CS207474B1 - method of culativationof the mushroom of the genus coriulus - Google Patents
method of culativationof the mushroom of the genus coriulus Download PDFInfo
- Publication number
- CS207474B1 CS207474B1 CS509177A CS509177A CS207474B1 CS 207474 B1 CS207474 B1 CS 207474B1 CS 509177 A CS509177 A CS 509177A CS 509177 A CS509177 A CS 509177A CS 207474 B1 CS207474 B1 CS 207474B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- cultivation
- medium
- liters
- extract
- fermenter
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 14
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 title 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 43
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 238000005187 foaming Methods 0.000 claims abstract description 24
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims abstract description 20
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 claims abstract description 9
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 7
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 28
- 241000222356 Coriolus Species 0.000 claims description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 7
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 7
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 claims description 4
- -1 casein amino acid Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 6
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 abstract description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 15
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 14
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 9
- 241000222355 Trametes versicolor Species 0.000 description 6
- 239000000306 component Substances 0.000 description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001303601 Rosacea Species 0.000 description 1
- 241000222357 Trametes hirsuta Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 201000004700 rosacea Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/812—Foam control
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Botany (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu kultivace houby ro-du Coriolus tak, že se brání příliš velkému pěnění živného pro,středí v průběhu pěstování za stálého provzdušňování a míchání při použití kapalného vodného prostředí, v němž jinak vzniká bohatá .pěna v průběhu pěstování houby.
Pro kultivaci uvedeného typu se obvykle užívá vodné živné prostředí s obsahem alespoň jedné látky ze skupiny extrakt z kvasnic, pcpton, aminokyseliny kaseinu a extrakt z masa jako zdroj dusíku a mimoto sacharidy jako glukózu, škrob, fruktózu a podobně jako zdroje uhlíku a anorganickou sůl nebo soli, například fosfáty, horečnaté soli apod. V případě, že houba rodu Coriolus se pěstuje v submerzní kultuře při použití vodného živného prostředí uvedeného typu, dochází k silnému pěnění na povrchu kapaliny v průběhu pěstování a je velmi těžké provádět kultivaci bez obtíží při použití většího množství prostředí ve fermentoru. Je tedy obvykle nutné naplnit fermentor pouze z části, obvykle na 40 až 60 °/o kapacity. Protože však kultivace trvá mnoho dní, znamená toto snížení i snížení produktivity a zvýšení ceny produktu.
Tento nedostatek zatím nebylo možno odstranit ani použitím různých zařízení ke snížení pěnivosti ve fermentoru, ani snížením provzdušnění nebo zpomalením míchání živného prostředí, proLože v tomto případě docházelo ke snížení rychlosti růstu houby. Ani ředění živného prostředí nebylo vhodným řešením, protože i při tomto opatření docházelo k velkému snížení výtěžku mycelia.
Pokud jde o možnost snížit tvorbu pěny jinými technologickými zásahy, bylo používáno například silikonového oleje. Bylo však zjištěno, že tento olej pevně lne k takto získanému myceliu a není možno jej z mycelia úplně vymýt. Protože v následujícím stupni se obvykle mycelium extrahuje vodným rozpouštědlem, aby bylo možno získat polysacharid s piOtinádorovou účinností, přítomnost silikonového oleje je nežádoucí, protože i malé množství tohoto oleje podstatně znečistí výsledný polysacharid. Proto byly vyvíjeny pokusy snížit pěnivost bez použití protipěnivých činidel.
Nyní bylo zjištěno, že k podstatné pěnivosti dochází pouze v počátečních stadiích kultivace, v dalších stadiích se však pěnění rychle snižuje, takže je možno postupovat tak, že se nejprve naplní fer.mentor pouze do části své kapacity a pak se postupně přidává živné prostředí nebo některá z jeho složek tehdy, když dochází k poklesu pěnivosti dochází pouze v počátečních stadiích sokých výtěžků houby.
Předmětem vynálezu je tedy způsob kultivace houby rodu Coriolus z čeledi Polyporaceae třídy Basidiomycetes za provzdušňování a míchání při použití vodného živného prostředí, s obsahem sacharidu jako zdroje uhlíku a alespoň jeden zdroj dusíku ze skupiny extrakt z kvasnic, pepton, aminokyseliny kaseinu a extrakt z masa, které •obvykle v průběhu kultivace silně pění, vyznačující se tím, že se na počátku kultivace fermentor naplní pouze do 70 % své kapacity při provzdušňování rychlostí 0,3 až 0,6 litru vzduchu/litr prostředí a při 20 až 500 otáčkách za minutu, načež se přidává živné prostředí nebo alespoň jedna z jeho živných složek při poklesu pěnivosti živného prostředí v průběhu kultivace.
Hlavním význakem způsobu podle vynálezu je skutečnost, že se vodné živné prostředí pro kultivaci Basidiomycetes nepřivádí do fermentoru najednou, avšak fermentor se plní pouze do 70 % své kapacity a jakmile pěnivost ustává, přidává se další část živného prostředí nebo alespoň jedna z živných složek.
Počáteční náplň fermentoru poněkud závisí na složení živného prostředí, rozměru a tvaru fermentoru, na rychlosti míchání a na dalších faktorech, činí však obvykle 40 až 70 % vnitřní kapacity užitého fermentoru.
Doba a množství přídavků živného prostředí nebo alespoň jedné jeho živné složky se obvykle stanoví sledováním ipěnivosti prostředí okénkem ve víku fermentoru. Je výhodné přidat další část živného prostředí nebo některé z jeho složek ihned, jakmile se pěnivost do určité míry sníží. Toto opakované přidávání prostředí nebo některé z jeho složek je možno provádět po částech nebo kontinuálně. Tímto způsobem je možno zvýšit celkový obsah živného prostředí až na 85 % kapacity fermentoru.
Při kultivaci Coriolus v počátečních stadiích mycelium roste pomalu a spotřeba živných látek je proto omezena, takže na počátku pěstování se složení živného prostředí málo mění a dochází proto к velké pěnivosti, avšak jakmile dojde к rychlému růstu houby, dojde i к rychlému poklesu pěnění. Z tohoto důvodu je vhodné ze začátku naplnit fermentor jen do 70 '% jeho kapacity a pak teprve ovlivňovat konečný výtěžek mycelia přidáváním živného prostředí nebo některé z jeho složek, protože jinak by byl rychlý růst houby zbrzděn. V případě, že se užívá к přidávání celého živného prostředí, je vhodné snížit počáteční množství tohoto prostředí až na méně než 60 % kapacity fermentoru.
Užité vodné kapalné prostředí obsahuje jako zdroj uhlíku glukózu, láktózu, škrob apod. jako zdroj dusíku extrakt z kvasnic, pepton, aminokyseliny kaseinu a extrakt z masa, a to v množství obvykle vyšším než 0,1 °/o hmotnostního. Vzhledem к vysoké koncentraci komplexních zdrojů živin dochází к vysokému pěnění na povrchu kapal ného prostředí. Toto pěnění je možno silně ovlivnit rychlostí provzdušňování fermeritačního prostředí, v němž se kultivace provádí. Způsob podle vynálezu se s výhodou provádí při rychlosti provzdušňování 0,3 až 0,6 litru vzduchu na 1 litr kapalného prostředí za minutu. Pěnění je možno ovlivnit také mícháním živného prostředí ve fermentoru. Při provádění způsobu podle vynálezu se živné prostředí míchá rychlostí 20 až 500 otáček za minutu.
Pod pojmem „některá ze složek živného prostředí4' se rozumí alespoň jedna z uvedených živin, například extrakt z kvasnic, pepton, aminokyselina kaseinu a extrakt z masa.
Způsob podle vynálezu je možno aplikovat na celou řadu hub, náležejících к čeledi Polyporaceae, avšak s výhodou je způsob možno využít zejména pro kultivaci Basidiomycetes z rodu Coriolus, zejména z druhů Coriolus versicolor (Fr.) Quěl., Coriolus consors (Berk.) Imaz., Coriolus hirsutus (Fr.] Quěl, Coriolus pargamenus [Fr.] Pat., Coriolus pubesens (Fr.) Quěl a Coriolus conchifer (Schw.) Pat. Všechny tyto houby ze skupiny Basidiomycetes jsou známé a jejich mykologické vlastnosti byly popsány v publikaci Rokuya Imazeki a Tsuguo Hongo „Colored Iliustration of Fungi of Japan“, sv. I, 1974, а II, 1975.
Při provádění způsobu podle vynálezu je možno i při použití vodného živného prostředí, v jehož submerzní kkultuře vždy dochází к velké pěnivosti, pěstovat houby ze skupiny Basidiomycetes bez velkých obtíží při vysokém výtěžku mycelia a při snížené době kultivace.
Je také nutno uvést, že hlavním produktem kultury a hlavní součástí mycelia a živného prostředí je polysacharid. Tento polysacharid má různé farmakodynamícké účinky a také celou řadu použití jako přísada v potravinářství. Při použití svrchu uvedených druhů je možno získat polysacharid s vysokou protinádorovou účinností. Tento polysacharid je možno oddělit a izolovat extrakcí mycelia z živného prostředí podle vynálezu vodným rozpouštědlem.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Přikladl
1000 litrů vodného živného prostředí s obsahem 10 °/o hmotnostních glukózy, 1,5 % hmotnostních extraktu z kvasnic, 0,2 procenta hmotnostního sladového extraktu, 0,1 procenta hmotnostního MgSO4.7 H2O a 0,1 procenta hmotnostního KH2PO4 se vloží do vertikálního fermentoru o kapacitě 2 m3 s dvoustupňovou turbinou a ipo sterilizaci známým způsobem se živné prostředí očkuje 20 litry suspenze mycelia Coriolus versicolor (Fr.) Quěl po předběžném pěstování v předběžné kultuře ve fermentoru o obsahu 50 litrů, načež se produkční kultura provzdušňuje rychlostí 500 litrů za minutu, to znamená 0,5 litrů vzduchu na 1 litr prostředí za minutu, při 150 otáčkách turbiny za minutu a teplotě 26 °C. Fermentor se naplní pěnou až do své horní části, avšak po 15 až 20 hodinách ;pěna poklesne a 24 hodin od začátku kultivace je možno přidat 200 litrů sterilizovaného prostředí téhož složení v průběhu 1 hodiny a další pěstování se provádí při provzdušňování 600 litrů za minutu. Opět se objeví pěna, která však brzy poklesne a je možno přidat dalších 200 litrů prostředí za týchž podmínek po 48 hodinách od začátku kultivace. Provzdušňování se upraví na 700 litrů za minutu. Opět se objeví pěna, ale po 72 hodinách od počátku kultivace je možno znovu přidat 200 litrů živného prostředí téhož složení, současně se upraví provzdušňování na 800 litrů za minutu. Po třech přídavcích živného prostředí je celkové množství živného prostředí 1600 litrů, tj. 80 o/o kapacity fermentoru, kultivace se pak provádí do sedmého dne od začátku kultivace. Po této době se mycelium oddělí odstředěním a usuší. Výtěžek byl 15-,6 g/litr.
Příklad 2
1000 litrů vodného živného prostředí s obsahem 15 % hmotnostních glukózy, 2,25 % hmotnostních extraktu z kvasnic, 0,2 % hmotnostního sladového extraktu, 0,1 % hmotnostního MgSO«.7H2O a 0,1 % hmotnostního KH2PO4 se uvede do vertikálního fermentoru o obsahu 2 m3 s dvoustupňovou turbinou s plochými lopatkami a po sterilizaci známým způsobem se prostředí očkuje 20 litry suspenze mycelia Coriolus versicolor (Fr.) Quěl. z předběžné kultury, pěstované ve fermentoru o obsahu 50 litrů. Vlastní kultivace se provádí při provzdušňování 500 litrů za minutu, tj. 0,5 litrů vzduchu na 1 lite živného prostředí za minutu, při 150 otáčkách turbiny za minutu a teplotě 26 °C. Zpočátku dosáhne plyn horní části fermentoru, po 30 až 40 hodinách se však její množství sníží, 48 hodin po počátku kultivace je možno přidat v průběhu 1 hodiny 200 litrů sterilizovaného prostředí téhož složení a kultivace se dále provádí při provzdušňování 600 litrů za minutu. Znovu se vytvoří pěna, avšak po 72 hodinách od počátku kultivace je možno za týchž podmínek jako svrchu znovu přidat 200 litrů živného prostředí, kultivace se pak provádí při provzdušňování 700 litrů za minutu. Znovu se vytvoří pěna, avšak po 96 hodinách od počátku kultivace se znovu přidá 200 litrů živného prostředí za týchž podmínek a provzdušňování se upraví na 800 litrů za minutu. Živného prostředí je po tomto přidání celkem 1600 litrů, tj. 80 % kapacity fermentoru. Kultivace se pak dále provádí do 7. dne od počátku kultivace. Pak se mycelium oddělí odstředěním od živného prostředí a usuší. Celkový výtěžek mycelia je
18,4 g/litr.
V následujících příkladech jsou uvedeny výsledky srovnávacích pokusů.
Srovnávací .příklad 1
1200 litrů prostředí téhož složení jako v příkladu 1 se voiží do fermentoru z příkladu 1 a po sterilizaci běžným způsobem se očkuje 20 litry suspenze mycelia Coriolus versicolor (Fr.) Quěl. z předběžné kultury pěstované ve fermentoru o obsahu 50 litrů. Kultivace se pak provádí při provzdušňování 500 litrů za minutu, při 150 otáčkách turbiny za minutu a teplotě 26 CC 7 dní. Výtěžek mycelia, získaného stejným způsobem jako v příkladu 1, po skončení kultivace byl
16,9 g/litr.
Množství mycelia na jednotku živného prostředí je v tomto příkladu vyšší než v příkladu 1, -avšak v příkladu 1 by nebylo možno vložit veškeré množství užitého živného prostředí do fermentoru vzhledem к velké pěnivosti živného prostředí, fermentor ve srovnávacím příkladu 1 je tedy naplněn pouze na 60 % své kapacity a celková produkce jedné produkční kultury je tedy nižší než v příkladu 1. Tato skutečnost je zřejmá z tabulky 1.
Srovnávací příklad 2
Kultivace se provádí stejně jako ve srovnávacím příkladu 1 s tím rozdílem, že .se do fermentoru. vloží 1000 lhrů živného prostředí téhož složení jako v příkladu 2. Vzhledem к vysoké pěnivosti nebylo možno užít většího množství prostředí. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 1.
Srovnávací příklad 3
Kultivace se provádí stejně jako ve srovnávacím .příkladu 1 s tím rozdílem, že se užije 1600 litrů živného prostředí s obsahem 5 % hmotnostních glukózy, 0,75 °/o hmotnostního extraktu z kvasnic, 0,2 procenta hmotnostního sladového extraktu, 0,1 procenta hmotnostního MgSCM. 7 H2O a 0,1 procenta hmotnostního KH2PO4. V tomto případě bylo tedy množství prostředí stejné jako v příkladu 1 a 2, avšak prostředí bylo к zábraně pěnivosti zředěno. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 1.
Srovnávací příklady
2 3
TABULKA 1
Příklady
2
Složení prostředí (o/o hmotnostní)
glukóza | 10 | 15 | 10 | 15 | 5 |
extrakt z kvasnic | 1,5 | 2,25 | 1,5 | 2,25 | 0,75 |
extrakt ze sladu | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 |
MgSO4.7 I-I2O | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
KH2PO1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
konečná náplň v % | 80 | 80 | 60 | 50 | 80 |
celková náplň (litry) | 1600 | 1600 | 1200 | 1000 | 1600 |
produkce mycelia (kg/vsázka) | 24,96 | 29,44 | 20,28 | 20,90 | 17,76 |
Poznámka: kultivace byla prov. | áděna vždy | 7 dní. |
Příklad 3
V tomto příkladu byla dodávána pouze jedna složka prostředí místo celého živného prostředí.
litrů kapalného živného prostředí s obsahem glukózy a extraktu z kvasnic bylo vloženo do vertikálního fermentoru o obsahu 50 litrů a po sterilizaci běžným způsobem. bylo naočkováno suspenzí mycelia Coriolus verricolor (Fr.) Qunl. CM-1Ů1 v množství 0,01 °/o, vztaženo na mycelium. Uvedený kmen byl ·uložen v Fermentation Re.search Institute, Agency of Industrial Science and Technology, · Civ. ba, Japonsko, ' pod číslem FERM-P- č. 2412 dne 25. prosince 1973. Tento kmen byl · předběžně pěstován v třepaní kultuře. Vlastní kultivace byla prováděna .při provzdušňování 0,5 litrů vzduchu na 1 litr živného prostředí za minutu při rychlosti míchadla 250 otáček za minutu a teplotě 25 ± 2 °C, V počátečním· -stadiu so vytvořila pěna, která naplnila celý fermentor, po 15 až 20 hodinách však pěna počala klesat a po 24 hodinách bylo možno přidat 2 litry vodného ro-zioku· extraktu z kvasnic. Rychlost prΌvzdusňovй·oí pak byla upravena na hodnotu 0,6 litrů vzduchu na litr prostředí za minutu. Znovu. se vytvořila pěna, avšak (po jejím poklesu bylo · .možno po 48 hodinách od začátku kultivace přidat další 2 litry vodného· roztoku extraktu . z kvasnic při rychlosti provzdušnění 0,6 litru, na litr prostředí za ' .minutu. Po 72 hodinách od začátku kultivace bylo možno přidat ještě 2 litry vodného roztoku extraktu z kvasnic.
Celkem tedy obsahoval na konci fermen táce fermentor 41 litrů živného prostředí, to znamená, že byl naplněn na 82 '% své kapacity. Kultivace byla prováděna do 7. dne od začátku kultivace.
Po skončení kultivace bylo mycelium oddě-.eno odstředěním. od živného prostředí a usušeno. Tímto způsobem bylo získáno celkem 810 g mycelia při průměrném výtěžku 19,8 g mycelia/litr živného prostředí, jak je také uvedeno v následující tabulce 2.
Pro srovnání bylo mycelium Coriolus versicolor (Fr.) Quěl. pěstováno ve fermentoru téhož typu jako v příkladu 3, avšak k živnému prostředí nebyl .přidáván · další extrakt z kvasnic. Živné .prostředí mělo složení, . které je uvedeno v tabulce 2, z níž je zřejmé, že . obsahovalo poměrně velké množství extraktu z . kvasnm ve srovnání s množstvím glukózy. V tomto případě však nebylo možno užít více než 25 litrů živného prostředí vzhledem k výjimečně velké tvorbě pěny. Výtěžek mycelia .po 7 dnech byl 22 g na 1 . litr živného prostředí, celkový výtěžek mycelia byl 550 g.
Z těchto výsledků je zřejmé, že způsobem podle vynálezu . je podstatným- způsobem možno zvýšit celkovou produkci mycelia při použití téhož fermentoru.
Poznámka k tabulce 2
V tabulce je koncentrace glukózy v živném- prostředí v obou . případech 7,5 % a koncentrace extraktu z kvasnic včetně přidaných množství . při provádění způsobu podle vynálezu 1,5 °/o.
Způsob podle vynálezu Srovnávací příklad
TABULKA' 2
Počáteční množství prostředí | 35 litrů .obsah glukózy obsah extraktu z kvasnic | 3000 g 25 litrů obsah glukózy obsah extraktu | 1875 g 375 g | |
200 g | z kvasnic | |||
Přidávání roztoku s extraktem | 1. po (24 hod.) (obsah | |||
z kvasnic | extraktu 100. g) | 2 1 | ||
2. ,po (48 hod.) (obsah | ||||
extraktu 100 g) | 2 1 | |||
3. .po 72 hod. (obsah | ||||
extraktu 100 g) | 2 1 | |||
Celkové množství prostředí | 41 litrů | 25 litrů | ||
Podmínky kultivace čas | 7 dní | 7 dní | ||
teplota | 25 ± 2°C | 25 ± 2 °C | ||
mycelium produkcé | 810 g | 550 g |
Příklad 4
Mycellum Coriolus versicolor (Fr.) Quěl. CM-101 se pěstuje svrchu uvedeným způsobem při .použití fermentoru z příkladu 1 o obsahu 50 litrů. Do fermentoru se vloží 30 litrů živného prostředí s obsahem glukózy a extraktu z kvasnic, ták, jak je uvedeno v .tabulce 3, a mycelium se očkuje suspenzí houby. Po 48 a 72 hodinách se přidá vždy 5 litrů extraktu z kvasnic a v pěstování se pokračuje. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 3.
Pro srovnání byla provedena podobná kultivace při použití prostředí s vysokým počátečním obsahem extraktu z kvasnic v poměru ke glukóze bez dalšího přidávání tohoto. extraktu. V tomto případě nebylo možno vzhledem k velké tvorbě pěny užít více než 20 litrů živného prostředí. V důsledku toho byla produkce mycelia nízká, jak je zřejmé z tabulky 3.
TABULKA 3
Způsob . podle vynálezu | Srovnávací příklad | ||||
Počáteční množství prostředí | 30 | litrů .obsah glukózy | 4000 g | 20 litrů obsah glukózy | 2000 g |
obsah extraktu | obsah extraktu | ||||
z kvasnic | 400 g | z kvasnic | 350 g | ||
Přidávání roztoku s extraktem | 1. | po (24 hod.) (obsah | |||
z kvasnic | 2. | extraktu 200 g) po (72 hod.) (obsah | 5 1 | ||
extraktu 100· g) | 5 1 | ||||
Celkové množství prostředí | 40 litrů | 20 litrů | |||
Podmínky kultivace čas | 7 dní | 7 dní | |||
teplota | 26 °C | 26 °C | |||
mycelium produkce | 1110 g | 616 g |
Claims (3)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU '1. Způsob kultivace houby rodu Coriolus z čeledi Polyporaceae třídy Basidiomycetes za provzdušňování a míchání při použití vodného živného prostředí, s obsahem sacharidu jako zdroje uhlíku a alespoň jeden zdroj dusíku ze skupiny extrakt z kvasnic, pepton, aminokyseliny kaseinu a extrakt z masa, které obvykle v průběhu kultivace silně pění, vyznačující se tím, že se na počátku kultivace fermentor naplní pouze do 70 % své kapacity při provzdušňování rychlostí 0,3 až 0,6 litru vzduchu/Htr prostředí a při 20 až 500 otáčkách za minutu, načež se přidává živné .prostředí nebo alespoň jedna z jeho živných složek při poklesu pěnivosti živného prostředí v . průběhu kultivace.
- 2. Způsob podle bodu 1 pro kultivaci houby rodu Coriolus z čeledi Polyporaceae třídy Basidiomycetes za provzdušňování a míchání při použití vodného živného prostředí s obsahem. sacharidu jako· zdroje uhlíku a alespoň jeden zdroj dusíku ze skupiny extrakt z kvasnic, pepton, aminokyseliny · kaseinu a extrakt z masa, které obvykle v průběhu kultivace silně .pění, vyznačující se tím, že se na počátku kultivace fermentor naplní pouze do 70 % své kapacity při provzdušňování rychlostí ·0,3 až 0,6 litru vzduchu/litr prostředí při 20 až 500 otáčkách za minutu, přičemž prostředí, původně obsahující jen . jednu z živných složek se postupně doplňuje při poklesu pěnivosti v průběhu fermentace.
- 3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se do· živného prostředí postupně přidává extrakt. z kvasnic, extrakt z masa, pepton nebo směs aminokyselin z kaseinu.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9307476A JPS5318790A (en) | 1976-08-03 | 1976-08-03 | Cultivating basidiomycete |
JP10338076A JPS5329990A (en) | 1976-08-30 | 1976-08-30 | High yield cultivation of basidiomycetes |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS207474B1 true CS207474B1 (en) | 1981-07-31 |
Family
ID=26434519
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS509177A CS207474B1 (en) | 1976-08-03 | 1977-08-01 | method of culativationof the mushroom of the genus coriulus |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4237233A (cs) |
AR (1) | AR219708A1 (cs) |
AT (1) | AT360942B (cs) |
AU (1) | AU502441B2 (cs) |
BG (1) | BG36045A3 (cs) |
BR (1) | BR7705104A (cs) |
CA (1) | CA1081634A (cs) |
CH (1) | CH632637A5 (cs) |
CS (1) | CS207474B1 (cs) |
DD (1) | DD132592A5 (cs) |
DE (1) | DE2734290C2 (cs) |
DK (1) | DK145801C (cs) |
ES (1) | ES461117A1 (cs) |
FR (1) | FR2360242A1 (cs) |
GB (1) | GB1566356A (cs) |
IN (1) | IN146012B (cs) |
IT (1) | IT1085252B (cs) |
MX (1) | MX5038E (cs) |
NL (1) | NL172967C (cs) |
PL (1) | PL103736B1 (cs) |
RO (1) | RO71889A (cs) |
SE (1) | SE432610B (cs) |
YU (1) | YU41072B (cs) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4311511A (en) * | 1976-07-07 | 1982-01-19 | Gernot Graefe | Method for producing high-grade fertilizer |
US4327181A (en) * | 1980-05-15 | 1982-04-27 | Battelle Development Corporation | Aerobic submerged fermentation of sporulating, ectomycorrhizal fungi |
IT1239755B (it) * | 1989-03-10 | 1993-11-15 | Murata Machinery Ltd | Sistema di pallettizzazione di rocche e dispositivi che lo compongono. |
RU2189395C2 (ru) * | 2000-07-31 | 2002-09-20 | Государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ" | Способ получения белковой биомассы гриба |
RU2186851C2 (ru) * | 2000-07-31 | 2002-08-10 | Государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ" | Способ получения белковой биомассы гриба |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3672953A (en) * | 1970-02-09 | 1972-06-27 | Mobil Oil Corp | Process for growing cells of a microorganism on a carbon-containing liquid substrate |
JPS4946078B1 (cs) * | 1970-02-13 | 1974-12-07 | ||
US4051314A (en) * | 1970-10-14 | 1977-09-27 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polysaccharides and method for producing same |
-
1977
- 1977-07-25 YU YU1831/77A patent/YU41072B/xx unknown
- 1977-07-26 IN IN1143/CAL/77A patent/IN146012B/en unknown
- 1977-07-26 US US05/819,401 patent/US4237233A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-07-26 AR AR268564A patent/AR219708A1/es active
- 1977-07-28 ES ES461117A patent/ES461117A1/es not_active Expired
- 1977-07-29 DE DE2734290A patent/DE2734290C2/de not_active Expired
- 1977-07-29 AT AT562077A patent/AT360942B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-07-29 CH CH940177A patent/CH632637A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-08-01 NL NLAANVRAGE7708473,A patent/NL172967C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-01 BG BG037058A patent/BG36045A3/xx unknown
- 1977-08-01 CS CS509177A patent/CS207474B1/cs unknown
- 1977-08-01 GB GB32274/77A patent/GB1566356A/en not_active Expired
- 1977-08-02 DD DD7700200401A patent/DD132592A5/xx unknown
- 1977-08-02 SE SE7708795A patent/SE432610B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-08-02 CA CA283,920A patent/CA1081634A/en not_active Expired
- 1977-08-02 RO RO7791246A patent/RO71889A/ro unknown
- 1977-08-03 IT IT26442/77A patent/IT1085252B/it active
- 1977-08-03 MX MX775959U patent/MX5038E/es unknown
- 1977-08-03 FR FR7723936A patent/FR2360242A1/fr active Granted
- 1977-08-03 PL PL1977200038A patent/PL103736B1/pl unknown
- 1977-08-03 AU AU27571/77A patent/AU502441B2/en not_active Expired
- 1977-08-03 DK DK347677A patent/DK145801C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-08-03 BR BR7705104A patent/BR7705104A/pt unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE2734290A1 (de) | 1978-02-09 |
YU183177A (en) | 1983-01-21 |
NL172967C (nl) | 1983-11-16 |
PL200038A1 (pl) | 1978-04-24 |
SE432610B (sv) | 1984-04-09 |
YU41072B (en) | 1986-12-31 |
DK145801C (da) | 1983-08-29 |
AR219708A1 (es) | 1980-09-15 |
AT360942B (de) | 1981-02-10 |
CH632637A5 (de) | 1982-10-29 |
AU2757177A (en) | 1979-02-15 |
AU502441B2 (en) | 1979-07-26 |
SE7708795L (sv) | 1978-02-04 |
CA1081634A (en) | 1980-07-15 |
RO71889A (ro) | 1982-02-26 |
DD132592A5 (de) | 1978-10-11 |
IN146012B (cs) | 1979-02-03 |
PL103736B1 (pl) | 1979-07-31 |
BR7705104A (pt) | 1978-05-02 |
NL7708473A (nl) | 1978-02-07 |
US4237233A (en) | 1980-12-02 |
NL172967B (nl) | 1983-06-16 |
BG36045A3 (en) | 1984-08-15 |
MX5038E (es) | 1983-02-23 |
IT1085252B (it) | 1985-05-28 |
DK347677A (da) | 1978-02-04 |
GB1566356A (en) | 1980-04-30 |
DK145801B (da) | 1983-03-07 |
ES461117A1 (es) | 1978-06-16 |
FR2360242A1 (fr) | 1978-03-03 |
ATA562077A (de) | 1980-07-15 |
DE2734290C2 (de) | 1984-04-19 |
FR2360242B1 (cs) | 1981-06-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8124385B2 (en) | Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acid by very high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors | |
AU595481B2 (en) | A lipolytic enzyme derived from a aspergillus microorganism having an accelerating effect on cheese flavor development | |
CA1334515C (en) | Fermentation process for carboxylic acids | |
CN1339581A (zh) | 灰树花大规模液体深层发酵工艺 | |
CS207474B1 (en) | method of culativationof the mushroom of the genus coriulus | |
US3086320A (en) | Process and composition for growing mushroom mycelium submerged fermentation | |
Lübbehüsen et al. | Morphology and physiology of the dimorphic fungus Mucor circinelloides (syn. M. racemosus) during anaerobic growth | |
CA2025678C (en) | Natural delta-lactones and process of the production thereof | |
Larroche et al. | Characterization of the growth and sporulation behavior of Penicillium roquefortii in solid substrate fermentation by material and bioenergetic balances | |
Martin et al. | Growth of Agaricus campestris NRRL 2334 in the form of pellets | |
EP1945786A2 (en) | Fermentation processes for the preparation of tacrolimus | |
Hansson et al. | Effects of cultivation techniques and media on yields and morphology of the basidiomycete Armillaria mellea | |
CN112625914B (zh) | 一种利用气升式发酵罐重复分批发酵灵芝的方法 | |
US4369253A (en) | Growth promoting method for basidiomycetes | |
MaNu-Tawiah et al. | Study of operational variables in the submerged growth of Pleurotus ostreatus mushroom mycelium | |
SU719513A3 (ru) | Способ культивировани базидиомицетов | |
Weete | Introduction to fungal lipids | |
CN112391299B (zh) | 亚硫酸盐联合甘油在提高酿酒酵母油脂含量中的应用及方法 | |
Sedlmayr et al. | Physiological studies on Calvatia species. I. Vitamin requirements | |
Martin et al. | Production of mushroom mycelium in supplemented acid-extract from peat | |
KR910000453B1 (ko) | 감마-리놀렌산을 생산하는 무코르 속균(Mucor SP) : KCTC 8405P, 및 이를 이용한 감마-리놀렌산의 제조방법 | |
Husain et al. | A study on synthesis of fungal protein by Aspergillus oryzae on molasses, a by-product of sugar industry. | |
Naguib et al. | Fat synthesis from supplemented beet molasses by penicillium soppi zaleski in still and shaken cultures | |
JPS5817589B2 (ja) | コウボノセイゾウホウ | |
Ochaikul et al. | Optimization of Single Cell Protein Production from Cassava Processing Wastewater by Mixed Culture of Endomycopsis fibuligera TISTR 5097 and Candida utilis TISTR 5046 |