CS233134B1 - Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito - Google Patents
Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito Download PDFInfo
- Publication number
- CS233134B1 CS233134B1 CS525483A CS525483A CS233134B1 CS 233134 B1 CS233134 B1 CS 233134B1 CS 525483 A CS525483 A CS 525483A CS 525483 A CS525483 A CS 525483A CS 233134 B1 CS233134 B1 CS 233134B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- fructose
- well
- preparation
- biochemistry
- field
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
Vynález sa týká oboru bioohémie, ehémie sacharidov, ako aj lekárskej a potravinářskoj ehémie. Vynález rieši přípravu /U-^C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivitě, pre štúdium metabolizmu sacharidov, ako aj pre teoretické štúdiá v oblasti ehémie a bioohémie sacharidov. Uvedeného účelu sa dosiahne tým, že /U-14C/ D-glukóza sa transformuje posobenim enzýmu xylóza izomerázy v rozpustnom alebo imobilizovanom stave alebo ako súčasti imobilizovaných buniek a reakčná zmes sa chromatograficky rozdělí. Vynález má použitie predovšetkým pri priprave /U- C/ fruktozy ako čistej chemikálie, vhodnej pre štúdia metabolizmu sacharidov, ako aj pre teoretické štúdium v oblasti ehémie a bioohémie sacharidov a tiež v lekarskom výskume a farmaceutickom priemysle.
Description
- 1 - 233 134 ' Vynalez sa týká spdsobu přípravy /U-1^/ D-fruktózy o vyso- ké j mólovej aktivitě.
Obvyklou metodou přípravy AJ-^^C/ D-fruktózy je inverzia rá-dioaktívnej sacharózy v slabo kyslom prostředí (Čs. patent 121 808)připadne transformácia /U-^^C/ D-glukózy s nasýteným roztokomhydroxidu vápenatého (Čs. AO 181 475) alebo transformácia /U-^^C/D-glukózy pdsobením roztoku hlinitanu sodného (Čs. AO 187 109).Příprava /U-^^C/ D-fruktózy z /U-^C/ sacharózy je neekonomicképre nízký obsah sacharózy v riasach, ako východzom biologickom ma-teriáli pre přípravu značených sachariďov. Při chemických transfor-máciách aldóz a ketóz je poměrně značný záchyt značených sacharidovrádionukliďom v precipitátoch, čím sa znižuje výtažok AJ-^C/D-fruktózy. Technicky obtažným stupňom je áalej aj vymývanie vznik-nutých zrazenín vodou dovtedy, dokial’ do filtrátu prechádza rádio-aktivita. Z hTadiska výtažku, ňalšie straty sacharidov značenýchrádionuklidom vznikajú pri odsolovaní reakčnej zmesi na ionto-meničoch.
Uvedené nevýhody v podstatnej miere odstraňuje spdsob přípra-vy AJ-^C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivitě podTa vynálezu,ktorého podstata spočívá v tom, že /U-^^C/ D-glukóza sa transformu-je pdsobením xylóza izomerázy v rozpustnom alebo imobilizovanomstave, alebo vo formě súčasti imobilizovaných buniek a reakčná zmessa chromatograficky rozdělí.
Po ukončení reakcie katalýzovanej xylóza izomerázou (EC5.3.1.5) reakčná zmes obsahuje AJ-^c/ D-glukózu a /U-^^C/ D-fruk-tózu v molárnom pomere cca 1:1. Výhodou navrhovaného postupu jejeho jednoduchost, možnost přípravy rádioaktívneho preparátu o vysokej špecifickej aktivitě a možnost spátnej kvantitatívnej izolácienezreagovanej AJ-^C/ D-glukózy. - 2 - Příklad 1 233 134 10 mg /U-^c/ D-glukózy o aktivitě 248 MBq (6,7 mCi), mólováaktivita 4440 MBq (120 mCi)nmól sa rozpustí v 0,2 ml tlmivého roztoku Tris-(hydroxymetyl)-aminometan-hydrochlorid 20 mmol/1 o pH8,0, obsahujúcom 0,1 mol heptahydrát síranu horečnatého a 1 mmolhexahydrát chloridu kobaltnatého a enzým xylóza izomerázu (exWingea robertsii) 60 nkat. Inkubácia prebiehala po dobu 12 h priteplote 70°G. Reakčná zmes sa potom naniesla na chromatografickýpapier (Whatman 3MM) a eluovala sa v zostupnom usporiadaní v sys-téme 2-butanon nasýtený vodou, resp. octan etylnatý-2-propanol--voda (6 : 2 : 1). Po rozdělení reakčnej zmesi sa jednotlivé zó-ny prislúchajúce čistej /U-^^C/ D-glukóze a /U-^^C/ D-fruktózeeluovali destilovanou vodou. Získalo sa 4,8 mg D-fruktozy o cel-kové j aktivitě 120 MBq a 5,2 mg /U-14C/ D-fruktózy o celkovejaktivitě 128 MBq. Rádiochemická čistota preparátov bola vyššiaako 98 %, kontrolované pomocou papierovej chromatografie v sys-témoch 1-butanol - kyselina octová - voda (4 : 1 : 5) a 1-buta-nol - 1-propanol - amoniak - voda (7 : 5 : 7 : 2). Příklad 2
Postupuje sa ako v příklade 1 s tým rozdielom, že namiestovodorozpustného enzýmu (ex Wingea robertsii) sa použije imobili-zovaná xylóza izomeráza (ex Streptomyces violaceus), imobilizo-vané v sieťovanom polyetylénimíne o celkovej aktivitě 63 nkal(per 85 mg). Výťažok /U-1^/ D-fruktózy bol 50 % pri reakčnej do-bě 6 hodin. Příklad 3
Postupuje ea ako v příklade 1 s tým rozdielom, že k trans-formácii sa použijú celé buňky Wingea robertsii, perme- abilizované po dobu 5 min tóluenom pri teplote 70 °C. Xylózaizomerázová aktivita buniek imobilizováných v sieťovanej celuló-ze a impregnovanéj sieťovaným pólyetylénimínom bola 0,71 nkat/mg.Celkový objem reakčnej zmesi bol 0,7 ml, pričom imobilizovanýchbuniek Wingea robertsii sa použilo 100 mg. Reakčná zmes obsahova-la 46 % /U-1^/ D-fruktózy a 54 % /U-^^C/ D-glukózy a zmobilizo-vané buňky Wingea robertsii boli použitelné ku katalýze izomerá-zovej reakcie 45 násobné. 233 134
Vynález mdže nájsť široké uplatnenie pri výrobě /U-^^C/D-fruktózy a pri Stúdiu metabolizmu sacharidov, ako aj pre teoretické Stúdie chémie a biochémie sacharidov a tiež v lekárskom výskume a farmaceutickom priemysle. 4
Claims (1)
- _ 4 - 233 134 PREDMET VYNÁLEZU Spósob přípravy /U-1^/ D-fruktózy o vysokej mólovej akti-vitě vyznačujúci sa tým, že /U-^c/ D-glukóza sa transformujepdsóbením enzýmu xylózo izamerázy v rozpustnom alebo imobilizova-nom stave alebo ako súčasti imobilizováných buniek a reakčnázmes sa chromatograficky rozdělí. 7
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS525483A CS233134B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS525483A CS233134B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS233134B1 true CS233134B1 (cs) | 1985-02-14 |
Family
ID=5397085
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS525483A CS233134B1 (cs) | 1983-07-11 | 1983-07-11 | Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS233134B1 (cs) |
-
1983
- 1983-07-11 CS CS525483A patent/CS233134B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5876980A (en) | Enzymatic synthesis of oligosaccharides | |
| Lohrmann et al. | Prebiotic activation processes | |
| Sols | The hexokinase activity of the intestinal mucosa | |
| Villafranca et al. | Heptulose synthesis from nonphosphorylated aldoses and ketoses by spinach transketolase | |
| Kay et al. | Preparation and use of porous sheets with enzyme action | |
| Wilchek et al. | Conversion of protein kinase to a cyclic AMP independent form by affinity chromatography on N6-caproyl 3′, 5′-cyclic adenosine monophosphate-sepharose | |
| Anet | Chemistry of non-enzymic browning. II. Some crystalline amino acid-deoxy-sugars | |
| US4069104A (en) | Conversion of aldose to ketose in the presence of oxyanions or mixed oxyanions of tin or germanium | |
| Kowal et al. | Affinity chromatography of thymidine kinase from a rat colon adenocarcinoma | |
| CS233134B1 (cs) | Sposob přípravy /U-14C/ D-fruktózy o vysokej mólovej aktivito | |
| FI57974C (fi) | Kontinuerligt foerfarande foer enzymatisk isomerisering av glukos till fruktos | |
| Eckstein et al. | Stereochemistry of the transesterification step of pancreatic ribonuclease | |
| Sinhababu et al. | Mechanism of action of S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase. Measurement of kinetic isotope effects using adenosine-3'-d and S-adenosyl-L-homocysteine-3'-d as substrates | |
| Chen et al. | Transaminations involving keto-and amino-inositols and glutamine in actinomycetes which produce gentamicin and neomycin | |
| US4151347A (en) | Separation of coformycin and its related nucleosides | |
| Myllylä | Studies on the mechanism of collagen glucosyltransferase reaction | |
| US3126324A (en) | Catalase compositions | |
| JPS5538324A (en) | 3'-pyrophosphoric acid-type nucleotides | |
| ARORA et al. | Rapid methods for the high yield synthesis of carbon-13 enriched intermediates of the pentose-phosphate pathway | |
| TACHIKI et al. | Glutamine production in high concentrations with energy transfer employing glutamine synthetase from Micrococcus glutamicus | |
| Kunita et al. | Crystallization and a 5 Å X-ray diffraction study of Aphanothece sacrum ferredoxin | |
| Helfferich | Ion Exchange: past, present, and future | |
| Keenan et al. | A rapid and simple procedure for preparation of γ-32P-labeled nucleoside triphosphates | |
| Tibbs et al. | An enzymically catalysed reaction between D-glucose and the protein cyst coat of the ciliate Colpoda steinii | |
| US3138539A (en) | Preparation of 5'-polyphosphate nucleotides |