CS204129B1 - Method of producing cellulolytic enzymes - Google Patents

Method of producing cellulolytic enzymes Download PDF

Info

Publication number
CS204129B1
CS204129B1 CS13077A CS13077A CS204129B1 CS 204129 B1 CS204129 B1 CS 204129B1 CS 13077 A CS13077 A CS 13077A CS 13077 A CS13077 A CS 13077A CS 204129 B1 CS204129 B1 CS 204129B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
ccy
basidiotrichosporon
strains
glucan
cellulolyticum
Prior art date
Application number
CS13077A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Anna Kockova-Kratochvilova
Juraj Zemek
Ludovit Kuniak
Original Assignee
Kockova Kratochvilova Anna
Juraj Zemek
Ludovit Kuniak
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kockova Kratochvilova Anna, Juraj Zemek, Ludovit Kuniak filed Critical Kockova Kratochvilova Anna
Priority to CS13077A priority Critical patent/CS204129B1/cs
Publication of CS204129B1 publication Critical patent/CS204129B1/cs

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

ČESKOSLOVENSKÁ SOCIALISTICKÁ R E P U B L 1 K A(18) POPIS VYNÁLEZU K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 204129 (11) (Bl) (22) Přihlášené 10 01 77(21) (PV 130-77) (51) Int. Cl.3 C 12 N 9/42 (40) Zverejnené 31 07 80 ŮfcAD PRO VYNÁLEZY A OBJEVY (45) Vydané 15 12 83 (75)
Autor vynálezu KOCKOVA-KRATOCHVlLOVA ANNA RNDr. DRSc., BRATISLAVA,ZEMEK JURAJ ing. CSc., LEHNICA a KUNIAK EUDOVÍT ing. CSc.,BRATISLAVA (54) Spdsob produkcie celulolytických enzýmov 1
Vynález sa týká spósobu produkcie celu-lolytických enzýmov štepiacich celulózovúzložku lignin·—celulózových komplexov kva-sinkovitými orgariizmami rodu Basidiotri-chosporon.
Schopnost štepenia celulózy v prečiste-nom stave alebo v natívnom stave, vo formělignin—celulózového komplexu β (1 -» 4)glukán glukánohydrolázu EC. 3. 2. 1. 4, resp.schopnost produkovat tento enzým nie jevlastnosťou rodu Basidiotrichosporon akocelku. Pri použití gélovej metody testova-nia mikroorganizmov na celulázovú aktivi-tu (AO č. 183 169) sa zistila výrazná pro-dukcia /3-glukán glukánohydrolázy u kme-ňov zastupujúcich dva druhy rodu Basidio-trichosporon, a to B. pullulans a B. cellulo-lyticum. Žiadny z uvedených druhov nie je uvede-ný v literatuře ako producent enzýmov šte-piacich celulózovú zložku lignin—celulózo-vého komplexu.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že na-sledovných 10 kmeňov rodu Basidiotricho-sporon·.
Basidiotrichosporon pullulans: CCY 30-1-1 a CCY 30-1-1 b 2 CCY 30-1-2CCY 30-1-3
Basidiotrichosporon cellulolyticum: CCY 30-5-1CCY 30-5-3CCY 30-5-4CCY 30-13-1CCY 30-5-11CCY 30-5-12 jednotlivo alebo ich zmesi kultiváciou naživnej pode minerálneho zloženia obsahujú-cej síran amónny, gel hydroxyetylcelulózy a/3(1 -> 4) glukán ako induktor enzýmu priteplote 20 až 40 °C, po dobu 48 až 110 hodinpri pH 4,5 až 6,8 produkuje komplexný celu-lázový systém /3-glukán glukánohydrolázu a/3-glukozidázu, ktorý sa získá v surovou sta-ve odpařením rastovej pódy, připadne v čias-točne prečistenom stave zrážaním sířanomamonným, připadne zrážaním organickýmrozpúšťadlom s výhodou etanolom. Všetky tieto kmene produkujú ureázu a ich biomasa dává s pufrovým roztokom dia- zofarbiva Fast Blue B červené zafarbenie, čo svědčí, že tieto kmene patria do oddele- nia Basidiomycetes. Okrem typových kultúr 204 1 2 9 204129 3 (CCY 30-1-1, a, b, Btr. pullulans CCY 30-13-1Btr. inkin) bolí všetky kmene izolované zodpadových v&d drevospracujúceho a papie-renského priemyslu. Kmene CCY 30-1-2 aCCY 30-1-3, CCY 30-5-11 a CCY 30-5-12 bolíizolované najnovšie v ČSSR.
Obidva druhy sa vzá}omne odlišujú tým,že Btr. pullulans nevyužívá laktózu, treha-lózu, ribózu ani xylózu, zatial' co kmene Btr.cellulolyticum áno. Obidla druhy sa líšiaprodukciou xylanáz: Btt. pullulans xylaná-zy neprodukuje, zatial' čo Btr. cellulolyticumáno. Kmene druhu Btr. pullulans tvoria bo-hato artrospóry, kmene Btr. cellulolyticumlen sporadicky.
Btr. cellulolyticum sa od Btr. eutaneum(CCY 30-5-10- typová kultura a CCY 30-7-1Btr. jirovecii — typová kultúra) líši asimi-láciou galaktózy, sacharózy, xylózy, struk-turou polysacharidu, a prítomnosťou xyla-náz a celuláz. Btr. cellulolyticum sa líši ajod ínéhosusedněho druhu Btr. inositophi-lum (CCY 30-5-5, -6 a -7], kterého kmenesú schopné asimilovat inozitol.
Použité kmene rodu Basidiotrichosporonsú uložené v Ceskoslovenskej zbierke kva-siniek a kvasinkovitých organizmov, Bratis-lava.
Praktické využitie uvedených kmeňov spo-čívá v tom, že produkujú do kultivačnéhomédia enzýmy β-glukán glukánohydrolázu a/3-glukozidázu, ktoré sú jednoduchou meto-dou izolovatelné, pričom vznikajú z makro-molekulárneho substrátu typu /í(l -* 4] glu-kánu oligosacharidy typu celobiózy, ceilo-triózy, celotetraózy a D-glukóza. Enzýmy u-vedeného typu sú využitelné v procese sa-charifikácie celulózy a v základnom výsku-me. Ďalšia možnost využitia tejto vlastnos-ti uvedených kmeňov rodu Basidiotrichospo-ron je v hydrolytickom rozklade dřevenéhoodpadu za vzniku enzýmatického hydrolyzá-tu priamo utilizovaného nahromaděním nu-tričně hodnotnej bielkoviny kvasinkovitýchBasidiotrichosporon využitelných v krmovi-nárstve. Kvasinková forma Basidiotricho-sporon umožňuje použitie ako centrifugač-ných tak aj filtračných separačných metódk oddeleniu nakultivovanej biomasy. Přikladl Z gélu žo sieťovanej hydroxyetylcelulózy(A. O. č. 183 169) sa vyrežú trojúhelníkovéprofily o straně 4 cm, vložia sa do Petrihomisky a zalejú sa roztokom kultivačného mé-dia Yeast Nitrogen Base (Oxoid) s gélomhydroxyetylcelulózy ako jediným zdrojomuhlíka, s přísadou induktora /3(1 - 4) glu-kánu (1 mg/100 ml), tak aby pol hrůbkygélu vyčnievalo nad hladinu kultivačnéhomédia. Po trojnásobnej sterelizácii pri 100 °Cpo dobu 1 hodiny sa očkuje na povrch gélukultúra Basidiotrichosporon pullulans CCY30-1-2 a kultivuje sa pri 28 °C po dobu 48hodin. Stekutený gél spolu s pomnoženoubiomasou B. pullulans (0,42 g) sa použil akoinokulum na produkčnú pódu (2 1) s 1 °/okukuřičného výluhu, 0,18 % hydroxyetylce-lulózy, 0,2 % síranu amónneho a 0,2 % di-hydrofosforečnan draselný (pH produkčnějpódy bolo upravené na 5;9). Kultivácia pre-biehala po dobu 96 hodin pri 28 °C. Po u-končení kultivácie sa biomasa odcentrlfu-govala (1500 g, 10 min.) a supernatant sazahustil na odparke. Získal sa surový enzy-mový preparát s celulózovou aktivitou 66U a specifickou aktivitou 0,78 U/mg.Příklad 2
Rovnako, ako v příklade 1, s tým rozdie-lom, že namiesto Basldiiotrichoeportm piul-lulans sa použil kmeň Bassidiotrichosporoncellulolyticum CCY 40-5-4. Výsledný surovýenzýmový preparát mal aktivitu 94 U a špe-cifickú aktivitu 0,71 U/mg. P r í k 1 a d 3
Rovnako, ako uvedené v příklade 2, s týmrozdielom, že namiesto kukuřičného výluhua hydroxyetylcelulózy sa ako zdroj uhlíka vkultivačně) póde použije odpadná vata zhydroxyetylcelulózy (50 g/1).

Claims (1)

  1. 204129 PREDMET Spósob produkcie celulolytických enzý-mov vyznačujúci sa tým, že 10 nasledov-ných kmeňov rodu Basidiotrichosporon:Basidiotrichosporon pullulans: CCY 30-1-1 aCCY 30-1-1 bCCY 30-1-2CCY 30-1-3 Basidiotrichosporon cellulolyticum: CCY 30-5-1CCY 30-5-3CCY 30-5-4CCY 30-13-1 VYNALEZU CCY 30-5-11CCY 30-5-12 jednotlivo alebo v zmesi sa kultivuje naživ-nej půdě minerálneho zloženia obsahujúcejsíran amonný, gél hydroxyetylcelulózy a/3(1 -> 4) glukán ako induktor enzýmu priteplote 20 až 40 °C, po dobu 48 až 110 hodinpri pH 4,5 až 6,8 a vyprodukovaný komplex-ný celulózový sylstém /3-glukán glukánohyd-rolázy a /3-glukozidázy sa získá v surovomstave odpařením rastovej půdy, připadne včiastočne prečistenom stave zrážaním síra-nom amonným připadne zrážaním organic-kým rozpúšťadlom s výhodou etanolom. Severografls, a. p., závod 7, Most
CS13077A 1977-01-10 1977-01-10 Method of producing cellulolytic enzymes CS204129B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS13077A CS204129B1 (en) 1977-01-10 1977-01-10 Method of producing cellulolytic enzymes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS13077A CS204129B1 (en) 1977-01-10 1977-01-10 Method of producing cellulolytic enzymes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS204129B1 true CS204129B1 (en) 1981-03-31

Family

ID=5332899

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS13077A CS204129B1 (en) 1977-01-10 1977-01-10 Method of producing cellulolytic enzymes

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS204129B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Christakopoulos et al. Direct fermentation of cellulose to ethanol by Fusarium oxysporum
Hägerdal et al. Saccharification of cellolulose by the cellulolytic enzyme system of Thermonospora sp. I. Stability of cellulolytic activities with respect to time, temperature, and pH
Crawford et al. Cellulases of Thermomonospora fusca and Streptomyces thermodiastaticus
JPS60500891A (ja) セルラ−ゼを大量生成する微生物
Grigorevski-Lima et al. Aspergillus fumigatus thermophilic and acidophilic endoglucanases
CA1120875A (en) Method for ethanol fermentation
Li et al. Purification and characterization of an endocellulase from the thermophilic fungus Chaetomium thermophilum CT2
Nevalainen et al. A high cellulase-producing mutant strain of Trichoderma reesei
Javed et al. An innovative approach for hyperproduction of cellulolytic and hemicellulolytic enzymes by consortium of Aspergillus niger MSK-7 and Trichoderma viride MSK-10
CN101855973B (zh) 一种漆酶产生真菌菌株白耙齿菌及其培养方法和应用
Kawamori et al. Production of cellulases by a thermophilic fungus, Thermoascus aurantiacus A-131
Paul et al. Influence of sugars on endoglucanase and β-xylanase activities of a Bacillus strain
Ikram-ul-Haq et al. An innovative approach for hyperproduction of cellulolytic and hemicellulolytic enzymes by consortium of Aspergillus niger MSK-7 and Trichoderma viride MSK-10
Robison Cellulase and xylanase production by Trichoderma reesei Rut C-30
Chaudhary et al. Thermophilic actinomycetes from hot water spring capable of producing enzymes of industrial importance
US6946277B2 (en) Method for enhancing cellobiase activity of termitomyces clypeatus using a glycosylation inhibitor
Macris et al. Solid state fermentation of straw with Neurospora crassa for CMCase and β-glucosidase production
Busto et al. Induction of β-glucosidase in fungal and soil bacterial cultures
CS204129B1 (en) Method of producing cellulolytic enzymes
Barrera-Islas et al. Characterization of a [beta]-Glucosidase Produced by a High-Specific Growth-Rate Mutant of Cellulomonas flavigena
RU2293115C1 (ru) Штамм гриба penicillium canescens - продуцент секретируемой эндо-(1-4)-бета-ксиланазы
Kaji et al. Production and Properties of α-L-Arabinofuranosidase from Various Strains of Corticium rolfsii
Okagbue et al. Isolation of Aureobasidium pullulans from Zimbabwean sources and glucosidase activities of selected isolates
JP2785323B2 (ja) β―グルコシダーゼ及びその製造法
Treat et al. Production of β-glucosidase (cellobiase) by Pisolithus tinctorius