CS203719B1 - Antistaphylococ gag lyzate for local use - Google Patents

Description

ČESKOSLOVENSKA SOCIALISTICKÁ REPUBLIKA (19) POPIS VYNÁLEZU K AUTORSKÉMU OSVĚDČENI 203719 (11) (Bl) 1 (22) Přihlášeno 21 02 79(21) (PV 1156-79) (51) Int. Cl,3 A 81 K 39/12 L_J (40) Zveřejněno 30 06 80 OftAD PRO VYNÁLEZY A OBJEVY (45 j Vydáno 15 05 83 (75) '

Autor vynálezu PILLICH JIŘÍ RNDr.CSc., BRNO

a VÝMOLA FRANTIŠEK MUDr. CSc., PRAHA (54) Antistafylokokový fágový lyzát pro místní použití 1

Vynález se týká antistafylokokového íá-gového lyzátu pro· místní použití, s polyva-lentním účinkem na Staphylocoecus sp. Ten-to lyzát je určen k léčbě stafylokokovýchonemocnění, jejímž cílem je systematická e-rádikace původce onemocnění, Staphylococ-cus aureus, z ložisek infekce i potenciálníchrezervoárů. V současné době není k dispozici žádnýantistafylokokový fágový lyzát k místnímupoužití při léčbě akutních, subakutníeh ne-bo chronických stafylokokových onemocněnínebo· při superponovaných hnisavých stafy-lokokových komplikacích.

Vhodné podmínky pro uplatnění patogen-ních vlastností stafylokoků bývají během vi-rových epidemií, hlavně chřipkového pů-vodu. Vysoká letalita u lidí v průběhu těch-to epidemií je způsobena často superinfekclplicních alveolů, kterou vyvolává Staphylo-coccus aureus, rezistentní na antibiotika. K' závažným faktorům, které poskytujímožnosti k uplatnění ubikvitních stafylokokůje alterovaná kůže, nemocniční prostředía polytraumatismus. Hnisavé procesy kůže,podkožl a kožních adnex, hnisání v rannýchložiscích, mohou vyústit v septický stav ne-bo přejít v dlouhodobý chronický proces. Léčebné možnosti stafylokokových one-mocnění značně rozšiřuje antistafylokokový 203719 2 fágový lyzát pro místní použití, s polyvalent-ním účinkem na Staphylocoecus sp., podlevynálezu, jehož podstata spočívá v tom, žejako účinnou složku obsahuje ve sterilnímtekutém médiu s hodnotou pH 6,9 až 7,2 spe-cifické fágové partikule v množství l,109 až5,10i°/ml.

Antistafylokokový fágový lyzát podle vy-nálezu je určen především k místní aplikaci(inhalace, kapání, spraye, zmáčené longe-ty, instilace apod.) do ranných ložisek a dorezervoárů původců infekce (nosohltan,střevní a močový trakt). Tato aplikační for-ma je integrální součástí léčebného režimuchronických i akutních ,forem stafylokoko-vých onemocnění.

Pro· dokonalou lýzi bakteriálního, hostite-le, t. j. příslušné stafylokokové kultury, sepoužívá výhradně čistě virulentního· fága svelmi širokým spektrem účinnosti. Potlyva-lentní specifický fág se získává jednak pří-mo z bakteriální kultury izolované z pato-logického materiálu, jednak jako· umělá mu-tanta z prostředí temperovaných bakteriofá-gů, které byly uvolněny po indukci roznýmifyzikálně-chemickými činiteli (UV-záření,mitomycin C, peroxid vodíku apod.). Testo-váním na větším množství bakteriálních kul-tur se prokazuje polyvalentní lytický účinekpříslušného fága.

Claims (1)

1. 203719 3 Polyvalentní specifický virulentní fág, kte-rý je použitelný pro přípravu léčebných pre-parátů, musí vyhovovat řadě požadavků:musí být homogenní [nutno kontrolovat),nesmí být lyzogenní, t. j. nesmí obsahovatsměs virulentních a temperovaných fágů,musí dokonale lyžovat příslušnou hostitel-skou kulturu v krátkém čase, musí mít znač-nou stabilitu své aktivity a svéhoi titru, tj.koncentrace aktivních fágových částic na· 1 ml, nesmí vyvolávat u produkčního kmeneani v podmínkách in vivo L-foirmy. Kontrolačistoty a stability fágového kmene se prová-dí příslušným specifickým antisérem, získa-ným imunizací králíků studovaným fágovýmkmenem. Hostitelská stafylokoková kultura musímít tyto vlastnosti: musí mít typické vlast-nosti odpovídající kmenům Staphylococcusaureus [biochemické, fagologické a taxono-mícké), musí vykazovat maximální odsorpci aprodukci příslušného bakteriofága, musíprojevovat ztrátu lyzofenie nebo< alespoňznačně ztížené uvolnění fága do prostředíbez použití indukčních činitelů, musí býtdobře citlivá na běžná antibiotika, nesmíprojevovat výskyt mutant (je třeba vyloučiti pigmentační varianty), musí dobře růst nazákladních syntetických půdách při jedno-duché kultivaci a dobré stabilitě kultury připasážování, musí prokazovat stabilitu anti-genní struktury při elektroforetickém sledo-vání. Antistafylokokový fágový lyzát podle vy-nálezu je sterilní čirá bezbarvá tekutina svysokou koncentrací účinných fágových čás-tic v 1 ml, s hodnotou pH 6,9 až 7,2. Nemápyrogenní vlastnosti. V použitém syntetickémmédiu se bez provzdušnění nebo třepánínepomnožuje žádný z mikrobů, který by mohlbýt kontaminantou preparátu. Aby se udrže-lo maximum fágové aktivity není k lyzátupřidáváno žádné konzervans. Proto je nut-ná absolutní sterilita, aby se předešlo přimanipulaci infekci preparátu. \ PREDMfiT Antistafylokokový fágový lyzát pro místnípoužití s polyvalentním účinkem na Staphy-lococcus sp., vyznačující se tím, že jako ú-čininou složku obsahuje ve sterilním tekutém Antistafylokokový fágový lyzát podle, vy-nálezu působí selektivně na patogenní sta-fylokoky, ale nepoškozuje současně normál-ní bakteriální floru. V žádném případě ne-byla zaznamenána při aplikaci hypersenzi-tivní nebo toxická reakce. Antibiotika ne-působí inaktivačně na fágové částice. Antistafylokokový fágový lyzát pro místnípoužití/ je standardizován na základě obsa-hu bakteriálních buněk před lyží a na zákla-dě fágové aktivity. Podrobnosti přípravy vyplývají z příkladuprovedení. Příklad provedení Bakteriální hostitelská kultura vybranéhokmene Staphylococcus aureus se kultivujena třepačce v syntetickém médiu tohoto slo-žení: dihydrofosforečnan draselný 4,5 g chlorid amonný 3,0 g hydrofosforečnan sodný 10,5 g chlorid vápenatý 1 M 0,3 g glycerin 8,0 ml želatina 1,5 ml směs aminokyselin [Difco) 5,0 g destilovaná voda 1000 ml Kultivace probíhá při teplotě 35 až 37 °Cpo dobu 16 až 18 hodin. K narostlé bakteriál-ní kultuře se přidá aktivní fágový kmen. Po ukončené lyži (asi za 3 až 6 hodin)bakteriální kultury se lyzát odstředí. V su-pernatantu se stanoví titr fágových částicna 1 ml. Provede se zkouška na biologickounezávadnost podle ČsL a preparát se plní dolahviček. Podle ČsL 3 se provede též zkouš-ka na sterilitu. Hotový preparát má hodnotupH okolo 7,0, obsah fágových částic 1.109až '5.1010. Při skladování v temnu a suchupři teplotě 2 až 4°C je trvanlivost přípravkuminimálně 12 měsíců. YNÁLEZU médiu s hodnotou pH 6,9 až 7,2 specifickéfágové partikule v množství 1.109 až 5.1010//ml.' Severograíia, n. p., závod 7, Most