CS202729B1 - Způsob výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gastrinu - Google Patents
Způsob výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gastrinu Download PDFInfo
- Publication number
- CS202729B1 CS202729B1 CS389878A CS389878A CS202729B1 CS 202729 B1 CS202729 B1 CS 202729B1 CS 389878 A CS389878 A CS 389878A CS 389878 A CS389878 A CS 389878A CS 202729 B1 CS202729 B1 CS 202729B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- nps
- solution
- trp
- coupling
- acetic acid
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 12
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 9
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 9
- BHNHHSOHWZKFOX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1H-indole Chemical compound C1=CC=C2NC(C)=CC2=C1 BHNHHSOHWZKFOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 5
- OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 4
- SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N ammonium thiocyanate Chemical compound [NH4+].[S-]C#N SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 150000002168 ethanoic acid esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 4
- -1 trichlorophenyl ester Chemical class 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 108010079943 Pentagastrin Proteins 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N pentagastrin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1[C]2C=CC=CC2=NC=1)NC(=O)CCNC(=O)OC(C)(C)C)CCSC)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N 0.000 description 3
- 229960000444 pentagastrin Drugs 0.000 description 3
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021022 Gastrin Human genes 0.000 description 2
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010012944 Tetragastrin Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- RGYLYUZOGHTBRF-BIHRQFPBSA-N tetragastrin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)CCSC)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 RGYLYUZOGHTBRF-BIHRQFPBSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Substances C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 XYXYXSKSTZAEJW-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVHJQCGUWFKTSE-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)OC(C)(C)C QVHJQCGUWFKTSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000027119 gastric acid secretion Effects 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- MEVUPUNLVKELNV-JEDNCBNOSA-N methyl (2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@@H](N)CCSC MEVUPUNLVKELNV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000005245 sintering Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran thf Chemical compound C1CCOC1.C1CCOC1 WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gastrinu.
Tetrapeptid gastrinu vyrobený podle vynálezu se používá pro diagnostiku žaludku.
Z tohoto vyrobitelný pentagastrin-slouží ke stimulaci sekrece žaludeční kyseliny a s ohledem na úěinnost a snášenlivost předSí všechny obvyklé podněcovatele sekrece. Může se používat ke zkoušení maximální výkonnosti tvorby kyseliny obsažené v žaludku.
Byla již navržena řada způsobů výroby tetrapeptidu gastrinu. Tak je v britských patentových spisech δ. 1 042 482, 1 042 483, 1 042 484, 1 042 485, 1 042 486, 1 042 487,
042 488 a 1 120 755, které byly také přihlášeny v jiných zemích, popsána syntéza pentagastrinu step by step, syntéza přes dipeptidderiváty a podle Merrifield-ovy techniky.
Ve všech patentech se kopulace provádí metodou aktivovaných esterů. Všechny až dosud používané skupiny chránící aminy jsou typu uretanů. Metodika syntézy začíná ve všech případech na C-terminálním konci s fenylalaninamidem. Až dosud používané kopulační metody nedovolují ve všech případech maximální výtěžek. Boc chránící skupiny, používané až dosud speciálně pro aminokyselinu tryptofan, ae nejeví jako prosté vedlejších produktů. Syntéza vycházející od C-terminálního konce gastrinu přináší potíže při hydrogenaci Asp-Phe-amidu. Zde se často objevují vedlejší reakce působené cyklizačními reakcemi. Z tohoto důvodu se hledal nový koncept syntézy.
202 729
202 729
Cílem vynálezu je objevení způsobu syntézy tetrapeptidu gaetrinu, který by neměl uvedené nedostatky známých syntéz. Nový způsob mé zaručit pokud možno vysoké výtěžky v jednotlivých kopulačních krocích. Novou strategií syntézy s použitím nových chránících skupin ae má v podetatě zabránit vedlejěim reakcím.
Vynález si klade za základní úlohu objevit nový způsob výroby tetrapeptidu gaetrinu, který zaručuje co možná vysoký výtěžek v jednotlivých krocích kopulace, a to použitím moderních kopulačních způsobů při speciálních krocích syntézy. Novou strategií syntézy se dalekosáhle zabrání vzniku vedlejších reakcí, ke kterým dochází zejména při hydrogenaci na A$p-Phe-amid, nebol kyselina asparágová je zatížena pouze jedním syntézním krokem a odpadá hydrogenace peptidové sekvence. Použití chránící skupiny Nps pro aminofunkci tryptofanu zabraňuje zejména, s ohledem na dosahované mírné podmínky odštěpení, vedlejžím reakcím v bočním řetězci.
Způsob podle vynálezu spočívá v tom, že se vyrobí dipeptid Nps-Trp-Uet-OHe kopulací dicyklohexylkarbodiimidovou metodou, navázání Asp-OTcp se provádí kopulační metodou směsných anhydridů, závěrečná kopulace feiyylalaninamidu se provádí metodou aktivovaných esterů a odětěpení chránící skupiny Nps se provádí rhodanidem amonným za ekvimolárního přídavku 2-methylindolu.
Při nové strategii syntézy se používají Met a Asp bez nákladných chránících skupin, to znamená, že se zmeněí celkový počet syntázních kroků. Tetrapeptid vyrobený podle vynálezu se může nechat zreagovat na N-terminálním konci kopulací s Boc- -alaninem známým způsobem na pentagastrin. (Vysvětlení zkratek sloučenin, respektive skupin, viz na konci popisu vynálezu.)
Strategie způsobu syntézy použitá podle vynálezu pro výrobu tetrapeptidu gaetrinu je znázorněna v následujícím schématu:
Nps-Trp.DCHA vyrobené známým způsobem ae pomoci chromatografie na tenká vrstvě (DCC) naváží s Uet-OKe.HCl na dipeptid Npe-Trp-líet-OUe. Potom ae uvolní metyleeter dipeptidu.
202 729
Ze 2-Asp~$>-0Tep- Z?-OBzl se získá katalytickou hydrogenaci Aep-tfC-OTcp jako sůl. Reakce Nps-Trp-Met-OB s Asp-OTcp na odpovídající tripeptid se provádí metodou směsných anhydridů. Tento tripeptid se může ihned kopulovat s Phe-NHg na požadovaný tetrapeptid Nps-Trp-Met-Asp-Phe-NB?. Uvolnění NHg-skupiny tetrapeptidu se provádí podle známé metody odštěpování Nps-chránících ekupin pomocí 2-metylindolu a rhodanidu amonného.
Příklad provedení
Nps-tryptofanylsiethioninme tylester (Nps-Trp-Me t-OMe)
K roztoku 4,0 g Nps-Trp.DCHA ve 120 ml chloroformu se přidá 1,49 g methioninmetylesteru hydrochloridu. K roztoku, ochlazenému na 0 °C, se přidá po částech 1,7 g dicyklohexylkarbodiimidu. Míchá se 20 hodin při teplotě místnosti. Potom se odfiltruje vzniklá dieyklohexylmočovina a chloroformový roztok se promyje dvakrát vždy 50 ml 0,5 %ního uhličitanu sodného, 2 %ní kyselinou sírovou a vodou. Potom se usuěí nad síranem sodným. Zfiltrovaný roztok se odpaří ve vakuu do sucha. Zbylý olejovitý zbytek se rozpustí ve 100 ml THP, ochladí na 0 °C a doplní 0,5 ml 50 %ní kyseliny octové. Dieyklohexylmočovina, která se při tom znovu vyloučí, se odfiltruje, roztok se ve vakuu zahusti a nakonec vysráží asi 60 ml etanolu.
b.t. = 120 až 125 °C.
/ot/^0 ~ - 58,0° /c » 1; metanol/.
Výtěžek: 3,0 g = 78 «.
Rf = 0,78 /butanol/ledová kyselina octová/H2° =4:1 : 1/.
Nps-tryptofanylmethionin.DCHA sůl (Nps-Trp-Met-OH.DCHA)
K roztoku 3,0 g Nps-Trp-Met-OMe ve 120 ml acetonu se přidá 6,6 ml 1 N NaOH. Roztok ee míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a potom ee zahustí ve vakuu. Zbylý olejovitý zbytek se vyjme do 100 ml vody a při 0 °C se okyselí 5 $ním roztokem KHSO^ na pH 2,0. Při tom se vyloučí olej, který se vyjme do esteru kyseliny octové. Féze esteru kyseliny octové se třikrát promyje vždy 40 ml vody a usuěí nad síranem hořečnatým. Potom se přikape
1,2 g dicyklohexylaminu a při tom se vyloučí pomalu za chlazení sůl DCHA.
Výtěžek: 1,2 g = 69 %.
/°^/^° * “ 31»5° /e lj metanol/.
Rp » 0,76 /butanol/ledová kyselina octové/HgO - 4:1: 1/.
Bod tání nebylo možno zjietit. Asi od 50 °C přes oblast tání až do 30 °C pomalý rozklad.
Analýza aminokyseliny: Trp : Met =1:1 nal. Trp : Met = 1 : 0,8.
202 729 fo -Trichlorfenylester kyseliny aeparágové
5,0 g/J-benzyleeter- -trichlorfenylester Z-asparégové kyseliny se za míchání rozpustí ve 150 ml ledová kyseliny octové. Roztok se filtruje až do vyčiření. Potom se přidají 2,0 g PdO/BaSO^ katalyzátoru. Zařízení se nejdříve vypláchne dusíkem a potom se roztokem vede za současného míchání vodík. Po 1 hodině se přikape 10 ml 3,5 N kyseliny chlorovodíkové v dioxanu, aby se konečný produkt získal jako HCl-sůl. Unikající plyn se zkouší pomocí roztoku hydroxidu barnatého na kysličník uhličitý. Po 3 hodinách ss potom jeětě reakce kontroluje pomocí chromátografie na tenké vrstvě. Po 15 hodinách již nelze dokázat v roztoku žádný výchozí produkt. Hydrogenace se přeruěí a katalyzátor se odfiltruje fritou. Filtrát se odstředí vé vakuu při teplotě 40 °C. Zbylý olej se rozpustí v 10 ml metanolu a pomalu se za míchání nakape do 200 ml studeného petroléteru. Při tom se vyloučí bílé hygroskopické krystaly, které se rychle odsají a usuěí v exikátoru.
B.t. = 130 až 134 °C.
Rp 55 0,19 /butanol/ledové kyselina octová/HgO = 4:1: 1/.
Výtěžek: 3,1 g · 86 %.
X. -Trichlorfenylester Nps-tryptofanylmethionylasparágové kyseliny
Do suspenze 7,0 g Nps-Trp-Met-OH.DCHA ve 150 ml esteru kyseliny octové se za míchání přidá 61 ml 0,2 N kyseliny sírové. Po oddělení organické vrstvy se třikrát promyje 50 ml vody a potom se usuěí nad síranem sodným. Filtrát se odpaří do sucha a zbytek ee vyjme do 25 ml THF. K tomuto roztoku se přidá 1 ekvivalent trietylaminu a roztok se ochladí na -15 °C. Potom se k ochlazenému roztoku nakape 1 ekvivalent etylesteru chlormravenčí kyseliny a směe se míchá 10 minut ve studené lázni. Současně se rozpustí 3,0 g Asp-OTep.HCl ve 25 ml THF a přikapou se 2 ekvivalenty trietylaminu a rovněž se ochladí na -15 °C. Tyto oba roztoky se spojí a teplota se z -15 °C nechá pomalu stoupat až na teplotu místnosti. Při tom se reakoe může sledovat na základě vývinu COg. Asi po 1 hodině nelze již pozorovat žádný vývin COg a roztok ee odpaří ve vakuu. Při tom zbude nažloutlý olej, který ee vyjme do eeteru kyseliny octové. Fáze esteru kyseliny octové se nyní promyje 1 N HC1 a vodou. Roztok, uauěený nad síranem hořečnatým, se zahustí a žlutý zbytek se vyjme do malého množství esteru kyseliny octové a vysráží studeným petroléterem.
B.t. = 95 až 102 °C.
Ry x 0,92 /butanol/ledové kyselina octová/ftgO = 4:1: 1/.
Výtěžek: 6,43 g » 79,9 ».
Nps-txyptofanylmethiohylaspartylfenylalaninamid
K roztoku 0,390 g (0,5 mmolu) -trichlorfenylesteru Nps-tryptofanylmethionylaeparágové kyseliny ve 25 ml dimetylformamidu se při teplotě +5 °C za míchání přikape roztok
0,082 g fenylalaninamidu, rovněž rozpuštěný v dimetylformamidu. Tato reakční směs se nechá stát tři dny při teplotě +5 °C ve chladničce. Potom ae nalije na směs 20 ml ledové
202 729 ▼ody a 10 ml cyklohexanu. Míchá se 20 minut a sraženina se odsaje. Usušený surový produkt se rozpustí v 50 ml horkého etylalkoholu a při stání přes noc v chladničce vykrystaluje konečný produkt.
B.t. » 120 až 125 °C.
Rj, = 0,70 /butanolAedová kyselina octová/voda = 4:1: 1/.
Výtěžek: 0,34 g » 88 %.
Tryptofanylmethionylaspartylfenylalaninamid
0,389 g (0,52 mmolu) Nps-tryptofanylmethionylaspartylfenylalaninamid se za míchání ' rozpustí v 50 ml dimetylformamidu a potom se přidá 0,136 g (1,04 mmolu) 2-metylindolu a 0,078 g (1,04 mmolu) rhodanidu amonného. Míchá se tři hodiny při teplotě místnosti.
Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se zbytek zpracovává až do úplného odbarvení éterem. Zbylý zbytek se digeruje velmi zředěným amoniakálním roztokem a potom vodou. Přikape se 1 ekvivalent trifluoroctové kyseliny a potom se usuší při tlaku 1 torru nad kysličníkem fosforečným. Konečný produkt existuje krystalický jako trifluoracetét a je tedy také stálý.
B.t. « 200 až 210 °C.
/íX/^° = - 24,0° /o = 1; dimetylformamid/.
Přehled použitých zkratek sloučenin a skupin
| Npa | o-nitrofenylsulfenyl |
| Asp | kyselina asparágová |
| Phe | fenylalanin |
| Met | methionin |
| Trp | tryptofan |
| CMe | metyleeter |
| Z | benzyloxykarbonyl |
| OTcp | trichlorfenyle ste r |
| OBzl | benzylester |
| DCHA | dicyklohexylamin |
| DCC | dicyklohexylkarbodiimid |
| BOC | t-butyloxykarbonyl |
| THF | tetrahydrofuran |
| DMF | dimethylformamid. |
202 729
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gststrinu, vyznačující ae tím, že se vyrobí dipeptid Npe-Trp-Met-OMe kopulací dicyklohexylkarbodiimidovou metodou, navázání Aap-OTcp se provádí kopulafiní metodou sečených anhydridů, závěrečná kopulace fenylalaninamidu se provádí metodou aktivovaných esterů a odštěpení chránící skupiny Nps se provádí rhodanidem amonným ze ekvimolárního přídavku 2-methylÍndolu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD19952677A DD139939A3 (de) | 1977-06-16 | 1977-06-16 | Verfahren zur herstellung der c-terminalen tetrapeptidsequenz von gastrin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS202729B1 true CS202729B1 (cs) | 1981-01-30 |
Family
ID=5508754
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS389878A CS202729B1 (cs) | 1977-06-16 | 1978-06-14 | Způsob výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gastrinu |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| BG (1) | BG30991A1 (cs) |
| CS (1) | CS202729B1 (cs) |
| DD (1) | DD139939A3 (cs) |
| HU (1) | HU179926B (cs) |
-
1977
- 1977-06-16 DD DD19952677A patent/DD139939A3/de not_active IP Right Cessation
-
1978
- 1978-06-08 BG BG7840014A patent/BG30991A1/xx unknown
- 1978-06-14 CS CS389878A patent/CS202729B1/cs unknown
- 1978-06-15 HU HUBE001321 patent/HU179926B/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD139939A3 (de) | 1980-01-30 |
| BG30991A1 (en) | 1981-10-15 |
| HU179926B (hu) | 1983-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zervas et al. | New methods in peptide synthesis. I. Tritylsulfenyl and o-nitrophenylsulfenyl groups as N-protecting groups | |
| Taylor | Ynthesis of | |
| US6255285B1 (en) | Phenethylamine derivatives | |
| US6235876B1 (en) | Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides | |
| EP0662078A1 (en) | New reagents for peptide couplings | |
| PL114981B1 (en) | Process for preparing novel peptide | |
| EP1212350A1 (en) | A process for the preparation of h-tyr-d-ala-phe(f)-phe-nh 2? | |
| EP0123950A2 (en) | Intermediates for thymosin alpha 1 and desacetylthymosin alpha 1 | |
| CHOREV et al. | Partially modified retro‐inverso peptides: Comparative Curtius rearrangements to prepare 1, 1‐diaminoalkane derivatives | |
| US5965770A (en) | N-aryloxycarbonyl amino acids and peptides and their derivatives | |
| US3862927A (en) | Process for preparation of vasoactive intestinal peptide | |
| CN117003791B (zh) | 一种二苯基膦酰氧基双酚a类化合物及其制备美白九肽-1中的应用 | |
| CS202729B1 (cs) | Způsob výroby C-terminální tetrapeptidové sekvence gastrinu | |
| US4038282A (en) | Pyridyl-4-methyl-succinimidocarbonate and process for its preparation | |
| US6248865B1 (en) | Compounds useful for the synthesis of dolastatin analogs | |
| GB1584669A (en) | Process for synthesising peptides containing a sulphated tyrosine residue | |
| PL167504B1 (pl) | Sposób wytwarzania peptydów za pomoca syntezy w fazie stalej PL PL | |
| US3679655A (en) | N,n-disubstituted aminoethylcarbamyl protecting groups for cysteine | |
| US20040225108A1 (en) | Novel process for production of the somatostatin analog, octreotide | |
| US4172130A (en) | α-AMINOACYL CONTAINING NEW PEPTIDES WITH GASTRIN EFFECTS AND A PROCESS FOR THE PREPARATION THEREOF | |
| CA2020650A1 (en) | Technique for rapid peptide coupling | |
| SU659083A3 (ru) | Способ получени сульфата октапептидамида-терминального октапетида холецистокининпанкреазимина | |
| US3780015A (en) | Process for preparing lysine containing peptides | |
| CZ288448B6 (en) | Pentapeptide hydrochloride, processes of its preparation and intermediates therefor | |
| US4183909A (en) | Phenylglycine-containing new peptides with gastrine effects and a process for the preparation thereof |