CS208277B1 - Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci - Google Patents
Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci Download PDFInfo
- Publication number
- CS208277B1 CS208277B1 CS351179A CS351179A CS208277B1 CS 208277 B1 CS208277 B1 CS 208277B1 CS 351179 A CS351179 A CS 351179A CS 351179 A CS351179 A CS 351179A CS 208277 B1 CS208277 B1 CS 208277B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- biuret
- reagent
- nonlinearity
- protein
- absorbance
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Vynález řeži odstraněni nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci na dvoucestných automatických analyzátorech. Při stanoveni bílkovin na automatických analyzátorech proudí hlavni větvi biuretová činidlo a vedlejší větvi alkalický roztok činidla pro slepá stanoveni,která p se vyznačuje tím,že obsahuje 1-5Xhmotových komplexně vázaných iontů dvojmocná mědi, vžtaženo na celková množství iontů dvojmocná mědi,obsažených v základním biuretovám činidle. Vynález může býti využit při analytických stanoveních na automatických analyzátorech v lékařství,tarmaceutickám průmyslu,analytická chemii a biologii.
Description
Vynález se týká způsobu kompenzace nelinesrity při stanovení bílkovin biuretovou reakci a to zejaéna při aplikaci metody na automatická· analyzátoru.
V současná době jsou v širokém oboru rozvinuty automatizovaná analytická postupy.
Jednou z takových metod je stanoveni bílkovin biuretovou reakci.Jej i princip spočívá v interakci iontů mádi s bílkovinou v alkalickém prostředí za tvorby fialově zbarveného komplexu.S použitím peristaltická pumpy probíhá v automatickém analyzátoru reakce kontinuálně v hadicovém systému a zapisovač kresli křivky,kde vzdálenost vrcholu od základny určuje obsah bílkoviny ve vzorku.Spektrofotometr analyzátoru je dvoupaprskový a společně s návaznou analytickou jednotkou je dvoucestný.V hlavni větvi přístroje proudí biuretová činidlo,obsahující ionty mědi a ve vedlejší větvi činidlo pro slepé stanoveni,které kompenzuje nespecifické absorbance,způsobené přítomnosti barviv,například hernu,nebo různých zákalů ve vzorku.Do obou větvi se současně automaticky nasávají jednak roztoky zkoušených vzorků,jednak samotná rozpouštědlo,kterým bývá voda nebo fysiologický roztok.Rozpouštědlo při tomto kontinuálním způsobu totiž odděluje v hadicovém systému navzájem jednotlivé vzořky.Také před vlastním započetím analysy se do přístroje nasává pouze rozpouštědlo a v táto fázi se na zapisovači přístroje kompenzuje nastavením báze modrá zbarveni vlastního biuretového činidla.Počet modifikaci ve složeni biuretového činidla,používaných v praxi,je značhý.Avšak v zásadě je to vždy alkalický komplex měďnatých iontů.Všechny modifikace máji při kvantitativním průběhu biuretová reakce jeden zásadní nedostatek a to nelinearltu mezi skutečným obsahem bílkoviny a příslušnou absorbanci,při použiti automatického analyzátoru indikovanou na zapisovači výškou vrcholu křivky.Je to zákonitý jev a má jednoduchá vysvětlení.Jak již bylo řečeno,před analýzou vlastních vzorků se nasává do obou větvi analyzátoru pouze rozpouštědlo.V hlavni větvi proudí modrý roztok biuretového činidla,ve vedlejší větvi bezbarvý roztok činidla pro slepá stanoveni.Modré zbarveni biuretového činidla se kompenzuje na zapisovači nastavením báze a to v konstantní hodnotě pro všechny následně analyzované vzorky bez zřetele ne to, jakou mají koncentraci bílkovin.To neni teoreticky správné,ale technicky to nelze bez složité regulační elektroniky jinak provést.Totiž čést modrého zbarveni biuretového činidla se spotřebuje na tvorbu silnějšího komplexu fialového biIkovina-měá a správně by se tedy měla kompenzovat pouze absorbance zbývajícího modrého zbarveni.Tato zbývající absorbance by měla býti tím nižší,čím vyšší je obsah bílkoviny ve zkoušeném vzorku.
Ve skutečnosti se kompenzuje plné hodnota absorbance modrého zbarveni biuretového činidla a proto se u vzorků s vyšším obsahem bílkoviny získávají relativně nižši vrcholy příslušných křivek a vzájemné závislosti jsou nelineární.Některé automatizované pracovní postupy tohoto oboru kompenzuji nelinearltu na přiklad využitím thermodynamiky rovnovážných stavů a nechávají reakci proběhnout pouze do střední fáze a v té .měří absorbanci.Nevýhodou je,že způsob,závislý na teplotě a metoda je vhodné pro roztoky bílkovin v koncentračním rozsahu jednoho řádu a to 1 až 10X.
Uvedená nedostatky odstraňuje způsob kompenzace nelinearity při starioveni bílkovin biuretovou reakcí na dvouceStnám automatickém analyzátoru,jehož podstatou je,že činidlo pro slepá stanoveni,proudíci ve vedlejší větvi,obsahuje 1 až 5% hmotových,s výhodou z
208 277
3X haotových koaplexně vázaných lontů dvojnocná aědi,vztaženo na celková Množství koaplexně vázaných lontů dvojaocná aěd1,obsažených v základní· bluretovéa Činidla, proudící· v hlavni větvi a abaorbance zbarveni koaplexu ědnatých lontů a bílkovinou se odeCItá od abaorbance vlastni bluretová reakce a v závislosti na zjlitěná koncentraci bílkoviny se konpenzuje nellnearlta Měřená abeorbance.
Výhodou tohoto způsobu je jeho jednoduchost,zanedbatelná závislost na teplotě a Možnost ppužltl takového pracovního scheaetu,která uaožňuje analyzovat roztoky bílkovin v roznezl více než dvou řádů,prakticky 0,1 až 22X.
Přiklad provedeni vynálezu:
Složeni Činidel:
| V 1000 Rl vody se rozpustí: | Bluretová | Činidlo | činidlo pro stepá stanoveni |
| Síran aěčlnatý-pentahydrát | 8,0 | 0 | 0,27 g |
| Vinen sodnodraseIný-tetrahydrát | 24,0 | 0 | 6,0 g |
| Dvojsodná sůl kyseliny ethylen- | |||
| d1anlnotetraoctové-dlhydrát | 5,0 | 0 | 5,0 g |
| Hydroxyd draselný | 32,0 | o | 32,0 g |
| Jodld draselný | 5,0 | g | 5,0 g |
| SmáCedlo 2-ethyIhexyIslran sodný | 1.0 | nl | 1,0 nl |
| Srovnáni výsledků | ,získaných | při použiti Činidla pro vadlejU | slepá stanoveni podle | |||
| vyná lezu | i a Činidla bez | využiti vynálezu. | ||||
| Bylo analyzováno | telecí séru· a lidský albualn v původní koncentraci a souCasně po | |||||
| zředěni | na polovinu a | Čtvrtinu původního obsahu bílkovin.V | tabulce | jsou uvedeny výlky | ||
| vrcholů | získaných křivek a z nich | vypočtená obsahy bílkovin | vCatně | přlsluiných | ||
| absolutních chyb.PH výpoCtu byla | u každá skupiny vzata pro | názornost nejnlžd | Čtvrtinová | |||
| hodnota | jako standart. | |||||
| Vzorek | SkutaCný | Činidlo | podle vynálezu | Činidlo bez využiti | vynálezu | |
| obsah | Výěke vrcholu VypoCtený Absol.chyba Výlka | VypoCtený | Absol.chyb. | |||
| b1lkovin | křivky | obtah bílkovin | vrcholu obsah b1Ik | • | ||
| X | RR | X X | RR | X | X | |
| Teleel | 7/52 | 83,6 | 7,52 0 | 81,5 | 7/13 | -0,39 |
| séru· | 3,76 | 41,8 | 3,76 0 | 42,0 | 3,67 | -0,09 |
| 1,88 | 20,9 | 1,88 | 21/5 | 1,88 | - | |
| Lidský | 19,48 | 78,5 | 19,50 +0,02 | 93/1 | 19,13 | -0,35 |
| albualn | 9,74 | 39,2 | 9,74 0 | 47/0 | 9,66 | -0,08 |
| 4,87 | 19,6 | 4,87 | 23/7 | 4,87 | - |
208 277
Claims (1)
- P&EDMĚT VYNÁLEZU·Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci na dvoucestnám automatickém analyzátoru,při které· hlavni vétvl tohoto anlyzétoru proudí biuretové činidlo a vadlajil vétvl alkalický roztok činidla pro slepé stanoveni, vyznačený t1m,ža činidlo pro slepé stanoveni,proudící vedlejil vétvl,obsahuje 1 až 5% haotových,např1klad 3X hmotová komplexně vázaných iontů dvojmocná mědi,obsažených v základní· biuretové· činidle,prodlel· v hlavni větvi a absorbance zbarveni komplexu ědnatých lontů a bílkovinou se odečítá od absorbance vlastni biuretové reakce a v závislosti na zjlltěná koncentraci bílkoviny se kompenzuje nelinearlta měřené absorbance.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS351179A CS208277B1 (cs) | 1979-05-21 | 1979-05-21 | Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS351179A CS208277B1 (cs) | 1979-05-21 | 1979-05-21 | Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS208277B1 true CS208277B1 (cs) | 1981-09-15 |
Family
ID=5375415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS351179A CS208277B1 (cs) | 1979-05-21 | 1979-05-21 | Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS208277B1 (cs) |
-
1979
- 1979-05-21 CS CS351179A patent/CS208277B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kessler et al. | An automated procedure for the simultaneous determination of calcium and phosphorus | |
| Jooste et al. | Methods for determination of iodine in urine and salt | |
| Bodor et al. | Standardization of glycohemoglobin determinations in the clinical laboratory: three years of experience | |
| KR940005427A (ko) | 검량제의 정확한 희석을 확인하기 위한 단백질 ―염료 결합체 | |
| US3447904A (en) | Test indicator for the detection of chlorides | |
| Faithfull | Automated simultaneous determination of nitrogen, phosphorus, potassium and calcium on the same herbage digest solution | |
| CN105353139A (zh) | 一种甲状旁腺素定量检测试剂盒 | |
| Gitelman et al. | An automated spectrophotometric method for magnesium analysis | |
| CH642750A5 (it) | Procedimento per la rapida determinazione del ferro nel siero sanguigno e miscela per l'esecuzione del procedimento. | |
| Thode et al. | Evaluation of a new semiautomatic electrode system for simultaneous measurement of ionized calcium and pH | |
| US4448889A (en) | Fluid analysis | |
| White et al. | An automated procedure, with use of ferrozine, for assay of serum iron and total iron-binding capacity | |
| DE2530036C3 (de) | Verfahren zur Bestimmung von Harnstoff in Flüssigkeiten | |
| EP3221444B1 (en) | Lateral flow assay ratio test | |
| US3558278A (en) | Determination of albumin | |
| CS208277B1 (cs) | Způsob kompenzace nelinearity při stanoveni bílkovin biuretovou reakci | |
| Smith et al. | Semiautomatic and robotic methods for determining serum haptoglobin levels | |
| EP0061793B1 (en) | Method for preparing a chromogen reactive for determining the serum iron concentration and binding power, and the chromogen reactive obtained thereby | |
| Terasaki et al. | Automated method for the quantitation of orthophosphate | |
| Liedtke et al. | Automated calmagite compleximetric measurement of magnesium in serum, with sequential addition of EDTA to eliminate endogenous interference. | |
| JPS62842A (ja) | 検量線を使用する成分分析方法 | |
| RU2097762C1 (ru) | Набор реактивов для определения первичных ароматических аминов в растворах и биологических жидкостях | |
| CN103226146A (zh) | 克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇三合一酶联免疫法及专用试剂盒与试剂盒的检测法 | |
| Cagnasso et al. | Evidence of a systematic underestimation of free sulfur dioxide by the aeration-oxidation method approved by OIV | |
| JPS6125062A (ja) | 免疫比濁法によるａｓｏ価の測定法 |