CS202866B1 - Prostředek k plošné ochraně mláďat před uhynutím, k profylaxi a podpůrné terapii enzootií v chovech živočišné výroby - Google Patents

Description

Vynález se týká prostředku k plošné ochraně mlá3at před uhynutím, k profylaxi a podpůrné terapii enzootiá. v chovech živočišné výroby. Řeší problematiku živočišné velkovýroby, chovu hospodářských, domácích a laboratorních zvířat, dále snížení ztrát mláSat a dospělých zvířat a tím spojeným zlepšením zdravotního stavu a užitkovosti, ochranu před onemocněním a popřípadě i podpůrnou terapii.

Nová organizace chovův souvislosti s přeměnou zemědělství na velkovýrobu, časté přesuny zvířat a vytváření velkých stád aktualizovala některá onemocnění, která se dříve vyskytovala jen sporadicky. Jde převážně o respirační a enterální infekce, zvláště u mláůat. Nově narozená mláůata nemají ještě dostatečně rozvinutý komplexní imunitní systém, i když jsou již imunokompetentní, a jsou vystavena zvýšenému riziku onemocnění. Celkové oslabení mladého organismu může mít za následek mimo jiné i vznik onemocnění působených jinak neškodnými .organismy, u telat například E. coli, žijícími v zažívacím traktu.

V současné době je hledána cesta, jak zabránit velkým ztrátám v živočišné výrobě. K tomu účelu se používá v současné době například širokospektrých antibiotik ve vysokých dávkách i jako. příměsi krmiv, preventivní aplikace depoťních antibiotik nebo chemoterapeutik, vakcinace proti některých onemocněním, dále je snaha o imunizaci mláďat ovlivněním tvorby protilátek u fetů, využitím jednak drahých specifických imunoglobulinů, jednak pomocí směsi imunoglobulínů, ochrany fetů a mlá3at imunizací matek. Některé tyto cesty jsou nebezpečné například vzhledem k nepříznivému působení.antibiotik a chemoterapeutik na životní prostředí člověka, nebo jsou velmi nákladné, pracné a časově náročné, jako například výroba specifických imunoglobulínů. Vzhledem k tomu nejsou využívány plošně ve veterinární praxi. Pokud jde o imunoglobulíny samotné, je známo, že krev k přípravě imunoglobulinů odebraná na jatkách a/nebo odebraná v chovech obsahuje, vzhledem k obecné promořenosti, globální směs homologních imunoglobulinů, potřebných k ochraně mláSat i dospělých zvířat při moderním odchovu. Jedná se o směs všech imunoglobulinů obsažených ve zvířecí krvi, tj. zejména IgG, T.gA a IgM. Homologní imunoglobuli202866 ny jsou získávány ze stejného druhu zvířat, například z hovězí jateční krve pro Skot, zvláětě pro telata, z vepřové krve pro selata apod. Tak například jsou známé preparáty, které obsahují směs imunoglobulinů, které byly izolovány z jateční prasečí a telecí krve, které se kombinují s vitaminy, zvláště A a D, a biogenními prvky, například fosforem a vápníkem ve . stopovém množství /Gafervit/· Aplikují se ve formě injekčního roztoku při poruchách výměny látkové, při zaostávání ve vývoji při stavech hypo-a agamaglobulinemie, při anemíi selat a chorobách selat spojených s odstavem.

Dále jsou známé preparáty, které obsahují hovězí iraunoglobulíny v kombinaci~s živými zárodky laktobacilu a nepatogenním kmenem E. coli s přídavkem sušeného mléka jako vehicula /Galaco/. Tento preparát se aplikuje při prevenci colidispepsií a při hypo*a agamaglóbuline— míckých stavech.

Podobně prostředek /Gamavit/, který je kombinací sušiny imunoglobulinu, glukosy, chlortetracyklinu, fosfátových a vápníkových iontů.

Některé nedostatky dosud známých preparátů odstraňuje prostředek podle vynálezu, jehož podstatou je, že obsahuje směs homologenních imunoglobulinů v množství 8 až 16 7. hmot. a esenciální aminokyselinu lysin v množství 15 až 25 Z hmot. a zbytek tvoří fyziologický roztok.

Esenciální aminokyselina lysin se užívá v běžné komerční produkci. Táto látka je stabilizátor a působí nespecifickou stimulaci tvorby protilátek a tak zvyšuje účinek základních homologních imunoglobulinů a prodlužuje pasivní ochranu zvířete navozenou přípravkem. Dále příznivě ovlivňuje vnitřní prostředí, zvláště úpravou acidobazické rovnováhy a tím umožňuje správnou funkci retikuloendoteliárního systému.

Ve světové literatuře nejsou údaje o působeni lysinu v injekční formě u zvířat. Jedinou zprávou je informace o použití aminutrinu /Informační zprávy SPOFA - Veterinářství - 1978 č. 4 str. 7-8/ na léčení a prevenci metabolických poruch. Zde byl pokusně užíván 20Z roztok 1-lysinu HC1 v dávkách 50-100 ml u telat při indikacích: deficit 1-lysinu, infekční otravy, poruchy metabolismu minerálií, rekonvalescence, jaterní nedostatečnost /intoxikace/, při otravách amoniakem, léčba alkaloz, hypomagnesiemíe, kanibalismus, úprava acidobazické rovnováhy a hniloba paznehtů.

Navrhovaná dávka lysinu ve směsi s homologními imunoglobuliny, t j , 30 mg/kg ž. h., působí při samostatné aplikaci jen velmi slabou, nebo žádnou, fyziologickou pdezvu; a to pouze v souvislosti s mírnou a krátkodobou úpravou acidobazické rovnováhy. Terapeutická dávka je 10x vyšší, tj . 300 mg/kg ž. v. /SPOFA 1978/.

Sytiergickým působením vysokomolekulárni složky imunoglobulinů a lysinu dojde jednak ke zvýšení obsahu imunoglobulinů jejich dodáním a jednak nespecifickou stimulací vlastního imunitního systému /viz graf č. 1/.

Na obrázku 1 je graficky znázorněna hladina sérových imunoglobulinů u telat, kterým byly aplikovány:

a/ placeboitj. fyziologický roztok v dávce 10 ml/tele b/ 20Z roztok lysinu v dávce 30 mg/kg ž. v.

c/ 20Z roztok lysinu v dávce 300 mg/kg ž. v.

d/ 10Z roztok homologních imunoglobulinů v dávce 15 mg/kg ž. v.

e/ prostředek podle vynálezu, tj . 15 mg homolpgních imunoglobulinů' a 30 mg/lysinu na 1 kg ž.v. f/ prostředek podle vynálezu bodu £ s jedním opakováním aplikace 21. den po první aplikaci.

Přípravek tvořený směsi homologních imunoglobulinů a lysinu se aplikuje ve formě injekčního roztoku, a to plošně, to znamená každému zvířeti v chovu. Aplikace se provádí parenterálně /injekcí/ do svalu, hluboce podkožně, anebo do žíly v dávce 5 až 25 mg imunoglobulinu a 10 až 100 mg lysinu na kilogram živé váhy bezprostředně po narození, nebo při odstavu, nebo při svodu, nebo při ohrožení infekcí všem zvířatům, anebo nemocným zvířatům. Rozsah dávek byl stanoven farmakologickým pokusem. Byly prověřovaný dávky minimální, optimální a maximální účinnosti jak u imunoglobulinS, tak i u lysinu. Nejnižší účinnou dávkou imunoglobulinů, při které byl staticky významný efekt, je 0,5 mg imunoglobulinů. Za nejnižší, účinnou ekonomicky optimální, byla stanovena dávka ,5 mg Xg/kg a od dávky 50 a více mg Ig/kg ž. v. nebyl již zjištěn zvýšený účinek, Stejně tak u lysinu byl synergický účinek s imunoglobuliny staticky významný u dávky 5 mg/kg ž. v. ve směsi s 1 5 mg imunoglobulinů, za ekonomicky optimální byla stanovena dávka 30 mg lysinu ve směsi s 15 mg Ig/kg ž. v. Do 500 mg je statisticky zjistitelný rozdíl účinku, i když ve velmi malém rozsahu. Aplikace se může opakovat 1 až 3x po základní aplikaci podle zoohygienických podmínek. U laboratorních zvířat, na příklad u opic nebo jiných vzácných zvířat, se prostředek s výhodou aplikuje buů v chovech, anebo při karanténě, dále plošně v celém chovu nebo stáji, anebo u ohrožených jedinců.

Podle vynálezu je použití prostředku zaměřeno tak, Že aplikované množství homologních imunoglobulinů ve směsi s lysinera pomůže překlenout choulostivé období fyziologické deficience. imunoglobulinů, tj . do minimálně 12. týdne života od narození, kdy jsou zvířata vystavena zvýšenému riziku onemocnění, a období celkového oslabení organismu,tj. po stresu, svodu, změně výživy, epidemiích a podobně, při zachování a zlepšení fyziologických poměrů.

Příprava prostředku spočívá ve výrobě injekčního roztoku směsi 10 X homologních imunoglobulinů, získaných známým způsobem frakcíonací krevní plasmy nebo séra síranem amonným, kyselinou kaprylovou, ajatinem, rivanolem nebo jiným způsobem, a 20 % lysinu. Čistota použitých imunoglobulinů musí být minimálně 70 Z celkového objemu. Aplikační injekční roztok musí být sterilní. Např.; směs homologních imunoglobulinů se připraví např. frakcíonací plasmy nebo séra z jateční krve ajatinem /diraetyllaurylbenzylaraoniumbromid/.

pH směsné krevní plasmy nebo séra získaného z jateční krve nebo z odběrů v chovech se upraví na hodnotu 8,00 * 0,05, Za stálého míchání se přidá na každých 1 000 ml plasmy 100 ml 10% roztoku ajatinu /komerční desinfekční roztok/ zředěného 900 ml destilované vody. Směs se za stálého míchání zahřeje na teplotu 38 °C, při které se míchá ještě 5 minut. Nato se bez předchozího ochlazení filtruje. /Sraženina zachycená na filtru se promíchá ve vodě - 1/5 objemu srážené směsi - a nechá se eluovat do druhého dne, pak se vylisuje. Získaná kapalina se přidá k hlavnímu podílu filtrátu, nebo až k filtrátu následující šarže plasmy./

Z filtrátu se odstraní případný zbytek ajatinu pomocí aktivního uhlí přidáním 2 % objemových aktivního uhlí. Získaná směs se nechá min. 15 minut stát pří laboratorní teplotě a pak se aktivní uhlí odfiltruje^

Nebo pH se upraví při frakcíonací kyselinou kaprylovou.

Získaný roztok směsí imunoglobulinů se zahustí lyofylizací. Do připraveného cca 25% roztoku lysinu ve fyziologickém roztoku se přidají iraunoglobuliny do finální koncentrace 10 %, upraví se obsah chloridu sodného, pH a přidá-se antiseptikum. Takto upravený injekční roztok se sterilizuje filtrací.

Přednost uvedeného postupu spočívá v tom, že při malé pracnosti, jednoduché manipulaci a nízkých nákladech se docílí účinné ochrany mláůat před úhynem, zajistí se profylaxe před některými virovými a bakteriálními nemocemi a vyrovná se, při plošném použití, imunobiologicky populace. Ověřovací zkoušky /na 10 000 kusů telat a 5 000 selat/ prokázaly zejména; nevyčerpatelný, laciný zdroj suroviny, která je jinak odpadem, jednoduchost a levná výroba, snížení ztrát až o více než 50 % původních ztrát podle zoohygienických podmínek, úrovně ošetřování, ustájení apod., snížení počtu nutných porážek, snížení morbidity, snížení ztrát dospělých kusů, snížení spotřeby lidské práce a tím zlepšení podmínek ošetřování, snížení spotřeby antibiotik a léčiv, snížení potřeby veterinárních úkonů.

Zlepšení odolnosti se projevilo výrazným zvýšením užitkovosti,například u telat došlo ke zvýšení prodejní váhy po 180 dnech o více než 11 kg proti kontrole, došlo ke zvýšení denních váhových přírůstků, zvýšení produkce mléka, zvýšení tučnosti mléka a zvýšení produkce masa. Omezení spotřeby antibiotik se příznivě projeví na zlepšení životního prostředí člověka, snížením nebezpečí vzniku rezistencí a podobně. Účelné zpracování krve, kdy po oddělení * plazmy je možno erytromasu dále zpracovat jako bohatý zdroj bílkovin.

V chovech laboratorních zvířat se účinek projeví vyšší produkcí, snížením ztrát a zlepšením zdravotního stavu a standardnosti experimentálního materiálu.

V chovech koní je společenský prospěch vyjádřen zvýšeným počtem odchovaných koní, jejich kondicí a nakonec aukční cenou, která je úměrná i zdravotnímu stavu a kondici.

U preparátu byla před aplikací úředně zkoušena podle ČSN 38 3001 a ČSL 3: a/ sterilita na krevním agaru - vyhovuje thioglykolátové půdě - vyhovuje saburaudově půdě - vyhovuje b/ neškodnost na myších - bez patologického nálezu morčatech - bez patologického nálezu c/ elektroforetická čistota /norma 70 %/ - 91,5 % vyhovuje d/ obsah antiseptika /norma 0,01 %/ - 0,009 % vyhovuje e/ pH /norma 6,2 - 7,2/ - 7,08 vyhovuje f/ obsah NaCl /norma 0,7 i 0,2/ - 0,708.

Vynález je objasněn dále na příkladech použití, kterými však není jeho obsah ani omezen či vyčerpán:

Přikladl

Z krve odehraná na porážce hovězího dobytka na jatkách se známým postupem připraví homologní imunoglobullny. Injekční roztok obsahuje 10 Z homologních imunoglobulínů, 20 Z lysinu a 0,7 Z chloridu sodného, stopové množství antiseptika například merthiolátu a zbytek tvoří voda. Takto připravený roztok se sterilizuje s výhodou filtrací. Aplikace se provádí parenterálně /subcutálně nebo inťra musculárně/, s výhodou automatem, v množství 10 ml každému teleti ihned po narození; po 20 dnech může být dávka opakována v dávce 15 ml na kus.

'Příklad 2

Injekční roztok připravený podle příkladu 1 ee aplijcuje plošně v množství 15 ml/tele při odstavu, s výhodou automatem. Opakování se provádí 1 - 3x vždy v rozmezí cca 20 dnů.

Příklad 3

Z hovězí krve odebrané na jatkách se připraví injekční roztok homologních iraunoglobulínů a lysinu jako v příkladu 1. Tento roztok je aplikován, s výhodou automatem, do svalu nebo podkožně v dávce minimálně 15 ml všem telatům při svodu, tj. plošně ihned při veterinární prohlídce před zařazením do velkokapacitního teletníku, anebo jiné formy chovu a ustájení. Aplikace se opakuje y prvních 6 týdnech po první injekcí, dvakrát. Mimoto aplikaci je možno opakovat podle zjištění veterinárního lékaře při Zvýšeném nebezpečí jakékoliv infekce plošně, nebo i jednotlivě při oslabení zvířete;a to v minimální dávce 15 mg homologních imunoglobulínů s 30 mg lysinu na 1 kg hmotností.

Příklad 4

Při výměně zástavu velkokapacitních stájí, ve kterých proběhla výrazná masová infekce, se z vyřazovaných kusů odebere podle stáří a váhy až 5 000 ml krve. Ze směsi se připraví homologní ímunoglobuliny ve formě injekčního roztoku s obsahem minimálně 10 Z hmot. a s 20 Z hmot. lysinu. Tento přípravek se aplikuje parenterálně nově zastaveným kusům před příchodem do stáje. Do 14 dnů až 3 týdnů še opakuje aplikace bu3 stájovými homologními ímunoglobuliny, anebo roztokem připraveným podle příkladu 1.

Příklad 5

Injekční roztok podle příkladu 1 se aplikuje do žíly v množství minimálně 15 mg imunoglobulinů s 30 mg lysinu na 1 kg hmotnosti všem kravám před porodem /jako prevence mastítid a endometritid/. Nebo je stejná aplikace u kusů nemocných užita jako podpůrná terapie.

Příkladů

Z prasečí krve získané na porážce jatek se připraví sterilní injekční roztok s minimálně 10 Z hmot. homologních imunoglobulinů a 20 Z hmot. lysinu. Tento se aplikuje všem právě narozeným selatům v dávce 5 až 7 ml cestou parenterální. Aplikace je opakována ještě jednou do 3 týdnů v minimální dávce 7 ml/sele. Podle zoohygienické situace, zdravotního stavu je možno aplikaci opakovat v dávce minimálně 15 mg/kg hmotnosti.

Příklad 7

Z krve koní získané na jatkách nebo odběry v chovech a stájích se izoluji homologni imunoglobulíny známým způsobem. Poté se připraví sterilní injekční roztok s obsahem 10 Z hmot. homologních imunoglobulinů, 20 Z hmot. lysinu. První aplikace se provádí u všech koní po narození, opakování se provádí 1 až 2x v rozmezí 14 až 21 dnů po předchozí aplikaci. Aplikaci je možno opakovat vždy před zvýšeným nebezpečím - převozy, stresem, novým ustájením apod. Minimální dávka aplikace je vždy 15 mg/kg hmotnosti.

Příklad 8

Z krve opic, získané při jejich totální exsanguinaci, například po provedeném testování, se připraví pro každý druh vždy homologní injekční roztok obsahující 10 Z hmot. imunoglobulínů a 20 Z hmot. lysinu, které jsou aplikovány všem kusům v den příchodu do karantény v množství minimálně 13 mg/kg hmot. S výhodou lze tento roztok kombinovat se stejnou dávkou lidského gammaglobulinu.

Obdobně je možné využít homologních imunoglobulinů i v chovech jiných hospodářských zvířat, zvířat domácích /psů a koček/ a dále laboratorních zvířat, exotů a kožešinových zvířat.

Claims (1)

1. Zvláštní význam má plošné použití prostředku podle vynálezu v chovech gnotohiontů, homozygotů a jedinců odchovaných po transplantaci vajíček či miniembryí například skotu, prasat a podobně.

   Použití prostředku podle vynálezu s obsahem homologních imunoglobulinů získaných ve stájích nebo chovech a speciálních zařízeních má význam profylaxe nebo slouží k podpoře jiné terapie. ·

   Injekční roztok byl po přípravě zkoušen podle ČsL 3 a ČSN 38 300, , zkoušení biologických přípravků. Provedené zkoušky vyhovují uvedeným normám: Zkoušky sterility : bez nálezu Zkoušky neškodnosti: vyhovuje ČSL 3 a ČSN Chemická analýza: čistota 92 Z obsah NaCl: 0,81 Z Následující tabulka 1 ukazuje srovnání . výsledků úhynu telat před a po aplikaci prostředku podle vynálezu a dále synergický účinek oproti účinkům samotných homologních imunoglobulinů, Tabulka 1 kusů úhyn nucené celkové nemocnost snížení ztrát telat poráž. ztráty ks Z ks Z ks Z ks Z Z ks/, 000 ks Kontrolní pokus 200 26 13 15 7,5 41 20,5 1 26 63 bez aplikace prostředku Homologní 23, 7 3,03 ,1 4,73 19 7,76 42 21 62 120 imunoglobulíny Přípravek podle 100 3 3,0 3,0 3,0 19 19 76 170 vynálezu apli- kace 1x Přípravek podle 200 3 1,5 1 0,5 4,0 2,0 34 17 84 180 vynálezu apli- kace 2x PŘE DMĚT VYNALEZU

   Prostředek k plošné ochraně mláSat před uhynutím, k profylaxi a podpůrné terapii enzootií v chovech živočišné výroby na bázi imunoglobulinů, vyznačený tím, že obsahuje směs homologních imunoglobulinů v množství 8 až 16 Z hmot. a esenciální aminokyselinu lysin v množství 15 až 25 Z hmot. a zbytek tvoří fyziologický roztok.

   1 list výkresů

   Srvrroprafia. o. p~ xávod 7. Most

   Obr. 1