CS206971B1 - Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes - Google Patents

Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes Download PDF

Info

Publication number
CS206971B1
CS206971B1 CS648579A CS648579A CS206971B1 CS 206971 B1 CS206971 B1 CS 206971B1 CS 648579 A CS648579 A CS 648579A CS 648579 A CS648579 A CS 648579A CS 206971 B1 CS206971 B1 CS 206971B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
maltooligosaccharides
glucanes
isolation
maltooligosacharides
hydrolyzators
Prior art date
Application number
CS648579A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Vojtech Balik
Juraj Zemek
Karol Babor
Rozalia Sandtnerova
Original Assignee
Vojtech Balik
Juraj Zemek
Karol Babor
Rozalia Sandtnerova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vojtech Balik, Juraj Zemek, Karol Babor, Rozalia Sandtnerova filed Critical Vojtech Balik
Priority to CS648579A priority Critical patent/CS206971B1/cs
Publication of CS206971B1 publication Critical patent/CS206971B1/cs

Links

Landscapes

  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

ČESKOSLOVENSKÁ SOCIALISTICKÁ
REPUBLIKA (19)
POPIS VYNÁLEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU (61) (23) Výstavná priorita (22) Přihlášené 26 09 79 (21) PV 6485-79 206 971 (Π) (Bl) (51) Int. Cl3 c 07 H 3/06
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (40) Zverejnené 15 09 80(45) Vydané 01 11 83 (75)
Autor vynálezu BÍLIK VOJTECH RNDr. CSc., BRATISLAVA, ZEMEK JURAJ ing. CSc., LEDNIC A,BABOR KAROL ing. CSc. a SANDTNEROVÁ ROZÁLIA RNDr., BRATISLAVA (54) SpĎsob izolácie (U- 14 C)maltooligosachařidov z hydrolyzátov (17-1¼)^ -glukánov 1
Podstata vynálezu spočívá v tom, že nižšie maltooligosacharidy - maltoza až maltooktó-za - sa po převedení na odpovedajúce 4-nitrofenylhydrazóny velmi účinné rozdeTujú chromato-grafiou na papieri.
Preparatívne rozdelenie maltooligosacharidov sa uskutečňuje na stípci aktívneho uhliapři vhodnom měnění gradientu elučného systému voda - etanol (R. L. Whistler, D. F. Durso; J. Am. Chem. Soc. 72, 677 (1950); ibid. 74. 5140 (1952)), resp. na stípci Bio-Gel P-2 elú-ciou vodou (M. John, G. Trenel, H. Dellweg; J. Chromatogr. 42, 476 (1969)) alebo iónome-niča XE 200 (J. F. Deaton; Ger. Offen. 2725964, CA. 88, 63494b (1978)). Kvalitatívny dókaz,připadne stanovenie maltooligosacharidov je tiež založené na ich vzájomnom rozdělení papie-rovou chromatografiou (J. Stanek, M. Cervný, J. Pacák; Oligosacharidy, p. 328, Nakl. ČSAV,Praha 1962; H. Bender; Carbohydr. Res. 65, 85 (1978); K. Umeki, K. Kainuma; J. Chromatogr. 242 (1978)). Rýchlu informáciu o zložení zmesí oligosacharidov typu oi-glukánov posky-tuje chromatografia na tenkej vrstvě celulózy (R. Spitschan; J. Chromatogr. 61, 169 (197D),kremeliny (F. W. Collins, K. R. Chandorkar; J. Chromatogr. 56. 163 (197D), silikagelutD. Nurok, A. Zlatkis; Carbohyd. Res. 65. 265 (1978)), resp. zmesi silikagélu a kremeliny(C. T. Mansfield, H. G. McElroy Jr.; Anal. Chem. JJ, 586 (197D). Výhodou navrhovaného sp8-sobu izolácie maltooligosacharidov oproti uvedeným chromatografickým deleniam je, že .malto-oligosacharidy vo formě ich 4-nitrofenylhydrazónov sa chromatografiou na papieri vysoko účin-né navzájem rozdel’ujú. 206 971 2 208 971
Podstata vynálezu spočívá v tom, že maltooligosacharidy sa a 4-nitrefenyIhydrszínomv metanol-vodnom roztoku konvertujú na odpovedajúce 4-nitrofenylhydrazóny, ktoré aa chroma-tografiou na papieri rozdelia a z izolovaných hydrazonov aa známým poatupom napr. reakcious benzalóehydom uvolnia příslušné maltooligosacharidy.
Technické prevedenie izolácie maltooligosacharidov je velmi jednoduché a získané jed-notlivé maltooligosacharidy vykazujú vysoký stupen Čistoty. Příklad
Vodorozpustný (U-^c) e6-glukán (10 pCi; glukán izolovaný z riad Chlorella sp., produktÚstavu pře výskům, výrobu a využitie rádioizotópov, Praha), připadne riedený neznačenýmglukánom (50 mg; glykogén z ustríc, produkt JT Baker Chemical Co.) sa dá do vody (2 ml), doktorej sa súCasne přidá imobilizovaná ct-amyláza (ex saliva) na celulózovom nosiči (5 mg; 4 až 8 U/mg, připravená podlá J. Zemek, J. Augustin; fis. vynález 189472 (1978)1 a reakčnázmes sa nechá stát pri teplote 20 až 25 °C po dobu 3 až 5 dní. Imobilizovaný enzým sa od-filtruje, k filtrátu sa přidá 2 % metanolový roztok 4-nitrofenylhydrazínu (4 ml) a zmes sazahrieva 7 hodin pri 60 °C. Reakčná zmes sa nanesie na chromatografický papier (46 x 56 cm,Whatman No 1) a chromatografuje elučným systémom 1-butanol-etanol-voda (5:1:4 V/V) priteplote 20 až 25 °C po dobu 24 až 30 hodin. Pohyblivost jednotlivých 4-nitrofenylhydrazó-nov maltooligosacharidov je uvedená v tabulke 1 (pri dostatočných koncentráciách jednotli-vých hydrazonov je možné pozorovat im odpovedajúce jasnožlté zóny na chromatograme).
Tabulka 1
Pohyblivost 4-nitrofenylhydrazónov saeharidov pri chromatografii na papieri 4-nitrofenylhydrazón R*) R++) glukózy 1,00 3,43 maltozy 0,63 2,00 maltotriózy 0,43 1,50 maltotetraózy 0,30 1,00 maltopentaózy 0,18 0,62 maltohexaózy ' 0,11 0,39 maltoheptaózy 0,06 0,21 maltooktaózy 0,035 0,12 4-nitrofenylhydrazín 1,60 5,49 ♦^vztahované na pohyblivost 4-nitrofenylhydrazónu D-glukózy, ♦♦^vztahované na pohyblivost D-glukozy Z chromatografického papiera sa jednotlivé zóny 4-nitrofenylhydrazónov vystrihnú(z póvodnej rádioaktivity (U-14C)ot-glukánu je v zóně 4-nitrofenylhydrazónu maltózy

Claims (1)

  1. 3 206 971 29 až 34 %, maltotriozy 19 až 22 %, maltotetraózy 10 až 13 % a maltopentaozy 10 až 12 %aktivity), zalejú vodou (10 ml) a po pol hodinovom etátí při teplote mieatnosti sa ku kaž-dej frakcii přidá metanol (1 ml) a benzaldehyd (1 ml) a zmes sa udržuje pri teplote 60 °C15 hodin. Potom sa roztok přefiltruje, filtrát zahustí za zníženého tlaku (teplota kúpel’ado 40 °C), destilačný zvyšok sa nanesie na chromatografický papier a chromatografuje eluč-ným systémom 1-butanol-etanol-voda pri teplote miestnosti 5 až 6 dní, čím aa získá osobitnečistý jednotlivý meltooligosacharid (ca 50 %· aktivity pfivodného fenylhydrazonu). Maltotrioza ako aj ňalšie oligosacharidy maltózového radu sú dĎležitýmisubstrátmi prebiochemické a histochemické vyšetrenia, a to jednak v oblasti priemyselnej mikrobiologie(sledovanie kvasných procesov), v klinickéj biochémii a histochémii (stanovenie aktivitamylolytických enzýmov a ich lokalizácia) a v základnom výskume chémie a biochémie sachari-dov. Použitie značkovaných substrátov umožňuje rozpracovanie mikrometodík vhodných pře analýzu biologického materiálu odobraného v obmedzenom množstve (napr. k diagnostike vrode-ných porúch metabolizmu glykogénu). PREDMET VYNÁLEZU SpSsob izolácie (U-^C) maltooligosacharidov z hydrolyzátov (U-^^C) oc-glukánov, vyzna-čujúci sa tým, že maltooligosacharidy sa převedu v metanol-vcdnom roztoku s 4-nitrofenyl-hydrazínom na odpovedajúce 4-nitrofenylhydrazony maltooligosacharidov, ktoré sa rozdeliapapierovou chromatografiou a z izolovaných hydrazónov sa jednotlivé sacharidy uvol’nia zná-mým spSsobom, výhodné reakciou s benzaldehydom.
CS648579A 1979-09-26 1979-09-26 Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes CS206971B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS648579A CS206971B1 (en) 1979-09-26 1979-09-26 Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS648579A CS206971B1 (en) 1979-09-26 1979-09-26 Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS206971B1 true CS206971B1 (en) 1981-07-31

Family

ID=5412007

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS648579A CS206971B1 (en) 1979-09-26 1979-09-26 Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS206971B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wallenfels et al. The enzymic synthesis, by transglucosylation of a homologous series of glycosidically substituted malto-oligosaccharides, and their use as amylase substrates
Rosevear et al. Synthesis and solution conformation of the type 2 blood group oligosaccharide. alpha. LFuc (1. fwdarw. 2). beta. DGal (1. fwdarw. 4). beta. DGlcNAc
Zeng et al. Regioselective synthesis of p-nitrophenyl glycosides of β-D-galactopyranosyl-disaccharides by transglycosylation with β-D-galactosidases
Nieto-Domínguez et al. Thioglycoligase derived from fungal GH3 β-xylosidase is a multi-glycoligase with broad acceptor tolerance
Zou et al. Substrate specificity of galactokinase from Streptococcus pneumoniae TIGR4 towards galactose, glucose, and their derivatives
JPH0649715B2 (ja) 末端にイノシト−ル残基を結合したグルコオリゴ糖およびその製造方法
Amemura et al. Extracellular Oligosaccharides and Low-M r Polysaccharides Containing (1.2)-β-d-Glucosidic Linkages from Strains of Xanthomonas, Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae
Xin et al. Characterization of the in vitro synthesized arabinan of mycobacterial cell walls
Pazur et al. Studies on Inulin. The Preparation and Properties of Inulobiose1
Pazur et al. The synthesis of 1, 6-anhydro-β-D-glucopyranose and D-glucosyl oligosaccharides from maltose by a fungal glucosyltransferase
Ogata et al. A novel analytical procedure for assaying lysozyme activity using an end-blocked chitotetraose derivative as substrate
Zhang et al. Acarbose glycosylation by AcbE for the production of acarstatins with enhanced α-amylase inhibitory activity
Schwartz et al. Modification of sialic acid metabolism of murine erythroleukemia cells by analogs of N-acetylmannosamine
Murata et al. Enzymic synthesis of 3′-O-and 6′-ON-acetylglucosaminyl-N-acetyllactosaminide glycosides catalyzed by β-N-acetyl-D-hexosaminidase from Nocardia orientalis
CS206971B1 (en) Method of isolation of the /u-14c maltooligosacharides from the hydrolyzators of u 14c/alpha-glucanes
Urashima et al. Chemical characterization of sialyl oligosaccharides in milk of the Japanese black bear, Ursus thibetanus japonicus
Murata et al. Galactosyl Transfer onto p-Nitrophenyl β-d-Glucoside Using β-d-Galactosidase from Bacillus civculans
Kim et al. Catalytic properties of a mutant β-galactosidase from Xanthomonas manihotis engineered to synthesize galactosyl-thio-β-1, 3 and-β-1, 4-glycosides
Meng et al. α-Glucosidase inhibitory effect of a bioactivity guided fraction GIB-638 from Streptomyces fradiae PWH638
US6569649B2 (en) Compositions and methods for saccharide synthesis
Bårström et al. New derivatives of reducing oligosaccharides and their use in enzymatic reactions: efficient synthesis of sialyl Lewis a and sialyl dimeric Lewis x glycoconjugates
Zeng et al. Convenient enzymatic synthesis of a p-nitrophenyl oligosaccharide series of sialyl N-acetyllactosamine, sialyl Lex and relevant compounds
Li et al. Galactosyl transfer reactions catalysed by pneumococcal α-galactosidase
Smith et al. A Study of some Enzymes in Extracts of a Non-Capsulated Strain of Pneumococcus Concerned with Uridine Pyrophosphoǵlycosyl Metabolism
Wu et al. L-uridine: synthesis and behavior as enzyme substrate