CS250850B1 - Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production - Google Patents

Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production Download PDF

Info

Publication number
CS250850B1
CS250850B1 CS1004885A CS1004885A CS250850B1 CS 250850 B1 CS250850 B1 CS 250850B1 CS 1004885 A CS1004885 A CS 1004885A CS 1004885 A CS1004885 A CS 1004885A CS 250850 B1 CS250850 B1 CS 250850B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
virus
inactivated
corona
vaccine
polyvalent
Prior art date
Application number
CS1004885A
Other languages
Czech (cs)
Slovak (sk)
Inventor
Alojz Zuffa
Dusan Gubran
Tomas Zuffa
Stefan Kovac
Jolanda Zuffova
Jaromir Mensik
Eduard Salajka
Original Assignee
Alojz Zuffa
Dusan Gubran
Tomas Zuffa
Stefan Kovac
Jolanda Zuffova
Jaromir Mensik
Eduard Salajka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alojz Zuffa, Dusan Gubran, Tomas Zuffa, Stefan Kovac, Jolanda Zuffova, Jaromir Mensik, Eduard Salajka filed Critical Alojz Zuffa
Priority to CS1004885A priority Critical patent/CS250850B1/en
Publication of CS250850B1 publication Critical patent/CS250850B1/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Riešenie sa týká polyvalentnej inaktivovanej olejovej vakcíny určenej na imunizáciu gravidných kráv za účelom vyvolania ch*-ánenosti novonarodených teliat, cestou kolostrálnej a laktogénnej imunity, proti ochoreniam dýchacích orgánov vyvolaných infekciou virusom parainfluenzy 3 a hnačkovým ochoreniam vyvolaným kombinovaným patogénnym účinkom vírusov rota a korona a enteropatogénnych kmeňov Escherichla coli. Vakcína obsahuje v 1 ml 10?'θ až 10®'® TKID50 inaktivovaného virusu parainfluenzy 3, 105'0 až 107'0 TKID50 inaktivovaného virusu rota, 512 až 4 096 hemaglutinačných jednotiek inaktivovaného virusu korona a 9 10 5x10 až 5 x 10 inaktivovaného virusu 9 10 korona a5xl0 až 5 x 10 inaktivovaných zárodkov Escherichia coli, emulgované v olejovom adjuvans. Nachádza použitie v živočišnej velkovýrobě a prispieva k zníženiu chorobnosti a hynutia teliat v prvých týždftoch života.The solution relates to polyvalent inactivated an oil vaccine for immunization pregnant cows to induce disposition newborn calves on the way colostral and lactogenic immunity, against respiratory diseases parainfluenza 3 infection and diarrhea combined diseases pathogenic effects of company and corona viruses and enteropathogenic strains of Escherichla coli. The vaccine contains 10 µl to 10 ® ® in 1 ml TCID50 of inactivated parainfluenza virus 3,105,10-0,107'10 TCID50 inactivated virus, 512-4,096 hemagglutinating inactivated corona virus units a 9 10 5x10 to 5 x 10 inactivated virus 9 10 corona and 5x10 to 5 x 10 inactivated germs of Escherichia coli, emulsified in oily adjuvant. It finds use in livestock production and contributes to a reduction in morbidity and calf deaths in the first weeks of life.

Description

250850 2250850 2

Vynález sa týká polyvalentnej inaktovovanej olejovej vakcíny proti paralnfluenze 3,virusom rota a korona a infekciám koli a spósobu jej přípravy.The present invention relates to a polyvalent inactivated oil vaccine for parallelfluenza 3, rota and corona virus and coli infections and a method for its preparation.

Paralnfluenza 3 /PI-3/ je so 70 až 85 i premorenostou jednou z najrozšírenejšíchinfekcií hovádzieho dobytka. Vyskytuje sa prakticky všade tam, kde sa chová hovádzí dobytok.Infekcia virusom PI-3 je příčinou častých pneumonických ochorení teliat v prvých dňocha týždňoch života. Vysokú chorobnosť a hospodářské škody zapříčiňuje menpyite pri telatáchbez kolostrálnych protilátok v chovoch s nízkou chovatelskou úrovňour'pri ktorých je primárnávirusová infekcia komplikovaná širokým spektrom bakteriálnych infekcií. Naproti tomu sú tela-tá uliahnuté od kráv ktoré obsahujú v krvnom sére, a tým aj v kolostre, ako následok prirodze-nej infekcie alebo imunizácie, vysoký obsah protilátok, proti ochoreniu chráněné,Paralnfluenza 3 / PI-3 / is one of the most widespread infections of bovine animals with 70 to 85 and overweight. It occurs practically everywhere where cattle are bred. PI-3 infection is the cause of frequent pneumonic calf diseases in the first days of life. High morbidity and economic damage is caused by menpyite in calves without colostral antibodies in low-breeding farms where the primary viral infection is complicated by a wide range of bacterial infections. In contrast, the cows are cows that contain high levels of antibodies in the blood serum, and thus colostrum, as a result of natural infection or immunization, protected against the disease,

Telatá uliahnuté od kráv s titrami sérových protilátok 128 a viac obsáhujd nielen odpove-dajúce množstvo protilátok v krvnom sére ale aj meratelné množstvo protilátok v nosných sekré-toch /Zuffa, A. - Hajdu, 3. - Salaj, J. - Brányik, A. - Zeman, P. - Macák, J. - Zalaj, J. 1980: Výskům imunoprofylaxie virusových infekcií hovádzieho dobytka. Stúdiuln závislosti medziobsahom protilátok u kráv a vybavenostou teliat kolostrálnymi protilátkami, Závěrečná správaetapy P 11-529-262-07/4, Ostav experimentálněj veterinárnej medicíny, Košice, s. 63/, ktorésú hlavně zodpovědné za ochranu proti infekcii a ochoreniu.Cows snuffed from cows with serum antibody titers of 128 and above include not only the corresponding amount of antibodies in the blood serum, but also a measurable amount of antibodies in carrier secretions / Zuffa, A. - Hajdu, 3. - Salaj, J. - Branik, A - Zeman, P. - Macak, J. - Zalaj, J. 1980: The Immunoprofylaxis of Viral Infections of Beef Cattle. Study of the interdependent content of antibodies in cows and equipment of calves by colostral antibodies, Final Report of P 11-529-262-07 / 4, Institute of Veterinary Veterinary Medicine, Košice, p. 63 /, mainly responsible for protection against infection and disease.

Napriek všeobecnému premoreniu populácie dobytka virusom PI-3 neobsahuje váčšina krávv krvnom sére, a preto ani v kolostre, Specifické protilátky v titroch, ktoré by zabezpečilipožadované vybavenost teliat sérovými aj sekretocikými protilátkami, a tým aj leh ochranu protiochoreniu. Požadované úroveň humorálnej imunity sa nepodařilo dosiahnuť pri kravách parente-rálnou, intranazálnou alebo inhalačnou aplikáciou živej vakcíny, avšak dvojrázová aplikáciainaktivovanej vakcíny stimulovala všeobecný vzostup protilátok do titrov 1:128 a vyšších/Zuffa, A. - Zuffa, T. - Zajac, J. - Mafíovský, I. - Menšík, J. - Slanina, E. 1984: Specifickáprofylaxia závažných ochorení hospodářských zvierat vo velkochovech. Vývoj viacvalentných vak-cín proti virusovým infekciám hovadzieho dobytka, Závěrečná správa etapy S 11-529-104-05/01,Ostav experimentálnej veterinárnej medicíny, Košice, s. 101/.Despite the widespread overweight in the cattle population, PI-3 does not contain the blood serum of the cow, and therefore not in the colostrum, the specific antibody in the titers that would provide the calf's required equipment with both serum and secretory antibodies, and thus protect the anti-disease. The desired level of humoral immunity was not achieved in cows by parenteral, intranasal or inhalation administration of a live vaccine, but the dual-action application of the inactivated vaccine stimulated a general increase in antibodies to 1: 128 and higher titers / Zuffa, A. - Zuffa, T. - Zajac, J. - Mafiovský, I. - Menšík, J. - Slanina, E. 1984: Specific prophylaxis of serious diseases of farm animals in large farms. Development of multivalent vaccinations against viral infections of cattle, Final report of stage S 11-529-104-05 / 01, Institute of Experimental Veterinary Medicine, Košice, p. 101 /.

Znamená to, že dvojrázové očkovanie účinnou inaktlvovanou olejovou PI-3 vakcínou vyvoláimunitný stav charakterizovaný vysokou úrovňou humorálnej imunity, poskytujúcej novorodenýmtelatám pitím imúnneho kolostra solidný stupeň pasívnej chránenosti. Příčinou hromadných hnačkových ochorení teliat v prvých dňoch života sú enteropatogénnekmene Escherichia coli /EPEC/ a virusy rota /Mebus, Ch,A. - Wyatt, R. G. - Sharpee, R.F. - Šeřeno, Μ. M. - Kalica, A. R. - Kapikian, A. Z. - Twiehaus, M. J. 1976: Diarrhea in gnotobio-tic salves saused bythe reo-like agent of human infantile gastroenteriris, Infec. a.This means that a two-stroke vaccination with an effective inactivated PI-3 oil vaccine induces an immune condition characterized by a high level of humoral immunity, providing a new degree of passive protection to newborn babies by drinking colostrum. The cause of massive diarrheal diseases of calves in the first days of life are enteropathogenic Escherichia coli / EPEC / and Company / Mebus, Ch, A viruses. - Wyatt, R.G. - Sharpee, R.F. - Luster, Μ. Kalica, A.R. - Kapikian, A.Z. Twiehaus, M.J. 1976: Diarrhea in gnotobio-tic salves by the reo-like agent of human infantile gastroenteriris, Infec. and.

Immunity, 14, 471 - 474} Tzipori, S. R. - Makin, T. J. - Smith, M. L. - Krautil, F. L. 1981:Clinical manifestations of diarrhea in calves infected with rotavirus and eterotoxigenic Esche-richia coli, J. Clin. Microbiol., 13, 1 011-1 016/ a korona /Mebus, C. A. - Stair, E. L. -Rhodes, Μ. B. - Twiehaus, M. J. 1973: Pathology of neonatal calg diarrhea induced by a coro-navirus-like agent, Vet. Pathol. 10, 45-64/, ktoré napadajú novonarodené telatá samostatné,alebo ako zmiešané infekcie /Morin, M. - Lariviere, S. - Lallier, R. - Begin, M. - Roy, R. -Either, R. 1978: Neonatal calf diarrhea: Pathology and microbiology of spontaneous cases indairy herds and incidence of the enteropatogenous implicated as etiological agents, Proč, sec.Int. Symp. on Neonatal Diarrhea, University of Saskatchevap, Canada, 347-369} Van Opdenbosch, E. - Wellemans, G. - Degekel, D. - Strobe, R. 1979: Neonatal calg diarrhoea: A complex viraletiology, Vlaams Diergeneesk. Tijdschr., 48, 512-526/. Včasné postinatálne hnačkové ochorenia teliat infekčnej etlologie sú příčinou vysokýchekonomických strát vo všetkých štátoch a rozvinutou živočišnou výrobou.Immunity, 14, 471-474} Tzipori, S.R. - Makin, T.J. - Smith, M.L. Krautil, F.L. 1981: Clinical manifestations of diarrhea in calves infected with rotavirus and eterotoxigenic Escherichia coli, J. Clin. Microbiol., 13, 1101-1016 and Korona / Mebus, C.A. - Stair, E.L.-Rhodes, Μ. B. - Twiehaus, M.J. 1973: Pathology of neonatal cal. Diarrhea induced by coro-navirus-like agent, Vet. Pathol. 10, 45-64 /, which infect newborn calves on their own or as mixed infections / Morin, M. - Lariviere, S. - Lallier, R. - Begin, M. - Roy, R. -Either, R. 1978: Neonatal calf diarrhea: Pathology and microbiology of spontaneous cases of indian herds and incidence of enteropathogenic implications as etiological agents, Proc, sec.Int. Symp. on Neonatal Diarrhea, University of Saskatchevap, Canada, 347-369} Van Opdenbosch, E. - Wellemans, G. - Degekel, D. - Strobe, 1979: Neonatal calg diarrhea: A complex viraletiology, Vlaams Diergeneesk. Tijdschr., 48, 512-526]. Early postinatal diarrheal diseases of calves of infectious etlology are the cause of high economic losses in all countries and developed livestock production.

Stratám zapříčiněným hromadnými hnačkovými ochoreniami teliat možno zabránit pokračujúcimper orálnym prísunom protilátok, ktoré zabránia uplatneniu patogénneho účinku odppvedajúcichinfekčných zárodkov. 3 250850Losses caused by massive diarrheal diseases of the calves can be prevented by the continued oral intake of antibodies, which prevent the application of pathogenic effects of disinfectant germs. 3 250850

Požadovaný přísun protilátok sa dosiahne pitím imúnneho kolostra a mlieka od kráv imunizováných v pozdnom stádiu gravidity pomocou vakcín obsahujúcich odpovedajúce antigény. Kombino-vaná inaktivovanú vakcínu, so zastúpením vírusov rota a korona, připravil Kunz /Kunz, W. 1982: Muttertierimpfung mit einer rota, Corona-Vakzine zur Bekámpfung des Kálberdurchfalles-klinische Erfahrungen, Tierárztl. Umschau, 37, 505-506/, so zastúpením virusu rota a EPECEishorn a spol. /Eichhorn, W. - Bachmann, P. A. - Baljer, G. - Plank, P. - Schneider, P. 1983: Vaccination of cows with a combined rotavirus/enterotoxigenic "E. coli” K99 vaccine toprotéct newborn calves against diarrhoea, Develop. biol. Standard. 53, 237-243/, polyvalentnúvakcínu s obsahom virusov rota, korona, parvo a EPEC Bachmann, P. A. - Eichhor, W. - Baljer, G- Woernle, H. - Wieda, J. - Plank, J. - Becjer, W. - Mayr, A. 1985: Muttertierimpfung gegenDiarrhoen bei Kálbern: Ergebnisse eines Feldversuches, Toerárztl. Umsshau, 40, 8-14/ a sozastúpením virusov rota, korona a EPEC Stepánek a spol. PV 6681 83 J, 1983/.The desired antibody delivery is achieved by drinking immune colostrum and milk from cows immunized in late pregnancy using vaccines containing the corresponding antigens. The combined inactivated vaccine, with the Company and Corona viruses, was prepared by Kunz / Kunz, W. 1982: Muttertierimpfung mit einer rota, Corona-Vakzine zur Bekampfung des Kálberdurchfalles-Clinische Erfahrungen, Tierárztl. Umschau, 37, 505-506 /, with the Company virus and EPECEishorn et al. / Eichhorn, W. - Bachmann, PA - Baljer, G. - Plank, P. - Schneider, P. 1983: Vaccination of Cows with Combined Rotavirus / Enterotoxigenic "E. coli" K99 vaccine toprotect newborn calves against diarrhea, Develop. biol Standard 53, 237-243 / polyvalent vaccine containing the viruses rota, corona, parvo and EPEC Bachmann, PA - Eichhor, W. - Baljer, G - Woernle, H. - Wieda, J. - Plank, J. - Becjer, W. - Mayr, A. 1985: Muttertierimpfung gegenDiarrhoen bei Kalbern: Ergebnisse eines Feldversuches, Toerztzt. Umsshau, 40, 8-14 / and with the introduction of the viruses rota, korona and EPEC Stepanek et al., PV 6681 83 J, 1983].

Doposial nebola připravená vakcína s obsahom vírusov PI-3, rota, korona a EPEC, ktorá bypri očkovaní kráv poskytovala, cestou* kolostrálnej a laktogénnej imunity, chránenost teliatproti ochoreniam dýchacích orgánov vyvolaných vírusov PI-3 a hnačkových ochorení vyvolanýchkombinovaným patogénnym účinkom virusov rota a korona a EPEC.So far, a vaccine containing PI-3, rota, corona and EPEC viruses has not been prepared to provide cow-vaccinating via colostral and lactogenic immunity, protection of teliatus against respiratory diseases caused by PI-3 viruses and diarrhea caused by combined pathogenic effects of rota and corona viruses and EPEC.

Uvedené nedostatky sú riešené polyvalentnou inaktivovanou olejovou vakcínou proti parainf luenze 3, vírusom rota a korona a enteropatogénnym kmeňom Escherichia coli, vyznačujúcou sa tým, že v 1 ml obsahuje 1Ο7'θ až ÍO8'^ TKID , inaktivovaného virusu parainfluenzy 3,5070 50 10 ř až 10 ' ΤΚΙϋςη inaktivovaného virusu rota, 512 až 4 096 hemaglutinačných jednotiek9 10 inaktivovaného virusu korona a 5 x 10 až 5 x 10 inaktivovaných zárodkov Escherichia coliv olejovom adjuvans.The above mentioned drawbacks are solved by the polyvalent inactivated parainfluenza 3 oil vaccine, the rota virus and the corona virus and the enteropathogenic Escherichia coli strains, characterized in that it contains 1-7-8-8 TKID, inactivated parainfluenza virus 3.5070 50 10 -1 in 1 ml. up to 10 '' inactivated company virus, 512 to 4,096 hemagglutination units910 inactivated corona virus and 5x10-5x10 inactivated Escherichia coliv oil adjuvant germs.

Virus PI-3, s výhodou použitia kmeňa PI-3/T /11, uloženého v Sbírke zoopatogenníchmikroorganizmů, Výzkumný ústav veterinárního lékařství, Hudcova 70, 621 32 Brno, pod číslomV-30, vyznačujúci sa dobrými rastovými vlastnostami na bovinnych obličkových kultúrach a Za-chovalou virulenciou pre hovádzí dobytok, sa pomnožuje naprimárnych kultúrach a hovadzichobličiek nasledovným spósobom:PI-3 virus, preferably using the PI-3 / T / 11 strain deposited in the Collection of Zoopathogenic Microorganisms, Veterinary Research Institute, Hudcova 70, 621 32 Brno, under the number V-30, characterized by good growth properties on bovine kidney cultures and Za -protected virulence for bovine animals, is propagated by primary cultures and bovine animals in the following way:

Kultúry připravené z boviných obličiek, vytvárajúce na povrchu kultivačných nádob súvislújednovrstvu, sa zbavia rastového média pozostávajúceho z Hanksovho roztoku s obsahom 0,3až 0,5 hmotových percent laktalbumínhydrolyzátu a 5 až 10 hmotových percent bovinneho séra,sa prepláknu dva až tri krát ústojným fyziologickým roztokom a infikujú virusom PI-3/SZM, VUVL, Brno, V-30/ pri multiplicite infekcie 0,1; po ukončení adsorbcie virusu na buňkysa kultúry zalejú Earlovým roztokom obohateným o 0,3 až 0,5 hmotových percent laktalbumínhyd-rolyzátu a inkubujú pri 37 °C po dobu 48 až 72 hodin. Získané infekčné kvapaliny obsahujú1O7'° až 108'5 TKID^q živého virusu.Bovine kidney cultures forming a continuous monolayer on the surface of the culture vessels are freed of growth medium consisting of Hanks' solution containing 0.3 to 0.5 weight percent lactalbumin hydrolysate and 5 to 10 weight percent bovine serum, rinsed two to three times with saline buffer. and infect PI-3 / SZM, VUVL, Brno, V-30 / at a multiplicity of infection of 0.1; upon completion of virus uptake, the cells were cultured with Earl ' s solution enriched in 0.3-0.5 weight percent lactalbumin hydrophosphate and incubated at 37 [deg.] C. for 48-72 hours. The infectious fluids obtained contain from about 107% to about 108% of the TKID / q live virus.

Bovinny rota virus, s výhodou použitia kmeňa TM-91 /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-279/ a bo-vinny korona virus, s výhodou použitia kmeňa BCV-9 /SZM, VUVL, Brno, V-280/ sa pomnožujúna primárných bovinnych obličkových kultúrach. Obídva kmene sa vyznačujú velmi dobrýmirastovými vlastnostami na stabilnej bunkovej linii MDBK a primárných kultúrach z bovinnýchobličiek; sú neškodné pre bezkolostrálne telatá pri per orálnom aj parenterálnom podáni.Bovinny rota virus, preferably using the strain TM-91 / SZM, VUVL, Brno, CAPM V-279 / and the corona virus, preferably using the strain BCV-9 / SZM, VUVL, Brno, V-280 / sa propagating primary bovine kidney cultures. The periphery of the strain is characterized by very good properties on a stable MDBK cell line and primary bovine cell cultures; they are harmless to colostral calves at both oral and parenteral administration.

Pri ich pěstovaní na primárných kultúrach z bovinnych obličiek sa postupuje následovně:kultúry bovinnych obličkových buniek vytvárajúce na povrchu skla súvislú monovrstvu, sa pozliatí rastového média opakované prepláknu ústojným fyziologickým roztokom a infikujú odde-lene, vírusom rota a vírusom korona. K suspenzii bovinneho rota virusu, kmeň TM-91 /SZM, VUVL,Brno, CAPM V-279/ určenej na infekciu kultúr, sa přidá také množstvo trypsinu, aby jeho ko-nečná koncentrácia v udržovacom médiu představovala 0,2 ug, a trypsin sa nechá pósobitna virus počas 30 minút pri 37 °C.When grown on primary cultures of bovine kidneys, the following is followed: cultures of bovine kidney cells forming a continuous monolayer on the glass surface, repeatedly rinsing the growth medium with buffer saline and infecting separately, with the company virus and corona virus. To the cultures of the bovine virus suspension, TM-91 / SZM strain, VUVL, Brno, CAPM V-279 /, the amount of trypsin is added to give a final concentration of 0.2 µg in the maintenance medium and trypsin the virus is left for 30 minutes at 37 ° C.

Na infekciu kultúr sa použije také inokulum, aby multiplicita infekcie představovala0,1 až 0,01 na buňku. 250850 4An inoculum is used to infect the cultures so that the multiplicity of infection is 0.1 to 0.01 per cell. 250850 4

Po ukončení adsorbcie virusu na buňky sa kultury zalejú Earlovým bezsérovým médioma inkubujú počas 48 až 72 hodin pri 37 °C. Získaná virusová suspenEÍa obsahuje 105'0 až107'5 TKID50 v 1 ml.Upon completion of virus uptake, cells cultured with Earl's serum-free medium are incubated for 48-72 hours at 37 ° C. The virus suspension obtained contained 10 5 -107 TKID 50 per ml.

Pri pomnožovaní korona virusu sa buňkové kultúry zbavené rastového média opakované pre-pláknu ústojným fyziologickým roztokom a infikujú kmeňom BCV-9 /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280/,pri multiplicite infekcie 0,1 až 0,01 a po adsorbcii virusu na buňky zalejú Earlovýmbezsérovým médiom. Infikované kultúry sa inkubujú pri 37 °C počas 5 až 7 dní. Získanéinfekčně tkanivové tekutiny obsahujú 128 až 2 048 hemaglutinačných jednotiek v Ϊ ml.For virus corona propagation, cell cultures deprived of growth medium are repeatedly shaken with buffer saline and infected with BCV-9 / SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280 /, at a multiplicity of infection of 0.1-0.01 and virus uptake on cells harvested with Earl's serum medium. The infected cultures are incubated at 37 ° C for 5-7 days. The infectious tissue fluids obtained contain 128 to 2048 haemagglutination units in ml.

Infekčně tkanivové tekutiny, predstavujúce suspenzie virusov PI-3, rota a korona, sa podrobia trojnásobnému zmrazeniu a rozmrazeniu, zbavia buňkového detritu filtráciou, sedimentá-ciou alebo centrifugáciou pri odstredivej sile okolo 3 000 x G známým spósobom a inaktivujúúčinkom formaldehydu od 0,1 do 0,4 hmotových percent pri teplote 20 až 37 °C počas 6 až72 hodin, pósobením poloaldehydu, respektive dialdehydu kyseliny glutarovej, alebo ich kombi-novaným účinkom v koncentrácii od 0,1 do 6 hmotových percent pri teplote 20 až 30 °c počas2 až 120 minút, účinkom propiolaktónu v koncentrácii od 0,05 dó 0,4 hmotových percent priteplote 15 až 35 °C po dobu 6 až 24 hodin, alebo účinkom dietylamínu v koncentrácii od0,01 do 4 hmotových percent pri teplote 22 až 38 °c po dobu 1 až 24 hodin, za účelom rozru-šenia ich infekčnosti pri zachovaní imunizačnej aktivity.Infectiously tissue fluids, representing PI-3, rota and corona suspensions, are freeze-thawed three times, depleted of cellular detritus by filtration, sedimentation, or centrifugation at a centrifugal force of about 3,000 x G in a known manner and inactivating the formaldehyde effect from 0.1 to 0.4 weight percent at 20-37 ° C for 6-72 hours, by the action of a semi-aldehyde or a glutaric dialdehyde, or a combination thereof at a concentration of 0.1 to 6 weight percent at 20-30 ° C for 2 to 120 minutes, with propiolactone at a concentration of 0.05 to 0.4 percent by weight, 15 to 35 ° C for 6 to 24 hours, or diethylamine at 0.01 to 4 percent by weight at 22 to 38 ° C for a period of 1 to 24 hours, to disrupt their infectivity while maintaining immunization activity.

Vybrané i.munogénne kmene zárodku Escherichia coli, vybavené fimbriovým antigénom K99, s výhodou použitia kmeňa 3935/l/09:K35:K99/ /SZM, VUBL, Brno, CAPM 6233/, kmefía 4804 /K8 K85:K99//SZM, VUVL, Brno, CAPM 6234/ a kmeňa 6304/0101/K30:K99/ /SZM, VUVL, Brno, CAPM 6235/ sa pom-nožia v zariadení na submerznú kultiváciu, vyhrievanom na teplotu 37 °C. Do nádob naplněnýchsterilným médiom MINCA, vyhriatým na 37 °C sa přidá inokulum v množstve představujúcom 0,1objemových percent kultivačného média, ktoré představuje 18 hodinovú kultúru odpovedajúcehokmeňa E. coli v MINCA médiu.Selected immunogenic strains of Escherichia coli, equipped with K99 fimbria antigen, preferably using strain 3935 / l / 09: K35: K99 / / SZM, VUBL, Brno, CAPM 6233 /, Kefe 4804 / K8: K99 // SZM, VUVL, Brno, CAPM 6234 / and strain 6304/0101 / K30: K99 / / SZM, VUVL, Brno, CAPM 6235 / are cut in a submerged cultivation plant, heated to 37 ° C. Inoculum filled with MINCA sterile medium, heated to 37 ° C, was charged with an inoculum in an amount of 0.1 volume percent of culture medium, representing an 18 hour culture of the corresponding E. coli strain in MINCA medium.

Každý kmeň sa kultivuje samostatné. Kultúry připravené z jednotlivých kmeňov musiaEach strain is cultivated separately. Cultures prepared from individual strains must

Q obsahovat najmenej 1 x 10 zárodkov v 1 ml. Bakteriálně kultúry sa inaktivujú účinkom formal-dehydu v koncentrácii 0,05 až 0,5 hmotových percent pri teplote 15 až 37 °C po dobu 12až 72 hodin, alebo účinkom pripiolaktónu v koncentrácii 0,1 až 0,5 hmotových percent. Inakti-vovaná kultúra sa zahustí odstreďovaním jednotlivo alebo v zmesi použitých kmeňov na hustotu5 x 10^ až 5 x lO7® zárodkov v 1 ml.Q contain at least 1 x 10 embryos per ml. Bacterial cultures are inactivated by the effect of formaldehyde at a concentration of 0.05 to 0.5 percent by weight at 15 to 37 ° C for 12 to 72 hours, or by the action of a prepiolactone at a concentration of 0.1 to 0.5 percent by weight. The inactivated culture is concentrated by centrifugation singly or in a mixture of used strains to a density of 5 x 10 -5 to 10 10 7 g in 1 ml.

Spósobom podlá vynálezu sa připraví inaktivovaná polyvalentná olejová vakcína protiPI-3 virusu, virusom rota a korona a infekciám koli tak, že virusy PI-3, rota a koronasa inaktivujú účinkom formaldehydu v koncentrácii 0,1 do 0,4 hmotových percent pri teplote20 až 37 °C počas 6 až 72 hodin, pósobením poloaldehydu, respektive dialdehydu kyselinyglutarovej, alebo ich kombinovaným účinkom v koncentrácii od 0,1 do 6 hmotových percent priteplote 20 až 30 °C počas 2 až 120 minút, účinkom propiolaktóni v koncentrácii od 0,05 do 0,4hmotových percent pri teplote 15 až 35 °C po dobu 6 až 24 hodin, alebo účinkom dietylamínu *v koncentrácii od 0,01 do 4 hmotových percent pri teplote 22 až 38 °C po dobu 1 až 24 hodin,ďalej sa kultúry zárodku Escherichia coli pomnožujú a zahusťujú a potom sa inaktivujú účinkomformaldehydu v koncentrácii od 0,05 do 0,5 hmotových percent pri teplote 15 až 37 °C po dobu12 až 72 hodin, alebo účinkom propiolaktónu v koncentrácii 0,1 až 0,5 hmotových percent priteplote 12 až 27 °C po dobu 5 až 72 hodin, nakoniec sa jednotlivé zložky vakcíny zmiešajú ·According to the present invention, an inactivated polyvalent oil vaccine is prepared against the PI-3 virus, the rota and corona virus, and coli infections by inactivating PI-3, rota and coronase viruses at a concentration of 0.1 to 0.4% by weight at 20 to 37% by formaldehyde. ° C for 6 to 72 hours, by the action of a semi-aldehyde or a glutaric acid dialdehyde, or a combination thereof at a concentration of 0.1 to 6% by weight, 20 to 30 ° C for 2 to 120 minutes, with propiolactone at a concentration of 0.05 to 0.4 weight percent at 15 to 35 ° C for 6 to 24 hours, or with diethylamine * at a concentration of 0.01 to 4 weight percent at 22 to 38 ° C for 1 to 24 hours, followed by seed culture Escherichia coli are propagated and concentrated and then inactivated by formaldehyde at a concentration of 0.05 to 0.5 weight percent at a temperature of 15 to 37 ° C for 12 to 72 hours, or by propio lactone at a concentration of 0.1 to 0.5 weight percent priteplote 12 to 27 ° C for 5 to 72 hours, finally, the individual components of the vaccine are mixed.

"7 A O C C ZA tak, aby 1 ml vakcíny obsahoval 10'' až 10, ' ' TKID,„ inaktivovaného virusu PI-3, 10 ' až 7 0 10 ' TKID inaktivovaného virusu rota, 512 až 4 096 hemaglutinacnych jednotiek inaktivova-50 q iq ného virusu Korona a 5 x 10 až 5 x 10 inaktivovanych zárodkov E. coli v olejovom adjuvans."7 AOCC ZA so that 1 ml of vaccine contains 10" to 10 "TKID," inactivated PI-3 virus, 10 'to 710 10 "TKID of inactivated company virus, 512 to 4,096 hemagglutinating units inactivating 50 q and 5 x 10 to 5 x 10 inactivated E. coli embryos in oil adjuvant.

Prípravok vyrobený podlá vynálezu sa vyznačuje nasledovnými kvalitativnými parametrami:a/ dvojrázová aplikácia přípravku v predpísanej dávke vyvolá pri očkovaných zvieratách imunit-ný stav, charakterizovaný pritomnostou sérových protilátok proti jednotlivým virusom a EPECv ňom obsažených v středných až vysokých titroch, ktoré pri očkovaní kráv v pozdnom štádiu 5 250850 gravidity zabránia vylu.ovaním protilátok kolostrom a mliekom ochoreniam dýchacích orgánov •vyvolaných virusom PI-3 a hnačkových ochorení vyvolaných kombinovaným patogénnym účinkomvírusov rota a korona a EPEC. Dosiahne sa tým zlepšenie zdravotného stavu teliat vo včas-nom postnatálnom období, a významné zníženie ztrát zapříčiněných vysokou chorobnostou aúhynami vyvolanými infekciou odpovedajúcimi virusovými a bakteriálnymi zárodkami. Oalšoupřednostou použitia preparátu podlá vynálezu je významné zjednodušenie špecifickejprofylaxie respiratórnych a enterálnych ochorení teliat vo včasnom postnatálnom obdobívyvolaných patogénnym účinkom zárodkov v ňom obsiahnutých.The preparation according to the invention is characterized by the following qualitative parameters: a / bipolar application of the preparation at the prescribed dose induces in the vaccinated animals an immune status, characterized by the presence of serum antibodies against the individual viruses and the EPECs contained in the medium to high titers which, when vaccinating cows in the late stage 5 250850 pregnancies prevent the elimination of antibodies to colostrum and milk respiratory diseases caused by PI-3 virus and diarrhea caused by the combined pathogenic effects of company and corona and EPEC. This will result in improved calf health in early postnatal periods, and a significant reduction in losses due to high morbidity and death caused by infection with corresponding viral and bacterial germs. The preferred use of the preparation of the invention is the significant simplification of the specific prophylaxis of respiratory and enteral diseases of the calves in early postnatal conditions induced by the pathogenic effects of the germs contained therein.

TabulkaTable

Titre protilátok v krvnom sére kráv podvojrázovom očkovaní proti Dávka vakcíňy PI-3 Rota Korona K99 3 ml 64 64 64 - 32 - - 512 - 512 256 1 024 Uvedené příklady predmet vynálezu nijako neobmedaujú ani nevyčerpávajú PřikladlBlood Serum Antibody Titers of Double-Breast Cows Against PI-3 Vaccine Rota Korona K99 3ml 64 64 64-32 - - 512-512,256,024 The examples do not limit or exemplify the invention.

Primárné bovinne obličkové kultúry, alebo ich subkultúry, vytvárajúce na povrchukultivačných nádob súvislú jednovrstvu, sa zbavia rastového média pozostávajúceho z Hanksovhoroztoku obohateného o 0,3 až 0,5 hmotových percent laktalbuminhydrolyzátu a 5 až 10 hmotovýchpercent bovinneho séra, sa prepláknu dva až trikrát ústojným fyziologickým roztokom a infiku-jú virusom PI-3 /SZM, VUVL, Brno, V-3.0/ pri multiplicite infekcie 0,1 až 1. Infikovanébuňkové kultúry sa zalejú Earlovým roztokom obohateným o 0,3 hmotových percent laktalbumín-hydrolyzátu a inkubujú pri 37 °C po dobu 48 až 72 hodin.The primary bovine kidney cultures, or subcultures thereof, forming a monolayer on the surface-culture vessels, are deprived of growth medium consisting of a Hanks-solution enriched in 0.3 to 0.5 weight percent lactalbumin hydrolysate and 5 to 10 weight percent bovine serum, rinsed two to three times with saline. infused with PI-3 / SZM, VUVL, Brno, V-3.0 / at a multiplicity of infection of 0.1 to 1. Infected cell cultures were plated with Earl's solution enriched with 0.3 weight percent lactalbumin hydrolyzate and incubated at 37 ° C for 48 to 72 hours.

Po virusšpecifickej degenerácii tkaniva určenej mikroskopicky, sa inkubácia preruší azíská sa infekčná kvapalina obsahujúca 10?'θ až 10 ΤΚΙϋ^θ virusu v 1 ml. K suspenzii rota virusu, predstavujúcej kmen TM-91 /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-279/ sa předočkováním narastených a prepláknutých buňkových kultur přidá také množstvo trypsinu, aby jehokonečná koncentrácia v udržovacom médiu představovala 0,2 ug, a trypsin nechá pósobiť. na viruspočas 30 minút pri 37 °C.After virus-specific tissue degeneration determined microscopically, the incubation is discontinued and an infectious fluid containing 10 µl to 10 µl of virus per ml is recovered. To the virus-suspension of the TM-91 / SZM strain, VUVL, Brno, CAPM V-279 /, the amount of trypsin is also added by pre-grafting the grown and plated cell cultures so that its final concentration in the maintenance medium is 0.2 µg, and trypsin is allowed to act . for 30 minutes at 37 ° C.

Na infekciu sa použije také inokulum, aby multiplicita infekcie představovala okolo 0,1až 0,01 na buňku. Po ukončení adsorbcie virusu sa kultúry zalejú Earlovým bezsérovým médioma inkubujú počas 48 až 72 hodin pri 37 °C. Získaná virusová suspenzia obsahuje 10^'θ až 107'5TKlD50/ml.Inoculum is used to infect the multiplicity of infection to be about 0.1 to 0.01 per cell. Upon completion of virus uptake, cultures harvested with Earl's serum-free medium are incubated for 48-72 hours at 37 ° C. The virus suspension obtained contains 10 µl to 10 7 TKlD 50 / ml.

Pri pomnožovaní korona virusu sa buňkové kultúry zbavené rastového média a opakované oplák-nuté ústojným a fyziologickým roztokom infikujú kmeňom BCV-9 /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280/ primultiplicite infekcie 0,1 až 0,01 a po adsorbcii virusu na buňky zalejú Earlovým bezsérovýmmédiom. Infikované kultúry sa inkubujú pri 37 °C počas 5 až 7 dní. Získané infekčné tkaninovétekutiny obsahujú 128 až 2 048 hemaglutinačných jednotiek v 1 ml. Připravené infekčné tkaninové tekutiny, představujúce suspenzie jednotlivých virusov, savyČíria sedimentáciou, odstreďovaním alebo filtráciou a inaktivujú účinkom formaldehydu v kon-centrácii 0,1 do 0,4 hmotových percent pri teplote 20 až 37 °C po dobu 6 až 72 hodin. KultúryIn the propagation of the virus corona, cell cultures devoid of growth medium and repeatedly washed with buffer and saline are infected with strain BCV-9 / SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280 / primultiplicity of infection 0.1 to 0.01 and the cells are primed with Earl's serum-free medium. The infected cultures are incubated at 37 ° C for 5-7 days. The infectious tissue fluids obtained contain 128 to 2048 haemagglutination units per ml. Prepared infectious tissue fluids, representing single virus suspensions, are sedimented, centrifuged, or filtered and inactivated by a formaldehyde concentration of 0.1 to 0.4 weight percent at 20 to 37 ° C for 6 to 72 hours. Cultures

Q imunogénnych kmeňov zárodku Escherichia coli obsahujúce najmenej 10 zárodkov v 1 ml, sainaktivujú účinkom formaldehydu vo výslednéj koncentrácii 0,4 hmotových percent pri labora- tórnej teplote /15 až 37 °C/ po dobu 24 hodin, a zahustia odstreďovaním ta, aby v 1 ml obsaho-g váli okolo 5 x 10 zárodkov.The Q immunogenic strains of Escherichia coli containing at least 10 nuclei in 1 ml are inactivated by formaldehyde at a final concentration of 0.4% by weight at room temperature (15 to 37 ° C) for 24 hours, and concentrated by centrifugation to 1%. ml of the contents was about 5 x 10 germs.

Claims (7)

250850 6 Suspenzie virusov PI-3 /SZM, VUVL, Brno, V-30/, rota /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-2797 a korona /SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280/, o požadovanom obsahu virusových častíc, sa zmiešajú rovnakým dielom a k siedmim dielom virusovej suspenzie sa přidá jeden diel zahustenej bakteriálnej suspenzie a dva diely olejového adjuvans a zmes sa emulguje pri obrátkách-* 5 000 až 10 000 pomocou zariadenia ULTRATURAX počas 3 až 10 raintít a následné pomocouvysokotlakého zariadenia 15M-31 /výrobca Centra Electric induction Motor U.S.A./, čím sazíská stabilná emulzia. Jedna aplikačná dávka vakcíny obsahuje 10?'® až 10®'® TKID50 PI-3 virusu, 10®'θ až 10?'θ TKIDr„ virusu rota, 512 až 4 094 hemaglutinačných jednotiek virusu koro9 ' 10 50 • na a 5 x 10 až 5 x 10 bakteriálnych tlel EPEC. Příklad 2 Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podla^príkladu 1 s tým, že na inakttvovanie virusovPI-3, rota a korona sa použije poloaldehyd alebo dialdehyd kyseliny glutarovej v koncentrácii0,1 až 6 hmotových percent. P r í.k lad 3 Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podlá příkladu 1 s tým, že na inaktiváciu virusovPI-3, rota a korona a zárodkov EPEC sa použije prppiolaktón v koncentrácii 0,05 až 0,4 hmo-tových percent. Příklad 4 Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podlá příkladu 1 s tým, že na inaktiváciu virusovPI-3, rota a korona sa použije dietylamin v koncentrácii 0,01 až 4 hmotových percent. Příklad 5 Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podlá příkladu 1 až 4 s tým, že na inaktiváciu zá-rodkov E. coli sa použije propiolaktón v koncentrácii 0,1 až 0,5 hmotových percent. PREDMET VYNALEZU250850 6 Virus Suspensions PI-3 / SZM, VUVL, Brno, V-30 /, Company / SZM, VUVL, Brno, CAPM V-2797 and corona / SZM, VUVL, Brno, CAPM V-280 /, on required viral content Particles are mixed in equal parts if one part of the concentrated bacterial suspension and two parts of the oil adjuvant are added to the seven parts of the virus suspension and the mixture is emulsified at a speed of 5,000 to 10,000 with the ULTRATURAX for 3 to 10 raints followed by a 15M high pressure apparatus. 31 / Manufacturer of Electric Induction Engine USA USA, which produces a stable emulsion. One application dose of vaccine contains 10 ?® to 10®® TKID50 PI-3 virus, 10®' to 10? TKIDr of the ota rota virus, 512 to 4,094 haemagglutination units of koro9 9 10 50 na to 5 x 10 to 5 x 10 EPEC bacterial buffers. EXAMPLE 2 A method of preparing the polyvalent vaccine of Example 1, using a semi-aldehyde or glutaric dialdehyde at a concentration of 0.1 to 6 percent by weight for inactivating virus-PI, 3, and corona. EXAMPLE 3 Preparation of the polyvalent vaccine according to Example 1, wherein preriolactone is used in a concentration of 0.05 to 0.4% by weight to inactivate virus PI-3, rota and corona and germs of EPEC. Example 4 Preparation of the polyvalent vaccine of Example 1, using diethylamine at a concentration of 0.01 to 4% by weight to inactivate the virus PI-3, rota and corona. Example 5 Preparation of the polyvalent vaccine according to Examples 1 to 4, with propiolactone being used in a concentration of 0.1 to 0.5 percent by weight for the inactivation of E. coli seed. SUBJECT MATTER 1. Polyvalentná inaktivovaná olejová vakcína proti parainfluenze 3, virusom rota a koro- 7 0 na a enteropatogénnym kmeňom Escherichia coli vyznačujdca sa tým, že v 1 ml obsahuje 10 'až 10®'® TKIDjq inaktivovaného virusu parainfluenzy 3, 10®'° až 10?'° ΤΚΙβ^θ inaktivovanéhovirusu rota, 512 až 4 096 hemaglutinačných jednotiek inaktivovaného virusu korona a 5 x 10®až 5 x 1010 inaktivovaných zárodkov Escherichia coli v olejovom adjuvans.A polyvalent inactivated oil vaccine against parainfluenza 3, rota virus and coronary artery virus, and an enteropathogenic strain of Escherichia coli, comprising in 1 ml 10 to 10 ® ® TKIDjq inactivated parainfluenza virus 3, 10 ® 'to Inactivated rota virus, 512-4,096 inactivated corona virus inactivated units and 5 x 10 5 to 5 x 10 10 inactivated Escherichia coli embryos in oil adjuvant. 2. Polyvalentná inaktivovaná olejová vakcína podlá bodu 1, vyznačujdca sa tým, že sapoužije kmeň parainfluenzy 3 PI-3/T^/ll V-30.2. A polyvalent inactivated oil vaccine according to claim 1, wherein the parainfluenza strain 3 PI-3 / T1 / IIV-30 is used. 3. Polyvalentná inaktivovaná olejová vakcína podlá bodu 1, vyznačujdca sa tým, že sapoužije kmeň virusu rota TM-91 CAPM V-279.3. A polyvalent inactivated oil vaccine according to claim 1, wherein the TM-91 CAPM V-279 virus strain is used. 4. Polyvalentná inaktivovaná olejová vakcína podlá bodu 1, vyznačujdca sa tým, že sa pou-žije kmeň virusu korona BCV-9 CAPM V-280.4. The polyvalent inactivated oil vaccine of claim 1, wherein the corona BCV-9 CAPM V-280 virus strain is used. 5. Polyvalentná inaktivovaná olejová vakcína podlá bodu 1, vyznačujdca sa tým, že sapoužijd kmene zárodku Escherichia coli 3935/1 CAPM 6233, 4808 CAPM 6234 a 6304 CAPM 6235.5. A polyvalent inactivated oil vaccine according to claim 1, wherein the seed strain is Escherichia coli 3935/1 CAPM 6233, 4808 CAPM 6234 and 6304 CAPM 6235. 6. Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podlá bodu 1, vyznačujdci sa tým, že virusyparainfluenzy 3, rota a korona sa inaktivujd déinkom formaldehydu v koncentráciach od 0,1 7 250850 do 0,4 hmotových percent pri teplote 20 až 37 °C počas 6 až 72 hodin, posobením poloaldehydu,respektive dialdehydu kyseliny glutarovej, alebo ich kombinovaným účinkom v koncentrácii od0,1 do 6 hmotových percent ,pri teplote 20 až 30 °C počas 2 až 120 mindt, účinkom proplolaktd-nu v koncentrácii od 0,05 do 0,4 hmotových percent pri teplote 15 až 35 °C po dobu 6 až 24hodin, alebo účinkom dietylaminu v koncentrácii 0,01 do 4 hmotových percent pri teplote 22až 38 °C po dobu 1 až 24 hodin a ďalej sa killtúry zárodku Escherichia coli pomnožujú a zahušťu-ji! a potom sa inaktivujd účinkom formaldehydu v koncentrácii od 0,05 do 0,5 hmotových percentpri teplote 15 až 37 °C po dobu 12 až 72 hodin, alebo účinkom průpiolaktónu v koncentrácii 0,1 až 0,5 hmotových percent pri teplote 12 až 27 °C po dobu 5 až 72 hodin, nakoniec sa jed-7 Ω β tš notlivé zložky vakcíny zmiešajú tak, aby 1 ml vakcíny obsahoval 10ír až 10°' TKID_n virusu50 70 parainfluenzy 3, 10 ' až 10 ' TKID,-n virusu rota, 512 až 4 096 hemaglutinačných jednotiek9 10 virusu korona a 5 x 10 až 5 x 10 zárodkov Escherichia coli a výsledná zmes sa emulguje v ole-jovom adjuvans.6. A method of preparing a polyvalent vaccine according to claim 1, wherein the virusyparainfluenza 3, rota and corona are inactivated by the formaldehyde chain at concentrations of from about 0.1 to about 250 percent by weight at about 20 to about 37 degrees Celsius. hours, by placing a semi-aldehyde or a glutaric dialdehyde, or a combination thereof, at a concentration of from 0.1 to 6% by weight, at a temperature of 20 to 30 ° C for 2 to 120 minutes, by the action of proplolactane at a concentration of 0.05 to 0, 4% by weight at 15 to 35 ° C for 6 to 24 hours, or by the action of diethylamine at 0.01 to 4% by weight at 22 to 38 ° C for 1 to 24 hours and further propagating and killing the Escherichia coli embryo -her! and then inactivating with formaldehyde at a concentration of from 0.05 to 0.5 percent by weight at a temperature of 15 to 37 ° C for 12 to 72 hours, or by the effect of piolactone at a concentration of 0.1 to 0.5 percent by weight at 12 to 27 hours ° C for 5 to 72 hours, finally the same components of the vaccine are mixed so that 1 ml of the vaccine contains 10 to 10 ° TKID_n virus 50 70 parainfluenza 3, 10 'to 10' TKID, -n virus of the company , 512 to 4,096 corona virus haemagglutinating units 9 and 5 x 10 to 5 x 10 Escherichia coli germs, and the resulting mixture is emulsified in an oil adjuvant. 7. Spósob přípravy polyvalentnej vakcíny podlá bodu 2 vyznačujúci sa tým, že po zmišaníjednotlivých zložiek vakcíny sa stabilná olejová emulzia připraví dvojstupňovým opracováním,najskór emulgováním pri 5 až 10 tisíc obrátkách po dobu 3 až 10 minút a následné posobenímtlaku pri 35 až 42 MPa po dobu 1 až 5 minút.7. A method of preparing a polyvalent vaccine according to claim 2, wherein after mixing the individual components of the vaccine, a stable oil emulsion is prepared by two-stage treatment, most preferably by emulsifying at 5-10,000 turns for 3-10 minutes and then post-pressurizing at 35-42 MPa for 1 to 5 minutes.
CS1004885A 1985-12-29 1985-12-29 Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production CS250850B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS1004885A CS250850B1 (en) 1985-12-29 1985-12-29 Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS1004885A CS250850B1 (en) 1985-12-29 1985-12-29 Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS250850B1 true CS250850B1 (en) 1987-05-14

Family

ID=5447746

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS1004885A CS250850B1 (en) 1985-12-29 1985-12-29 Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS250850B1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2378014C2 (en) * 2007-12-20 2010-01-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") Emulsion inactivated associated vaccine against cattle paragrippe-3, rednose and coronoviral infection
RU2378017C2 (en) * 2007-12-24 2010-01-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") Emulsion inactivated associated vaccine against cattle rednose and coronoviral infection

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2378014C2 (en) * 2007-12-20 2010-01-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") Emulsion inactivated associated vaccine against cattle paragrippe-3, rednose and coronoviral infection
RU2378017C2 (en) * 2007-12-24 2010-01-10 Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") Emulsion inactivated associated vaccine against cattle rednose and coronoviral infection

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US3911108A (en) Process of producing bovine milk products containing specific antibodies
FI85222C (en) HUND OF PARVOVIRUS VACCINATION FOR FRAMSTAELLNING AV ETT HUND OF PARVOVIRUS VACCIN.
Haesebrouck et al. Effect of intratracheal challenge of fattening pigs previously immunised with an inactivated influenza H1N1 vaccine
JPH0657663B2 (en) Method for producing multifunctional specific antibody
CN104258389A (en) Vaccine composition as well as preparation method and application thereof
NO159782B (en) SPRING SYSTEM DEVICE, FIRST AND FIRST ON VEHICLES.
KR100531491B1 (en) Bovine Respiratory Coronavirus As a Vaccine
CS250850B1 (en) Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production
JP4050312B2 (en) Chicken anemia factor broiler vaccine
CN113845588B (en) Preparation method and application of yolk antibody for resisting porcine rotavirus
Crick The vaccination of man and other animals against rabies
US3585108A (en) Transmissible gastroenteritis vaccines and methods of producing the same
US3704203A (en) Transmissible gastroenteritis vaccines and methods of producing the same
Pitkin et al. Immunity to Vibrio cholerae in the mouse I. Passive protection of newborn mice
US3629396A (en) Avian encephalomyelitis vaccine
CN111686246A (en) Antigen-antibody complex vaccine for porcine epidemic diarrhea virus and preparation method thereof
WO1996010420A1 (en) Composition and treatment for hyperimmunization with non heat-killed bacteria
Johnson Status of arenavirus vaccines and their application
Stone et al. Immunization of chickens against Newcastle disease with beta-propiolactone-killed virus antigen administered in drinking water
El-Fadil et al. Keeping quality of inactivated respiratory virus vaccines (Pneumo-5)
CS250849B1 (en) Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production
CS249880B1 (en) Polyvalent inactivated oil vaccine and method of its production
Islam et al. Standardization of effective dose of fowl cholera vaccine in pigeon in Bangladesh
CN107670032A (en) The preparation method of poultry oil emulsion inactivated vaccine adjuvant and its corresponding vaccine
NO119491B (en)