CS217163B1

CS217163B1 - Process for producing rennet enzymes from animal sources

Info

Publication number: CS217163B1
Application number: CS485480A
Authority: CS
Inventors: Vladimir Husek; Miroslav Dedek; Vladimir Cerny; Ludmila Mikova; Jan Havelka
Original assignee: Vladimir Husek; Miroslav Dedek; Vladimir Cerny; Ludmila Mikova; Jan Havelka
Priority date: 1980-07-08
Filing date: 1980-07-08
Publication date: 1982-12-31

Abstract

Způsob výroby syřidlových enzymů z živočišných zdrojů. Vynález se týká výroby syřidlových enzymů v rámci mlékárenského oboru. Způsob podle vynálezu řeší technický problém zvýšeni výtěžnosti výroby proteolytickýoh enzymů s využitím jako syřidla. Podstata vynálezu spočívá ve výrobě syřidlových enzymů autolýzou se stoupajícím gradientem koncentrace minerální nebo organické kyseliny tak, až se dosáhne stabilní hodnoty pH v rozmezí pH 1,3-3,9. Autolýza vepřových žaludků anebo sliznic, dále žaludků a nebo sliznic přežvýkavců a předžaludků drůbeže se může provádět v přítomnosti potravinářských konzervačních prostředků. Vynález má využití v enzymovém průmyslu, který se zabývá výrobou syřidel pro mlékařství.Method for producing rennet enzymes from animal sources. The invention relates to the production of rennet enzymes in the dairy industry. The method according to the invention solves the technical problem of increasing the yield of production of proteolytic enzymes with use as rennet. The essence of the invention lies in the production of rennet enzymes by autolysis with an increasing gradient of mineral or organic acid concentration until a stable pH value in the range of pH 1.3-3.9 is reached. Autolysis of pig stomachs and/or mucous membranes, as well as stomachs and/or mucous membranes of ruminants and forestomachs of poultry can be carried out in the presence of food preservatives. The invention has application in the enzyme industry, which is engaged in the production of rennets for dairy farming.

Description

Vynález řeší způsob výroby syřldlových enzymů z živočišných zdrojů tak, že se syřidlové enzymy vyrábějí z žaludků nebo sliznic přežvýkavců, z vepřových žaludků nebo sliznic, dále z předžaludků drůbeže pomocí autolýzy, s postupným zvýěením koncentrace minerálních kyselin, přednostně HC1 a organických kyselin, přednostně kyseliny octové a citrónové v rozmezí pH 1,3 až 3,9, s výhodou pH 1,8 až 2,5, při '♦•plotě 35 až 50 °C, přednostně 38 až 45 °C, vzestupná koncentrace minerálních nebo organických kyselin je zajišťována bu3 stupňovitě, nebo kontinuálně, autolýza může být prováděna v přítomnosti konzervačních látek, jako je kyselina benzoová, její soli a estery, propylenglykol, kyselina sorbové a její soli, kyselina boritá, eugenol a thymol.The invention solves a method for producing rennet enzymes from animal sources by producing rennet enzymes from ruminant stomachs or mucous membranes, from pig stomachs or mucous membranes, from poultry pre-stomachs by autolysis, with a gradual increase in the concentration of mineral acids, preferably HCl and organic acids, preferably acid. acetic and lemon in the range of pH 1.3 to 3.9, preferably pH 1.8 to 2.5, at a temperature of 35 to 50 ° C, preferably 38 to 45 ° C, the increasing concentration of mineral or organic acids is provided either stepwise or continuously, the autolysis may be carried out in the presence of preservatives such as benzoic acid, its salts and esters, propylene glycol, sorbic acid and its salts, boric acid, eugenol and thymol.

Výroba syřidel z živočišných zdrojů se zakládá na extrakci vodnými roztoky solí, nejběžněji NaCl, nebo na autolýze, při které se reakční směs okyselí k pH 1,5 až 3,0 většinou přídavkem 12 až 35 % HC1, Koncentrace HC1 v reakční směsi dosahuje od počátku 0,2 až 0,3 molů HC1 v 1 litru směsi. Autolýza se běžně provádí při 42 až 50 °C po dobu 15 až 20 hodin. .The production of rennet from animal sources is based on extraction with aqueous salt solutions, most commonly NaCl, or autolysis, in which the reaction mixture is acidified to a pH of 1.5 to 3.0 mostly by the addition of 12 to 35% HCl. 0.2-0.3 moles of HCl per liter of mixture. Autolysis is conveniently performed at 42 to 50 ° C for 15 to 20 hours. .

Tento výrobní způsob nezaručuje podle našich zjištění plná využití suroviny.This production method does not, according to our findings, guarantee full utilization of the raw material.

Tyto nedostatky odstraňuje způsob výroby syřldlových enzymů z živočišných zdrojů podle vynálezu tak, že se syřidlové enzymy vyrábějí z žaludků nebo sliznic přežvýkavců, z vepřových žaludků nebo sliznic, dále z předžaludků drůbeže pomocí autolýzy s postupným zvýšením koncentrace minerálních kyselin, přednostně HC1, organických kyselin, přednostně kyseliny octové a citrónové v rozmezí pH 1,3 až 3,9, s výhodou pH 1,8 až 2,5 při teplotě 35 až 50 °C, přednostně 38 až 45 °C, vzestupná koncentrace minerálních nebo organických kyselin je zajišťována bu3 stupňovitě, nebo kontinuálně, autolýza může být prováděna v přítomnosti konzervačních látek, jako je kyselina benzoová, její soli a estery, propylenglykol, kyselina sorbová a její soli, eugenol a thymol.These drawbacks are overcome by the method of producing rennet enzymes from animal sources according to the invention by producing rennet enzymes from the stomachs or mucous membranes of ruminants, from pig stomachs or mucous membranes, from poultry pre-stomachs by autolysis with a gradual increase in mineral acids, preferably HCl, organic acids, preferably acetic acid and citric acid in the range of pH 1.3 to 3.9, preferably pH 1.8 to 2.5 at a temperature of 35 to 50 ° C, preferably 38 to 45 ° C, the increasing concentration of mineral or organic acids is provided either stepwise or continuously, autolysis can be performed in the presence of preservatives such as benzoic acid, its salts and esters, propylene glycol, sorbic acid and its salts, eugenol and thymol.

Způsobem výroby syřldlových enzymů z živočišných zdrojů podle vynálezu se výtěžnost autolýzy podle našich dosavadních výsledků zvýší o 20 až 40 % proti běžnému způsobu výroby autolýzou při počáteční koncentraci 0,2 až 0,3 mol HC1 v 1 litru reakční směsi.The method of producing rennet enzymes from animal sources according to the present invention increases the autolysis yield according to our results by 20 to 40% over the conventional autolysis process at an initial concentration of 0.2 to 0.3 mol HCl in 1 liter of reaction mixture.

Příklad 1Example 1

Vepřové sliznice se po umletí naplní do duplikátorové nádoby, kde se smísí s roztokem HC1 o koncentraci 0,025 molů HC1 v 1 litru v poměru 1 díl sliznic a 2 díly roztoku HC1, hmotnostně naebjem, reakční směs se vytemperuje na 40 °C a při této teplotě se míchá 3 až 4 hodiny, potom je ponechána v klidu. Po 30 minutách autolýzy se pH reakční směsi upraví 3M HC1 na pH 1,9 až 2,1, další úprava pH následuje vždy po 1 hodině 6M roztokem HG1. Autolýza je ukončena za 15 hodin.After milling, the pigs are filled into a duplicator vessel where they are mixed with a 0.025 mol HCl solution in 1 liter of 1 part mucosa and 2 parts HCl solution by weight, the reaction mixture is allowed to warm to 40 ° C at this temperature. is stirred for 3-4 hours, then allowed to stand. After 30 minutes of autolysis, the pH of the reaction mixture is adjusted to pH 1.9 to 2.1 with 3M HCl, followed by a further pH adjustment every 1 hour with 6M HG1 solution. Autolysis is complete in 15 hours.

Příklad 2Example 2

Na rozdíl od příkladu 1 obsahuje reakční směs 1 % kyseliny benzoové nebo benzoanu sodného.In contrast to Example 1, the reaction mixture contains 1% benzoic acid or sodium benzoate.

Příklad 3Example 3

V reakční směsi jsou obsažena 2 % kyseliny sorbové nebo sorbanu draselného.The reaction mixture contains 2% sorbic acid or potassium sorbate.

Příklad 4Example 4

V reakční směsi je obsaženo 0,05 % kyseliny benzoové nebo benzoanu sodného společně s 0,5 % sorbové kyseliny nebo sorbanu draselného.The reaction mixture contains 0.05% benzoic acid or sodium benzoate together with 0.5% sorbic acid or potassium sorbate.

Příklad 5Example 5

V reakční směsi je obsaženo 0,2 % propylenglykolu, 1 % kyseliny benzoové nebo benzoanu sodného a 0,2 % kyseliny sorbové.The reaction mixture contained 0.2% propylene glycol, 1% benzoic acid or sodium benzoate and 0.2% sorbic acid.

Přiklad 6Example 6

Hovězí slezy zbavené tuku se po umletí suspendují v 0,05 M roztoku HCl v poměru 1 hmot nostní díl slezů na 1 objemový díl roztoku HCl. Směs se vytemperuje na 40 °C. Po 30 minutách se upraví 3 N HCl na hodnotu 2,0 až 2,5, dále se upravuje po 1 hodině 6 N HCl. Míchání je ukončeno za 3 hodiny. Autolýza je ukončena za 12 až 18 hodin.After grinding, the fat-free bovine spleens are suspended in 0.05 M HCl solution in a ratio of 1 part by weight of spleens to 1 part by volume of HCl solution. The mixture was allowed to warm to 40 ° C. After 30 minutes, adjust 3 N HCl to 2.0 to 2.5, then adjust after 1 hour 6 N HCl. Stirring is complete in 3 hours. Autolysis is complete in 12 to 18 hours.

Příklad 7Example 7

V reakční směsi je obsaženo 0,5 % kyseliny benzoové, 0,5 % kyseliny sorbové a 0,5 % propylenglykolu.The reaction mixture contained 0.5% benzoic acid, 0.5% sorbic acid and 0.5% propylene glycol.

Příklad8Example8

Drůbeží předžaludky se suspendují v 0,05 M roztoku HCl, který obsahuje 0,1 1 12,5 % alkoholického roztoku eugenolu a thymolu na 100 1 reakční směsi a 0,5 % kyseliny benzoové. Na 1 hmotnostní díl předžaludků připadají 2 díly roztoku HCl, směs se vytemperuje na 39 až 42 °C, 4 hodiny se níchá, pH se upravuje 6 N HCl po 30 minutách a potom v 1 hodinových intervalech v rozmezí pH 1,8 až 2,5 Autolýza je ukončena za 7 až 8 hodin.The poultry stomachs are suspended in a 0.05 M HCl solution containing 0.1 L of a 12.5% alcoholic solution of eugenol and thymol per 100 L of reaction mixture and 0.5% benzoic acid. For 1 part by weight of the stomach there are 2 parts of HCl solution, the mixture is allowed to warm to 39 to 42 ° C, stirred for 4 hours, the pH is adjusted with 6 N HCl after 30 minutes and then at 1 hour intervals in the pH range of 1.8 to 2. Autolysis is complete in 7 to 8 hours.

Příklad 9Example 9

V reak.ční směsi je obsaženo 0,1 až 0,5 % propylenglykolu a 0,05 % benzoanu sodného.The reaction mixture contains 0.1 to 0.5% propylene glycol and 0.05% sodium benzoate.

Příklad 10Example 10

Reakční směs je konzervována 0,05 % propyl nebo etylesteru kyseliny benzoové nebo jejich směsi.The reaction mixture is preserved with 0.05% propyl or ethyl benzoate or mixtures thereof.

PřikladliThey did

Drůbeží předžaludky (1 hmotnostní díl) se suspenduji v 10 % kyselině octové, reakční směs, která obsahuje 0,05 % kyseliny benzoové a 0,0001 % eugenolu a thymolu, se vytemperuje na 40 °C. Po 20 minutách se pH upravuje koncentrovanou 96 % kyselinou octovou na pH 2,5 a dále se upravuje každou hodinu na pH v rozmezí 1,8 až 2,0. Autolýza je ukončena za 8 hodin.The poultry stomach (1 part by weight) was suspended in 10% acetic acid, the reaction mixture containing 0.05% benzoic acid and 0.0001% eugenol and thymol was allowed to warm to 40 ° C. After 20 minutes, the pH is adjusted to pH 2.5 with concentrated 96% acetic acid and further adjusted to a pH in the range of 1.8 to 2.0 every hour. Autolysis is complete in 8 hours.

Příklad 12Example 12

Rozemleté vepřové sliznice jsou po rozemletí suspendovány v 10 % roztoku kyseliny citrónové v poměru 1 hmotnostní díl roztoku kyseliny citrónové, který obsahuje 0,05 % kyseliny benzoové a 0,2 % propylenglykolu a 0,2 % kyseliny sorbové. pH reakční směsi je upraveno po 15 minutách přídavkem kyseliny citrónové na pH 1,5 až 2,0. V 1 hodinových intervalech je pH upravováno kyselinou citrónovou v krystalickém stavu, po dosažení hodnoty pH 1,8 až 2,0 je pH udržováno na této hodnotě 50 % roztokem kyseliny citrónové.The minced pork mucous membranes are suspended in 1% by weight citric acid solution containing 0.05% benzoic acid and 0.2% propylene glycol and 0.2% sorbic acid in a 10% citric acid solution after grinding. The pH of the reaction mixture is adjusted after 15 minutes by adding citric acid to a pH of 1.5 to 2.0. At 1 hour intervals, the pH is adjusted with citric acid in a crystalline state, after reaching a pH of 1.8 to 2.0, the pH is maintained at this value with a 50% citric acid solution.

Příklad 13Example 13

Ί reakční směsi je dále přítomno 3 % kyseliny boritéΊ 3% boric acid is further present in the reaction mixture

2,7,63 i2,7,63 i

Uvedené příklady ozřejmují způsob výroby živočišných syřidel podle vynálezu, v žádném případě věak předmět vynálezu nevyčerpávají ani nijak neomezují.These examples illustrate the process of making the animal rennet according to the invention, but do not limit the scope of the invention in any way.

Claims

SUBJECT OF THE INVENTION

Process for the manufacture of rennet enzymes from animal sources, in particular from ruminant stomachs or mucous membranes, from pig stomachs or mucous membranes, and from poultry pre-stomach, characterized in that it is carried out by autolysis with gradual increase of mineral acids, preferably HCl and organic acids, preferably acetic and citric acids in the range of pH 1.3 to 3.9, preferably pH 1.8 to 2.5, at a temperature of 35 to 50 ° C, preferably 38 to 45 ° C, the increasing concentration of mineral or organic acids is provided either stepwise or continuously.

2. A method for producing rennet enzymes from animal sources according to claim 1, characterized in that the step-by-step autolysis is carried out in the presence of preservatives such as benzoic acid, its salts and esters, sorbic acid and its salts, propylene glycol, eugenol and thymol, and boric acid.