen v laboratoři a nikoliv i na příklad přímo u lůžka pacienta nebo dokonce pacientem samotným·To overcome this drawback, special reagent strips have recently been developed in which all the reagents required to conduct a specific analytical reaction are contained in a solid state in a suitable absorbent carrier, such as filter paper, synthetic fiber web or even porous polymer film. · Using these strips, the entire test procedure has been simplified to apply the test liquid to the test strip or soak the test liquid in the test liquid and visually or reflectometrically evaluate the specific color reaction. The fact that only serum can be examined by means of these tests still prevents, among other things, the separation of blood elements by centrifugation must precede the examination itself. again only in the laboratory and not for example directly at the patient's bed or even by the patient himself ·

Byly ovšem vyvinuty i proužky, dovolující přímé vyšetření plné krve* U těchto proužků je nasákavý nosič s činidly ©vrstven semipermeabilní membránou, která po nanesení kapky krve zadrží na svém povrchu krevní elementy a propustí k činidlům, obsaženým v nasákavém nosiči pouze sérum případně plazmu· Krevní elementy zadržené na takto upraveném povrchu proužku se odstraní opláchnutím nebo setřením a po určité době se provede visuální nebo reflektometrické vyhodnocení zbarvení indikační plošky proužku, jehož Intensita je úměrná obsahu stanovované součásti krevního séra·However, strips have also been developed to allow for direct examination of whole blood * These strips are coated with a semipermeable membrane with reagent © which, after application of a drop of blood, retains blood elements on its surface and permits only serum or plasma to pass through reagents. The blood elements retained on the treated strip surface are removed by rinsing or wiping, and after a certain period of time a visual or reflectometric evaluation of the coloring of the indicator surface of the strip is performed, the intensity of which is proportional to the content of the blood component to be determined.

Společným nedostatkem všech těchto proužků pro vyšetřování krve jsou však opět nevyhovující vlastnosti dosud používaných semipermeabilní ch membrán· Tyto membrány, vytvořené nanesením ve vodě nerozpustných a silně hydrofohních esterů nebo eterů celulosy, jako na příklad ethyleelulosy, nitrocelulosy nebo acetátu celulosy, nebo pouze hydrofobizaví povrchu nosiče pomocí tuků, olejů, parafínu, silikonu nebo vosků brání dík svým silně hydrofobním vlastnostem rychlému a stejnoměrnému p-r»nrHkmití séra do nasákavého nosiče, oož má za ná260 063However, a common drawback of all these blood test strips is again the unsatisfactory properties of the semipermeable membranes used so far. thanks to their fats, oils, paraffin, silicone or waxes, thanks to their highly hydrophobic properties, they prevent the rapid and uniform »oscillation of the serum into the absorbent carrier, resulting in

- 3 sledek nejen poměrně dlouhou dobu celého stanovení, ale zejména nehomogenitu, vzniklého vybarvení plošky proužku vedoucí ke značné nepřesnosti výsledků, pohybuj ící se až v rozmezí + 40% relate Jisté zlepšení v tomto směru přenesl sice vynález který popisuje použití semipermeabil ní membrány složené z relativně hydrofilního methylpolymetakrylátu a hydrofobního polyvinylformalu, avšak ani toto řešení všechny uvedené nedostatky neodstranuje·- 3 results not only a relatively long time of the whole determination, but especially the inhomogeneity, resulting coloring of the strip flat, leading to considerable inaccuracy of results, up to + 40% relative. Some improvement in this direction was brought by the invention which describes the use of semipermeable membrane composed of of relatively hydrophilic methylpolymethacrylate and hydrophobic polyvinylformal, but even this solution does not eliminate all of these shortcomings.

Nyní bylo zjištěno, že ke zcela dokonalému oddělení krevních elementů od séra a jeho rychlému a naprosto stejnoměrnému proniknutí k reakčnímu systému v nasákavém nosiči umožňuje semipermeabilní membrána, vytvořená ze směsi hydrofilních a hydrofobních látek, při čemž však hydrofilní složka musí být navíc i rozpustná ve vodě. Předmětem vynálezu je tedy analytický prostředek ke stanovení diagnosticky významných součástí tělních kapalin, zejména krve, sestávající z nasákavého nosiče obsahujícího všechna činidla potřebná k provedení analysy, vyznačený tím, že je opatřen semipermeabilní membránou vytvořenou ze směsi hydrofilního, ve vodě rozpustného hydroxyalkyléteru celulosy, jako na příklad hydroxymetyl-, hydroxypropyl- nebo metylhydroxypropylcelulosy, a hydrofobní, ve vodě nerozpustné polymerní látky ze skupiny éterů nebo esterů celulosy, jako na příklad metyl-, ethyl- nebo nitrocelulosy, a/nebo esterů nebo acetalů polyvinylalkoholu, jako na příklad polyvinylacetátu, polyvinylpropionátu, polyvinylformalu nebo polyvinylbutyralu Semipermeabilní membrána o tomto složení vyniká proti všem dosud známým řešením výbornými filtračními vlastnostmi, oož se projevuje nejen neobyčejně rychlým a naprosto stejnoměrným proniknutím séra do. nosiče, ale i snadností, s jakou je možné krevní elementy s jejího povrohu odstranit opláchnutím nebo prostě jen setřením. Vedle toho však tato membrána nemusí být nanášena pouze na povrch nosiče, ale nosič jí může být prosycen v celé své hmotě; dík tomu je nosič chráněn proti proniknutí krevních elementů i na plochách, vzniklých rozříznutím větší plochy nosiče, takže i na těchto plochách proniká do nosiče pouze sérum, případně plasma, čímž nemůže dojít k nerovnoměrnosti vzniklého vybarvení na okrajích indikační plošky, které je typické pro všechny dosud známé prostředky a které je také v literatuře obecně popisová- 4 260 663 no jako nežádoucí tzv. okrajový efekt (”edge effect’’)· Semipermeabilní membrána tvořící integrální součást prostředku dle tohoto vynálezu a sestávající ze směsi hydrofilních ve vodě rozpustných derivátů celulosy a hydrofobních, ve vodě nerozpustných polymerních látek, má yšak vedle těchto výborných filtračních vlastností i řadu dalších předností proti dosud užívaným membránám, vytvořeným výlučně ze složek nerozpustných ve vodě. Je to v prvé řadě její výrazný stabilizačítííúčinek na reakční systém prostředku· Mechanismus tohoto účinku není zcela jasný, skutečností však zůstává, že tato membrána nejen značně prodlužuje stabilitu prostředku během jeho skladování za normálních podmínek, tj· v hermeticky uzavřeném obalu se sušidlem, ale snižuje značně jeho citlivost vůči rozkladnému působení vzdušné vlhkosti, který se u dosavad nich prostředků projevuje na příklad při nedokonalém uzavření obalu nebo při jeho opětovném otevírání při provádění analys·It has now been found that a semipermeable membrane, made of a mixture of hydrophilic and hydrophobic substances, allows the blood elements to be completely separated from the serum and its rapid and uniform penetration to the reaction system in the absorbent carrier, but the hydrophilic component must also be water soluble . Accordingly, the present invention provides an analytical device for the determination of diagnostically important components of body fluids, in particular blood, consisting of an absorbent carrier containing all the reagents required for carrying out the assay, characterized in that it is provided with a semipermeable membrane formed from a hydrophilic, water-soluble hydroxyalkylether cellulose mixture. for example hydroxymethyl, hydroxypropyl or methylhydroxypropylcellulose, and hydrophobic, water-insoluble polymeric substances from the cellulose ethers or esters group, such as methyl, ethyl or nitrocellulose, and / or polyvinyl alcohol esters or acetals, such as polyvinyl acetate, polyvinylpropionate The semipermeable membrane of this composition excels against all known solutions with excellent filtration properties, which is manifested not only by the extremely fast and absolutely uniform penetration of the serum into. carriers, but also the ease with which blood elements of its surface can be removed by rinsing or simply wiping away. In addition, however, this membrane need not only be applied to the surface of the carrier, but the carrier can be saturated with it throughout its mass; Thanks to this, the carrier is protected against penetration of blood elements even on the surfaces created by cutting the larger surface of the carrier, so that even on these surfaces only serum or plasma penetrates into the carrier, thus avoiding uneven coloration on the edges of the indicator pad. The semipermeable membrane forming an integral part of the composition of the present invention and consisting of a mixture of hydrophilic water-soluble cellulose derivatives; and However, in addition to these excellent filtration properties, hydrophobic, water-insoluble polymeric substances have a number of other advantages over the membranes used up to now, made exclusively of water-insoluble components. The mechanism of this effect is not entirely clear, but the fact remains that this membrane not only greatly prolongs the stability of the composition during its storage under normal conditions, ie in a hermetically sealed package with desiccant, but reduces greatly its sensitivity to the degradation effect of air humidity, which is present in their compositions, for example, when the packaging is not properly closed or when it is reopened during analysis ·

Vedle toho má však membrána i značný positivní vliv na jakost vybarvení indikační plošky analytického prostředku po proběhlé reakci se stanovovanou součástí tělní kapaliny·In addition, however, the membrane also has a significant positive effect on the coloring quality of the indicator pad of the analytical device after the reaction with the determined body fluid component.

Tento vliv se projevuje ve vzniku čistějšího a brilantnějšího zbarvení, což umožňuje jednoznačnější a přesnější kvantitativní vyhodnocení výsledku vyšetření jak při objektivním reflekto metrickém stanovení, tak ale zejména při visuelním srovnávání zbarvení prostředku s barevnou, zkusmo zhotovenou srovnávací stupnicí* , Analytický prostředek dle tohoto vynálezu může být použit pro vyšetření a stanovení všech klinicky důležitých součástí krve, jako na příklad stanovení glukosy, močoviny, kys.močové nebo bilirubinu. Dík svému obecně stabilizačnímu účinku na reakční systémy analytických prostředků z oboru dg.proužků však může být membrána dle vynálezu s výhodou použita i na prostředcích pro vyšetření takových tělních kapalin, jako jsou moč nebo liquor, u nichž není nutné odstraňovat pomocí membrány rušivé složky, jako jsou krevní elementy při vyšetření plné krve.U všech těchto prostředků je reakční systém, tj. soubor činidel a chemikálií, potřebných k vlastnímu analytickému stanovení příslušné diagnosticky významné součásti tělní kapalinyThis effect results in a clearer and more brilliant color, allowing a clearer and more accurate quantitative evaluation of the test result both in objective reflective metering and, in particular, in visual comparison of the color of the composition with a color test bench scale. be used to examine and determine all clinically important blood components, such as glucose, urea, uric acid or bilirubin. However, due to its generally stabilizing effect on the reaction systems of the analytical reagent industry, the membrane according to the invention can advantageously also be used on devices for examining body fluids such as urine or liquor which do not need to remove interfering components such as urine are all blood elements in the whole blood. For all these devices, the reaction system, ie the set of reagents and chemicals required for the actual analytical determination of the relevant diagnostically significant body fluid component

- 5 260 663 o sobě známý a již dlouhou dobu pro tento účel obecně používán· Nej významnější a svým složením a vlastnostmi zcela nový prvek analytického prostředku dle vynálezu tvoří tudíž semipermeabilní membrána, určená k oddělení krevních elementů, popřípadě ke stabilizaci reakčního systému analytického prostředku* Žádoucí vlastnosti této semlpermeabilní membrány jsou pak dány jak jejím základním složením definovaným výše, tak 1 vzájemným poměrem jednotlivých jejích složek a způsobem nanesení na nasákavý nosič*5 260 663, which has been known for a long time and has been widely used for this purpose for a long time. Thus, the semipermeable membrane for separating blood elements or for stabilizing the reaction system of the analytical device The desirable properties of this semi-permeable membrane are then given both by its basic composition as defined above and by the ratio of its components to each other and the method of application to the absorbent carrier *.

Jak vyplývá z výše uvedeného popisu semlpermeabilní membrá ny9 jsou její výborné funkční a stabilizační vlastnosti dány kombinací hydroflíního, ve vodě rozpustného derivátu celulosy s hydrofobní, ve vodě nerozpustnou polymerní látkou^říp* směsí dvou nebo více těchto látek, ze skupiny esterů nebo éterů celulosy a/nebo esterů nebo aoetalů polyvinylalkoholu*Při tom hmotový poměr hydrofilní, ve vodě rozpustné a hydrofobní, ve vodě nerozpustné složky membrány se dle žádaných vlastností může měnit v poměrně širokých mezích od 5:1 po 1:5· Obecně se však nej lepších vlastností membrány s ohledem na její filtrační i stabilizační* schopnosti dosáhne při poměru obou složek okolo 1:1 až 1:1,5* Dále je výhodné, 1 když nikoliv bezpodmínečně nutné, aby hydrofobní, ve vodě nerozpustná složka sestávala ze dvou rozdílných látek, tj* vhodného éteru nebo esteru celulosy a esteru nebo acetalu polyvinylalkoholu* Hmotový poměr těchto dvou hydrofobních, ve vodě nerozpustilých složek může opět ležet v poměrně Širokých mezích od 10:1 do 1:10, výhodné je však volit poměr 1:1,5* Sumárně lze tudíž ve většině případů považovat za nej výhodnější semlpermeabilní membránu, vytvořenou z 2 hmotových dílů hydrofilní, ve vodě rozpustné modifikované celulosy, 1 hmotového dílu hydrof obního ve vodě nerozpustného éteru nebo esteru celulosy a 1,5 hmotového dílu esteru nebo acetalu polyvinylalkoholu*As can be seen from the above description of the semipermeable membrane 9 , its excellent functional and stabilizing properties are due to the combination of a hydrophilic, water-soluble cellulose derivative with a hydrophobic, water-insoluble polymeric material, or a mixture of two or more of cellulose esters or ethers. and / or polyvinyl alcohol esters or acetal * The weight ratio of the hydrophilic, water-soluble and hydrophobic, water-insoluble membrane components may vary within relatively wide limits from 5: 1 to 1: 5 according to the desired properties. with regard to its filtering and stabilizing properties, it reaches at a ratio of both components of about 1: 1 to 1: 1.5. * suitable cellulose ether or ester and polyvinyl alcohol ester or acetal * Again, the weight ratio of the two hydrophobic, water-insoluble components may lie within relatively wide limits of from 10: 1 to 1:10, but preferably a ratio of 1: 1.5 is preferred. In summary, in most cases, the semi-permeable membrane is most preferred, made up of 2 parts by weight of hydrophilic, water-soluble modified cellulose, 1 part by weight of a hydrophobic water-insoluble cellulose ether or ester and 1.5 parts by weight of polyvinyl alcohol ester or acetal *

Jak bylo uvedeno výše, jsou vlastnosti membrány dány - vedle již uvedeného poměru jejich jednotlivých složek - i způsobem nanesení ňa nasákavý noqič* Zásadně je možné membránu nanést na nosič z vhodného nevodného těkavého rozpouštědla, jako metanolu, etanolu, propanolu, dichlormetanu, chlorofomrau, triohlorétanu, benzenu nebo toluenu* Jako nejvýhodnější se všakAs mentioned above, the properties of the membrane are given, in addition to the ratio of the individual components mentioned above, by the method of application and the absorbent carrier. In principle, the membrane can be applied to a support from a suitable non-aqueous volatile solvent such as methanol, ethanol, propanol, dichloromethane, chloroform, trichloroethane. , benzene or toluene

260 663 ukázalo nanášení membrány ze směsi nevodných rozpouštědel, sestávající z nižšího alifatického alkoholu, jako metanolu a/nebo etanolu, nižšího halogenovaného alkanu jako dichlormetanu, chloroformu nebo trichloratanu a benzenu nebo toluenu.260,663 showed the deposition of a membrane from a mixture of non-aqueous solvents consisting of a lower aliphatic alcohol such as methanol and / or ethanol, a lower halogenated alkane such as dichloromethane, chloroform or trichloroethane and benzene or toluene.

Poměr jednotlivých složek těchto rozpouštědel v uvedené směsi není kritický a může být víceméně libovolně měněn.The ratio of the individual components of these solvents in the mixture is not critical and can be varied more or less as desired.

Obvykle se membrána nanáší na nosič jako poslední impregnace, tj. po nanešení všech činidel a látek, potřebných pro průběh vlastní analytické reakce. Je však možné - a v některých případech djvýhodné - některé z těchto analytických činidel přidat do roztoku pro vytvoření membrány. Tyto možnosti spolu s obecným způsobem přípravy prostředku dle vynálezu osvětlují blíže některé typické příklady uvedené níže.Usually, the membrane is applied to the carrier as the last impregnation, i.e. after deposition of all reagents and substances required for the actual analytical reaction. However, it is possible - and in some cases preferred - some of these analytical agents to be added to the membrane forming solution. These possibilities, together with the general process for preparing the composition of the invention, are illustrated in more detail by some of the typical examples below.

Proužky pro stanovení glukosy v krviBlood glucose test strips

1) 1) Impregnační roztok 1 Impregnating solution Etanol Ethanol 24,0 ml 24.0 ml Aceton Acetone 42,0 ml 42.0 ml Metanol Methanol 16,0 ml 16.0 ml voda dest* water dest * 16,0 ml 16.0 ml 3,315,5-Tetramethylbenzidin 3,315,5-Tetramethylbenzidine 0,72 g 0.72 g Dioktylsulfo jantaran sodný Sodium dioctylsulfo succinate o,ia g o, i, and g Polyvinylpyrrolidon K 90 Polyvinylpyrrolidone K 90 1 ,20 g 1, 20 g Impregnační roztok II Impregnating solution II Glukosooxidasa, 28 U/mg Glucose oxidase, 28 U / mg 0,24 g 0.24 g Peroxidasa, 100 U/mg Peroxidase, 100 U / mg 0,10 g 0,10 g Citrátový tlumič, pH«5,3 Citrate buffer, pH 5 5.3 20 ,0 ml 20.0 ml Polyvinylpyrrolidon K 90 Polyvinylpyrrolidone K 90 t»0 g t »0 g laurylsulfát sodný sodium lauryl sulfate 0,04 g 0,04 g Želatina, 1,5%-ní vodný roztok Gelatin, 1.5% aqueous solution 20,0 ml 20.0 ml Voda dest. Water dest. 26,0 ml 26.0 ml Metanol Methanol 12,0 ml 12.0 ml

Impregnační roztok IIIImpregnation solution III

Hydroxypropylce lulosa,Hydroxypropylce lulosa,

5,3%-ní roztok ve směsi triehloretan-^netanol 2:1 Nitrocelulosa, 6,8%-ní roztok v toluenu Polyvinylacetát, 2,9%-ní roztok v etanolu5.3% solution in 2: 1 triethyloroethane-ethanol mixture, Nitrocellulose, 6.8% solution in toluene Polyvinyl acetate, 2.9% solution in ethanol

260 663260 663

43,0 ml 28,0 ml 28,0 ml43.0 ml 28.0 ml 28.0 ml

Jednotlivé impregnační roztoky se připraví rozpuštěním, případ ně smícháním jednotlivých složek v uvedeném pořadí a nanesou tak, aby papír byl impregnačním roztokem právě nasycen·The individual impregnating solutions are prepared by dissolving or mixing the individual components, respectively, and applied so that the paper is saturated with the impregnating solution.

Po každé impregnaci se papír důkladně vysuší proudem horkého vzduchu· Usušený, krémově bílý papír se poté rozřeže na čtvečky 6x6 mm a nalepí se - na příklad pomocí oboustranné samolepí cí pásky - na konec bílého plastikového proužku o rozměrech 6x80 mm· Jestliže se na takto připravenou indikační plošku nanese kapka kapilární krve, je možné po 3θ β s povrchu proužku krevní elementy odstranit na příklad opláchnutím vodou nebo otřetím navlhčenou buničitou vatou, a vyhodnotit Čistě modré zbarvení plošky, jehož intenzita je úměrná obsahu glukosy ve vyšetřované krvi, na příklad visuelně porovnáním se zkusmo zhotovenou barevnou srovnávací stupnicí. Tyto proužky indikují koncentraci glukosy v krvi v rozmezí od 1 do 8 mmol/1 a jsou tudíž vhodné pro stanovení silnějších hypoglykémií přes normální hodnoty až do slabě zvýšených hyperglykemií.After each impregnation, the paper is thoroughly dried with a stream of hot air. The dried, creamy white paper is then cut into 6x6 mm squares and glued - for example with double-sided adhesive tape - to the end of a 6x80 mm white plastic strip. The indicator spot is applied by a drop of capillary blood, it is possible to remove blood elements after 3θ β from the strip surface, for example by rinsing with water or wipes moistened with cellulose cotton, and evaluate the pure blue color of the spot. Experimentally made color scale. These bands indicate a blood glucose concentration in the range of 1 to 8 mmol / l and are therefore suitable for the determination of stronger hypoglycemia beyond normal levels up to slightly elevated hyperglycemia.

2) Proužky pro stanovení glukosy v krvi2) Blood glucose test strips

Impregnační roztok IImpregnating solution

Dihydrogenfosforečnan sodný 0;08 gSodium dihydrogen phosphate 0.088 g

Hydrogenfosforečnan sodný (12 HgO) 1,33 gSodium hydrogen phosphate (12 HgO) 1.33 g

Kyselina ethylendiaminotetraoctová,čtyřsodná sůl 2,28 gEthylenediaminotetraacetic acid, tetrasodium salt 2.28 g

Voda dest· 57,0 mlWater dest · 57.0 ml

Želatina, 1,5%-ní vodný roztok 38,0 mlGelatin, 1.5% aqueous solution of 38.0 ml

Glukosooxidasa, 28 U/mg 3,04 gGlucose oxidase, 28 U / mg 3.04 g

Peroxidasa, 100 U/mg, 1,8-ní vodný roztok 5,7 mlPeroxidase, 100 U / mg, 1.8 ml aqueous solution 5.7 ml

- 8 Metanol 68,0 ml- 8 Methanol 68.0 ml

Voda dest. 24,0 mlWater dest. 24.0 ml

1-(4-sulfof enyl )-3-methyl-5-pyrazo Ion 2,16 g1- (4-sulfophenyl) -3-methyl-5-pyrazolone 2.16 g

4-aminoantipyrin 0,63 g4-aminoantipyrine 0.63 g

Dioktylsulfojantaran sodný,Sodium dioctylsulfosuccinate,

2%ní roztok v etanolu 50,0 ml Tartrazin, 1%-ní roztok vodný 4,8 ml2% ethanol solution 50.0 ml Tartrazine, 1% aqueous 4.8 ml

260 663260 663

Impregnační roztok IIImpregnating solution II

Impregnační roztok IIIImpregnation solution III

Methylhydroxyme thylc elulosa,Methylhydroxyme thylc elulosa,

3%-ní roztok ve směsi metanol-dichlormetan 1:1 20,0 ml3% solution in methanol-dichloromethane 1: 1 20.0 ml

Ethylcelulosa, 4%-ní roztok v toluenu 15,0 mlEthylcellulose, 4% solution in toluene 15.0 ml

Polyvinylbutýral B 20 H, 5%-ní roztok 17,5 ml v etanoluPolyvinyl butyral B 20 H, 5% solution of 17.5 ml in ethanol

Všechny impregnační roztoky se nanesou na papír o plošné o hmotnosti 180 g/m způsobem, popsaným v příkladu 1 , dle ktereho se také provede další zpracování naimpregnovaného papíru na proužku· Po nanesení kapky kapilární krve na jejich indikační plošku je možné po 30 s s povrchu indikační plošky krevní elementy odstranit a po dalších 30 - 60 s vyhodnotit-na příklad srovnáním se zkusmo zhotovenou barevnou srovnávací stupnicí - intensitu vzniklého, čistě červeného zbarvení, která je přímo úměrná koncentraci glukosy v krvi v rozmezí cca 4 -45 mmol/l. Proužky jsou tedy vhodné pro stanovení glukosy u jedinců s mírně sníženým obsahem glukosy v krvi až po vysoce patologické hyperglykemie, které se vyskytují např· při těžkém,· nekompensováném diabetů·All impregnating solutions are applied to a paper weighing 180 g / m 2 as described in Example 1, according to which further processing of the impregnated paper is also carried out on the strip. After a drop of capillary blood has been applied to their indicator pad, the blood elements are removed and evaluated for a further 30-60 s, for example by comparison with an experimental color comparison scale - the intensity of the resulting pure red coloration, which is proportional to the blood glucose concentration in the range of about 4-45 mmol / l. The strips are therefore suitable for the determination of glucose in individuals with moderately reduced blood glucose up to highly pathological hyperglycemia, which occur, for example in · severe, · uncompensated diabetes ·

260 663260 663

- 9 3) Proužky pro stanovení celkového bilirubinu v krvi9) Strips for the determination of total bilirubin in the blood

Impregnační roztok IImpregnating solution

2,4 - Diohlorbenzendiazonium- 2,4 - Diohlorobenzenediazonium- 0,6 g 0.6 g t etrafluoroborát t etrafluoroborate Dyphýllin Dyphýllin 10,8 g 10,8 g Kyselina metafosfořečná Metaphosphoric acid 3,7 g 3.7 g Kyselina šlayelová Shlayelic acid 4,2 g 4.2 g laurylsulfát sodný sodium lauryl sulfate 0,3 g 0.3 g Polyvinylpyrrolidon K 90, Polyvinylpyrrolidone K 90, 4,7 g 4,7 g Eoda dest· Eoda dest · 100,0 ml 100.0 ml Impregnační roztok II Impregnating solution II Hydroxyethylcelulosa,4 * 4%-ní Hydroxyethylcellulose, 4 * 4% 35,0 ml 35.0 ml roztok ve směsi etanol-chloroform 1,3»1 solution in ethanol-chloroform 1,3 »1 EtMylcelulosa, 5,7%-ní roztok roztok Ethyl cellulose, 5.7% solution 35,0 ml 35.0 ml

v benzenuin benzene

Analytický prostředek se připraví postupným nanesením o obou impregnačních roztoků na papír 180 g/m a dalším zpracováním naimpregnovaného a usušeného papíru postupem uvedeným v příkladě 1)· Získané proužky, sloužící ke stanovení bilirubinu v krvi, se použijí tak, že se na indikační plošku nanese 20^1 krve a po 30 s se s povrchu indikační plošky odstraní krevní elementy otřením navlhčenou buničitou vatou· Po dalších 9Qfse vzniklé červenoflalové zbarvení indi kační plošky vyhodnotí opět buž visuělhě porovnáním s barevnou, zkusmo zhotovenou stupnicí, nebo změřením ref lek tance pomocí vhodného reflexního fotometru· Závislost mezi naměřenými hodnotami reflexní density a koncentrací bilirubinu v krvi udává přiložený graf· č· 1·The analytical composition is prepared by sequentially applying both impregnating solutions to 180 g / m paper and further treating the impregnated and dried paper as described in Example 1). ^ 1 blood and after 30 s, the blood elements are removed from the surface by wiping with a damp cellulose wadding. · The dependence between the measured values of the reflex density and the concentration of bilirubin in the blood is given in the attached graph.

- 10 260 663- 10 260 663

4) Proužky pro stanovení močoviny v krvi4) Blood urea test strips

Impregnační roztok IImpregnating solution

Methylhydroxymethylcelulosa,Methylhydroxymethylcellulose,

4%-ní vodný roztok 30,6 ml4% aqueous solution 30.6 ml

Citrátový tlumič 0,3 mol, pH«5,2 20,4 mlCitrate buffer 0,3 mol, pH 5 5,2 20,4 ml

Cetylpyridiniumbromid 0,255 gCetylpyridinium bromide 0.255 g

Glycin 0,082 gGlycine 0.082 g

2,3 - Dithioerythritol 0,086 g2,3-Dithioerythritol 0.086 g

Ureasa, 2800 U/g 0,50 gUreasa, 2800 U / g 0.50 g

Impregnační roztok II Methylhydroxymethylcelulosa,Impregnation solution II Methylhydroxymethylcellulose,

3%-ní roztok ve směsi metáno1-dichlormetan 1:1 20 ml3% solution in 1: 1 methanol: dichloromethane 20 ml

Ethyleelulosa, 2%-ní roztok v toluenu 15 mlEthyl cellulose, 2% solution in toluene 15 ml

Polyvinylbutýral B 20 H, 2,5%-ní roztok v etanolu 17,5 ml Bromthymolová modř 0,026 gPolyvinylbutyral B 20 H, 2,5% solution in ethanol 17,5 ml Bromthymol blue 0,026 g

Impregnační roztoky se připraví postupným smí chánínij příp.The impregnating solutions are prepared by sequential mixing or stirring.

rozpuštěním jednotlivých složek ve výše uvedeném pořadí a nao nesou se na papír 180 g/m způsobem popsaným v příkladě č.1 · Impregnační roztok II se však nanese dvakrát.by dissolving the individual components in the aforementioned order and onto the paper 180 g / m 2 as described in Example 1. However, impregnation solution II is applied twice.

Po nanesení kapky kapilární nebo venosní krve na proužek a odstranění erythrocytů 30 s po nanesení je možné visuelně poměrně přesně vyhodnotit vzniklé modré zbarvení, jehož odstín a Intensita je úměrná množství močoviny ve vyšetřované krvi v koncentračním rozmezí 1,5 - 40 mmol/1.After applying a drop of capillary or venous blood to the strip and removing the erythrocytes 30 seconds after application, it is possible to visually evaluate the resulting blue color, whose shade and intensity is proportional to the amount of urea in the blood examined in the concentration range 1.5 - 40 mmol / l.

5) Proužky pro stanovení glukosy v moči5) Urine glucose test strips

Impregnační roztok IImpregnating solution

Citrátový tlumič, pHs5,23 34,0 mlCitrate buffer, pH5,23 34,0 ml

Želatina, 1,5%-ní vodný roztok 18,0 mlGelatin, 1.5% aqueous solution 18.0 ml

Glukosooxidasa (22 U/g) 0,99 gGlucose oxidase (22 U / g) 0.99 g

Peroxidasa (95 U/mg), 1,18%-ní vodný roztok 2,545 mlPeroxidase (95 U / mg), 1.18% aqueous solution of 2.545 ml

- 11 260 003- 11 260 003

Impregnační roztok IIImpregnating solution II

Metanol 40,0 mlMethanol 40.0 ml

1-fenyl-3-metyl-5-pyrazolon 2,14 g1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone 2.14 g

4-aminoantipyrin 0,94 g4-aminoantipyrine 0.94 g

Voda dest· 30,0 mlWater dest · 30.0 ml

Polyvinylpyrrolidon K 90, 74,0 mlPolyvinylpyrrolidone K 90, 74.0 ml

5%-ní vodný roztok5% aqueous solution

Laury1sulfát sodný 0,6 g o-Dianisidin 0,92 gSodium lauryl sulfate 0.6 g o-Dianisidine 0.92 g

Tartrazin, 1%-ní vodný roztok 3,6 mlTartrazine, 1% aqueous solution 3.6 ml

Impregnační roztok IIIImpregnation solution III

Složení dle příkladu 2), avšak zředěný etanolem v poměru 1:9·Composition according to example 2), but diluted 1: 9 with ethanol ·

Tyto proužky slouží ke stanovení glukosy v moči, kterou detekují vznikem červeného až temně hnědého zbarvení v rozmezí koncentrací 0,35 - 30 g/1· Proti proužkům stejného složení, avšak bez III. impregnace, tj. bez semipermeabilní membrány, vykazují při stejné reaktivitě vůči glukose podstatně zvýšenou stabilitu vůči vzdušné vlhkosti·These strips are used for the determination of glucose in urine, which are detected by the formation of a red to dark brown color in the concentration range 0.35 - 30 g / l. impregnations, ie without semipermeable membrane, show significantly increased stability to air humidity with the same reactivity to glucose ·

Claims (1)

PŘEDMĚT VYNÁLETUOBJECT OF THE INVENTION Analytický prostředek ke stanovení diagnostiky významných součástí tělních kapalin, zejména krve, sestávající z nasákavého nosiče, obsahujícího všechna činidla potřebná k provedení analysy, vyznačený tím, že je opatřen semipermeabilní membránou vytvořenou ze směsi hydrofilního, ve vodě rozpustného hydrozyalkyléteru celulosy, jako na příklad hydroxymethyl-, hydroxypropyl nebo methylhydroxypropylcelulosy a hydrofobní,ve vodě nerozpuBtné polymerní látky ze skupiny éterů nebo esterů celuloSy, jako na příklad methyl-,ethylnebo nitrocelulosy a/nebo esterů nebo acetalů polyvinylalkoholu, jako na příklad polyvinylacetátu, polyvinylpropionátu, polyvinylformalu nebo polyvinylbutyralu .Analytical means for the diagnosis of significant components of body fluids, in particular blood, consisting of a water-borne carrier containing all the reagents necessary for carrying out the analysis, characterized by a semipermeable membrane formed of a mixture of hydrophilic, water-soluble cellulose hydro-alkyl ether, such as hydroxymethyl- hydroxypropyl or methylhydroxypropylcellulose and hydrophobic, water-insoluble polymeric substances from the group of cellulose ethers or esters, such as methyl, ethyl or nitrocellulose and / or polyvinyl alcohol esters or acetals, such as polyvinyl acetate, polyvinylpropralionate or polyvinylbutyralpropionate, polyvinylbutyralpropionate or polyvinylbutyralpropionate. Cena: 2,40 KčsPrice: 2,40 Kčs Vytiskly Moravské tiskařské závody, střed. 11 100, tř.Lidových milicí 3, OlomoucPrinted by Moravian printing works, center. 11 100, the class of People's Militia 3, Olomouc
CS856431A 1985-09-09 1985-09-09 Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts CS260663B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS856431A CS260663B1 (en) 1985-09-09 1985-09-09 Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS856431A CS260663B1 (en) 1985-09-09 1985-09-09 Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS643185A1 CS643185A1 (en) 1988-06-15
CS260663B1 true CS260663B1 (en) 1989-01-12

Family

ID=5411321

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS856431A CS260663B1 (en) 1985-09-09 1985-09-09 Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS260663B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
CS643185A1 (en) 1988-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0113896B2 (en) Test strips
AU594389B2 (en) Blood serum test strip
US3814668A (en) Method and device for the semi-quantitative determination of glucose in aqueous fluids
EP0555045B1 (en) Improved oxidative coupling dye for spectrophotometric quantitative analysis of analytes
DE69714637T2 (en) Reagent test strips for the detection of glucose in the blood
CZ20022945A3 (en) Testing strip containing agent for determining analyte
US3418083A (en) Hydrophobic test strip for analyzing whole blood
FI80343C (en) TESTANORDNING.
JPH0317479B2 (en)
JPH0355120B2 (en)
UA44758C2 (en) DIAGNOSTIC LINING FOR ANALYSIS AND METHOD OF DETERMINING THE OBJECT OF ANALYSIS WITH ITS HELP
DE3323973A1 (en) ERYTHROCYTE RETENTION SUBSTRATES
JP3657375B2 (en) Glass / cellulose as protein reagent
DE2843539B2 (en) Test agent for the determination of an oxidizing substance
DE3202667A1 (en) ANALYSIS UNIT
US4476222A (en) Test piece for quantitative analysis of substances in body fluids
HU176045B (en) Diagnostical composition for determining uric acid
JPH03130662A (en) Device and method for separating plasma from blood and method of measuring analytic object in blood
US5124266A (en) Method and device for determining protein using carrier matrix impregnated with polymerized urethane based compounds and method of making the device
JPS6359466B2 (en)
US4803158A (en) Composition used for the determination of beta-hydroxybutyric acid and a method for preparing the said composition
CS260663B1 (en) Analytic means for determination of body liquids' diagnostically important component parts
NO146922B (en) TEST RULES FOR DETERMINING GLUCOSE AND GALACTOSE IN BLOOD AND URINE AND OCCULT BLOOD IN FAECES
US4676950A (en) Indicator and test device for detecting occult blood
CA1320193C (en) Purified guaiacum resin and method for making the same

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20000909