CS217574B1 - Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. - Google Patents
Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. Download PDFInfo
- Publication number
- CS217574B1 CS217574B1 CS36581A CS36581A CS217574B1 CS 217574 B1 CS217574 B1 CS 217574B1 CS 36581 A CS36581 A CS 36581A CS 36581 A CS36581 A CS 36581A CS 217574 B1 CS217574 B1 CS 217574B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- metabolite
- agrocybe aegerita
- fungus
- agate
- staphylococcus
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
Vynález se týká nového metabolitu, který byl izolován z kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita, kmen Ag ae I., který je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů CCM v Brně. Uvedená látka je chemické individuum molekulární váhy 496 sumárního vzorce C30H40O6. Metabolit se izoluje z kultivační tekutiny této houby adsorpční chromatografií na silikagelu (Silpearl) soustavou octan ethylnatý — n-hexan v poměru 7: 3 jako majoritní komponenta s RF = 0,05. Získaný metabolit vykazuje antibakteriální a antifugální aktivituThe invention relates to a new metabolite that was isolated from the cap-shaped stem-spore fungus Agrocybe aegerita, strain Ag ae I., which is stored in the collection of basidiomycetes cultures CCM in Brno. The substance is a chemical individual with a molecular weight of 496 and a total formula of C30H40O6. The metabolite is isolated from the culture fluid of this fungus by adsorption chromatography on silica gel (Silpearl) using the ethyl acetate - n-hexane system in the ratio 7: 3 as the major component with RF = 0.05. The obtained metabolite exhibits antibacterial and antifungal activity
Description
Vynález se týká metabolitu, který byl získán z kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita, kmen Ag ae I., který je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů CCM v Brně pod uvedeným číslem.The invention relates to a metabolite obtained from the acacia Agrocybe aegerita fungus, strain Ag and e I., which is deposited in the CCM collection of cultures of basidiomycetes in Brno under the mentioned number.
Mezi antibiotiky je dnes známa celá řada látek, které byly izolovány z kloboukatých stopkovýstrusných hub, jako např. pleuromutilin, agrocybin atd. Žádný z těchto metabolitů zatím nedosáhl upotřebení jako léčivo. Pouze mucidin, antifungální antibiotikum, připravené ze submersní kultury houby Oudemansiella mucida (Čs. patent 136 492) našel uplatnění v klinické praxi v CSSR. Jeho komerční produkt (Mucidermin SPOFA) se používá k povrchové aplikaci ve formě spraye.Many antibiotics are now known amongst antibiotics that have been isolated from hats, such as pleuromutilin, agrocybin, etc. None of these metabolites have yet been used as a drug. Only mucidine, an antifungal antibiotic, prepared from a submersible culture of Oudemansiella mucida (U.S. Patent 136,492) has found application in clinical practice in CSSR. Its commercial product (Mucidermin SPOFA) is used for topical spray application.
Z houby Agrocybe aegerita nebyl dosud popsán žádný aktivní metabolit. Kultivační tekutina této houby, připravená hloubkovou kultivací (autorské osvědčení 212 526), však obsahuje na základě analytického rozboru, provedeného metodou chromatografie na tenké vrstvě, několik 'metabolitu neznámé struktury. Některé, včetně majoritní komponenty, vykazují antibakteriální a antifuigální účinnost, zatímco kvantitativně nevýrazné složky komplexu jsou neúčinné.No active metabolite has been reported from Agrocybe aegerita. However, the culture medium of this fungus, prepared by deep cultivation (author's certificate 212 526), contains several metabolites of unknown structure on the basis of analytical analysis carried out by thin-layer chromatography. Some, including the major component, exhibit antibacterial and antifungal activity, while quantitatively insignificant components of the complex are ineffective.
Podstata vynálezu je nový metabolit z kloboukaté stopkovýtrusné houby Agrocybe aegerita, kmen Ag ae I,, který je uložen ve sbírce kultur basidiomycetů CCM v Brně pod uvedeným číslem, sumárního vzorce C30H40O6, molekulární váhy 496, získaný z kultivační tekutiny této houby adsorpční chromatografií na silikagelu (Silpearl) soustavou octan ethylnatý — n-hexan v poměru 7 : 3 jako majoritní komponenta s Rf = 0,05.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention is a new metabolite from the acacia Agrocybe aegerita, Ag ae I strain, which is deposited in the CCM collection of basidiomycetes in Brno under the above-mentioned number, C30H40O6, molecular weight 496. (Silpearl) system ethyl acetate - n-hexane 7: 3 as the major component with an R f = 0.05.
Uvedená látka je chemické individuum, které vykazuje antibakteriální a antifugální úěinky s fyzikálně-chemickými parametry, které jsou určujícím faktorem pro stanovení jeho struktury.Said substance is a chemical individual which exhibits antibacterial and antifungal effects with physicochemical parameters which are a determining factor in determining its structure.
Dále jsou uvedeny příklady izolace a identifikace metabolitu podle vynálezu.The following are examples of isolation and identification of the metabolite of the invention.
PříkladExample
Hloubková kultivace podle čs. autorského osvědčení ě. 212 526) byla provedena za použití houby Agrocybe aegerita, kmen Ag ae I, při teplotě 24 °C (+ 4°) na sladinkové půdě 8°Ball. (pH 5,5-7,0) po dobu 14 až 24 dnů, načež kultivační tekutina, která obsahuje antibiotikum, byla odfiltrována přes plachetku. Poté v dělicí nálevce byla tekutina extrahována třikrát po sobě 700 ml chloroformu. Spojené chloroformové extrakty (2000 ml) byly vysušeny síranem sodným a zahuštěny ve vakuu při teplotě 40 °C. Viskózní odparek po ochlazení ztuhl ve světle oranžově-hnědě zbarvenou sklovitou masu.Deep cultivation according to MS. author's certificate. 212 526) was carried out using Agrocybe aegerita, Ag ae I strain, at 24 ° C (+ 4 °) on 8 ° Ball sweetener broth. (pH 5.5-7.0) for 14 to 24 days, after which the culture fluid containing the antibiotic was filtered through a cloth. Then, in a separatory funnel, the liquid was extracted three times in succession with 700 ml of chloroform. The combined chloroform extracts (2000 mL) were dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo at 40 ° C. After cooling, the viscous residue solidified in a light orange-brown glassy mass.
Zahuštěný chloroformový extrakt supernatantu (0,6 g) byl naadsorbován na přibližně pětinásobné množství aktivního silikagelu (Silpearl). Chloroform byl ze vzorku odstraněn destilací ve vakuu, až silikagel dosáhl opět sypké konzistence bez hrudek. Silikagel s naadsorbovanou směsí metabolitů byl vnesen nad předem připravený sloupec stonásobného množství téhož adsorbentu v chromatografické koloně, do níž byl vlit v suspenzi s n-hexanem. Sloupec byl postupně eluován směsí n-hexanu s přibývajícím množstvím ethylacetátu.The concentrated chloroform extract of the supernatant (0.6 g) was adsorbed to approximately five times the amount of active silica gel (Silpearl). The chloroform was removed from the sample by distillation under vacuum until the silica gel again reached a free-flowing consistency without lumps. The silica gel with the adsorbed mixture of metabolites was loaded over a pre-prepared column of 100 times the same adsorbent in a chromatography column into which it was poured in suspension with n-hexane. The column was eluted sequentially with a mixture of n-hexane with increasing amounts of ethyl acetate.
Chromatografické dělení na sloupci bylo průběžně sledováno chromatografií 11a tenké vrstvě na silufolových deskách. Jako standard byl použit roztok výchozího chloroformového extraktu supernatantu. Po ukončení chromatografie byly spojeny frakce,· obsahující oddělené komponenty, jejich antibiotická aktivita byla kontrolována mikrobiologickou titrací.Chromatographic separation on the column was continuously monitored by 11a thin layer chromatography on silufol plates. A solution of the starting chloroform extract of the supernatant was used as a standard. Upon completion of the chromatography, fractions containing separate components were pooled and their antibiotic activity was controlled by microbiological titration.
V uvedeném příkladu byla z chromatografických frakcí, eluovaných z kolony směsí ethylacetát — n-hexan (7:3), izolována látka hydrofilní povahy, která se projevuje na silufolové desce po postřiku směsí koncentrované kyseliny sírové, a 1% vanilinu charakteristickým sytě’ žlutým zbarvením a jejíž Rf je 0,05. Po odpaření rozpouštědla bezbarvý sklovitý odparek (0,150 g, tj. 25% výtěžek z výchozího extraktu) representuje metabolit dle vynálezu, který· má následující fyzikálně-chemické parametry:In this example, a hydrophilic substance, which is reflected on the silufol plate after spraying with a mixture of concentrated sulfuric acid and 1% vanillin, is characterized by a rich yellow coloration from the chromatographic fractions eluted from the column with ethyl acetate-n-hexane (7: 3). and wherein R f is 0.05. After evaporation of the solvent, a colorless glassy residue (0.150 g, ie 25% yield from the starting extract) represents a metabolite of the invention having the following physicochemical parameters:
V infračerveném spektru (měřeno v KBr) se vyznačuje pásem při 1727 cm-1, odpovídajícím karbony lové skupině a velice intensivním pásem při 341Ú cm'1, k němuž se řadí i pás při 1038 cm-1, které oba svědčí o přítomnosti jedné nebo i více hydroxylových skupin v molekule látky. V hmotovém spektru M+ 496 (high resoluition) odpovídá molekulárnímu složení- C30H40O6. Ze spektra možno soudit, že jde o nesymetrickou molekulu, jejíž části jsou charakterizovány fragmenty: m/e 247, který odpovídá složení C15H19O3 a m/e 231, který odpovídá složení C15H19O2. V souhlase s údaji infračerveného a hmotového spektra je i interpretace *Η— —NMR a 13C-NMíR spekter. 1H—NMR (200 MHz, CDCI3, 25°, ŤMS): 0,51 mt (1H); 0,74 mt (1HJ; 0,91 mt (1H); 1,170 s (3H); 1,198 s (3HJ; 2,09 s (3H); 2,40 s (2H); 3,17 s (2H); 3,45 s (2H); 3,165 T (J=7 Hz, 2H); 4,21 br s (1H, exchangeablej. 13C—NMR (15,036 mHz, CDCI3, 25°, TMS): 7,4 t, 8,3 t, 14,8 q, 15,5 q,In the infrared spectrum (measured in KBr), it is characterized by a band at 1727 cm -1 corresponding to a carbonyl group and a very intense band at 341 cm -1 , which includes a band at 1038 cm -1 , both indicative of the presence of one or even more hydroxyl groups in the substance molecule. In the mass spectrum M + 496 (high resoluition) corresponds to the molecular composition - C 30 H 40 O 6. From the spectrum it can be assumed that it is an asymmetric molecule whose parts are characterized by fragments: m / e 247, which corresponds to the composition of C15H19O3 and m / e 231, which corresponds to the composition of C15H19O2. Interpretation of * Η— —NMR and 13 C-NMiR spectra is also consistent with infrared and mass spectrum data. @ 1 H-NMR (200 MHz, CDCl3, 25 DEG, JMS): 0.51 mt (1H); 0.74 mt (1H); 0.91 mt (1H); 1.170 s (3H); 1.198 s (3HJ; 2.09 s (3H); 2.40 s (2H); 3.17 s (2H); 3.45 s (2H); 3.165 T (J = 7 Hz, 2H); 4.21 br s (1H, exchangeable. 13 C-NMR (15.036 mHz, CDCl 3, 25 °, TMS): 7.4 t, 8.3 t, 14.8 q, 15.5 q,
21,3 t, 25,1 d, 26,4 q, 28,2 t, 32,0 t, 32,6 s,21.3 t, 25.1 d, 26.4 q, 28.2 t, 32.0 t, 32.6 s,
38,9 t, 39,4 t, 41,1 s, 42,9 t, 43,8 s, 44,6 t,38.9 t, 39.4 t, 41.1 s, 42.9 t, 43.8 s, 44.6 t,
61,7 t, 71,1 t, 71,6 t, 80,8 t, 81,1 s, 118,6 s,61.7 t, 71.1 t, 71.6 t, 80.8 t, 81.1 s, 118.6 s,
124,4 s, 127,2 s, 130,6 s, 132,9 s, 135,3 s, 141,5 s, 148,7 s, 207,7 s.124.4 s, 127.2 s, 130.6 s, 132.9 s, 135.3 s, 141.5 s, 148.7 s, 207.7 s.
Z těchto spekter možno dedukovat, že molekula obsahuje tři terciární methylskupiny, z nichž jedna přísluší uhlíku, nesoucímu dvojnou) vazbu, dále je součástí molekuly cyklopropanový kruh, čtyři — OCH2— skupiny a alifatická keto skupina.From these spectra it can be deduced that the molecule contains three tertiary methyl groups, one of which belongs to the carbon bearing the double bond, the cyclopropane ring is part of the molecule, the four - OCH 2 - groups and the aliphatic keto group.
V molekule jsou čtyři tetrasubstituované dvojné vazby (osm sp2-hybridizovatelných uhlíků).There are four tetrasubstituted double bonds (eight sp 2 -hybridizable carbons) in the molecule.
V tabulce je dále uveden počet komponent, obsažených v chloroformovém extraktu supernatantu za současného sledování biologické aktivity rnetabolitů, zkoncentro váných chromatografickým dělením v oddě lených zónách.The table below shows the number of components contained in the chloroform extract of the supernatant while monitoring the biological activity of the metabolites, concentrated by chromatographic separation in separate zones.
Výsledek chromatografie odparku chloroformového extraktu z kultivačního filtrátu Agrocybe aegerita zóna zbarvení po přibližné výtěžek antibiotická aktivitaResult of chromatography of the residue of chloroform extract from Agrocybe aegerita culture filtrate color zone to approximate yield antibiotic activity
č. detekci RF v % Bac. subtilis Escher. coli Cand. pseudotropNo R F detection in% Bac. subtilis Escher. coli Cand. pseudotrop
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS36581A CS217574B1 (en) | 1981-01-19 | 1981-01-19 | Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS36581A CS217574B1 (en) | 1981-01-19 | 1981-01-19 | Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS217574B1 true CS217574B1 (en) | 1983-01-28 |
Family
ID=5335596
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS36581A CS217574B1 (en) | 1981-01-19 | 1981-01-19 | Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS217574B1 (en) |
-
1981
- 1981-01-19 CS CS36581A patent/CS217574B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mueller et al. | Signaling in the elicitation process is mediated through the octadecanoid pathway leading to jasmonic acid. | |
| Stritzke et al. | Novel caprolactones from a marine streptomycete | |
| Akita et al. | A convenient synthesis of (+)-albicanol based on enzymatic function: total syntheses of (+)-albicanyl acetate,(−)-albicanyl 3, 4-dihydroxycinnamate,(−)-drimenol,(−)-drimenin and (−)-ambrox | |
| Thuring et al. | Asymmetric synthesis of all stereoisomers of the strigol analogue GR24. Dependence of absolute configuration on stimulatory activity of Striga hermonthica and Orobanche crenata seed germination | |
| Eisenberg Jr et al. | Biosynthesis of inositol in rat testis homogenate | |
| Kisugi et al. | Strigone, isolation and identification as a natural strigolactone from Houttuynia cordata | |
| Loukaci et al. | Coscinosulfate, a CDC25 phosphatase inhibitor from the sponge Coscinoderma mathewsi | |
| Gigante et al. | Structural effects on the bioactivity of dehydroabietic acid derivatives | |
| EP0306282A2 (en) | Antiviral compositions derived from marine sponge epipolasis reiswigi and their methods of use | |
| Garson et al. | New polyketide metabolites from Aspergillus melleus: structural and stereochemical studies | |
| US9751826B2 (en) | 4-vinyl-2-cyclopenten-1-one derivatives, the production thereof, and the use of same as an antibiotic agent | |
| Kawaguchi et al. | Antimicrobial activity of stereoisomers of butane-type lignans | |
| JP6975487B2 (en) | Crotyl alcohol casic acid ester with antibacterial activity and its preparation method | |
| Ueno et al. | Structural requirements of strigolactones for germination induction of Striga gesnerioides seeds | |
| Nicolaou et al. | Identification of a novel 7-cis-11-trans-lipoxin A4 generated by human neutrophils: total synthesis, spasmogenic activities and comparison with other geometric isomers of lipoxins A4 and B4 | |
| Bardón et al. | Sesquiterpenoids, hopanoids and bis (bibenzyls) from the Argentine liverwort Plagiochasma rupestre | |
| CN108299330A (en) | Dehydrogenation Cong Suan oxazolidinone derivatives and its preparation method and application | |
| US5616607A (en) | Hepoxilin analogs | |
| Schneider et al. | Separation and determination of antimycins | |
| CS217574B1 (en) | Agrocybe aegerita Staphylococcus Metabolite Ag Agate and e I. | |
| Epstein et al. | Irregular monoterpene constituents of Artemisia tridentata cana. The isolation, characterization, and synthesis of two new chrysanthemyl derivatives | |
| Miyakado et al. | Podoblastin A, B and C. New antifungal 3-acyl-4-hydroxy-5, 6-dihydro-2-pyrones obtained from Podophyllum peltatum L | |
| Boratyński et al. | Microbial alcohol dehydrogenase screening for enantiopure lactone synthesis: Down-stream process from microtiter plate to bench bioreactor | |
| Sengupta et al. | Highly stereoselective synthesis of mupirocin H | |
| Kato et al. | Isolation of a new phytoalexin-like compound, ipomeamaronol, from black-rot fungus infected sweet potato root tissue, and its structural elucidation |