CS248005B2

CS248005B2 - Production method of 9-hydroxyrthoxymethylguanine derivatives

Info

Publication number: CS248005B2
Application number: CS794396A
Authority: CS
Inventors: Howard J Schaeffer
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1977-12-24
Filing date: 1979-06-26
Publication date: 1987-01-15

Abstract

Způsob výroby derivátu 9-hydroxyethoxymethylguaninu obecného vzorce I, kde W a Z mají významy stejné nebo různé a znamenají vodíkový atom nebo farmaceuticky vhodný kation, vyznačený tím, že se sloučenina obecného vzorce II, (kde G znamená atom nebo skupinu, 'která se dá selektivně amonolyzovat, amonolyzuje a případně se dále převede sloučenina vzorce I, kde W a Z znamenají v obou případech vodík na sloučeninu, kde jeden ze symbolů W a Z nebo oba tyto symboly znamenají farmaceuticky vhodný kation reakcí s bází nebo s jinou solí obsahující odpovídající kation. Sloučeniny vzorce I lze použít k léčení virových onemocnění u savců.A method for producing a 9-hydroxyethoxymethylguanine derivative of formula I wherein W a Z have the same or different meanings and mean hydrogen atom or pharmaceutically a suitable cation, characterized in that it is a compound of formula (II) (wherein G represents an atom or group that can be selectively selected ammonolysing, ammonolysing, and optionally further converting the compound of formula I wherein W a Z is hydrogen on both a compound wherein one of W and Z or both are pharmaceutically a suitable cation by reaction with a base or another salts containing the corresponding cation. The compounds of formula I can be used for treatment viral diseases in mammals.

Description

Předložený vynález se týká monofosforečného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guaninu a zejména odpovídajících farmaceuticky vhodných solí. Popisovány jsou také farmaceutické přípravky obsahující výše uvedené látky.The present invention relates to a 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester and in particular to the corresponding pharmaceutically acceptable salts. Disclosed are also pharmaceutical compositions containing the foregoing.

Je známo, že 9-(2-hydroxyethoxymethyljderiváty purinových látek se vyznačují antivirovou účinností proti virům typu deoxyribonukleových kyselin i ribonukleových kyselin, a to jak in vitro, tak in vivo, viz britský patent č, 1 523 865. Tyto sloučeniny se vyznačují zvláštní účinností jako antivirová činidla proti Vacciniím a virům oparů, počítaje v to herpes simplex, zoster a varicella u savců, přičemž tyto viry způsobují onemocnění, jako je herpetická keratitis u králíků a herpetická encefalitida myší.9- (2-hydroxyethoxymethyl) derivatives of purine compounds are known to possess antiviral activity against deoxyribonucleic acid and ribonucleic acid viruses, both in vitro and in vivo, see British Patent No. 1,523,865. as antiviral agents against Vaccinia and herpes viruses, including herpes simplex, zoster and varicella in mammals, which cause diseases such as rabbit herpes keratitis and mouse herpes encephalitis.

Nyní bylo nalezeno, že monofosřorečný ester 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guaninu je nejen tak účinný jako nefosforylová sloučenina, ale vyznačuje se navíc selektivní výhodou potud, že je mnohem rozpustnější alespoň za pH v rozsahu 1 až 7,5 při srovnávání s nefosforylovanou sloučeninou.It has now been found that 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester is not only as effective as a non-phosphoryl compound, but also has a selective advantage in that it is much more soluble at least at a pH range of 1 to 7.5 when compared to a non-phosphorylated compound. .

Předmětem vynálezu je způsob výroby derivátu 9-hydroxyethoxymethylguaninu obecného vzorce IThe present invention provides a process for the preparation of a 9-hydroxyethoxymethylguanine derivative of the formula I

OHOH

CH^O-CH-CH-O-P-OZCH 2 O-CH-CH-O-P-OZ

OW (I) kde W a Z mají významy stejné nebo různé, a znamenají atom vodíku nebo farmaceuticky vhodný kation, který se vyznačuje tím, že se sloučenina obecného vzorce IIOW (I) wherein W and Z have the same or different meanings, and are hydrogen or a pharmaceutically acceptable cation, characterized in that the compound of formula (II)

OHOH

CHyO-CH^CH^-O-P-OH kde G znamená atom nebo skupinu, která se dá selektivně amonolyzovat, amonolyzuje a případně se dále převede sloučenina vzorce I, kde W a Z znamenají v obou případech vodík, na sloučeninu, kde jeden ze symbolů W a Z nebo oba tyto symboly znamenají farmaceuticky vhodný kation reakcí s hází nebo s jinou solí obsahující odpovídající kation.CHyO-CH 2 CH 2 -OP-OH wherein G represents an atom or a group which can be selectively ammonolyzed, ammonolysed, and optionally further converts a compound of formula I wherein W and Z are both hydrogen to a compound wherein one of the symbols W and Z or both represent a pharmaceutically acceptable cation by reaction with a throw or other salt containing the corresponding cation.

Farmaceuticky vhodné kationty jsou voleny ze skupiny zahrnující sodík, draslík, lithium, ekvivalent vápníku, hořčíku nebo hliníku, nebo amoniový kation.The pharmaceutically acceptable cations are selected from the group consisting of sodium, potassium, lithium, calcium, magnesium or aluminum equivalent, or an ammonium cation.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde Z znamená sodík, draslík nebo amonium, a W znamená vodík, je třeba označit za výhodné, a zvláště jsou výhodnými sloučeniny obecného vzorce I, kde Z znamená sodík nebo amonium, a W znamená vodík.Compounds of formula I wherein Z is sodium, potassium or ammonium, and W is hydrogen are preferred, and particularly preferred are compounds of formula I wherein Z is sodium or ammonium, and W is hydrogen.

Polyvalentní kationty ve smyslu symbolů W a Z jsou rovněž označovány jako Ca/2, Mg/2 a Al/3, a tím se má naznačit, že se jedná o kation v poměru mocenství tedy Ca²'¹/ /2, Mg²⁺/2 a Al³⁺/3, a to odpovídá skutečnosti, kdy kationty vápníku nebo hořčíku jsou iontově vázány na 2 fosforečnanové kyslíky a hliník na 3.Polyvalent cations within the meaning of W and Z are also referred to as Ca / 2, Mg / 2 and Al / 3, and this is to indicate that it is a cation in the valence ratio of Ca ² ' ¹ / / 2, Mg ²⁺ / 2 and Al ³⁺ / 3, and this corresponds to the fact that calcium or magnesium cations are ionically bound to 2 phosphate oxygen and aluminum to 3.

Výchozí sloučeninu obecného vzorce II, kde G je atom halogenu, merkaptoskupina nebo nižší alkylthioskupina, jako je methylthioskupina, je možno převést na sloučeninu obecného vzorce I amonolýzou. Tento postup je popsán v „Heterocyclic compounds — Fused Pyrimidines, Part II, Purines“, vydavatel D. J. Brown (1971), nakladatelství Wiley-Interscience.The starting compound of formula II wherein G is halogen, mercapto or lower alkylthio, such as methylthio, can be converted to the compound of formula I by ammonolysis. This procedure is described in "Heterocyclic compounds - Fused Pyrimidines, Part II, Purines", edited by D. J. Brown (1971), Wiley-Interscience.

Výchozí sloučeniny obecného vzorce II se mohou připravovat reakcí sloučeniny vzorce IIIThe starting compounds of formula II can be prepared by reacting a compound of formula III

OHOH

( Hl) s fosforylačním činidlem, jako jsou deriváty kyseliny fosforečné, které mají jednu až tři hydroxyskupiny nahrazené za atomy halogenu, .například chloru. Například nejvýhodnější je fosforylchlorid. Až dvě hydroxyskupiny mohou být také nahrazeny za alkoxyskupiny, které mohou případně obsahovat další substituenty, například ve formě toenzyloxyskupin. Tyto deriváty kyseliny fosforečné se mohou aplikovat za běžných neutrálních nebo alkalických podmínek, přičemž posledně uvedené vyžadují aktivaci, například karbodiimidem, například dicyklohexylkarbodiimidem, pokud tyto nesjou přítomné ve formě anhydridu.(H1) with a phosphorylating agent such as phosphoric acid derivatives having one to three hydroxy groups replaced by halogen atoms such as chlorine. For example, phosphoryl chloride is most preferred. Up to two hydroxy groups may also be replaced by alkoxy groups, which may optionally contain additional substituents, for example in the form of toenzyloxy groups. These phosphoric acid derivatives may be applied under conventional neutral or alkaline conditions, the latter requiring activation, for example with a carbodiimide, for example dicyclohexylcarbodiimide, if these are not present in the anhydride form.

Jestliže alespoň dvě hydroxyskupiny v derivátu kyseliny fosforečné jsou nahrazeny za atom halogenu, pak po reakci se sloučeninou vzorce III je nutné odstranit volné atomy halogenu njírnou vodnou hydrolýzou, například použitím molárního ekvivalentu vody v rozpouštědle mísitelném s vodou, jako je alkohol.If at least two hydroxy groups in the phosphoric acid derivative are replaced by a halogen atom, then, after reaction with the compound of formula III, it is necessary to remove the free halogen atoms by moderate aqueous hydrolysis, for example using a molar equivalent of water in a water-miscible solvent such as alcohol.

Substituované nebo nesubstituované alkoxyskupiny zavedené na fosfát se mohou hydrolyzovat ve vhodném vodném médiu v přítomnosti báze v následujícím stupni. Aromatic248003The substituted or unsubstituted alkoxy groups introduced onto the phosphate can be hydrolyzed in a suitable aqueous medium in the presence of a base in a subsequent step. Aromatic248003

S ky substituované alikoxyskupiny, jako je benzyloxyskupina, se mohou také podrobit hydrogenolýze, s výhodou v přítomnosti katalyzátoru, běžně známým reduktivním štěpením. Sloučeniny vzorce III se mohou připravovat způsobem popsaným v britském patentu č. 1 523 865.S-substituted alkoxy groups such as benzyloxy may also be subjected to hydrogenolysis, preferably in the presence of a catalyst, by conventional reductive cleavage. Compounds of formula III may be prepared as described in British Patent No. 1,523,865.

Farmaceuticky vhodné soli monofosforeěného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guaninu je možno připravit neutralizací kyselé formy zmíněného monofosforečného esteru ekvivalentní množství báze, jako je například hydroxid, hydrogenuhličitan, Uhličitan atd., který obsahuje vhodný kation, jako je kation sodíku, draslíku, amonia, vápníku, lithia, hořčíku nebo hliníku. Jinak se mohou takové soli připravit použitím výměnných reakcí, kdy se na sůl monofosforečného esteru působí roztokem, s výhodou vodným roztokem soli, obsahující vhodný jiný kation. Takže je možno působit na málo rozpustnou barnatou sůl monofosforečného esteru 9- (2-hy dr oxyethoxymethyl) guaninu vodnou suspenzí síranu sodného; baryum se t/m odstraní ve formě nerozpustného síranu barnatého, a v roztoku zůstane sodná sůl monofosforečného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethy 1) guaninu.Pharmaceutically acceptable salts of 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester may be prepared by neutralizing the acid form of said monophosphoric ester equivalent amount of a base such as hydroxide, bicarbonate, carbonate etc. containing a suitable cation such as sodium, potassium, ammonium calcium, lithium, magnesium, or aluminum. Alternatively, such salts may be prepared using exchange reactions, wherein the monophosphoric ester salt is treated with a solution, preferably an aqueous salt solution, containing a suitable other cation. Thus, the sparingly soluble barium salt of 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester can be treated with an aqueous sodium sulfate suspension; The barium is removed t / m as insoluble barium sulfate, leaving the sodium salt of 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester.

Popisují se rovněž farmaceutické přípravky, obsahující sloučeninu obecného vzorce I spolu s farmaceuticky vhodným nosičem.Also described are pharmaceutical compositions comprising a compound of Formula I together with a pharmaceutically acceptable carrier.

Farmaceuticky vhodnými nosiči jsou materiály, použitelné pro úpravu účinné látky do podávané formy, a mohou být pevné, kapalné nebo i plynné, pokud jsou jinak inertní, z lékařského hlediska nesporné a jsou kompatibilní s aktivní složkou. Farmaceutické přípravky je možno podávat orálně, parenterálně nebo ve formě čípků, případně se mohou používat lokálně ve formě mastí, krémů, aerosolů nebo prášků, nebo je lze podávat jako oční či nosní 'kapky, vždy v závislosti na tom, zda se přípravek používá k léčbě interního nebo externího virového onemocnění.Pharmaceutically acceptable carriers are materials useful in formulating the active ingredient and can be solid, liquid, or even gaseous, if otherwise inert, physically indisputable and compatible with the active ingredient. The pharmaceutical preparations may be administered orally, parenterally or in the form of suppositories, or they may be administered topically in the form of ointments, creams, aerosols or powders, or they may be administered as eye drops or nasal drops, depending on whether the preparation is used for treating internal or external viral disease.

Při interních infekcích se podávají sloučeniny obecného vzorce I v dávkách od 0,1 do 250 mg na 1 kg, přepočteno na volný monofosforečný ester, a s výhodou se podávají v rozmezí od 1,0 až do 50 mg na 1 kg hmotnosti těla savce a u lidí se mohou používat ve formě jednotkových dávek, podávaných jednou nebo ve více dávkách, například několikrát denně v množství 1 až 800 mg na jednu dávku, s výhodou 1 až 250 mg na 1 dávku, nejvýhodněji 10 až 200 mg na 1 dávku.In internal infections, the compounds of formula I are administered in doses of from 0.1 to 250 mg per kg, calculated as free monophosphoric ester, and are preferably administered in the range of 1.0 to 50 mg per kg of mammalian body weight and in humans. may be used in unit dosage form, administered in single or multiple doses, for example, several times daily in an amount of 1-800 mg per dose, preferably 1-250 mg per dose, most preferably 10-200 mg per dose.

Při parenterálním podávání nebo lokálním podávání ve formě kapek, například při očních infekcích, může být sloučenina obecného vzorce I ve vodném roztoku v koncentraci od asi 0,1 na 10 % (hmotnost na objem j, s výhodou 0,1 až 7 % a nejvýhodněji 0,2 až 5 % (hmotnost na objem).For parenteral administration or topical administration in the form of drops, for example in ocular infections, the compound of formula I may be in an aqueous solution at a concentration of from about 0.1 to 10% (w / v, preferably 0.1 to 7% and most preferably 0.2 to 5% (w / v).

Jinak se mohou při infekcích očí nebo jiných zevních orgánů, například úst a kůže, používat roztoky, masti nebo krémy jako lo6 kální přípravky, které lze označit za výhodné. Koncentrace se pohybuje v rozmezí 0,1 až 10 %, s výhodou 0,3 až 6 %, nejvýhodněji 3 %.Otherwise, solutions, ointments or creams may be used as infusions for eye or other external organs, such as the mouth and skin, as local preparations which may be considered to be advantageous. The concentration ranges from 0.1 to 10%, preferably 0.3 to 6%, most preferably 3%.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu se používají pro léčení virových onemocnění savců, které spočívá v podávání účinného a netoxického antivirového množství sloučeniny obecného vzorce I. Výraz „účinné a netoxické antivirové množství“ znamená předem určené množství antivirově působící látky, účinné proti viru za použití in vivo.The compounds of the present invention are used to treat mammalian viral diseases comprising administering an effective and nontoxic antiviral amount of a compound of Formula I. The term "effective and nontoxic antiviral amount" refers to a predetermined amount of anti-viral agent active against virus using in vivo.

Účinek sloučenin podle předloženého vynálezu byl prokázán inhibičním testem na deskách.The effect of the compounds of the present invention was demonstrated by plate inhibition assay.

Inhibiční test na deskách byl prováděn na VĚRO buňkách, při kterém se stejnoměrný jednovrstvý povlak buněk infikuje dostatečným množstvím viru tak, že vznikne jeho stejnoměrné rozvrstvení na desce. Po přidání pevného překryvného povlaku se na střed tohoto povlaku umístí kotouček filtračního papíru impregnovaný roztokem testované sloučeniny (50 μ§ na kotouček). Kultury se pak inkubují 96 až 120 hodin při 37 ^aC v atmosféře 5 % kysličníku uhličitého. Po této době se buňky fixují 10 % formalinu a pak se barví 0,05 °/o methylové violeti.The plate inhibition assay was performed on VERO cells, in which a uniform monolayer of cells was infected with a sufficient amount of virus to form a uniform stratification on the plate. After adding a solid overcoat, place a filter paper impregnated with a test compound solution (50 μ§ per disc) in the center of the coating. The cultures are then incubated for 96 to 120 hours at 37 ^and C in an atmosphere of 5% carbon dioxide. After this time, the cells are fixed with 10% formalin and then stained with 0.05% methyl violet.

Výsledky testů byly hodnoceny podle následující stupnice:The test results were evaluated according to the following scale:

++ zóna větší než 25 mm v průměru + zóna 5 až 25 mm v průměru ± zóna 0 až 5 mm v průměru — negativní.++ zone greater than 25 mm in diameter + zone 5 to 25 mm in diameter ± zone 0 to 5 mm in diameter - negative.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu vykazovaly účinek ,,++“.The compounds of the present invention showed a " ++ " effect.

Při použití redukčního testu na deskách byly připraveny stejnoměrné jednovrstevné povlaky buněk infikované virusem jako při inhibičním testu, ale testovaná sloučenina se přidávala do pevného překryvného povlaku v dvojích zředěních. EDso, to je účinná dávka, která u 50 % desek příslušného zředění nevykazovala žádný virus na desce, byla 0,2 (Umolární.Using the plate reduction assay, uniform monolayer coatings of virus-infected cells were prepared as in the inhibition assay, but the test compound was added to the solid overcoat in two dilutions. The ED50, that is, the effective dose that showed no virus on the plate at 50% of the plates of the respective dilution, was 0.2 (Molar.

Vynález je blíže popsán formou přiložených příkladů.The invention is described in more detail by way of the attached examples.

Příklad 1Example 1

Monofosforečný esterMonophosphoric ester

9- (2-hydr oxyethoxymethyl) guaninu9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine

Do míchané suspenze 20 mg 2-chlor-9- (2-hydr oxyethoxymethyl) hypoxanthinu v 0,3 ml triethylesteru fosforečné kyseliny se za chlazení na —8 °C přidá najednou 0,03 ml chloridu fosforylu a během 30 minut se teplota reakční směsi nechá vystoupit na 0 °C. Za této teploty se reakční směs míchá 40 minut, dále 50 minut při +5 °C, vlije se na led a přidáním 2 N roztoku hydroxidu draselného se hodnota pH upraví na 7. Výsledný roztok se extrahuje dvěma díly chlo248005 roformu po 2 ml. Hodnota pH vodného podílu se přidáním 2 N roztoku hydroxidu draselného upraví na 8 až 8,5, přidá se 105 mg octanu barnatého a vysrážený fosforečnan barnatý se odfiltruje. Ke kapalině nad sedlinou se přidá velký nadbytek ethanolu, a tím se vysráží surová harnatá sůl monofosforečného esteru 2-chlor-9-(2-hydroxyethoxymethyljhypoxanthinu. Pevné podíly se odfiltrují, suspendují se v ethanolu, tato suspenze se zahřívá na parní lázni několik minut, načež se ochladí a filtruje. Odfitrovaná sraženina se promyje bezvodým etherem, načež se sušením získá 26 mg harnaté soli monofosforečného esteru 2-chlor-9-(2-hy droxyethoxymethoxy j hypoxantinu.To a stirred suspension of 20 mg of 2-chloro-9- (2-hydroxyethoxymethyl) hypoxanthine in 0.3 mL of phosphoric acid triethyl ester, 0.03 mL of phosphoryl chloride was added in one portion at -8 ° C, and the reaction mixture was stirred for 30 minutes allow to rise to 0 ° C. At this temperature, the reaction mixture is stirred for 40 minutes, then for 50 minutes at + 5 ° C, poured onto ice, and the pH is adjusted to 7 by addition of 2N potassium hydroxide solution. The resulting solution is extracted with 2 ml of 2 ml of chloroform. The pH of the aqueous portion was adjusted to 8-8.5 by the addition of 2N potassium hydroxide solution, 105 mg of barium acetate was added, and the precipitated barium phosphate was filtered off. A large excess of ethanol was added to the supernatant to precipitate the crude 2-chloro-9- (2-hydroxyethoxymethyl) -hypoxanthine mono-phosphate ester mono-phosphate ester, the solids were filtered off, suspended in ethanol, heated on a steam bath for several minutes, The filtered precipitate was washed with anhydrous ether and then dried to give 26 mg of 2-chloro-9- (2-hydroxyethoxymethoxy) hypoxanthine mono-phosphate ester salt.

Do míchané suspenze 7 mg právě uvedené barnaté soli v 0,5 ml vody se přidá 3,96 mg síranu amonného, reakční směs se míchá za teploty místnosti 15 minut, načež se ochladí v ledové lázni. Vysrážený síran barnatý se odfiltruje, promyje se vodou (1 ml) a pak za použití 10 ml ethanolu. Filtrát se spoji s podíly z prouiývání, a po oddestilování rozpouštědel za sníženého tlaku se zbytek rozpustí v 3 ml methanolu. Roztok v methanolu se vlije do tlakových lahví z nerezové oceli, vyložených teflonem, přidá se 8 ml methanolu, nasyceného za chlazení ledem amoniakem, a uzavřená tlaková láhev se zahřívá 4 hodiny na 122 °C. Po ochlazení a otevření se rozpouštědlo oddestiluje tak, aby zbytek měl co nejmenší objem, a zbytek se testuje chromatografováním na listech tenké vrstvy celulózy za vyvíjení soustavou η-propylalkohol—-voda (70:30, objemově). Pásy o Rf 0,16 a 0,34 se vystříhají, suspendují se v Tris-pufru (0,6 ml) o hodnotě pH 8, a celulóza se odfiltruje.To a stirred suspension of 7 mg of the above barium salt in 0.5 ml of water was added 3.96 mg of ammonium sulfate, the reaction mixture was stirred at room temperature for 15 minutes and then cooled in an ice bath. The precipitated barium sulfate was filtered off, washed with water (1 ml) and then using 10 ml of ethanol. The filtrate was combined with the washings and, after distilling off the solvents under reduced pressure, the residue was dissolved in 3 ml of methanol. The methanol solution was poured into Teflon-lined stainless steel cylinders, 8 ml of methanol saturated with ammonia ice were added, and the sealed cylinder was heated at 122 ° C for 4 hours. After cooling and opening, the solvent was distilled off so that the residue was kept as small as possible, and the residue was tested by thin-layer chromatography on cellulose sheets developing η-propyl alcohol-water (70:30, v / v). The bands of Rf 0.16 and 0.34 were cut, suspended in Tris buffer (0.6 mL), pH 8, and the cellulose was filtered off.

Bylo zjištěno za použití enzymatické defosforylace pomocí alkalické fosfatázy, že tyto pásy obsahují monofosforečný ester 9-(2-hydroxyethoxymethyl jguaninu a monofosforečný ester 2-chlor-9-(2-hydroxyethoxymethyljhypoxanthinu, protože zmíněnou def osfory lácí vzniká 9-(2-hydroxyethoxymethyljguanin a 2-chlor-9-(2-hydroxyethoxymethyl jhypoxanthin. Reakce se provádí tak, že se k filtrátu přidá alkalická fosfatáza z Escherichia coli (2 jul), a směs se zahřívá dvě hodiny na 32 ^C,C. Potom se testuje chromatografií na tenké vrstvě celulózy ve 3 systémech rozpouštědel:Using alkaline phosphatase enzymatic dephosphorylation, these bands have been found to contain 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester and 2-chloro-9- (2-hydroxyethoxymethyl) -hyphoxanthine monophosphoric ester, since said dephosphate forms 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine The reaction is carried out by adding alkaline phosphatase from Escherichia coli (2 [mu] l) to the filtrate and heating the mixture at 32 [ ^deg.] C. for two hours. layer of cellulose in 3 solvent systems:

(a) n-propylalkohol a voda (70 : 30, objemově), (b) voda (c) n-propylalkohol — konc. amoniak — voda (60 : 30 : 10, objemově).(a) n-propyl alcohol and water (70: 30, v / v), (b) water (c) n-propyl alcohol - conc. ammonia-water (60: 30: 10, v / v).

V každé soustavě odpovídají 2 skvrny 9-(2-hydroxyethoxymethyl jguaninu (A) a 2-chlor-9- (2-hydroxyethoxymethyl j hypoxanthinu (B).In each set, 2 spots correspond to 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine (A) and 2-chloro-9- (2-hydroxyethoxymethyl) hypoxanthine (B).

Soustava rozpouštědel Rf (AjSolvent system Rf (Aj

(a) (and) 0,51 0.51 (bj- (bj- 0,68 0.68 (c) (C) 0,51 0.51

Rf (B) Rf reakčního produktuRf (B) Rf of the reaction product

0,64 0,51 a 0,650.64 0.51 and 0.65

0,97 0,67 a 0,970.97 0.67 and 0.97

0,71 0,51 a 0,710.71 0.51 and 0.71

Příklad 2Example 2

Amonná sůl monofosforečného esteru 9- (2-hy droxyeťhoxymethyl) guaninu9- (2-Hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphoric ester ammonium salt

V 30 ml vody se rozpustí 0,28 g monofosforečného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethylj-guaninu a přidáním 6 N roztoku chlorovodíkové kyseliny se pH roztoku upraví na 6. Produkt se adsorbuje na 14 ml aktivního uhlí v koloně, velikost částeček 50 až 200 mesh, po promytí kyselinou a deaktivování toluenem. Aktivní uhlí se dobře promyje vodou a Ikolona se eluuje za použití 70 ml 50% vodného ethylalkoholu, obsahujícího 2 % koncentrovaného vodného roztoku amoniaku. Po oddestilování rozpouštědla za sníženého tlaku se získá takto 0,048 g amonné soli monofosforečného esteru 9- (2-hydroxyethoxymethyl jguaninu o hodnotě Rf 0,30 na celulóze v soustavě n-propylalkohol—voda (70 : 30, objemově J.Dissolve 0.28 g of 9- (2-hydroxyethoxymethyl) -guanine monophosphoric ester in 30 ml of water and adjust the pH of the solution to 6 by adding 6 N hydrochloric acid. The product is adsorbed onto 14 ml of activated carbon in a column, particle size 50 to 200 The charcoal was well washed with water and the column was eluted using 70 ml of 50% aqueous ethanol containing 2% concentrated aqueous ammonia, and the solvent was distilled off under reduced pressure to give 0.048 g of monophosphoric ammonium salt. 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine ester having an Rf value of 0.30 on cellulose in n-propyl alcohol-water (70:30, v / v).

Příklad 3Example 3

Složení tablety mg sodná sůl monofosforečného esteruTablet formulation mg sodium monophosphate ester

- (2-hydroxyethoxymethyl) -- (2-hydroxyethoxymethyl) -

guaninu guanine 100 100 ALIGN! laktóza lactose 200 200 škrob starch 50 50 polyvinylpyrrolidon polyvinylpyrrolidone 5 5 horečnatá sůl esterové kyseliny magnesium salt of ester acid 4 4 celková hmotnost total weight 359 359

PřikládáHe attaches

Oftalmický roztok sodná sůl 'monofosforečného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethyl jguaninu 1,0 gOphthalmic solution 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphate ester 1.0 g

248003 chlorid sodný, p. a. thimerosal čištěná voda, doplnit na pH upravit naSodium chloride, p. A. Thimerosal purified water, make up to pH adjust to

0,9 g 0,001 g0.9 g 0.001 g

100 ml 5,5 až 7,5100 ml 5.5 to 7.5

Příklad 5Example 5

Injekční roztok sodná sůl monofosforečného esteru 9-(2-hydroxyethoxymethyl jguaninu ' 0,775 g sterilní, apyrogenní fosfátový pufr, pH 7, doplnit na 25 ml.Solution for injection 9- (2-hydroxyethoxymethyl) guanine monophosphate ester 0.775 g sterile, pyrogen-free phosphate buffer, pH 7, make up to 25 ml.

Claims

SUBJECT

VYNALEZU

A process for the preparation of a 9-hydroxyethoxymethylguanine derivative of the general formula I

O (I

CH 2 O-CH, -CH-O-P · 07. Z <L 1 ow (I) wherein W and Z have the same or different meanings and represent a hydrogen atom or a pharmaceutically acceptable cation, characterized in that the compound of formula II

CH ^O ~CH ^CH ^O ~P ~OH

OH (II) wherein G is an atom or a group that can be selectively ammonolyzed, ammonolysed, and optionally further converts a compound of formula I wherein W and Z are both hydrogen to a compound wherein one or both of W and Z means a pharmaceutically acceptable cation by reaction with a base, or with another salt containing the corresponding cation.

2. A process according to claim 1, wherein G is a halogen atom, a mercapto group or a lower alkylthio group.

3. A process according to claim 1 or 2, wherein the base to be treated is a hydroxide, bicarbonate or carbonate containing the corresponding pharmaceutically acceptable cation.

4. A process according to claim 3, wherein sodium, potassium, ammonium, calcium, magnesium or aluminum are suitable cations.

5. A process according to claim 3, wherein lithium is used as a suitable cation.