CS206061B1 - Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče - Google Patents
Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče Download PDFInfo
- Publication number
- CS206061B1 CS206061B1 CS478679A CS478679A CS206061B1 CS 206061 B1 CS206061 B1 CS 206061B1 CS 478679 A CS478679 A CS 478679A CS 478679 A CS478679 A CS 478679A CS 206061 B1 CS206061 B1 CS 206061B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- adsorption
- solution
- microorganisms
- organoids
- microorganism
- Prior art date
Links
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 title claims description 20
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 12
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 title claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 239000000969 carrier Substances 0.000 title claims description 7
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 claims description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 8
- PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Chemical group [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 12
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 9
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 3
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- QAQSNXHKHKONNS-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-2-hydroxy-4-methyl-6-oxopyridine-3-carboxamide Chemical compound CCN1C(O)=C(C(N)=O)C(C)=CC1=O QAQSNXHKHKONNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000195908 Mnium Species 0.000 description 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- FXQJFHYFOGHZTB-UHFFFAOYSA-M carbethopendecinium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCC([N+](C)(C)C)C(=O)OCC FXQJFHYFOGHZTB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- BEIHVSJTPTXQGB-QIXACUJNSA-N n'-anilino-n-phenyliminobenzenecarboximidamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1N\N=C(C=1C=CC=CC=1)\N=NC1=CC=CC=C1 BEIHVSJTPTXQGB-QIXACUJNSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče.
V posledních letech roste zájem o adsorpci buněčných organoidů a mikroorganismů. Je známé použití polyclektrolytů k čištění vody i vzduchu od patogenních látek, virů a podobně. Imobilizací mikroorganismů na vhodné nosiče je možné získat fungující enzymatické systémy, které dovolují opakované, resp. kontinuální provedení požadovaných reakcí. Zvláštní význam má adsorpce chloroplastů, buněčných organoidů, pomocí kterých se uskutečňuje fotosynthesa (viz Berezin I. V., Antonov V. K., Martinek K.: Imobilizovannye fermenty, Iz. Moskovskovo Universiteta, Moskva 1976).
Jedním ze způsobů adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů je nekovalentní vazba s nosiči, které mají povahu iontoměničů, či polyelektrolytů. Získávají se však nosiče s nízkou adsorpční mohutnosti a nízkou odolností proti vymývání do vodných roztoků.
Uvedené nedostatky odstraňuje způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů podle vynálezu.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že se na pevný nosič působí suspenzí mikroorganismů, resp. buněčných organoidů za přítomnosti kationoidního tenzidu o koncentraci 2.10~3 až 10~2 moll-1. S výhodou je možné použít 2,3,5-trifenyltetrazoliumchlorid nebo cetyltrimetylamoniumbromid. Na pevný nosič se působí suspenzí mikroorganismů, resp. buněčných organoidů ve vodě za přítomnosti kationoidních tenzidů, obsahujících objemný kationt. Tyto blokují záporný povrchový náboj vnějších buněčných membrán. Výběr kationoidních tenzidů není prakticky omezen. S úspěchem je možné použít cetyltrimethylamoniumbromid, cetylpyridiniumbromid, N-(a-karbethoxypentadecyl)-trimethylamoniumbromid a podobně. Jiné objemné kationty jsou použitelné, jestliže jejich relativní molekulová hmotnost je větší nebo alespoň rovna 100. V kombinaci s křemičitanovými nosiči je zvlášť výhodné použití cetyltrimethylamoniumbromidu a 2,3,5-trifenyltetrasoliumchloridu, které se používají ve formě 10”3 až 10“ 2 mol l1 roztoků.
Podstata vynálezu je blíže objasněna v následujících příkladech.
206 061
Příklad 1 .2
Adsorpce kvasinek {Saccharomyces cerevisiae) na kaolin pomocí 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloridu (TFT), resp. cetyltrimetylamoniumbromidu (CTAB).
Byla použita suspenze 3 g kvasinek ve 100 ml roztoku. Κ 1 g kaolinu bylo přidáno 10 ml suspenze kvasinek a 10 ml 10“2 mol l“1 roztoku TFT. V dalších dvou vzorcích byl roztok 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloridu nahrazen 10 ml 10“2 mol l”1 roztoku cetyltrimethylamoniumbromidu, resp. 10 ml vody. Po krátkém zamíchání byl roztok ponechán, aby se usadila suspenze kaolinu s neadsorbovánými kvasinkami. Při použití TFT i CTAB došlo k úplné adsorpci kvasinek a vydělení čirého roztoku nad suspenzí. Ke kvasinkám adsorbovaným na povrchu nosiče bylo přidáno 5 ml 1% roztoku glukózy, 10 ml yj mol l-1 Na2HPO4 a 10 ml 10“2 mol l“1 roztoku 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloridu. Vzorky byly ponořeny do vodní lázně stabilizované na 37 °C. Postupně se vyvíjející červené zbarvení trifenylformazanu indikuje schopnost kvasinek štěpit glukózu. Pozitivní reakci poskytuji pbuze kvasinky adsorbované prostřednictvím 2,3,5-trifenyltetrazolium-chloridu, zatímco kationoidní tenzid (CTAB) inhibuje jejich funkci. Při prvém způsobu adsorpce je možné získat životaschopné mikroorganismy naadsorbované-na nosiči, druhý způsob adsorpce najde použiti při čištění roztoků od nežádoucích mikroorganismů. Výhodou použití obou objemných kationtů je navíc agregace částic nosiče, která výrazně zrychluje jeho sedimentaci a zlepšuje filtrovatelnost.
Příklad 2
Adsorpce chloroplastů (měřík, mnium) na silikagel pomocí cetyltrimethylamoniumbromidu (CTAB).
Byla použita suspenze chloroplastů v roztoku 0,4 mol l“1 sacharosy, 0,01 mol l“1 NaCl a 0,05 mol l-1 tris-HCl pufru (pH 7,80). obsah barviva (chlorofyl a, b) byl 141 mg/1.
Ke 4 g silikagelu byly přidány 2 ml suspenze chloroplastů, 20 ml 10“ 2 M roztoku cetyltrimethylamoniumbromidu, resp. 20 ml vody. Po 4 hodinách míchání bylo po sedimentaci silikagelu odebráno 0,5 ml vodné suspenze chloroplastů, které nebyly naadsorbovány na nosiči, do 5 ml acetonu. Po přidání 0,5 ml vody, odstředění (10 min při 4200 ot. min“1), byla změřena absorbanee roztoku v oblasti vlnových délek 630 až 680 nm. Procentové zastoupení chloroplastů ve vodné suspenzi a na povrchu nosiče bylo vypočítáno pomocí kalibračních grafů. Za přítomnosti kationoidního tenzidu proběhla adsorpce z 60 % a adsorbát je odolný proti vymývání. Z čistých roztoků (v nepřítomnosti tenzidů) byla absorpce chloroplastů nepatrná a promytím vodou je možné nosič chloroplastů zcela zbavit. Adsorpční schopnost chloroplastů vůči upravenému povrchu silikagelu je možné zvýšit alkalizováním roztoku (pokud to dovolí pufrační schopnost silikagelu). Stejných výsledků je možné dosáhnout adsorpci chloroplastů na silikagel, který byl předtím vystaven osmihodinovému působení 10“ 2M roztoku CTAB v množství 5 ml/g nosiče a po adsorbci kationoidního tenzidu promyt vodou. S menším účinkem je možné pro adsorpci chloroplastů použít i 2,3,5-trifenyltetrazoliumchloridu. Při použití 10 “2M roztoků TFT proběhla adsorpce chloroplastů z 36%.
Claims (3)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče, vyznačující se tím, že se na pevný nosič působí suspenzí mikroorganismů a/nebo buněčných organoidů za přítomnosti kationoidního tenzidu o koncentraci 2.10“3 až 10-2 mol l-1.
- 2. Způsob adsorpce podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako kationoidní tenzid použije 2,3,5-trifenyltetrazoliumchlorid.
- 3. Způsob adsorpce podle bodu 1. vyznačující se tím, že se jako kationoidní tenzid použije tenzid, výhodně cetyltrimethylamoniumbromid.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS478679A CS206061B1 (cs) | 1979-07-06 | 1979-07-06 | Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS478679A CS206061B1 (cs) | 1979-07-06 | 1979-07-06 | Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS206061B1 true CS206061B1 (cs) | 1981-06-30 |
Family
ID=5391407
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS478679A CS206061B1 (cs) | 1979-07-06 | 1979-07-06 | Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS206061B1 (cs) |
-
1979
- 1979-07-06 CS CS478679A patent/CS206061B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Moran et al. | Extracellular and intracellular polygalacturonic acid trans-eliminases of Erwinia carotovora | |
| Tagawa et al. | Oxidation-reduction potentials and stoichiometry of electron transfer in ferredoxins | |
| EP0158909B1 (en) | Immobilized enzymes, processes for preparing same and use thereof | |
| MAAss et al. | Penicillin uptake by bacterial cells | |
| FI56537C (fi) | Foerfarande foer omvandlande av glukos till fruktos med tillhjaelp av glukosisomeras | |
| Reed et al. | Some properties of the ATPase from chromatophores of Rhodopseudomonas spheroides and its structural relationship to the bacteriochlorophyll proteins | |
| Elyakova et al. | Isolation and certain properties of alginate lyase VI from the mollusk Littorina sp | |
| Wenger et al. | Mitochondrial alcohol dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae | |
| Lindqvist et al. | Resistance of Escherichia coli to Penicillins VII. Purification and Characterization of a Penicillinase Mediated by the R Factor R1 | |
| Uwajima et al. | Purification, crystallization and some properties of β-galactosidase from Saccharomyces fragilis | |
| Hattori et al. | Studies on amylolytic enzymes produced by Endomyces sp. Part II. Purification and general properties of amyloglucosidase | |
| CS206061B1 (cs) | Způsob adsorpce mikroorganismů a buněčných organoidů na pevné nosiče | |
| Fitzgerald | Secondary alkylsulphatases in a strain of Comamonas terrigena | |
| Hesse et al. | On the reconstitution of photophosphorylation in CF1-extracted chloroplasts | |
| US3272717A (en) | Process for preparing thermally stable amylase composition | |
| Allan et al. | Prophage induction by N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine | |
| Lichstein et al. | Factors affecting the accumulation of biotin by Lactobacillus arabinosus | |
| Hizukuri et al. | [83] Glucose-6-phosphate isomerase from peas | |
| JPS6030679A (ja) | Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインハイドロラ−ゼの製造法 | |
| US4001082A (en) | Method of isomerizing glucose with enzyme immobilized within microbial cell | |
| Rexová-Benková | On the character of the interaction of endopolygalacturonase with cross-linked pectic acid | |
| Pereira et al. | The effect of clay particles on the efficacy of a biocide | |
| Syddall et al. | A site-specific endonuclease from Caulobacter crescentus CB-13: Restriction endonuclease CcrI | |
| Bodalo et al. | Immobilization of β-galactosidase by physical adsorption on chromosorb-W | |
| Unemoto et al. | Effect of free magnesium and salts on the inorganic pyrophosphatase purified from a slightly halophilic Vibrio alginolyticus |