CS209853B2 - Method of making the semisynthetic cephalosporine - Google Patents
Method of making the semisynthetic cephalosporine Download PDFInfo
- Publication number
- CS209853B2 CS209853B2 CS748821A CS882174A CS209853B2 CS 209853 B2 CS209853 B2 CS 209853B2 CS 748821 A CS748821 A CS 748821A CS 882174 A CS882174 A CS 882174A CS 209853 B2 CS209853 B2 CS 209853B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- penicillin
- hydrolysis
- cephalosporin
- synthesis
- carried out
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- HOKIDJSKDBPKTQ-UHFFFAOYSA-N 3-(acetyloxymethyl)-7-[(5-amino-5-carboxypentanoyl)amino]-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound S1CC(COC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)C(NC(=O)CCCC(N)C(O)=O)C12 HOKIDJSKDBPKTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 17
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 17
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 claims abstract description 16
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 13
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- HOKIDJSKDBPKTQ-GLXFQSAKSA-N cephalosporin C Chemical group S1CC(COC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CCC[C@@H](N)C(O)=O)[C@@H]12 HOKIDJSKDBPKTQ-GLXFQSAKSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000006049 ring expansion reaction Methods 0.000 claims description 2
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 8
- HSHGZXNAXBPPDL-HZGVNTEJSA-N 7beta-aminocephalosporanic acid Chemical compound S1CC(COC(=O)C)=C(C([O-])=O)N2C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H]12 HSHGZXNAXBPPDL-HZGVNTEJSA-N 0.000 abstract description 6
- 125000004203 4-hydroxyphenyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 abstract description 4
- NVIAYEIXYQCDAN-CLZZGJSISA-N 7beta-aminodeacetoxycephalosporanic acid Chemical compound S1CC(C)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](N)[C@@H]12 NVIAYEIXYQCDAN-CLZZGJSISA-N 0.000 abstract description 4
- ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N cephalexin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CC=CC=C1 ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N 0.000 abstract description 4
- 229940106164 cephalexin Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 3
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 abstract description 3
- IKWLIQXIPRUIDU-ZCFIWIBFSA-N (6r)-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CCS[C@@H]2CC(=O)N12 IKWLIQXIPRUIDU-ZCFIWIBFSA-N 0.000 abstract description 2
- FUBBGQLTSCSAON-PBFPGSCMSA-N cefaloglycin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)COC(=O)C)C(O)=O)=CC=CC=C1 FUBBGQLTSCSAON-PBFPGSCMSA-N 0.000 abstract description 2
- 229950004030 cefaloglycin Drugs 0.000 abstract description 2
- 241000534944 Thia Species 0.000 abstract 3
- NVIAYEIXYQCDAN-UHFFFAOYSA-N 7-amino-3-methyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound S1CC(C)=C(C(O)=O)N2C(=O)C(N)C12 NVIAYEIXYQCDAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N D-alpha-phenylglycine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N 0.000 abstract 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 abstract 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 abstract 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 5
- AJHZGVMKIXHMNP-UHFFFAOYSA-N methyl 2-anilinoacetate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)CNC1=CC=CC=C1 AJHZGVMKIXHMNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 229940023064 escherichia coli Drugs 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 3
- YGBFLZPYDUKSPT-MRVPVSSYSA-N cephalosporanic acid Chemical compound S1CC(COC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)C[C@H]21 YGBFLZPYDUKSPT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004256 Beta-lactamase Proteins 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 D-alpha-aminophenylacetamido Chemical group 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- CVWJDUUVFSVART-SECBINFHSA-N ethyl (2r)-2-amino-2-(4-hydroxyphenyl)acetate Chemical compound CCOC(=O)[C@H](N)C1=CC=C(O)C=C1 CVWJDUUVFSVART-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- CVWJDUUVFSVART-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-2-(4-hydroxyphenyl)acetate Chemical compound CCOC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 CVWJDUUVFSVART-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 125000000350 glycoloyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N methyl Chemical compound [CH3] WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTHMTBUWTGVEFG-DDWIOCJRSA-N methyl (2r)-2-amino-2-phenylacetate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 DTHMTBUWTGVEFG-DDWIOCJRSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229960003424 phenylacetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003279 phenylacetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
- C12P35/04—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin by acylation of the substituent in the 7 position
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
- C12P35/02—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin by desacylation of the substituent in the 7 position
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
Description
(54) Způsob výroby polosyntotického cefalosporinii
Vynález se týká způsobu výroby polosyntetického- cefalo-sporinu vzorce
CH^ CO-NH
O
CfyOCOCH
COOH hydrolýzo-u . příslušného derivátu, vzniklého chemickým rozšířením kruhu penicilinu G, a následujícím použitím produktu hydrolýzy jako výchozí sloučeniny pro jeho syntetickou přeměnu na požadovaný polosyntetický cef a lo-sporin.
Důležitost, které nabyly polosyntetické deriváty cefalosporlnů v posledních letech, je obecně známa. Jsou hojně užívány ve farmakologii jako náhrada antibiotik neodolávajících účinkům β-laktamázy (cefalosporinázy). Mimoto jsou dostatečně stálé v kyselém prostředí, jsou velmi dobře snášeny a mají široké spektrum antibiotické účinnosti.
Současný známý stav jejich výroby se skládá z následujících chemických stupňů:
a) rozšíření kruhu penicilinu G,
b) hydrolýzy získaného produktu,
c) izolace výchozího materiálu (kyseliny 7-desoxyacetylcefalosporanové, 7-ADCA),
d) syntézy nových sloučenin z tohoto výchozího· materiálu.
V desoxyacetylderivátech získaných shora uvedeným postupem, tj. v derivátech s methylradikálem v poloze 3, lze oxidovat methylskupinu a dospět к příslušným hydroxyacetylderivátům, jejichž struktura může být vztažena ke struktuře přirozeného cefalospo-rinu (cefalosporinu C).
Nyní bylo nalezeno, že některé stupně těchto postupů, užívaných při přípravě polosyntetických cefalosporinů, mohou být provedeny pomocí bakteriálních buněk nebo buněčných extraktů, což přináší podstatné zlepšení, šetří výchozí surovinu, reakce je uskutečněna za mírnějších podmínek a s dob209853 rými výtěžky. Buňky se kultivují obvyklým fermentačním postupem; buněčné e-xtrakty lze snadno získat mechanickým poškozením buněk, čímž se uvolní žádaný -enzym, který se parciálně přečistí.
Enzymatické procesy mohou nahradit tyto chemické stupně:
a) hydrolýzu produktu získaného chemickým rozšířením kruhu benzylpcnicilinu
b) chemickou acylaci získané 7-aminokyseliny, vedoucí ke konečnému produktu.
Vynálezem je tedy způsob výroby polo syntetického ceíalosporinu vzorce
COOH 1 3 hydrolýzou příslušného -derivátu vzniklého chemickým rozšířením kruhu penicilinu G a následujícím použitím produktu hydrolýzy - - jako- - výchozí - sloučeniny pro jeho syntetickou přeměnu na žádoucí polosyntetický cefalosporin, jehož podstata spočívá v tom, že -se - hýdrblýza derivátu penicilinu G provádí působením - penicilin-acylázy z mikroorganismu Escherichia co-li, načež se vzniklá sloučenina vzorce I
uvádí se reakce se sloučeninou vzorce II.
^^-CHCCOOH (ID
Způsob podle vynálezu lze provádět tak, že se hydrolýza derivátu penicilinu G provádí jeho uváděním -do -styku s bakteriálními buňkami Ešcherichia coli -nebo -s peniciPn-acylázou extrahovanou a přečištěnou z buněk Escherichia - coli.
Při -způsobu podle vynálezu se s výhodou jako derivátu penicilinu G používá cefalosporinu C.
Hydrolýza - se provádí s výhodou při pH v rozsahu - 6 - -až 9 a při teplotě v rozsahu 0 až 50 °C.
Způsob podle vynálezu se- s výhodou -provádí tak, že se vzájemná reakce sloučenin vzorce I a II provádí při pH v rozsahu 3 až 8, a to za molárního přebytku acylačního -činidla.
Hydrolyti-cká reakce buněčnými i enzymatickými extrakty probíhá při pH 6,0 až 9,0, s- výhodou při pH 8 až 8,5. Teplota se -může pohybovat -od 0 do 50 QC, nejvýhodnější je °C. Syntetická reakce se provádí v přítomnosti některého buněčného nebo enzymatického extraktu, nejlépe při pH 3,0 až 8,0, výhodně při pH 7,0.
Provedení syntézy vyžaduje - přítomnosti molárního nadbytku acylačního činidla, aby byla posunuta rovnováha; - molární poměr mezi acylačmm činidlem a cefalosporanovou kyselinou se může pohybovat me:zi 1 až' 5, s výhodou je - 2,5. Protože enzym katalyzuje hydrolýzu esterového nebo amidíckého seskupení acylačního činidla -a -amidické vazby produktu, je vhodné přerušit rychle reakci, - když bylo dosaženo maximální koncentrace. Byly-И použity buňky, lze to provést jejich odstraněním' z reakčního prostředí odstředěním, byl-li použit enzymatický extrakt snížením pH na hodnotu blízkou 2,0.
Následující -příklady lépe - osvětlují způsob podle vynálezu, aniž jej omezují.
Příklad 1
Es<^^<^a^^'Ghia Coli.ATCC 9637 byla fermentována v submerzní aerobní kultuře. Složení kultivačního· prostředí, vyjádřené v g/1, bylo následující: masový extrakt 10, pepton 10, N.aCl 5, kyselina- fenyloctová 2, pH bylo upraveno na hodnotu 7 a teplota udržována při 24 °C. Fermentace byla přerušena po 20 hodinách. 1 litr této kultury obsahoval průměrně množství biomasy E. Coli - schopné hydrolyžovat 40 milimolů penicilinu G během 1 hodiny při 37 °C a . pH 7,8 (40 000 jednotek).
K ‘biomase získané ze 2 1 kultury (80 000 jednotek), oddělené odstředěním -a promyté puířem (fosforečnan draselný) při pH 7,8, bylo přidáno· za míchání 0,5 1 6 °/o roztoku, hmot./objem, kyseliny 7-(2‘-fenylacetamido)-3-methylce!f-3-em.'-4-karboxylové (cefalosporinu G) (90 mmol) v 0,1 M roztoku fosfátového pufru při pH 7,8 a teplotě 37 °C, - pH roztoku bylo udržováno kontinuálním přidáváním roztoku hydroxidu - sodného' za kontroly přístroje udržujícího konstantní pH. Po 2,5 hod., když - bylo spotřebováno stechiometrické množství NaOH,- byla reakční směs odstředěna, filtrát -ochlazen na- 4 °C, přidá209853 no 200 ml octanu butylnatého a pH roztoku upraveno· 6iN HC1 na hodnotu 2.0. Hodnota pH oddělené vodní fáze byla upravena přidáním 5N NaOH n-a 4,6 a směs zředěna stejným množstvím ethylalkoholu.
Takto získaná sraženina byla oddělena, promyta směsí vody a ethylalkoholu (50 : 50, objem/objem) a usušena. Bylo získáno· 18,7 g (87 mmol) kyseliny 7-ammo-3-methylcef-3-em-4-karboxylové kyseliny 7-a.minodesacetoxycefalosporanové (7-ADCA) s obsahem 95 %.
Příklad 2
Escherichia Coli byla fermentována stejně jako v příkladu 1. Biomasa získaná ze 3 1 kultivačního· média byla nasuspendována do Tris-HCl pufru 0,01M při pH 8,5 a zhomogenisována dvojnásobnou recyklizací v homogenizátoru zn. M-anton-Gaulm při 700 kg/ /cm2. Potom byl přidán hexadecylpyridinium chlorid do koncentrace 0,4 % a hodnota pH upravena na 4,5. Teplota udržována při 37 °C. Po třech hodinách byl odstředěn nerozpustný materiál. Penicilinová acyláza byla regenerována z čirého· roztoku vysrážením síranem amonným (65% nasycenost).
Získaná sraženina byl-a nasuspendována do 0,1 M fosfátového· pufru s pH 7,8 a dialyzována proti 20 objemům téhož pufru. К takto získaným 500 ml dialyzovaného produktu bylo přidáno· 30 g (90 mmol) cefalosporinu G a pH reakční směsi udržováno pomocí pH-statu na hodnotě 7,8. Po· 2,5 hod. po skončené hydrolýze cefalosporinu G bylo· izolováno, stejně jako v příkladu 1, 18,1 g 7-ADCA, výtěžek konverse byl 93 %.
Příklad 3 g (23,3 mmol) 7-ADCA a 10 g (50 mmol) hydrochloridu methylesteru D-( —)-fenylglycinu (PGM) bylo· nasuspendováno do fosfátového pufru pH 7,0 při teplotě 25 °C a objem byl upraven na 500 ml. К takto získanému roztoku byla přidána za míchání biomasa získaná z 2 1 kultury E. Coli, získané stejně jako· v příkladu 1. Tvorba cefalexinu byla sledována spektrcfotometrickon metodou (Analyst 92, 247,1967). Po 1 hodině byla reakce přerušena, buňky odděleny odstředěním. 550 ml roztoku obsahovalo 8 mg/ml cefalexinu (4,4 g), což odpovídá 54 % k-onversi.
Příklad 4 g (23,3 mmol) 7-ADCA a 10 g (50 mmol) PGM bylo· rozpuštěno v 500 ml 0,1 M fosfátového· pufru o pH 7,0, obsahujícího množství penicilinové acylázy získané z 3 1 kultury, jak je to· popsáno v příkladu 2.
Po 1 hodině při 25 °C obsahoval roztok objemu 555 ml 7,8 mg/ml cefalexinu, což odpovídá 52 % konversi 7-ADCA.
P ř í к 1 -a d 5 g (23,2 mmol) 7-ADCA a 10 g (51 mmol) ethylesteru D-(-)-p-hydroxyfenylglycinu (p-OH PGE) bylo rozpuštěno v 1,5 1 0,1 M fosfátového pufru s pH 7,0 při 25 °C. К roztoku, jehož pH bylo· udržováno· na hodnotě 7,0, byla přidána biomasa ze 2 1 kultury E. Coli, získané podle příkladu 1. Po 1 hodině byla reakce přerušena. Roztok obsahoval 2 mg/ /ml kyseliny 7beta-[ 2‘-amino-2‘- (4-hydroxyfenyl) асе tamido ]-3-me thylcef-3-em-4-karboxylové, což odpovídá 35 % konversi 7-ADCA.
Příklad 6 g (23,3 mmol) 7-ADCA a 10 g [51 mmol) p-OH PGE byly rozpuštěny v 1500 ml 0,1 M fosfátového pufru o· pH 7,0 při 25 °C, obsahujícího· penicilinovou acylázou, získanou ze 3 1 kultury, stejně jako v příkladu 2. Po 1 hodině bylo v roztoku nalezeno 1,8 mg/ml kyseliny 7 beta- [ 2‘-amino-2‘- (4-hydroxyfenyl )acetamldo] -3-methylcef-3-em-4-karboxylové, což odpovídá 32 % konversi 7-ADCA.
Příklad 7 g (18,36 mmol) kyseliny 7-aminocefalosporanové 1-ACA a 10 g (50 mmol) PGM bylo rozpuštěno v 1500 ml 0,1 M fosfátového pufru o pH 7,0 při 25 °C. К roztoku byla přidána za míchání biomasa získaná z 2 litrů kultivačního média E. Coli. Po 1 hodině obsahoval roztok 3 mg/ml kyseliny 7-(D-alfa-aminofenylacetamido/cefalosporanové (cefaloglycinu), což odpovídá 60% konversi 7-ACK.
Příklad 8 g (18,36 mmol) 7-ACK a 10 g (50 mmol) PGM byly rozpuštěny v 1500 ml fosfátového pufru, obsahujícího penicilinovou acylázu extrahovanou ze 3 1 kultury, pH roztoku bylo udržováno kontinuálním přidáváním NaOH na hodnotě 7,0, teplota při 25 °C. Po hodině obsahoval roztok 3,1 mg/ml cefaloglycinu, což odpovídá 62 % konversi 7-ACK.
Příklad 9 g (18,36 mmol) 7-ACK a 9,75 g (50 mmol ethylesteru p-hydroxyfenylglycinu byly rozpuštěny v 1500 ml 0,1 M fosfátového pufru o pH 7,0 při teplotě 25 °C. К roztoku byla přidána za míchání btomasa získaná ze
1 kultury E. Coli. Pc· 1 hodině obsahoval roztok 1,7 mg/ml kyseliny 7Ье1а-[24-ат1по-2- (4-hydroxyfeny 1) acetamido] -3-hydroxymethy 1 (ocetát) -cef-3-em-4-karboxylové, což odpovídá 33 % konversi 7-ACK.
Příklad 10 tem získaným ze 3 1 kultury E. Coli. Na konci reakce byla zaznamenána 30 % konverse
Postup přípravy stejně jako v příkladu 7-ACK.
9, biomasa nahrazena enzymatickým extrak-
Claims (8)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Způsob výroby polosyntetického cefalo- sporinu vzorceCK-OCOCH.COOH í hydrolýzou příslušného derivátu vzniklého chemickým rozšířením kruhu penicilinu G a následujícím použitím produktu hydrolýzy jako výchozí sloučeniny pro jeho syntetickou přeměnu na požadovaný polosyntetický cefalosporin, vyznačující se tím, že se hydrolýza derivátu penicilinu G provádí působením penicilin-acylázy z Escherichia coli, načež se vzniklá sloučenina vzorce I uvádí do reakce se sloučeninou vzorce II. θ-сн^оон lil)
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se hydrolýza derivátu penicilinu G provádí jeho uváděním do styku s bakteriálními buňkami Escherichia coli.
- 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se hydrolýza derivátu penicilinu G provádí jeho uváděním do styku s penicilin-acylázou extrahovanou a přečištěnou z buněk Escherichia coli.
- 4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako derivátu penicilinu G používá cefalosporinu C.
- 5. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se hydrolýza provádí při pH v rozsahu 6 až 9.
- 6. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se hydrolýza provádí při teplotě v rozsahu 0 až 50 °C.
- 7. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se reakce provádí při pH v rozsahu 3 až 8.
- 8. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se reakce provádí za přítomnosti molárního přebytku acylačního činidla.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT5448473 | 1973-12-20 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS209853B2 true CS209853B2 (en) | 1981-12-31 |
Family
ID=11287332
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS748821A CS209853B2 (en) | 1973-12-20 | 1974-12-20 | Method of making the semisynthetic cephalosporine |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5095486A (cs) |
| AU (1) | AU7608974A (cs) |
| BE (1) | BE823392A (cs) |
| CA (1) | CA1018091A (cs) |
| CS (1) | CS209853B2 (cs) |
| DD (1) | DD116833A5 (cs) |
| DE (1) | DE2460607A1 (cs) |
| DK (1) | DK660374A (cs) |
| FR (1) | FR2255380B1 (cs) |
| GB (1) | GB1480850A (cs) |
| HU (1) | HU172077B (cs) |
| IL (1) | IL46150A (cs) |
| LU (1) | LU71506A1 (cs) |
| NL (1) | NL7416549A (cs) |
| NO (1) | NO744590L (cs) |
| SE (1) | SE7416077L (cs) |
| YU (1) | YU335674A (cs) |
| ZA (1) | ZA747895B (cs) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2105988B1 (es) * | 1996-03-15 | 1998-07-01 | Antibioticos Sa | Procedimiento para purificar 7-sustituido-amino-desacetoxi-cefalosporinas mediante el empleo de membranas de filtracion. |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5310156B2 (cs) * | 1972-10-21 | 1978-04-11 | ||
| JPS52118A (en) * | 1975-06-23 | 1977-01-05 | Sony Corp | Still picture reproducing device |
-
1974
- 1974-11-28 IL IL46150A patent/IL46150A/xx unknown
- 1974-12-05 AU AU76089/74A patent/AU7608974A/en not_active Expired
- 1974-12-11 ZA ZA00747895A patent/ZA747895B/xx unknown
- 1974-12-12 FR FR7440980A patent/FR2255380B1/fr not_active Expired
- 1974-12-16 GB GB54336/74A patent/GB1480850A/en not_active Expired
- 1974-12-16 BE BE151538A patent/BE823392A/xx not_active IP Right Cessation
- 1974-12-17 YU YU03356/74A patent/YU335674A/xx unknown
- 1974-12-17 LU LU71506A patent/LU71506A1/xx unknown
- 1974-12-18 DD DD183150A patent/DD116833A5/xx unknown
- 1974-12-18 DK DK660374A patent/DK660374A/da not_active Application Discontinuation
- 1974-12-18 NL NL7416549A patent/NL7416549A/xx active Search and Examination
- 1974-12-19 NO NO744590A patent/NO744590L/no unknown
- 1974-12-19 HU HU74SA00002731A patent/HU172077B/hu unknown
- 1974-12-19 CA CA216,466A patent/CA1018091A/en not_active Expired
- 1974-12-19 SE SE7416077A patent/SE7416077L/xx unknown
- 1974-12-20 DE DE19742460607 patent/DE2460607A1/de active Pending
- 1974-12-20 CS CS748821A patent/CS209853B2/cs unknown
- 1974-12-20 JP JP49145850A patent/JPS5095486A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| YU335674A (en) | 1982-05-31 |
| SE7416077L (cs) | 1975-06-23 |
| FR2255380A1 (cs) | 1975-07-18 |
| LU71506A1 (cs) | 1975-06-17 |
| NO744590L (cs) | 1975-07-14 |
| BE823392A (fr) | 1975-04-16 |
| IL46150A0 (en) | 1975-02-10 |
| ZA747895B (en) | 1976-01-28 |
| GB1480850A (en) | 1977-07-27 |
| IL46150A (en) | 1979-07-25 |
| DE2460607A1 (de) | 1975-06-26 |
| AU7608974A (en) | 1976-06-10 |
| JPS5095486A (cs) | 1975-07-29 |
| DD116833A5 (cs) | 1975-12-12 |
| CA1018091A (en) | 1977-09-27 |
| DK660374A (cs) | 1975-08-25 |
| FR2255380B1 (cs) | 1977-11-10 |
| NL7416549A (nl) | 1975-06-24 |
| HU172077B (hu) | 1978-05-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2208644C2 (ru) | Способ получения n-деацилированного цефалоспорина | |
| CA2086250C (en) | Process for preparation of beta-lactams | |
| US3945888A (en) | Method for the production of cephalosporins | |
| Vandamme | Peptide antibiotic production through immobilized biocatalyst technology | |
| US4774179A (en) | Process for preparing a 7-aminocephalosporanic acid compound | |
| JPH022396A (ja) | セファロスポリンｃ及び類似体の一段階酵素反応による７‐アミノセファロスポラン酸及びその類似体への変換 | |
| US3880713A (en) | Cephalosporin compounds | |
| US4981789A (en) | One-step enzymatic conversion of cephalosporin C and derivatives to 7-aminocephalosporanic acid and derivatives | |
| US3862004A (en) | Method for production of cephalosporins | |
| EP0915988B1 (en) | Process for the fermentative production of deacylated cephalosporins | |
| US5922907A (en) | Precursors of β-lactam antibacterials having soluble side chain esters | |
| CS209853B2 (en) | Method of making the semisynthetic cephalosporine | |
| EP0638649B1 (en) | New use of alcaligenes faecalis penicillin G acylase | |
| US3976546A (en) | Cephalosporins | |
| CA2168923C (en) | Process for the enzymatic synthesis of .beta.-lactam antibiotics in the presence of an enzyme inhibitor | |
| WO2004020652A2 (en) | An enzymatic process for preparing beta-lactams | |
| CA1069120A (en) | Process for preparing 7-aminocephalosporanic acid derivatives | |
| US20030044884A1 (en) | Synthesis of beta-lactam antibacterials using soluble side chain esters and enzyme acylase | |
| WO2002020819A2 (en) | AN ENZYMATIC PROCESS FOR PREPARING β-LACTAM COMPOUNDS | |
| EP2614066A1 (en) | Process for the production of cephalosporins | |
| US3872088A (en) | Method for the production of d(-)-{60 -aminobenzylpenicillin directly from natural penicillins | |
| CH621575A5 (en) | Process for the enzymatic hydrolysis of cephalosporins | |
| WO1998056945A1 (en) | PROCESS FOR ENZYMATICALLY PREPARING A β-LACTAM ANTIBIOTIC AND THIS ANTIBIOTIC | |
| JPS622798B2 (cs) | ||
| JPH01104194A (ja) | Ｄ−（−）−酒石酸の製造法 |