CS235598B1

CS235598B1 - Enzýmový preparát na stabilizáciu vína proti bielkovinným zákalom a sposob jeho přípravy

Info

Publication number: CS235598B1
Application number: CS817583A
Authority: CS
Inventors: Lubomira Rexova-Benkova; Eva Stratilova; Jirina Omelkova; Jaroslava Turkova; Vladimir Kostka; Vladimir Kubanek; Jan Farkas
Original assignee: Rexova Benkova Lubomira; Eva Stratilova; Jirina Omelkova; Jaroslava Turkova; Vladimir Kostka; Vladimir Kubanek; Jan Farkas
Priority date: 1983-11-07
Filing date: 1983-11-07
Publication date: 1985-05-15

Description

235598

Vynález sa týká komplexného enzymové-ho preparátu na stabílizáciu vína proti biel-kovinným zákalom a spůsobu jeho iprípravy.Tento preparát je nerozpustný a obsahujezmes enzýmov katalyzujúcich degradáciubielkovín a nieikitorých ochranných koloidovsposobujúcich vo vine tvorbu zákalov.

Na stabílizáciu vína proti bielkovinnýmzákalom dosial' používali jednak preparáty,účinkom ktorých sa látky spůsobujúce tvor-bu bielikoviinných zákalov z vína odstraňu-jú, napr. bentonit, vymieňače iónov [J. Far-kaš: Biochemie a technologie vína. SNTLPraha, 1980j, jednak enzýmové preparáty,účinkom ktorých sa koloidné, zákalotvornélátky degradujú na nízkomolekuíárne pro-dukty. Jedná sa o preparáty kyslých proteáz,katalyzujúcich degradáciu bielkovín vína,alebo o preparáty pektináz degradujúcichpektínové látky, připadne iné polysacharidypřítomné vo vine alebo mušte a posobiaceako ochranné koloidy [B. Urlaub: ProcessBiochem. 13, 14 (1978); E. V. Vorobjeva, E.V. Judin: Sadov. Vinogr. i Vinod. Moldávii32, 37 (1977); E. N. Datunašvili: TrudyVNIlViV Magarač 19, 118 (1978)].

Tieto preparáty sú vo vine rozpustné, tak-že ich apliikáciou sa dostávajú do vína cud-zorodé látky, ktoré nie je možné z něho poskončení účinku odstrániť. Táto nevýhodaje eleminovaná pri aplikácli nerozpustnýchenzymových preparátov, ktoré je možné poskončení procesu z vína oddělit. Ich přípra-va spočívá v zakotvení enzýmu na neroz-pustný nosič.

Nerozpustné preparáty používané dosial'na stabílizáciu vína proti bielkovinným zá-kalom obsahovali kyslé proteázy alebo pek-tinázy zakotvené ikovalentným viazaním a-lebo adsorpciou na dietylaminoetyl-celulózu,bentonit, alebo hydratovaný kysličník kře-mičitý (siliikagel) [E. N. Datunašvili, N. M.Pavlenko, B. S. Gaina, V. I. Petračenok: Vi-nod. Vinogr. SSSR 6, 54 (1975); E. N. Datu-našvil, V. M. Ježov, N. Ά. Azizov: Vinod. Vi-nogr. SSSR 7, 8 (1980); J. Vajčner, J. Turko-vá, V. Krumhanzl: Kvasný prum. 27, 181(1981);W. Harmeier: Biotechnol. Lett. 1,225 (1979)].

Nevýhodou týchto preparátov je, že vač-šinou obsahujú len jeden typ enzýmov —— proteázy alebo pektinázy, účinkom kto-rých nie je možné dosiahnúť úplnú stabili-záciu s dlhodobým účinkom, lebo nedegra-dujú všetky zákalotvorné látky vína. Ďalšou nevýhodou dosial' známých neroz-pustných enzýmových preparátov na stabi-lizáciu vína proti bielkovinným zákalom jepoměrně nízká stabilita zakotvenia a účinkuenzýmov, takže je možné nimi stabilizovatlen obmedzené množstvo vína, pričom nieje vylúčené pomalé uvolňovanie zakotvenýchenzýmov a ich sprievodných látok do spra-covávaného- vína.

Uvedené nevýhody odstraňuje enzýmovýpreparát na stabílizáciu vína proti bielko-vinným zákalom a spůsob jeho přípravy po- dlá vynálezu, ktorých podstata spočívá vtom, že preparát obsahuje 0,1 až 5 % kyslejproteázy živočišného alebo mikrobiálnehopůvodu a 0,1 až 2,5 % pektinázy ireverzíbil-ne zakotvených na nerozpustný polymérnynosič — polyetyléntereftalát a že podsta-tou přípravy tohto preparátu je, že sa napolyetyléntereftalát suspendovaný v octano-vom tlmivom roztoku 0,1 mol. I-1, pH 3 až 5působí pri teplote 4 °C až 30 °C po dobu 4až 20 h 0,2 až 10 % proteázy a na polyety-léntereftalát suspendovaný v 0,1 mol.l-1octanovom tlmivom roztoku pH 3,6 až 6,0sa působí pri teplote 4 °C až 30 °C po dobu4 až 20 h 0,2 až 5 % pektinázy, potom saohidve suspenzie obsahujúce enzýmy zmie-šajú v pomere 1:1 až 5:1 a nerozpustnýpodiel sa oddělí centrifugáciou alebo filt-ráciou a nakoniec sa premyje 0,1 mol. I"1octanovým tlmivým roztokom pH 4,0. Výhodou enzýmového preparátu a spůso-bu jeho přípravy podl'a vynálezu je, že máproteázovú i pektinázovú aktivitu, že vyso-ká stabilita zakotvenia obidvoch typov en-zýmov vylučuje ich uvolňovanie do spraco-vávaného materiálu, vysoká operačná stabi-lita preparátu umožňuje dlhodobé kontinu-álně, lebo mnohonásobné opakované použí-váme za nemeniaceho sa účinku a že přípravapreparátu je založená na ireverzibilnej in-terakcii enzýmov s nosičom uskutočnenejbez účinku dalších reagentov. V ďalšom je vynález bližšie objasněný napríkladoch, ktoré však rozsah vynálezu ne-obmedzujú. Příklad 1

1 g polyetyléntereftalátu sa suspendujeza miešania v 20 ml 0,1 mol. I-1 octanovéhotlmivého roztoku, pH 3,0. K suspenzii sa při-dá 70 mg kuracieho pepsínu rozpuštěnéhov rovnakom tlmivom roztoku. V 20 ml 0,1mol. 1_1 octanového tlmivého roztoku pH 3,6 sa suspenduje 1 g polyetyléntereftalátua 5 mg mikrobiálnej pektinázy Leozym. O-bidve suspenzie sa nechajú za miešania in-kubovať pri teplote 20 °C po dobu 4 h. Poskončení inkubácie sa ohidve suspenzie spo-ja, nerozpustný podiel sa oddělí filtrácioualebo centrifugáciou a premyje sa 3-krát40 ml 0,1 mol. I"1 octanového tlmivého roz-toku, pH 4,0. Příklad 2 2 g polyetyléntereftalátu sa suspendujeza miešania v 40 ml 0,1 mol. I-1· octanovéhotlmivého roztoku pH 4,6 a pridajú sa 3 mlmikrobiálnej proteázy Laktochym. V 40 ml0,1 mol. l~t octanového tlmivého roztoku,pH 4,6 sa suspenduje 0,5 g polyetyléntere-ftalátu a 2,5 mg pektinázy Rohament. Obi-dve suspenzie sa nechajú za miešania inku-bovať po dobu 20 h pri teplote 4 °C. Po skon-čení inkubácie sa suspenzie spoja, neroz-

Claims

235508 pustný podiel sa oddělí centrifugáciou, ale-bo filtráciou a premyje sa 3-krát octanoivýmtlmivým roztoikom, pH 4,2. Enzymové preparáty připravené postupmiopísanými v príkladoch eliminujú tvorbu bielikovinných zákalov vo vine, ich účinoksa nemení v priebehu niekoikomesačnéhotrvalého ako aj přerušovaného používaniaa enzýmy a ich sprievodné látky sa z nichv priebehu používania neuvolňujú. PREDMET

1. Enzýmový preparát na stabilizáciu vínaproti bielkovinným zákalom vyznačený tým,že obsahuje 0,1 až 5 % kyslej proteázy ži-vočišného alebo mikrobiálneho původu a0,1 až 2,5 % pektinázy ireverziibiline zakot-vených na nerozpustný polymérny nosič po-lyetyléntereftalát.

2. Sposob přípravy enzýmového prepará-tu na stabilizáciu vína proti bielkovinnýmzákalom podlá bodu 1, vyznačený itým, žena polymérny nosič suspendovaný v 0,1mol. I-1 octanovom tlmivom roztoku pH

3 YNÁLEZU až 5 sa působí při teplote

4 °C až 30 °C podobu 4 až 20 h 0,2 až 10 % hmot. kyslejproteázy na nosič suspendovaný v 0,1 mol.. I“1 octanovom tlmivom roztoku pH 3,6 až6,0 sa působí pri teplote 4 °C až 30 °C po do-bu 4 až 20 h 0,2 až 5 % hmot. peikitinázy,potom sa obidve suspenzie obsahujúce en-zýmy zmiešajú v pomere 1:1 až 5 :1 a ne-rozpustný podiel sa potom oddělí centrifu-gáciou alebo filtráciou a nakoniec sa pre-myje 0,1 mol. 1_1 oetanovým tlmivým rozto-kom, pH 4,0.