CS243173B1 - A method for producing particulate O -1,3-D-glucan - Google Patents

A method for producing particulate O -1,3-D-glucan Download PDF

Info

Publication number
CS243173B1
CS243173B1 CS846615A CS661584A CS243173B1 CS 243173 B1 CS243173 B1 CS 243173B1 CS 846615 A CS846615 A CS 846615A CS 661584 A CS661584 A CS 661584A CS 243173 B1 CS243173 B1 CS 243173B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
water
glucan
washed
cell walls
solution
Prior art date
Application number
CS846615A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CS661584A1 (en
Inventor
Zdenek Holan
Bohumil Sikyta
Vilem Palisa
Original Assignee
Zdenek Holan
Bohumil Sikyta
Vilem Palisa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zdenek Holan, Bohumil Sikyta, Vilem Palisa filed Critical Zdenek Holan
Priority to CS846615A priority Critical patent/CS243173B1/en
Publication of CS661584A1 publication Critical patent/CS661584A1/en
Publication of CS243173B1 publication Critical patent/CS243173B1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

Jedná se o způsob výroby partikulárního beta-1,3-D-glukanu. Mikroorganismy, a to askomycety, basidiomycety, řasy a protozoa, obsahující glukan, s výhodou kvasinky Saccharomyces cerevisiae, se desintegrují, buněčné stěny se oddělí, promyjí vodou, potom 0,4 až 8% roztokem hydroxidu alkalického kovu, s výhodou NaOH a KOH a dále s vodou s přídavkem 0,01 až 0,1 * smáčedel, potom se buněčné stěny vaří v roztoku alkalického kovu, po ochlazení se sediment promývá vodou, přivede na dobu 1 až 4 h k varu a po získání požadované čistoty promytim vodou se produkt suší. Výhodou tohoto postupu je, že je jednoduchý a poskytuje výtěžky stejné nebo vyšší než u dosud popsaných postupů.This is a method for producing particulate beta-1,3-D-glucan. Microorganisms, namely ascomycetes, basidiomycetes, algae and protozoa, containing glucan, preferably the yeast Saccharomyces cerevisiae, are disintegrated, the cell walls are separated, washed with water, then with a 0.4 to 8% solution of alkali metal hydroxide, preferably NaOH and KOH and further with water with the addition of 0.01 to 0.1 * wetting agents, then the cell walls are boiled in an alkali metal solution, after cooling, the sediment is washed with water, brought to a boil for 1 to 4 hours and after obtaining the required purity by washing with water, the product is dried. The advantage of this method is that it is simple and provides yields equal to or higher than in the methods described so far.

Description

Vynález se týká způsobu výroby partikulárního beta-1,3-D-glukanu (dále jen glukan), z mikroorganismů.The present invention relates to a process for the production of particulate beta-1,3-D-glucan (hereinafter referred to as glucan) from microorganisms.

Glukany nabývají stále větší důležitosti v klinické i biochemické praxi, snižují hladinu cholesterolu, stimulují fagocytárnl aktivitu a retikuloendotheliálnl systém vůbec, indikují regresi tumorů a zvyšují nespecifickou imunitu vůči infekcím. Další použití je možné v biochemické praxi, a to jako substrát pro stanovení endo- a exo-beta-1,3-D-glukanázové aktivity.Glucans are becoming increasingly important in clinical and biochemical practice, lower cholesterol levels, stimulate phagocytic activity and reticuloendothelial system at all, indicate tumor regression and increase non-specific immunity to infections. Further use is possible in biochemical practice as a substrate for the determination of endo- and exo-beta-1,3-D-glucanase activity.

Dobrým zdrojem pro získáváni glukanu jsou askosporogenní kvasinky čeledi Saccharomycetaceae, z nichž nejnižší kontaminující obsah chitinu vykazují rody Scizosaccharomyces a Kloeckera (0 4) a Endomycopsis (1,4 4), dále Saccharomyces, Kluyveromyces, Píchla, Hansenula, Debaryomyces, Saccharomycopsis a další. Z ostatních čeledí a podčeledí jsou pro přípravu glukanu použitelné rody Saccharomycoides, Hanseniaspora a Wickerhamia (S. Barnicki-Garcia, Ann. Rev. Microbiol. 22, 1 504, 1968).Ascosporogenic yeasts of the Saccharomycetaceae family are a good source for obtaining glucan. Of the other families and subfamilies, the genera Saccharomycoides, Hanseniaspora and Wickerhamia are useful for the preparation of glucan (S. Barnicki-Garcia, Ann. Rev. Microbiol. 22, 1 504, 1968).

Kromě strukturálních beta-1,3-D-glukanú se vyskytuje tento glukan pod různými názvy:In addition to the structural beta-1,3-D-glucans, this glucan appears under different names:

Jako exocelulárnl polysacharid pululan, rezervní polysacharid paramylon, chrysolaminarin, laminarin atd.Such as exocellular polysaccharide pululan, reserve polysaccharide paramylon, chrysolaminarin, laminarin etc.

Příprava glukanu ze Saccharomyces cerevisie (J.D.Manners, A.J.Mason, J.C.Petterson,Preparation of Glucan from Saccharomyces cerevisiae (J.D.Manners, A.J.Mason, J.C.Petterson,

J. Gen. Microbiol., 80, 411, 1974) vychází z přípravy glukanu z celých nedesintegrovaných buněk. Lisované droždí se míchá s 3 až 6 % NaOH při 18 °C 24 h a po centrifugaci se sediment suspenduje v 3% hydroxidu sodném NaOH a míchá 3 h při 50 až 75 °C. Po zředění vodou a centrifugaci se sediment suspenduje v 3% NaOH a ponechá 18 h při 18 až 20 °C a promyje vodou.J. Gen. Microbiol., 80, 411, 1974) is based on the preparation of glucan from whole non-disintegrated cells. The compressed yeast is stirred with 3 to 6% NaOH at 18 ° C for 24 h, and after centrifugation, the sediment is suspended in 3% NaOH and stirred for 3 h at 50 to 75 ° C. After dilution with water and centrifugation, the sediment is suspended in 3% NaOH and left at 18-20 ° C for 18 h and washed with water.

Potom se sediment rozmíchá ve vodě, zahřeje na 80 °C, filtruje přes G1 sintr a upraví kyselinou octovou na pH 4,5.Then the sediment is stirred in water, heated to 80 ° C, filtered through a G 1 sinter and adjusted to pH 4.5 with acetic acid.

Po centrifugaci se sediment opět suspenduje v 3% NaOH a míchá 2 h při 80 °C, potom se směs centrifuguje, k peletu se přidá voda a pH se upraví na 4,5 a centrifuguje. Potom se sediment míchá 1 h v 0,5 M kyselině octové při 70 až 80 °C, odstředí a želatinosní materiál se 1 h míchá s vodou při 70 až 80 °C. Následuje další extrakce s 0,6 M octovou kyselinou 1 h pří 70 až 80 °C a po odstředění se míchá s vodou 1 h při 75 až 80 °C.After centrifugation, the sediment is resuspended in 3% NaOH and stirred for 2 hours at 80 ° C, then the mixture is centrifuged, water is added to the pellet, the pH is adjusted to 4.5 and centrifuged. Then the sediment is stirred for 1 h in 0.5 M acetic acid at 70-80 ° C, centrifuged and the gelatinous material is stirred with water at 70-80 ° C for 1 h. Subsequent extraction with 0.6 M acetic acid for 1 hour at 70-80 ° C followed by centrifugation with water for 1 hour at 75-80 ° C.

Po opětovné centrifugaci se pelet suspenduje v 0,02M octanu sodného a zahřívá v autoklávu 1 h při 132 °C. Po dispergaci ve vodě se suspenze centrifuguje. Promývání a centrifugace se opakuje celkem 6krát. Produkt je světležlutý prášek obsahující 0,4 4 popela a 0,6 % dusíku, dále 1,6 4 gentiobiosy, 0,53 4 gentiotriosy, 0,56 4 gentiotetraosy. K uvedenému postupu byla popsána řada modifikací (J.S.D.Bacon, V.C.Farmer, D.Jones, I.F.Taylor, Biochem.J., 114, 557, 1969), kde se místo kyseliny octové používá aoetátový pufr nebo směs etanolu a éteru s 14 chlorovodíkem. Jiná modifikace vypracování stejnými autory se týká borohydridu sodného, kdy po prvém účinku acetátového pufru a po trojnásobné extrakci s vodou se k 34 NaOH přidá borohydrid sodný. Výtěžek glukanu u popsaných postupů činí 1,9 4.After re-centrifugation, the pellet is suspended in 0.02 M sodium acetate and heated in an autoclave at 132 ° C for 1 h. After dispersion in water, the suspension is centrifuged. Washing and centrifugation is repeated a total of 6 times. The product is a pale yellow powder containing 0.4 4 ash and 0.6% nitrogen, followed by 1.6 4 gentiobiosis, 0.53 4 gentiotriose, 0.56 4 gentiotetraose. A number of modifications have been described for this procedure (J.S.D.Bacon, V.C.Farmer, D.Jones, I.F. Taylor, Biochem. J., 114, 557, 1969), using an acetic acid buffer or a mixture of ethanol and ether with 14 hydrogen chloride instead of acetic acid. Another modification made by the same authors relates to sodium borohydride, where sodium borohydride is added to 34 NaOH after the first effect of the acetate buffer and three times with water. The yield of glucan in the processes described is 1.9.

A.Misaki, J.Johnson, S.Kirkwood, J.V.Scaletti, F. Smith (Carbohyd. Res. 6, 150, 1968) použili k izolaci glukanu celých buněk, které nejprve čtyřnásobně extrahovali v alkalickém prostředí, potom upravili pH, 3krát promyli vodou, etanolem a éterem. Po usušeni produktu jej dále čistili extrakci octovou kyselinou, přičemž tato extrakce prováděná vždy 3 h při 90 °C se opakovala 7krát. Po centrifugaci se sediment promyl 3krát vodou, 2krát etanolem, 3krát éterem. Výtěžek činil 0,84 4 vzhledem k počáteční hmotnosti kvasinek.A.Misaki, J.Johnson, S.Kirkwood, JVScaletti, F. Smith (Carbohyd. Res. 6, 150, 1968) used whole cells to isolate glucan, first extracted four times in alkaline medium, then adjusted pH, washed 3 times water, ethanol and ether. After drying, the product was further purified by acetic acid extraction, which was repeated 3 times at 90 [deg.] C. for 7 times. After centrifugation, the sediment was washed 3 times with water, 2 times with ethanol, 3 times with ether. The yield was 0.84% with respect to the yeast initial weight.

Podstata způsobu přípravy glukanu podle vynálezu spočívá v tom, že mikroorganismy obsahující glukan, s výhodou Saccharomyces cerevisiae, se desintegrují, buněčné stěny se oddělí, promyjí vodou, potom 0,4 až 8% roztokem hydroxidu alkalického kovu, s výhodou NaOH a KOH a dále vodou s přídavkem 0,1 % smáčedel, potom se buněčné stěny vaří 30 min až 4 h ve 44 roztoku NaOH nebo KOH a po ochlazení se sediment promývá vodou, přivede na dobu 1 až 4 h k varu a po získání požadované čistoty promytím vodou se produkt čistí a následně suší nebo lyofili3 zuje. Jako detergent (smáčedlo) se používá Tween 20, Tween 80, Triton X-100, s výhodou n-dodecylsulfát sodný. Pod názvy prvých tří smáčedel se jedná o polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát, polyoxyethylen (20) sorbitan monooleát a oktylfenol-polyoxyethylenglykoléter. Použitá koncentrace je v rozsahu 0,01 až 0,1 %. Takto připravený produkt s výtěžkem kolem 2 %, vztaženo na výchozí hmotnost lisovaného droždí, má tyto vlastnosti:The glucan-containing microorganisms, preferably Saccharomyces cerevisiae, are disintegrated, the cell walls are separated, washed with water, then 0.4 to 8% alkali metal hydroxide solution, preferably NaOH and KOH, and furthermore water with the addition of 0.1% surfactants, then the cell walls are boiled for 30 min to 4 h in 44 NaOH or KOH solution and after cooling the sediment is washed with water, brought to boiling for 1 to 4 h and after obtaining the desired purity by washing with water It is purified and then dried or lyophilized. As the detergent (wetting agent) Tween 20, Tween 80, Triton X-100, preferably sodium n-dodecyl sulfate, is used. The names of the first three surfactants include polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate, and octylphenol-polyoxyethylene glycol ether. The concentration used is in the range of 0.01 to 0.1%. The product thus prepared, with a yield of about 2%, based on the starting weight of the compressed yeast, has the following characteristics:

1. Acetylovaný produkt rozpustný v chloroformu (300 mg v 5 ml) má alfa D - 62,3°.1. Acetylated product soluble in chloroform (300 mg in 5 ml) has an alpha D of - 62.3 °.

-I 2 3-1-I 2 3-1

2. Molární hmotnost 310 kg . mol , koeficient vnitřní viskozity η = 3,36.10 . cm .g2. Molar mass 310 kg. mol, intrinsic viscosity coefficient η = 3,36.10. cm .g

3. . Infračervená spektra: 888, 1 000, 1 030, 1 070, 1 110-1 120, 1 155, 1 200, 1 250, 1 300,3. Infrared spectra: 888, 1,000, 1,030, 1,070, 1,110-1,120, 1,155, 1,200, 1,250, 1,300,

370, 1 405-1 420, 1 460, 1 550, 1 620, 1 640, 1 655, 2 875, 3 445-3 450 cm _1.370, 1 405-1 420, 1460, 1550, 1620, 1640, 1655, 2875, 3 445 to 3 450 cm _1.

4. Obsah celkového dusíku stanovený podle Kjehldala čísi 0,2 až 0,5 %.4. Total nitrogen content determined according to Kjehldal number 0.2 to 0.5%.

5. Obsah aminokyselin (v/ig na gram glukanu) činí Lys (25), His (7,5), Gly (3,1), Ser (1,5), Ala (1,5), Leu (1,4), Glx (1,2), Asx (1,0), Ile (1,0), Val (1,0), Thr (0,6) a nulový obsah Arg, Met, Pro, Tyr a CysSO-j.5. The amino acid content (v / g per gram of glucan) is Lys (25), His (7.5), Gly (3.1), Ser (1.5), Ala (1.5), Leu (1, 4), Glx (1.2), Asx (1.0), Ile (1.0), Val (1.0), Thr (0.6) and zero content of Arg, Met, Pro, Tyr and CysSO- j.

6. NMR při 62,8 MHz v dimethylsulfoxidu při 100 °C jsou ( v ppm):6. NMR at 62.8 MHz in dimethylsulfoxide at 100 ° C are (in ppm):

103,0 (cl), 86,2 (C3), 76,4 (C5), 72,9 (C2), 68,6 <C4) a 61,0 <C6).103.0 (cl), 86.2 (C3), 76.4 (C5), 72.9 (C2), 68.6 (C4) and 61.0 (C6).

Spektrum se měří v dimethylsulfoxidu při pD = 13,7. Větvením se mění.The spectrum is measured in dimethylsulfoxide at pD = 13.7. Branching changes.

7. Rentgenová analýza (v nm): 0,608 (s); 0,397 (s); 0,327 (w) ; 0,293 (s); 0,256 (m). Glukan v alkáliích nerozpustný je z 5 % rozpustný ve vřících zředěných anorganických kyselinách.7. X-ray analysis (in nm): 0.608 (s); 0.397 (s); 0.327 (w); 0.293 (s); 0.256 (m). The alkali-insoluble glucan is 5% soluble in boiling dilute inorganic acids.

Po vysrážení tvoří tzv. hydroglukan, jehož difrakce jsou identické s paramylonem (v nm):After precipitation it forms a so-called hydroglucan whose diffraction is identical with paramylon (in nm):

1,36 (vs); 0,785 (mv); 0,678 (w); 0,535 (vw); 0,445 (m.dif.); 0,392 (m) ; 0,362 (mw) ;1.36 (vs); 0.785 (mv); 0.678 (w); 0.535 (vw); 0.445 (dd); 0.392 (m); 0.362 (mw);

0,345 (w) , 0,300 (vw); 0,290 (w); 0,270 (vW) a 0,265 (vw).0.345 (w), 0.300 (vw); 0.290 (w); 0.270 (vW) and 0.265 (vw).

8. Podle metylační analýzy je možná přítomnost beta-1,6 vazeb (do 15 %) jako postranní větvení mezi jednotlivými trojčlennými helixy beta-1,3-D-glukanu.8. According to methylation analysis, the presence of beta-1,6 bonds (up to 15%) is possible as a lateral branching between individual triple helixes of beta-1,3-D-glucan.

9. Obsah popela pod 2 %.9. Ash content below 2%.

Proti uvedeným způsobům přípravy glukanu, které jsou dosti komplikované, protože zahrnují řadu izolačních postupů a stupňů, pro izolaci se používají minimálně 2 různé sloučeniny, je postup podle vynálezu značně jednodušší a pro izolaci se používají jen hydroxidy alkalických kovů. Tento zjednodušený způsob přípravy poskytuje stejně, nebo vyšší výtěžky glukanu ve srovnání s dříve popsanými způsoby.Against the above-mentioned processes for the preparation of glucan, which are quite complicated because they involve a number of isolation procedures and steps, at least 2 different compounds are used for isolation, the process according to the invention is considerably simpler and only alkali metal hydroxides are used. This simplified process provides the same or higher yields of glucan compared to the previously described processes.

Příklad 1Example 1

200 kg pekařského droždí Saccharomyces cereviciae se desintegruje jako 8% suspenze na zařízení Dyno-Mill KD5. Toto zařízení reprezentuje mechanickou dezintegraci pomocí skleněných mikrokuliček. Po dezintegraci se produkt promyje vodou a promíchá. Po 15 min se buněčné stěny odstředují, až se získá mírně opalescentní supernatant. Sediment se potom suspenduje ve 100 1 1% KOH, při 20 °C míchá lha odstředí. Získaný sediment se promyje vodou, odstředí a suspenduje ve 100 1 2% KOH, míchá 30 min a opět odstředí. Potom se sediment suspenduje do 100 1 vody, odstředí a pelet rozmíchá ve 100 1 1M hydroxidu draselného a za míchání přivede k varu a vaří 1 h. Po samovolném ochlazení na teplotu 20 až 25 °C se směs odstředí, sediment 3krát promyje ÍM KOH a promývá vodou až hodnota pH dosáhne 7.200 kg of baked yeast Saccharomyces cereviciae is disintegrated as an 8% suspension on a Dyno-Mill KD5. This device represents mechanical disintegration by means of glass microspheres. After disintegration, the product is washed with water and mixed. After 15 min, the cell walls are centrifuged until a slightly opalescent supernatant is obtained. The sediment was then suspended in 100 L of 1% KOH, stirred at 20 ° C and centrifuged. The sediment obtained is washed with water, centrifuged and suspended in 100 l of 2% KOH, stirred for 30 min and centrifuged again. The sediment is then suspended in 100 l of water, centrifuged and the pellet is stirred in 100 l of 1M potassium hydroxide and boiled under stirring and boiled for 1 hour. After cooling to 20-25 ° C, the mixture is centrifuged, washed 3 times with 1M KOH and Wash with water until pH 7.

Potom se přidá dodecylsulfát sodný o koncentraci 0,01 % a po 1 h odstředí. Sediment se suspenduje ve 100 1 destilované vody, 1 h povařf a po odstředění se promyje, až je supernatant naprosto čirý. Získaný glukan se lyofilizuje. Výtěžek je 1,5 až 2, 2 % počítáno na hmotnost lisovaného droždí. Takto získaný glukan má molární hmotnost 310 kg . mol-1 a obsah celkového dusíku je v rozmezí 0,20 až 0,50 %.Sodium dodecyl sulfate at a concentration of 0.01% is then added and centrifuged after 1 h. The sediment is suspended in 100 l of distilled water, boiled for 1 h and washed after centrifugation until the supernatant is completely clear. The obtained glucan is lyophilized. The yield is 1.5 to 2.2% based on the weight of the compressed yeast. The glucan thus obtained has a molar mass of 310 kg. mol -1 and the total nitrogen content is in the range 0.20-0.50%.

Příklad 2Example 2

500 g odstředěných kvasinek (mokrá hmotnost) Saccharomyces cerevlslae, mutantního kmene s fragilní buněčnou stěnou se vibračním míchadlem rozmíchá v destilované vodě a odstředí. Získaný pelet se suspenduje v destilované vodě a desintegruje v desintegrátoru Manton-Gaulin Toto zařízení reprezentuje desintegraci střižnými silami bez přídavku desintegrujících tělísek. Po desintegraci se postupuje zpŮBobem uvedeným v příkladu 1.500 g of centrifuged yeast (wet weight) of Saccharomyces cerevlslae, a mutant strain with a fragile cell wall, are mixed with a vibration stirrer in distilled water and centrifuged. The pellet obtained is suspended in distilled water and disintegrated in a Manton-Gaulin disintegrator. This device represents shear disintegration without the addition of disintegrating bodies. After disintegration, the procedure is as described in Example 1.

Příklad 3 g Euglena gracilis (mokrá hmotnost) se promyje vodou a potom etanolem. Potom se na buňky působí 1% trypsinem ve fosřorečnanovém pufru o pH 7,6 při 40 °C 12 h. Po promytí 8M močovinou se provede deproteinizace a po promytí, centrifugaci a vysušení se získá bílý produkt s výtěžkem 25 % vztaženo na hmotnost suchých depigmentovaných buněk.Example 3 g Euglena gracilis (wet weight) was washed with water and then with ethanol. The cells are then treated with 1% trypsin in phosphate buffer pH 7.6 at 40 ° C for 12 hours. After washing with 8M urea, deproteinization is performed and after washing, centrifugation and drying, a white product is obtained in 25% yield based on dry depigmented weight. cells.

Příklad 4Example 4

100 g mořských řas řádu Laminarinales se smísí s 500 ml 1% chlorovodíkové kyseliny, kterou se extrahují vakuolárni polysacharidy laminarinového typu. Precipitát nerozpustného sacharidu se získá srážením etanolem. Po centrifugaci a promytí vodou se polysacharid vysuší lyófilizací.100 g of seaweed of the order Laminarinales are mixed with 500 ml of 1% hydrochloric acid, which is used to extract the vacuolar laminar type-type polysaccharides. The insoluble saccharide precipitate is obtained by ethanol precipitation. After centrifugation and washing with water, the polysaccharide is dried by lyophilization.

V biochemické praxi lze použít předmětu vynálezu jako substrát pro stanovení beta-1,3-glukanázové aktivity. Substrát lze použít ve formě rozpustné i nerozpustné, práškové i tabletové, rozpustná forma ale vychází ze substituovaného glukanu, a to karboxymethylovaného, hydroxyethyloveného a podobně. Dále se tento substrát může barvit remazolovou modří, čímž se připraví chromolytický substrát.In biochemical practice, the present invention may be used as a substrate for determining beta-1,3-glucanase activity. The substrate can be used in the form of both soluble and insoluble, powder and tablet, but the soluble form is based on substituted glucan, namely, carboxymethyl, hydroxyethylated, and the like. Further, the substrate may be stained with remazol blue to prepare a chromolytic substrate.

V klinické praxi kromě stimulace fagocytární aktivity a retikuloendotheliálního systému vůbec indukují regresi tumorů a zvyšují nespecifickou imunitu vůči infekcím. Vynikající výsledky byly zaznamenány v léčení chronické osteomyelitidy. Glukan je asi aktivní složkou zymosanu, protože aktivuji alternativní dráhu komplementu, z tohoto pohledu mohou preparáty glukanu nahradit zymosan. Glukan také snižuje hladinu krevního cholesterolu.In clinical practice, in addition to stimulating phagocytic activity and the reticuloendothelial system, they induce tumor regression and increase non-specific immunity to infections. Excellent results have been reported in the treatment of chronic osteomyelitis. Glucan is probably the active ingredient of zymosan because it activates an alternative complement pathway, in this regard, glucan preparations can replace zymosan. Glucan also lowers blood cholesterol.

Claims (4)

předmEt VYNÁLEZUOBJECT OF THE INVENTION 1. Způsob přípravy partikulárního glukanu, vyznačující se tím, že mikroorganismy obsahující beta-l,3-D-glukan, a to askomycety, basidiomycety, řady a protozoa, s výhodou kvasinky Saccharomyces cerevisiae, se desintegrují, buněčné stěny oddělí, promyjí vodou, potom 0,4 až 8% roztokem ^alkalického hydroxidu sodného NaOH nebo draselného KOH a dále vodou s přídavky smáčedel s výhodou n-dodecylsulfátu sodného, v koncentraci 0,01 až 0,1 %, potom se buněčné stěny vaří 30 min až 4 h v roztoku alkalického hydroxidu sodného NaOH nebo draselného KOH a po ochlazení se sediment promývá vodou, přivede na dobu 1 až 4 h k varu a po promytí vodou se produkt suší.Process for preparing particulate glucan, characterized in that the microorganisms containing beta-1,3-D-glucan, namely ascomycetes, basidiomycetes, rows and protozoa, preferably yeast Saccharomyces cerevisiae, are disintegrated, the cell walls are separated, washed with water, followed by a 0.4 to 8% solution of an alkaline sodium hydroxide solution of NaOH or potassium KOH, followed by water with the addition of wetting agents, preferably sodium n-dodecyl sulfate, at a concentration of 0.01 to 0.1%, after which the cell walls are boiled for 30 min. solution of alkaline sodium hydroxide or NaOH or potassium KOH, and after cooling, the sediment is washed with water, brought to boiling for 1 to 4 h, and after washing with water the product is dried. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že desintegrace mikroorganismu se provede mechanicky nebo působením enzymů nebo působením chemických činidel.2. A process according to claim 1, wherein the disintegration of the microorganism is carried out mechanically or by enzymes or chemical agents. 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se buněčné stěny vaří ve 4% hydroxidu sodném nebo draselném.3. The method of claim 1, wherein the cell walls are boiled in 4% sodium or potassium hydroxide. 4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že sušení produktu se provádí lyófilizací.4. The process of claim 1 wherein the product is dried by lyophilization.
CS846615A 1984-09-04 1984-09-04 A method for producing particulate O -1,3-D-glucan CS243173B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS846615A CS243173B1 (en) 1984-09-04 1984-09-04 A method for producing particulate O -1,3-D-glucan

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS846615A CS243173B1 (en) 1984-09-04 1984-09-04 A method for producing particulate O -1,3-D-glucan

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS661584A1 CS661584A1 (en) 1985-08-15
CS243173B1 true CS243173B1 (en) 1986-05-15

Family

ID=5413610

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS846615A CS243173B1 (en) 1984-09-04 1984-09-04 A method for producing particulate O -1,3-D-glucan

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS243173B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
CS661584A1 (en) 1985-08-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Okuda et al. β-Glucan synthesis in the cotton fiber (I. Identification of β-1, 4-and β-1, 3-glucans synthesized in vitro)
JP5221656B2 (en) Method for preparing glucan and mannan, glucan preparation and mannan preparation obtained thereby, and use thereof
McCleary et al. Measurement of β-glucan in mushrooms and mycelial products
Avery Jr et al. The total extraction of free auxin and auxin precursor from plant tissue
Kanetsuna et al. Cell wall glucans of the yeast and mycelial forms of Paracoccidioides brasiliensis
DE69527955T2 (en) TREATING GLUCANES WITH ENZYMES
Wessels Control of cell-wall glucan degradation during development in Schizophyllum commune
McCleary Purification of (1→ 3),(1→ 4)-β-D-glucan from barley flour
JP2010528668A (en) High viscosity β-glucan product and method of preparation
CS243173B1 (en) A method for producing particulate O -1,3-D-glucan
US5183667A (en) Therapeutic immunostimulation by glombrella cingulata
EP1397389B1 (en) A method of isolation of immunostimulating glucan from oyster mushroom
JPH03119995A (en) Preparation of glucan containing product starting with candida arbicans bmm-12
CN108158846A (en) A kind of lotion containing candida utili callose
CN104797605A (en) Method for making pentoses and pentose-based soluble oligo/polysaccharides from cereal grain involving debranning technology
KR100700910B1 (en) Yeast Mutants Producing Alkali-Soluble β-Glucan
Sangar et al. Chemical composition of the cell wall of Smittium culisetae (Trichomycetes)
Sietsma et al. Cell wall composition and “protoplast” formation of Geotrichum candidum
CN108125818A (en) A kind of skin cream containing candida utili callose
Sietsma et al. Total inhibition of wall synthesis by 2‐deoxyglucose and polyoxin D in protoplasts of Schizophyllum commune
JP2003169690A (en) Method for extracting lignin-containing material and antioxidant using lignin
CN108143654A (en) A kind of suncream containing candida utili callose
Shepherd et al. Candida albicans: cell wall physiology and metabolism
JP2020010602A (en) TORULA YEAST-DERIVED β-GLUCAN
WO2022250011A1 (en) METHOD FOR PRODUCING β-1,3-1,6-GLUCAN