CS246162B1 - Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon - Google Patents
Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon Download PDFInfo
- Publication number
- CS246162B1 CS246162B1 CS722284A CS722284A CS246162B1 CS 246162 B1 CS246162 B1 CS 246162B1 CS 722284 A CS722284 A CS 722284A CS 722284 A CS722284 A CS 722284A CS 246162 B1 CS246162 B1 CS 246162B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- peptide
- hormone
- trp
- activity
- luteinizing
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 title claims description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 title description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 title description 2
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 title description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 30
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 claims abstract description 30
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 20
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 abstract description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 5
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 abstract description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 10
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 10
- -1 Benzhydrylamino Chemical group 0.000 description 9
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000002707 L-tryptophyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylmethoxypropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)COCC1=CC=CC=C1 DMBKPDOAQVGTST-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 2
- ZGKXAUIVGIBISK-SZMVWBNQSA-N Glu-His-Trp Chemical compound N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]cn1)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O ZGKXAUIVGIBISK-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000005915 ammonolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N (2s)-2-azanyl-5-[bis(azanyl)methylideneamino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N (2s)-3-(1h-imidazol-3-ium-5-yl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 AYMLQYFMYHISQO-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DXNAVBJNFLKWIK-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrate Chemical group O.CC(O)=O.CC(O)=O DXNAVBJNFLKWIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- IXHMHWIBCIYOAZ-UHFFFAOYSA-N styphnic acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C(O)=C1[N+]([O-])=O IXHMHWIBCIYOAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXDPEHGCHUDUFE-UHFFFAOYSA-N sulfanylmethanol Chemical compound OCS GXDPEHGCHUDUFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon (LH/RH) obecného vzorce
< Glu-Hi a-Trp-Se r-Ty r-D-p-Et-Phe-Leu-Arg'2 3 4 5 6 7 8
-Pro-Gly-NHg 9 10
a jeho farmaceuticky použitelné adiční soli s organickými kyselinami. Tento peptid s aktivitou LH/RH se používá jako prostředek k synchronizaci říje při průmyslovém chovu noépodářskýoh zvířat a taká k diagnostickým a terapeutickým účelům. Je mnohem účinnější a déle působící než původní hormon uvolňující luteinizační a folikuly stimulující hormon, luliberin.
Description
(54) Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon
Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon (LH/RH) obecného vzorce < Glu-Hi a-Trp-Se r-Ty r-D-p-Et-Phe-Leu-Arg'2 3 4 5 6 7 8
-Pro-Gly-NHg
10 a jeho farmaceuticky použitelné adiční soli s organickými kyselinami.
Tento peptid s aktivitou LH/RH se používá jako prostředek k synchronizaci říje při průmyslovém chovu noépodářskýoh zvířat a taká k diagnostickým a terapeutickým účelům. Je mnohem účinnější a déle působící než původní hormon uvolňující luteinizační a folikuly stimulující hormon, luliberin.
Vynález se týká peptidů s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon (LH/HH) obecného vzorce I ^Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NHg 12 345 6789 10 a jeho farmaceuticky použitelné adiční soli s organickými kyselinami.
Peptid vzorce I je analog přírodního hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon, tzv. luliberinu: předčí jej vyšší účinností na tvorbu a uvolňování luteinizačního hormonu (LH) a folikuly stimulujícího hormonu (FSH) s prodlouženou dobou působení. Peptid obecného vzorce I podle vynálezu je určen k synchronizaci oestru (říje) hospodářských zvířat a rovněž k diagnostickým a terapeutickým účelům v humánní medicíně,
K praktickému použití v uvedených indikacích jsou žádoucí látky účinnější, v organismu stálejSí a tedy protrahovaně působící. Strukturní obměny luliberinu sice zpravidla vedly k látkám méně účinným, nicméně se podařilo náhradou glycinu v poloze 6 aminokyselinového sledu luliberinu některými D-aminokyselinami dosáhnout zvýšení účinností. /A. Arimura a sp.: Endocrinology 95. ’ *74 (1974), J. A. Vilchez - Martinez a sp.: Biochem. Biophys. Res. Commun. 59. 1 226 (1974), DE DOS č. 2 625 843 j D. H, Coy, A. V. Schally: Aniraals of Clinical Res. ia, 139 (1978)/.
Požadavkům na vySSí aktivitu a delší působení než má přírodní hormon vyhovuje peptid s aktivitou LH/RH podle vynálezu, výše uvedeného obecného vzorce I.
Aktivita a prodloužený účinek látky podle yynálezu byly srovnávány s farmakologiokými standardy /A. Arimura a sp.: Endocrinology 22» ' '14 (1974)/. Testování hladiny LH bylo provedeno pomocí techniky RIA s ovčími protilátkami, kde jako referenční sloučenina sloužil standard amerického ústavu National Institute of Artritis, Metabolism and vDigestion Diseases - krysí LH/RP,. Statistická kontrola výsledku dosaženého pomooí t-testu byla provedena podle Studenta, popř, podle Welcha a výpočet koeficientu aktivity podle Borth a sp.: Arch. Gynac. 188. 497 (1957).
Podle výše popsaných pokusných stanovení na krysách, jimž bylo subkutánně podáno 50 ng, popřípadě 250 ng sloučeniny, byl prokázán silný účinek na uvolňování LH s maximem mezi 1 a 2 hodinou, přičemž ještě po 6 hodinách byla pozorovatelná značná aktivita Naproti tomu stejné dávce peptidů s aktivitou LH/RH podle vynálezu (50 ng, 250 ng, subkutánně) bylo dosaženo maxima účinku po 20 minutách a po 1 hodině už nebyla registrována žádná aktivita proti srovnávací skupině. Pro různé skupiny bylo vypočítáno, že poměr účinnosti standardu (LH/RH) a peptidů s aktivitou LH/RH podle vynálezu během 6 hodin od doby podání odpovídá při dávce 50 ng asi 31 násobnému zvýěení, při dávce 250 ng asi 43násobnému zvýšení.
Peptid s aktivitou LH/RH podle vynálezu lze syntetizovat známými metodami, například kondenzací na polymerních nosičích, jak bylo popsáno v NDR patentovém spise číslo 135 078 nebo v čs. AO č. 230 614.
Peptidy s aktivitou LH/RH podle vynálezu byly připraveny metodou v pevné fázi. Tripeptid ζ Glu-His-Trp byl připraven postupnou výstavbou na vhodném nosiči, odštěpem z pryskyřice a kondenzován na pryskyřici obsahující heptapeptid Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly, případně hexapeptid Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro, připravený též postupnou výstavbou na vhodném nosiči. Po odštěpení peptidů z nosiče a odštěpení chránících skupin působením kapalného fluorovodíku se získá relativně čistý produkt ve vysokém výtěžku.
Výstavba peptidů s aktivitou LH/RH probíhá na polymerních nosičích známého typu, jejichž základní skelet sestává ze sesílovaných polystyrénových uhlovodíků. Vhodnými metodami se zavádějí do polymeru aktivní centra, na nichž je navázána C-terminální chráněná aminokyselina nebo odpovídající di- nebo tripeptid, který představuje základ pro dalěí výstavbu peptidu. Jako reaktivních center se výhodně používá benzhydrylaminonebo chlormetylskupiny. Příprava peptidů s aktivitou LH/RH podle vynálezu sestává z několika dílčích stupňů.
Na benzhydrylaminovou pryskyřici se zakotví aminokyselina glycin ve vhodně chráněné formě s použitím známých kondenzačních metod, s výhodou dicyklohexylkarbodiimidové metody nebo metody symetrických anhydridů a postupně se stejnou metodou připojí vhodně chráněné aminokyseliny Pro, Arg, Leu, D-p-Et-Phe, Tyr a Ser nebo odpovídající fragmenty peptidů ve vhodně chráněné formě.
Při výstavbě zkrácené sekvence
Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro se naváže vhodně chráněný. Pro známými způsoby na chlormetylovanou pryskyřici a ostatní deriváty aminokyselin nebo odpovídající peptidové fragmenty se postupně připojí ve vhodně chráněné formě.
Tripeptid < Glu-His-Trp se vystaví na chlormetylované pryskyřici, přičemž Trp se ve vhodně chráněné formě připojí např. metodou česné soli apod. Ostatní aminokyseliny His a < Glu se postupně připojí v chráněné formě s použitím výěe uvedených kondenzačních metod. Tripeptid se uvolní z nosiče a kondenzuje s chráněným heptapeptidem, vázaným na benzhydrylaminovou pryskyřici, popřípadě s hexapeptidem, vázaným na chlormetylované pryskyřice. Peptidy s aktivitou LH/RH podle vynálezu se odětěpí z nosiče za současného odštěpení chránících skupin pomocí kapalného fluorovodíku nebo odštěpením peptidu známým způsobem, s výhodou amonolýzou a závěrečným odštěpením skupin, chránících postranní řetězce, s výhodou kapalným fluorovodíkem.
Takto získané peptidy s aktivitou LH/RH mají již obsah 70 až 80 % hmot.. Pro použití ve veterinární praxi stačí jedna čistící operace, například srážení ve formě rozpustné adiční soli s kyselinami a závěrečné uvolnění pomocí iontoměniče. Získá se tak biologicky vysoce aktivní preparát.
Pro diagnostické a terapeutické účely se pak provádí další čisticí operace, například čištění sloupcovou chromatografii.
V následujícím schématu je blíže objasněna syntéze peptidů a aktivitou LH/RH podle vynálezu:
+ Boc-His * Glu
Gly-NH- (?) + Boc-Pro + Boc-ArgdíOg) <Qlu-Hi3-Trp-(F) (Glu-His-Trp-OH
+ Boc-Leu + Boc-D-pEt-Phe + Boc-Tyr(Bzl) + Boc-Ser(Bzl)
Se r(Bzl)-Ty r(Bzl)-D-pEt-Phe-Leu-Arg(NOg)-Pro-Oly-NH-(Ť)
7. Glu-Hi s-T rp-Se r(Bzl)-Ty r(Bzl)-D-pEt-Phe-Leu-Arg(NOg) -Pro-Gly-NH-/Pj + HF
V
LH/RH analog
Aminokyseliny obsahující funkční skupinu v postranním řetězci se při syntéze vhodně chrání, zejména pomocí skupin, které lze snadno odštěpit hydrolýzou, redukcí nebo pomocí kapalného fluorovodíku, přičemž se používá skupin známých při syntéze peptidů, jako je například benzyl-, ρ-chlorbenzyl-, 2,6-dichlorbenzyl-, ρ-nitrobenzyl-, p-metoxybenzyl-, benzhydryl-, terč.butyl.-, tosyl-, dinitrofenyl- a nitroskupina.
Jako chrániči skupiny pro aminoskupiny lze použít alifatické oxykarbonylové skupiny, jako například cyklohexyloxykarbonyl-, adamantyloxykarbonyl- a především terc.butyloxykarbonylovou skupinu (Boc-), nebo karbobenzoxyskupiny substituované v aromatickém jádře (např. karbobenzoxy-, p-brom- nebo chlorkarbobenzoxy-, p-metoxykarbobenzoxyskupina), dále o-nitrofenylsulfenyl- a popřípadě substituované aralkylskupiny (např. di- nebo trifenylmetylskupiny).
K odštěpeni skupin chránících alfa-aminoskupiny v průběhu syntézy se používá přednostně kyselina trifluoroctová, kyselina trifluoroctová v dichlormetanu, chlorovodík v ledové kyselině octové nebo dioxanu. Jiná štěpící činidla a podmínky pro odštěpování specifických chránících skupin jsou popsány v publikaci E. Schroeder a K. Lubke, The Peptides I, Academie Press, '965, str. 72 až 75.
Po provedení syntézy může být peptid odštěpen z pdlymerního nosiče známým způsobem, s výhodou bromovodíljem v ledové kyselině octové, alkoholýzou, hydrazinolýzou, hydrogenolýzou, amonolýzou nebo kapalným fluorovodíkem s přídavkem anisolu nebo merkaptoetanolu.
Následující příklady provedení způsob podle vynálezu pouze dokládají, ale nikterak neomezují.
Příklad 1 g benzhydrylaminové pryskyřice (vyrobené podle I. Rivier a sp., J. Med. Chem. £6,
545 ('973), případně P. Pietta a sp., J. Org. Chem. 22» 44 ('977)) bylo kondenzováno β 5,3 g Boc-Gly v metyleňohloridu pomocí 6,2 g dicyklohexylkarbodiimidu. Obeah Gly činil
0,96 mmol/g pryskyřice. Pro postupnou výstavbu heptapeptidu byly použity následující deriváty aminokyselin! Boc-Pro, Boc-ArgíNOg), Boc-Leu, Βοο-ϋ-pEt-Phe, Boc-Tyr, Boc-Ser(Bzl)
Chráněné aminokyseliny byly kondenzovány v trojnásobném přebytku vzhledem k C-terminálnímu Gly metodou symetrických anhydridů. Postupná výstavba heptapeptidu byla provedena podle následujícího programu:
1. 3 x 80 ml metylenchloridu (po 3 minuty)
2. 3 x 80 ml dioxanu (3 minuty)
3. 1 x 80 ml 4 N roztoku kys. chlorovodíkové v dioxanu (10 minut)
4. 1 x 80 ml 4 N roztoku kys. chlorovodíkové v dioxanu (25 minut)
5. 3 x 60 ml dioxanu (3 minuty)
6. 3 x 80 ml metylenchloridu (3 minuty)
7. 3 x 80 ml směsi chloroform:metanol 2:1 (3 minuty)
8. 3 x 80 ml chloroformu (3 minuty)
9. 2 x 80 ml směsi chloroform:trietylamin 9:1 (5 minut)
10. 3 x 80 ml chloroform (3 minuty)
11. 3 x 80 ml metylenchloridu (3 minuty)
12. 1 x 80 ml symetrického anhydridu přisluSné chráněné aminokyseliny (kondenzační doba do negativního ninhydrinového testu)
13. 3 x 80 ml eměsi metanol:metylenchlorid (3 minuty)
Bylo získáno 18 g Boc-SerfBzD-D-pEt-Phe-Leu-ArgOIC^-Pro-Gly-NH-@
Příklad 2 g Boc-Trp-O- který byl připraven esterifikací chlormetylovaného polymerního nosiče (obsah Cl 7 %) s česnou solí Boe-Trp (obsah Trp 0,91 mmol Trp/g polymeru) byly kondenzovány postupně s BocrHis a Glu metodou symetrických anhydridů podle programu uvedeného v příkladu 1.
Bylo získáno 3,45 g <Glu-His-Trp-O-®. Odštěpení peptidu z pryskyřice bylo provedeno podle Sakakibary; 1 g tripeptidpolymeru byl suspendován v 15 ml fluorovodíku a 1,5 ml anisolu při 0 °C po dobu 30 minut. Po oddestilování fluorovodíku byl odparek promet éterem, rozpuštěn v 1 Sfc kyselině octové a byl převeden na acetát pomocí iontoměniče (Wofatit AD-41 v acetátovém cyklu). Lyofilizaci bylo získáno 220 mg Glu-His-Trp-OH ve formě acetétu.
Příklad 3 ζGlu-His-N2Hj (vyrobený podle Gillesen a sp., Helv. Chim. Acta £1, 60 (1970)) byl kondenzován azidovou metodou s Trp(OBzl) podle US pat. č. 3 888 838 za vzniku < Glu-His-Trp-OBzl. Produkt byl pak hydrogenován podle Sievertsson a sp.: J. Med. Chem. iž, 222 (1972) za přítomnosti katalyzátoru paladium/síran barnatý.
Příklad 4 g Ser(Bzl)-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-ArgdíOgJ-Pro-Gly-NH-® , získaného podle příkladu 1 byl kondenzován v dimetylformamidu s 2,88 mmol ζ Glu-His-Trp-OH, který byl připraven podle příkladu 2 nebo 3j jako kondenzační činidlo bylo použito 2,88 mmol dicyklohexylkarbodiimidu. Po promytí dimetylformamidem, směsí chloroform:metanol 2:1, metylenchloridem a metanolem bylo získáno 1,2 g produktu.
1,2 g dekapeptidpolymeru bylo suspendováno podle Sakakibary v 15 ml fluorovodíku a 1,5 ml anisolu (nebo merkaptometanolu) 1 hodinu při 0 °C. Po oddestilování fluorovodíku byl zbytek promyt eterem a rozpuštěn v 1% kyselině octové. Iontoměničem (tfofatit AD 41) byl produkt převeden na dekapeptidacetát a lyofilizován. Bylo získáno 334 mg analogu LH/RH uvedeného vzorce I v diacetátové monohydrátované formě.
Příklad 5
250 mg 4, Glu-Hia-Trp-Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 bylo při čištění rozpuštěno v 10 ml vody β 0,25 ml kyseliny octová a sraženo pomocí 25 ml nasyceného roztoku kyseliny stifnové (1,3-dihydroxy-2,4,6_trinitrobenzen). Sraženina byla promyta roztokem kyseliny stifnové, rozpuštěna ve směsi acetonsvoda 1:' a převedena iontoměničem (Wofatit AD 41, v acetátové formě) na analog LH/RH v diacetétové formě. Po lyofilizaci bylo získáno 188 mg čistého produktu výše uvedeného vzorce.
příklad 6
1,0 g analogu LH/RH získaného podle příkladu 5 pro diagnostické a terapeutické účely, bylo chromatografováno gradientovou elucí s pufrem trietylamin:kyselina octová (0,01/0,4 m pH 4,5) na karboxymetylcelulose (velikost sloupce 2 χ 30 cm). Detekce byla provedena UV měřením při 278 nm a čistota byla sledována tenkovrstvou chromatografií (soustava I : chloroform : metanol ; 30% kyselina octové 60 : 45 : 20; soustava II: n-butanol : kyselina octové : voda 4:1 : 5). Produkt byl získán v diavetátové formě.
Výtěžek: 0,638 g analogu LH/RH,nnl = -60,3° -0,5 (c = 1,1, kyselina octové),
Hodnota Rj. při tenkovrstvé chromatografií: Soustava I: 0,49
Soustava II: 0,13.
Aminokyselinová analýza:
Olu-Hi s-Trp-Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly teorie: 11111 11111 nalezeno:/1,0/ 1,02 0,97 0,85 0,98 1 ,01 1,0 1,04 1,0 1,02,
Vysvětlivky ke zkratkám použitým v textu:
| < Glu | pyroglutamová kyselina |
| His | histidin |
| Trp | tryptofan |
| Ser | serin |
| Tyr | tyrosin |
| Et | etyl |
| Phe | fenylalanin |
| Leu | leůcin |
| Arg | arginin |
| Pro | prolin |
| Gly | glycin |
| Boc | terč,butyloxykarbonyl |
| Bzl | benzyl |
| HF | fluorovodík |
RIA radioimmunoanalýza
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUPeptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon vzorce I4Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-p-Et-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NHg (I) a jeho farmaceuticky použitelné adiční soli s organickými kyselinami.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS722284A CS246162B1 (cs) | 1984-09-25 | 1984-09-25 | Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS722284A CS246162B1 (cs) | 1984-09-25 | 1984-09-25 | Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS246162B1 true CS246162B1 (cs) | 1986-10-16 |
Family
ID=5420989
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS722284A CS246162B1 (cs) | 1984-09-25 | 1984-09-25 | Peptid s aktivitou hormonu uvolňujícího luteinizační a folikuly stimulující hormon |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS246162B1 (cs) |
-
1984
- 1984-09-25 CS CS722284A patent/CS246162B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4667014A (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists | |
| US4481190A (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| AU613878B2 (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| AU593764B2 (en) | Nonapeptide and decapeptice analogs of LHRH, useful as LHRH agonists | |
| US3972859A (en) | Novel decapeptide amide analogs of leuteinizing hormone-releasing hormone | |
| FI91075C (fi) | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi | |
| FI92326C (fi) | LHRH:n nonapeptidi- ja dekapeptidianalogeja, jotka ovat käyttökelpoisia LHRH:n antagonisteina | |
| US4690916A (en) | Nona and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| JP2008534628A (ja) | ペプチド誘導体の製造のための方法 | |
| EP0131007A1 (en) | GnRH AGONISTS. | |
| WO1989009786A1 (en) | Peptide derivatives | |
| US4632979A (en) | Therapeutic LHRH analogs | |
| US4473555A (en) | Nona- and dodecapeptides for augmenting natural killer cell activity | |
| EP0328090A2 (en) | LHRH analogs | |
| US4581169A (en) | Nona-peptide and deca-peptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists | |
| US4721775A (en) | Effective peptides related to the luteinizing hormone releasing hormone from L-amino acids | |
| Rivier et al. | Synthetic luteinizing hormone releasing factor. Short chain analogs | |
| WO1994013313A1 (en) | 6-position modified decapeptide lhrh antagonists | |
| DK164875B (da) | Gonadoliberinderivater og deres farmaceutisk acceptable syreadditionssalte eller metalcomplexer, en fremgangsmaade til fremstilling heraf samt et farmaceutisk praeparat indeholdende disse | |
| US4758552A (en) | Gonadoliberin derivatives containing an aromatic aminocarboxylic acid in the 6-position, pharmaceutical and veterinary compositions containing them and process for preparing same | |
| AU609878B2 (en) | Cyclic grf-analogs | |
| US5508383A (en) | Cyclic peptide LHRH antagonists | |
| Klauschenz et al. | Tritium labeling of gonadotropin releasing hormone in its proline and histidine residues | |
| CZ172899A3 (cs) | Konformačně omezený peptidový analog LH-LR, farmaceutický přípravek obsahující tento peptid a jeho použití pro přípravu léčiva | |
| Bernard et al. | Synthesis of conjugates between luteinizing hormone releasing hormone (LH‐RH) and N‐acetyl‐muramyl‐L‐alanyl‐D‐isoglutamine (MDP) models of totally synthetic vaccines |