CS206598B1 - Způsob výroby živé vakcíny příušnic - Google Patents

Způsob výroby živé vakcíny příušnic Download PDF

Info

Publication number
CS206598B1
CS206598B1 CS480577A CS480577A CS206598B1 CS 206598 B1 CS206598 B1 CS 206598B1 CS 480577 A CS480577 A CS 480577A CS 480577 A CS480577 A CS 480577A CS 206598 B1 CS206598 B1 CS 206598B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
vaccine
culture
strain
mumps
virus
Prior art date
Application number
CS480577A
Other languages
English (en)
Inventor
Odisseev H Hristov
Petrov G Demirev
Original Assignee
Odisseev H Hristov
Petrov G Demirev
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Odisseev H Hristov, Petrov G Demirev filed Critical Odisseev H Hristov
Priority to CS480577A priority Critical patent/CS206598B1/cs
Publication of CS206598B1 publication Critical patent/CS206598B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu výroby Živé vakcíny příušnic.
Epidemická parotitis je velmi rozšířeným onemocněním na celém světě. V Bulharsku je každoročně registrováno průměrně více než 25 000 případů. Kromě mírné klinické formy jsou často pozorována vážná onemocnění četných orgánů a systémů často končících trvalým poškozením jako paralýzou, neplodností, cukrovkou, thyreoitis, hluchotou, poruchou ledvin, kardiovaskulárního systému, poškozením plodu u těhotných žen atd. Epidemie se vyskytují ve městech a na vesnicích běžně a ve větších městech přetrvávají epidemie celý rok. Proto je zapotřebí vyvinout účinné prostředky proti infekčnímu zánětu příušnic.
První pokusy o dosažení profylaxe proti epidemické parotitidě za použití therapeutickéiho séra byly neúspěšné. Navržené vakcíny připravené z usmrcených virů nebyly účinné a nemohly se použít v praxi.
Ukázalo se, že nejperspektivnější je živá vakcína. Avšak žádné z těchto vakcín nebyly doposud mezinárodně uznány. První pokusy, které provedl Enders a spol. (Enders et al. J. Immunol., 54, 1946, 281-291), zůstaly ve sféře pouze pokusů. Desetiroční studium živé vakcíny, získané z Leningradského kmene (Proceedings of the EMI Institute Pirogov v. 16, 1958, 116-122, KLyachko N. S., A. A. Smorodintzev - Acta virol., 1958, 3, 145-151), které provedli Smorodintzev A. a Klyachko, nebylo ukončeno praktickou aplikací. Podobný osud měla vakcína získaná Copelovicem a spol. (Copelovic et al. Cercetari asupera valorii - Immunogene a uni vaccin antiurlian preparát cutulpini autochtoni, stuor. Cercetari inframicrobiologis, 1962, 4, 473-480).
Další pokusy Nassibova a Smorodintzeva (Nassibov Μ. N., A. A. Smorodintzev, Voprosi vi206598
6598 rusologii, 1968, 3, 336-340) and of Andjaparidze and assoc. (Andjaparidze et al. - Rev. children’s infections, 1971) s novými kmeny Leningrad 1, 2 a 3 jsou stále ve stádiu laboratorních experimentů. Ve stádiu experimentace jsou také pokusy Starkeho a spol.
(Starke G. et al. Verfahien tur Hherstellung von mumps - lebenvirus implet. off. Pat. NDR č. 88169) s kmenem Leningrad 3 pěstovaným na ledvině štěněte. V počátečním stádiu pokusů „sou také práce japonských autorů s kmeny Towata a Urabe (Hosai et al. Studies of live attenuated mumps virus vaccine. Biven j 13, 1970, 2, 121-126).
Pouze Hilleman a spol. ve Spojených státech dělají pokusy ve. velkém měřítku s kmenem Jeryl Lynn a se získanou vakcínou (Bujnak E., B. Hilleman MR., Mem anor. Co. Patent USA č. 3 555 149). I Endersův kmen nemá větší použiti z důvodů pouze známých jeho autorům.
Kmen Leningrad se nepoužívá, protože je izolován na kuřecích zárodcích, z čehož se také získá vakoína. Kuřecí zárodky jsou nositeli virů kuřecí leukemie, proto stále trvá velké nebezpečí kontaminace vakcíny těmito viry. Později bylo zjištěno, že tento kmen má nízkou imunogenitu. Stejnému nebezpečí jsou vystaveny kmeny Copelovice a spol.
Kmeny Leningrad 1 a 2 jsou také izolovány na kuřecích zárodcích a proto nemají ze stejného důvodu použití. Kmen Leningrad 3 je vypěstován na fibroblastech buněk kultury a.japonských křepelek, avšak jeho široké použití je momentálně brzděno technologickými, vědeckými a organizačními důvody. Aplikace vakcíny získané z kmene Leningrad 3-Pankov vypěstovaného na ledvinách čerstvě narozených štěňat, byla zastavena pro potíže vědeckého původu. Kmen Jeryl Lynn je izolován na kuřecích zárodcích z aleukemiokých ptáků, tzv, zlatých vejcích, kde se také získá vakcína, což činí její výrobu nákladnější. Vakcíny z kmenů Towata a Urabe se získají na stejných vejcích.
Předmětem vynálezu je způsob výroby živé vakcíny příušnic s domácím kmenem, který má být areoktogenický, imunogenicky a epidemiologicky účinný. Použil se kmen Sofia 6, uložený 7. prosince 1976 pod číslem 111 v bulharské mikrobiologické sbírce v Institute for Control on the Medicaments, 26, VI. Zainov. Blv., Sofia, Bulgaria.
Způsob výroby živé vakcíny příušnic se vyznačuje tím, že se použije kmen Sofia 6 ICM č. 111, který se izoluje od pacienta na vláknité kultuře z ledviny čerstvě narozených morčat a zředí se 12 až 25násobným pasážováním na stejné kultuře a 3. až 5. den po přípravě kultury se tato infikuje při 0,01 až 1,00násobné dávce, kapalina obsahující virus se sbírá 3x bez monobuněčné vrstvy a následuje lyofilizace po 48 hodin při teplotě kondenzátoru -50 °C, vakuu sušicí komory až 100 mikrometrů a teplotě produktu v komoře na konci sušení až 25 °C.
Konečný produkt také prochází dalšími kontrolami na biologickou aktivitu, sterilitu, neškodnost, atoxioitu, reaktogenní a imunogenní vlastnosti. Vakcína tvoří světle růžové tablety v ampuli a má 1 rok účinnost. Před použitím se vakcína rozpustí v destilované vodě a infikuje se subkutánně v 0,5 ml objemu, obsahujícím 1 000 až 10 000 infekčních jednotek.
Při imunizaci se nezvýší teplota a nenastanou žádné obecné a místní reakce. Pouze v některých případech se pozoruje zvýšení teploty, avšak může se také zaznamenat při kontrole, což ukazuje, že teplota je následkem některých dalších příčin, nejčastěji katarů horních dýchacích cest.
U imunizovaných lidí se zvýší protilátkový titr na 95 %, s geometrickým středem titru virů neutralizovaných protilátkami 1:22,6 a hemaglutinační inhibice protilátky na 83,5 %, s geometrickým středem titru 11,3.
Uspokojivá epidemiologická účinnost vakcíny je potvrzena její aplikací v ohnisku epidemie a také jejím masovým použitím.
Po aplikaci vakciny v ohniscích epidemie se epidemický proces rychle přeruší, počet pacientů klesne a zkrátí se doba karantény. V ohnisku, kde se aplikovala vakcína, trvala epidemie průměrně 30 dni, zatímco u kontrol trvala téměř 120 dní.
Při masové aplikaci vakciny byla také prokázána její vysoká účinnost. Nyní, po úplné vakcinaci ve městě Plovdivu, se u všech dšti od 1 do 12 let, které neměly-epidemickou parotitidu, snížila nemocnost 12 až 17násobně. Pro tuto oblast měla vakcína index účinnosti nad 10 a koeficient ochrany áž 97 %. V minulosti zaujímala infekční parotitida v určitých letech 1., 2. nebo 3. místo na seznamu nakažlivých onemocnění, zatímco nyní je jednou z posledních na seznamu. Dříve představovala epidemická parotitis 22,3 % ze všech infekcí a
25,8 % z kapénkových infekcí, zatímco v r. 1973 představovala 2,9 % až 4,6 %. V minulosti tvořilo ohnisko se 4 a více případy nad 90 %, zatímco po imunizaci klesl jejich počet na 5 %. Doposud získané výsledky ukazují perspektivnost, vakciny v boji proti epidemické parotitidě v této zemi.
Způsob má následující výhody:
Pro vakcínu bylo použito domácího kmene, který se izoluje na kultuře, na které se později získá samotná vakcína, zabezpečená tímto způsobem od vedlejší kontaminace. Použije se domácí substrát, tj. ledviny morčat, na kterých se také získá vakcína spalničkového viru a které jsou zárukou čistoty a na druhé straně je snadno dostupný a levný. Technologie pro přípravu vakciny byla vypracována při zajištění vysoké a levné produkce, několikanásobně levnější než dosud používaná. Způsob zajišťuje produkci areaktogenicky, imunogenicky a epidemiologicky účinné vakciny při účinnosti alespoň jednoho roku.
Příklad 1 objasňuje bez omezení způsob podle vynálezu.
Přikladl
Příprava kmene Sofia 6.
Kmen Sofia 6 se izoluje z dítěte nemocného pravostrannou epidemickou parotitidou. Třetí den nemoci se odebere dítěti slina, která se po. úpravě kultivuje v pěti zkumavkách na kultuře z ledvin morčat. Infikované buňky neukazují .žádné morfologické změny. Hemiadsorpce vyvolaná 4., 6., 8. a 10. den je negativní. Desátý den se vytvoří směs z kapalné kultury ve zkumavkách. Reakce hemagglutinace je negativní. Provede se nové infekce pěti nových zkumavek slepý pokus. Infikované kultury neukazuji žádné morfologické změny, avšak zkoušky hemaadsorpce ukazují 4. den pozitivní výsledky. Sebraná kapalná kultura je 8. den počátečním materiálem na následující pasáž. 'Kinen se podrobí celkem 25 pasážím na tkáňové kultuře z ledvin morčat při jediném výběru každé z nich, aby nastalo zředění. Materiál z poslední pasáže slouží jako vakcinální kmen pro výrobu vakciny.
Popis výroby vakciny v sériích:
Pro výrobu poloproduktu pro 1 sérii vakciny se připraví kultura z ledvin čerstvě narozených morčat ve 30 nádobách o kapacitě 1 200 ml a. 3 nádobách o kapacitě 150 ml. 4. den po vytvoření monovrstvy se infikuje 27 velkých nádob s kulturou vakcinálnim virem. Zbylá kultura v 3 velkých nádobách a 3 malých nádobách se nechá neinfikovaná, tj. připraví se jako kontrola. Udržovací prostředí kultury je podle Parkera (prostředí 199) bez telecího séra. 2., 4. a 6. den se kapalina obsahující virus shromáždí a v prvních 2 případech se přidá nová kultura, zatímco ve 3. případě se kultura po odebrání tekutiny odstraní. V takto shromážděném poloproduktu se stanoví titr viru (ne menší než 10^·.5 ml), sterilita (bez jakýchkoli infekčních zárodků), obsah albuminu (ne větší než 0,10 mg/ml podle Lowry), specifita (plně neutralizováno specifickým sérem), neškodnost a atoxicita vůči zvířatům.
Na konec kultivace se přikapou do 3 malých nádob lidské, kuřecí a morčecí erythrocyty, aby se zjistila případná vedlejší hemadsorpce virů a tekutina ve 3 velkých kontrolních nádobách se zkouéí na sterilitu a nepřítomnost dalších virů. Po zkoušce kontrolních vzorků se poloprodukt shromáždí do série a přidá se stabilisátor, sachorosa a želatina, načež se rozlije do 1 ml ampulí a lyofilizuje se. Suchý produkt se zkouší opět na sterilitu (bez jakýchkoliv infekčních zárodků), biologickou aktivitu (titr nesmí být menší než 1Ο^'^ΧΑάΒ^θ//0,5 ml), neškodnost a atoxicitu na laboratorních zvířatech, reaktogenní a imunogenní vlastnosti u 20 dětí (jsou přípustný slabé symptomy příušnic’bez napadení jakéhokoliv dalěího orgánu do 1 % imunizovaných a konverse síry větší než 80 %, stanoveno podle reakce pro neutralizaci viru). Potom se označí série , dávka na ampulích a doba účinnosti a produkt je připraven pro použití.

Claims (1)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Způsob výroby živé vakcíny příušnic, vyznačený tím, že se použije kmen Sofia 6, ICM č. 111, který se izoluje od pacienta na vláknité kultuře z ledviny čerstvě narozených morčat a zředí se 12 až 25násobným pasážováním na stejné kultuře a 3. až 5. den po přípravě kultury se tato infikuje při 0,01 až 1,00násobné dávce, kapalina obsahující virus se sbírá 3x bez monobuněčné vrstvy a následuje lyofilizaee po 48 hodin při teplotě kondenzátoru -50 °C, vakuu sušicí komory až 100 mikrometrů a teplotě produktu v komoře na konci sušení až 25 °C.
CS480577A 1977-07-19 1977-07-19 Způsob výroby živé vakcíny příušnic CS206598B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS480577A CS206598B1 (cs) 1977-07-19 1977-07-19 Způsob výroby živé vakcíny příušnic

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS480577A CS206598B1 (cs) 1977-07-19 1977-07-19 Způsob výroby živé vakcíny příušnic

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS206598B1 true CS206598B1 (cs) 1981-06-30

Family

ID=5391613

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS480577A CS206598B1 (cs) 1977-07-19 1977-07-19 Způsob výroby živé vakcíny příušnic

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS206598B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Campbell et al. Fowl plague virus from man
Coleman et al. The HONG KONG/68 influenza A2 variant
US5597721A (en) Preparation of antigens of and of vaccines for the virus of mystery disease, antigens and vaccines obtained for the prevention of this disease
Mumford et al. Studies with inactivated equine influenza vaccine: 2. Protection against experimental infection with influenza virus A/equine/Newmarket/79 (H3N8)
Taylor-Robinson et al. Varicella virus
US4122167A (en) Respiratory synctial vaccine
US3959466A (en) Highly attenuated cytomegalovirus vaccine and production thereof
Örvell et al. Further studies on the immunologic relationships among measles, distemper, and rinderpest viruses
JPS6216933B2 (cs)
Nguyen et al. Low titer maternal antibodies can both enhance and suppress B cell responses to a combined live attenuated human rotavirus and VLP-ISCOM vaccine
CN108969492B (zh) 一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗及其制备方法
RU2603003C1 (ru) Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типов а, о, азия-1
RU2378014C2 (ru) Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная
Kulkarni et al. Assessment of the immune response to duck plague vaccinations
CS203080B2 (en) Method of preparing the imping agent against the influenza,containing the weakened h3 n2 strain of inflenza virus
US4145252A (en) Respiratory syncytial vaccine
RU2665849C1 (ru) Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О
Liebhaber et al. STUDIES OF A MYXOVIRUS RECOVERED FROM PATIENTS WITH INFECTIOUS HEPATITIS: I. ISOLATION AND CHARACTERIZATION
CN108703952B (zh) 一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗用冻干保护剂及应用
CS206598B1 (cs) Způsob výroby živé vakcíny příušnic
FUKUMI et al. Studies on the adenovirus as an etiological agent of pharyngoconjunctival fever
US3098011A (en) Process of producing a vaccine against distemper
US3318775A (en) Production of viral antigens with n-acetyl-ethyleneimine
GB1560185A (en) Respiratory syncytical virus vaccine
CN108704131B (zh) 一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗用疫苗稀释液及其应用