CS204148B1 - Method of producing enzyme of alpha-amylase - Google Patents
Method of producing enzyme of alpha-amylase Download PDFInfo
- Publication number
- CS204148B1 CS204148B1 CS365177A CS365177A CS204148B1 CS 204148 B1 CS204148 B1 CS 204148B1 CS 365177 A CS365177 A CS 365177A CS 365177 A CS365177 A CS 365177A CS 204148 B1 CS204148 B1 CS 204148B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amylase
- alpha
- enzyme
- ccy
- luteolus
- Prior art date
Links
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 title claims description 13
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 title claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 title description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 title description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 claims description 5
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 3
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 claims description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 241001337994 Cryptococcus <scale insect> Species 0.000 claims 1
- 241001259715 Hannaella luteola Species 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 241000235004 Saccharomycopsis fibuligera Species 0.000 description 2
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N D-melezitose Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000235003 Saccharomycopsis Species 0.000 description 1
- 241001489225 Saccharomycopsis capsularis Species 0.000 description 1
- 241000159523 Saccharomycopsis javanensis Species 0.000 description 1
- 241001123650 Schwanniomyces occidentalis Species 0.000 description 1
- 241000235005 Schwanniomyces occidentalis var. occidentalis Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000003625 amylolytic effect Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N maltotetraose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- -1 melibiosis Chemical compound 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
československá SOCIALISTICKÁ REPUBLIKA (19) POPIS VYNALEZU K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 204148 (Π) (M) (22) Přihlášené 03 06 77(21) (PV 3651-77) (51) Int. Cl.1 * 3 C 12 N 9/28 (40) Zverejnené 31 07 80 ORAD PRO VYNÁLEZY A OBJEVY (45) Vydané 15 12 83 (75)
Autor vynálezu KOCKOVÁ-KRATOCHVÍLOVA ANNA Dr. Se., BRATISLAVA,ZEMEK JURAJ ing. CSc., LEHNICA, AUGUSTIN JOZEF PhMr. aKUNIAK LUDOVÍT ing. CSc., BRATISLAVA (54) Sposob produkcie enzýmu a-amylázy 1
Vynález sa týká sposobu produkcie enzý-mu α-amylázy pomocou kvasinkovitého or-ganizmu Cryptoeoecus luteolus. V súčásnej době sa enzym alfa-amylázazískává izoláciou z produkčného prostrediabaktérie Bacillus substilis a Streptococcusaureofaciens. Produkcia alfa-amylázy je po-písaná u niektorých kmeňov bývalého roduEndomycopsis. Je to Endomycopsis capsula-ris (dnes Saccharomycopsis capsularis), po-písaný H. Ebertovou (Folia microbiologica11 : 422—428, 1966), dalej Endomycopsis fi-buliger (dnes Saccharomycopsis fibuliger),Endomycopsis javanensis (dnes Arthroascusjavanensis), Endomycopsis lindneri (dnes jeto synonymum pre Saccharomycopsis fibu-liger) a Endomycopsis hordei (dnes Saccha-romycopsis fibuliger var, hordei), popísa-ná E. Matsutani, M. Sáto a F. Hatori (US pat. 3 297 547) a konečne u Schwanniomycesoccidentalis a Schwanniomyces alluvius. Ne-výhodou sposobov produkcie a-amylázy utýchto kmeňov je poměrně nízká aktivita a--amylázy, vysoká koncentrácia zdrojov uhlí-ka a zložitá separácia biomasy.
Uvedené nevýhody odstraňuje sposob pro-dukcie α-amylázy na tekutej živnej půdě, ob-sahujúcej zdroje asimilovatefného uhlíka,komplexně zdroje dusíka a minerálně živ-né soli, ktorého podstata spočívá v tom, že 2 kmeň Cryptoeoecus luteolus CCY 17-6-2b sakultivuje na živnej pode obsahujúcej 0,8 až3 hmot. % kukuřičného škrobu pri teplote20 až 38 °C, po dobu 48 až 120 hodin, pripH 4,7 až 6,8, pričom sa enzým a-amylázazíská odpařením rastovej půdy, alebo zráža-ním síranom amónnym, alebo afinitnýmpřečištěním na sieťovanom škrobe.
Uvedený kmen Cryptoeoecus luteolus17-6-2b je uložený v čsl. zbierke kvasinieka kvasinkovitých organizmov v Bratislavě.
Povodný kmeň Cryptoeoecus luteolus CCY17-6-2, ktorý je saprofytického původu, bolizolovaný z půdy. Bol vyšíachtený trojná-sobným pasážovaním na půdě pripravenej z8 % gélu amylózy sieťovanej epichlórhydrí-nom, ponorenej do syntetickej Yeast Nitro-gen Base (0,6 g/100 ml) půdy pri teplote 20až 38 °C, po dobu 48 až 120 hodin a pH 4,7až 6,8. Nový vyšíachtený kmeň bol označenýako Gryptoicoecufe luteolus CCY 17-bJ2b.
Kmeň Cryptoeoecus luteolus CCY 17-6-2bmá buňky oválné až pretiahle, málo jednot-né, V tekutom prostředí tvoří prstenec ažsliznatý povlak, na pevnom prostředí je sliz-natý a krémovo žltastý. Nekvasí cukry. Asi-miluje okrem D-glukózy ešte D-galaktózu,maltózu, sacharózu, laktózu, melibiózu, ce-lobiózu, trehalózu, melezitózu, D-xylózu, D--manitol, L-lyzín, rafinózu. Polysacharid, vy- 204148
Claims (3)
- 204148 tváraný okolo buniek dává jódšrobovú re-akciu. Neasimiluje ani 1-sorbózu, ani dusič-ňan draselný. K rastu potřebuje vitamíny vprostředí. Optimálna teplota rastu je 23 °Cpri 5 °C alebo prí 42 °C nerastie. Produkujeureázu, aktivita katalázy je vysoká, steku-cuje želatinu a rýchle autolyzuje. Výhodou spósobu produkcie a-amylázypódia vynálezu je: poměrně vysoká aktivitaa-amylázy aj pri práci s jednoduchými fer-mentačnými půdami, o nižšej koncentráciizdroja uhlíka ako u fermentačných půd na-příklad pre Bacillus substilis; jednoduchšiaseparácia biomasy po ukončení fermentač-ného procesu; výhodnější charakter pro-duktu amylolytickej reakcie katalyzovanejenzýmom z Cryptococcus luteolus (obsah D--glukózy až 34 %) ako u α-amylázy Bacillussubstilis; možnost využitia biomasy na kr-movinárske účely. Příklad 1 Z vypratého gélu připraveného zo Sleto-vaného a(l -* 4) glukánu pódia A. O. číslo186 059, sa vyrežú trojúhelníkové profily ohrané 1,5 cm a vložia do Petriho misky a za-lejú sa roztokom kultivačnej tekutiny YeastNitrogen Base (Difco), 0,657 g na 100 mldestilovanej vody. Gély sa ponoria asi do po-lovice svojej výšky. Po trojnásobné opako-vané j sterilizácii pri 100 °C v pare (1 hodi-na) sa očkuje na povrch gélu kultúra Cryp-tococcus luteolus CCY 17-6-<2b a inkubuje sapri 23 °C po dobu 48 hodin. Namnožená bio-masa C. luteolus na stekutenom géli (0,21gramu) sa použila ako inokulum na pro-dukčnú půdu (2 1), pozostávajúcu z 0,8%kukuřičného výluhu, 0,8 % kukuřičnéhoškrobu, 0,2 % síranu amónneho a 0,3 % di-hydrofosforečňanu draselného vo vodě (pH 6,1). Kultivácia prebiehala po dobu 85 hodinpri 25 °C. Po ukončení kultivácie sa biomasa C. luteolus odstranila centrifugáciou (31000gramov, 5 min.) a supernatant sa zahustil navákuovej odparke. Získaný surový enzýma-amyláza mal celkovú aktivitu 34,3 U a špe-cífickú aktivitu 0,081 U/mg. P r í k 1 a d
- 2 Postupovalo sa tak ako v příklade 1, stým rozdielom, že kmen Cryptococcus luteo-lus CCY 17-6-2b sa kultivuje na živnej půděobsahujúcej 2 % kukuřičného škrobu priteplote 20 °C po dobu 120 hodin a pH 4,7.Namiesto zahustenia vo vákuovej odparkesa enzýmový preparát spracováva ďalej afi-nitnou metodou za využitia sletovanéhoškrobu (AO č. 157 955). Získaný přečištěnýenzým mal špecifickú aktivitu 11,4 U/mg.Příklad
- 3 Postupovalo sa ako v příklade 1, s týmrozdielom, že kultivácia sa prevádzala naživnej půdě obsahujúcej 3 % kukuřičnéhoškrobu pri teplote 38 °C po dobu 60 hodin apH 6,8. Enzým a-amyláza sa získá zrážanímso síranom amónnym (680 g/1). Získaný en-zýmový preparát mal špecifickú aktivitu0,11 U/mg. Význam vynálezu spočívá v použití a-amy-lázy v potravinárstve (pečivársky a pivovar-ský priemysel), příprava sirupov apod.) a vtextilnom priemysle. Amylázový hydrolyzátsa používá k príprave atypických sladidiela čistých oligosacharidov (maltóza, malto-trióza, maltotetraóza) ako aj D-glukózy svyužitím v chémii sačharidov a v klinickejpraxi. PREDMET Spůsob produkcie enzymu a-uinylázy natekutej živnej půdě obsahujúcej zdroje asi-milovateíného uhlíka, komplexně zdroje du-síka a minerálně živné soli, vyznačujúci satým, že kmen Cryptococcus luteoiluls CCY17-6-2b sa kultivuje na živnej půdě obsahu- júcej 0,8 až 3 hmot. % kukuřičného škrobupri teplote 20 až 38 °C po dobu 48 až 120 ho-din pri pH 4,7 až 6,8, pričom sa enzým a--amyláza získá odpařením rastovej půdy,alebo zrážaním síranom amónnym, alebo a-finitným přečištěním na sieťovanom škrobe. »«™ro<refi·, *. p., lAved I, Moct
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS365177A CS204148B1 (en) | 1977-06-03 | 1977-06-03 | Method of producing enzyme of alpha-amylase |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS365177A CS204148B1 (en) | 1977-06-03 | 1977-06-03 | Method of producing enzyme of alpha-amylase |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS204148B1 true CS204148B1 (en) | 1981-03-31 |
Family
ID=5377167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS365177A CS204148B1 (en) | 1977-06-03 | 1977-06-03 | Method of producing enzyme of alpha-amylase |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS204148B1 (cs) |
-
1977
- 1977-06-03 CS CS365177A patent/CS204148B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4247637A (en) | Highly thermostable glucoamylase and process for its production | |
| US4727026A (en) | Method for direct saccharification of raw starch using enzyme produced by a basidiomycete belonging to the genus Corticium | |
| Ramesh et al. | Ability of a solid state fermentation technique to significantly minimize catabolic repression of α-amylase production by Bacillus licheniformis M27 | |
| US4591560A (en) | Process for saccharification of starch using enzyme produced by fungus belonging to genus Chalara | |
| WO1986001831A1 (en) | Thermostable starch converting enzymes | |
| Sills et al. | Production of amylolytic enzymes by several yeast species | |
| Wickerham et al. | Starch hydrolysis and fermentation by the yeast Endomycopsis fibuliger | |
| CA1120875A (en) | Method for ethanol fermentation | |
| Sills et al. | ISOLATION AND CHARACTERISATION OF THE AMYLOTIC SYSTEM OF SCHWANNIOMYCES CASTELLII | |
| CA1226835A (en) | Biochemical process and composition | |
| CA1163939A (en) | Process for the production of the enzyme alpha- galactosidase and for the hydrolysis of raffinose by employing such enzyme | |
| JPS62500422A (ja) | 熱安定性β−アミラ−ゼ | |
| US4224410A (en) | Method for ethanol fermentation | |
| Haggett et al. | Mutants of Cellulomonas which produce increased levels of β-glucosidase | |
| Tani et al. | Raw cassava starch-digestive glucoamylase of Aspergillus sp. N-2 isolated from cassava chips | |
| Pestana et al. | Glucoamylase production by Aspergillus awamori on rice flour medium and partial characterization of the enzyme | |
| Kavitha et al. | Genetic improvement of Aspergillus carbonarius for pectinase overproduction during solid state growth | |
| Sá-Correia et al. | Production of biomass and amylases by the yeast Lipomyces kononenkoae in starch-limited continous culture | |
| Yamamoto et al. | Production, purification, crystallization, and some properties of yeast cell lytic enzyme from a species of fungi imperfecti | |
| CA1285896C (en) | .alpha.-1, 6-GLUCOSIDASE AND PROCESS FOR PRODUCING THE SAME | |
| US2431004A (en) | Method for producing ethyl alcohol | |
| JP3761236B2 (ja) | 新規なβ−グルコシダーゼ、その製造法および用途 | |
| US5281527A (en) | Process for producing pullalanase | |
| Ramachandran et al. | Influence of Media Composition on the Production of alpha‐Amylase and Amyloglucosidase by a Strain of Aspergillus niger | |
| CS204148B1 (en) | Method of producing enzyme of alpha-amylase |