CS211166B1 - Uzatváracie médium pre cytologickú mikroskopickú techniku - Google Patents

Abstract

Vynález spadá do odboru histologíckej mikroskopickéj techniky. Týká sa uzatváracieho média pre cytologickú mikroskopickú techniku, ktoré umožňuje zjednodušit a najmá urýchlit čas na uzavretie preparátu. Na tento účel sa používajú alkylfenoly s počtom uhlíkových atoaov v alkyle 8 až 12, s výhodou nonylfenol.

Description

Vynález sa týká uzatváracíeho média pre cytologickú mikroskopická techniku, ktorá umož’ňuje zjednodušit a najmá urýchlit čas na uzavretie preparátu·

Doteraz známe média mieŠatelné s vodou, ako sú želatinové médium, laktofenol, Farrantovo médium, Apathyho syrup, Jonesovo, Downosovo alebo Andeého uzatváracie médium a iné sa používajú k príprave preparátov, ktoré je potřebné vyhodnotit za krátku dobu. Sú to zmesi chemických látok s niektorými toxickými zložkami, ako například kysličník arzenitý, kyselina pikrová alebo fenol. Pri ich použití dochádza v priebehu mikroskopovania k ich rýchlemu odparovaniu a tým ku znehodnoteniu kvalitného mikroskopického obrazu už po niekolkých hodinách. Ak sa použijú média nemiešatelné s vodou, ako sú kanadský balzám, damarový lak, eukalyptova silica alebo eyntetické pryskyřice je nevyhnutné uzatváraný objekt do určitého stupňa odvodnit a potom presýtit látkou, ktorá rozpúšta uzatváracie médium. Pre túto operáciu, ktorá predlžuje čas přípravy preparátu sa používajú organické rozpúštadlá ako sú například xylén, benzén, n-butanol, chloroform, tetrachlormetán, ktoré sa rýchlo odparujú a zhoršujú pracovně prostredie.

Vyššie uvedené nedostatky sú odstránené u vynálezu popisujúceho uzatváracie médium pre cytologickú mikroskopická techniku, ktorého podstatou je monoalkylfenol s počtom uhlíkov v alkyle 8 až 12, 8 výhodou nonylfenol.

Uzatváracie médium tohoto typu sa dá použit v mikroskopíckej technike pri príprave trvalých preparátov xýchlou beztlakovou technikou, pričom sa vylúči operácia odvodnenia a použitie zdraviu škodlivých rozpúštadiel· Podstatné sa skrátí čas na uzavretie preparátu, a to z 24 až 30 hodin na niekolko sekúnd. Ďalšou doležitou vlastnostou je to, že po zdokumentovaní preparátu je možné z něho oddělit podložně a krycie sklíčko, bez použitia rozpúštadla ako je například xylén a po umytí ich opát použit. Preparát mdžeme uschovat ako trvalý preparát na dlhú dobu /až 12 mesiacov/, a to bez použitia orámovacej techniky a dalšieho konzervovania. Uzatváracie médium podlá vynálezu sa neodparuje, má žiadaný index lomu, nepdsobí nepriaz nivo na optiku mikroskopu.

Predmet vynálezu je použitý v nasledujúcich príkladoch, bez toho aby sa iba na tieto vztahoval·

Příklad 1

Biologický preparát, ako sú buněčné kultúry alebo buňky in vivo sa fixoval, maceroval a roztlak sa uskutočnil běžným spdsobom. Farbenie sa uskutočnilo tkz. rýchlou metodou, a to acetokarmínom, acetoorceínom, acetonigroínom alebo iným farbivom, so stečením farby. Po stečení farbiva v šikmej polohe sa ihned na zafarbené buňky v monovrstve roztlaku kvaplo uzatváracie médium - nonylfenol. Preparát sa přikryl krycím sklíčkom, ktoré sa přitlačilo preparačnou ihlou, za odstránenía prebytoČného farbiva a prejasnenia obrazu. Preparát vyhodnotený okamžité mal objekt pozorovania prejasnený so žiadaným indexom lomu a vyhodnotený po uschovaní počas dlhej doby /12 mesiacov/ pri pozorovaní v pravidelných časových intervaloch, bol obraz preparátu nezmenený v porovnaní s okamžitým vyhodnotením. V priebehu času nepřišlo k znehodnoteniu preparátu alebo k zníženiu kvality pozorovaného obrazu ani k odpareniu použitého uzatváracíeho média.

Příklad 2

Biologický prepafát bol spracovaný až po farbenie spdsobom popísaným v příklade 1 . Zafarbenie sa uskutočnilo farbiacimi zmesami používanými pri príprave tkz. trvalých preparátov, ako je například Feulgenovo farbenie. Ďalej sa použilo uzatváracie médium - nonylfenol. Účinky uzatváracíeho média sú také ako v příklade 1.

Příklad 3

Postupovalo sa ako v příklade 1 s tým rozdíelom, Se ako uzatváracie médium sa použil dodecylfenol· Účinky použitého média sú obdobné ako v příklade 1, vyhodnotený získaný prepa rát mal prejasnený objekt pozorovania a dal sa dlhodobe skladovat.

Uzatváracie médium podlá vynálezu šetří chemikálie, velmi rýchlo sa s nim manipuluje. Orámované preparáty ea dajú používat aj niekofko rokov, pričom nedochádza k porušeníu Struk túry objektu. Jeho použitie šetří zdravie pracovníkov. Látky používané ako uzatváracie médium sú medziprodukty používané pri syntéze neionových povrchov aktívnych látok a sú bešne dostupné.

Claims (3)

1. PREDMET VYNALEZU

   Použitie alkylfenolov 8 počtom uhlíkov v alkyle 8 až 12 s výhodou nonylfenolu, ako uza tváracieho média pre cytologickú mikroskopická techniku.