CS202181B1 - Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine - Google Patents
Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine Download PDFInfo
- Publication number
- CS202181B1 CS202181B1 CS753977A CS753977A CS202181B1 CS 202181 B1 CS202181 B1 CS 202181B1 CS 753977 A CS753977 A CS 753977A CS 753977 A CS753977 A CS 753977A CS 202181 B1 CS202181 B1 CS 202181B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- low molecular
- molecular weight
- solution
- albumin solution
- albumin
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 35
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 35
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 3
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000252233 Cyprinus carpio Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004319 trichloroacetic acid Drugs 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- -1 after thetaphosphate Chemical compound 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
(54) Způsob odstraňováni n1zkomolekulárnich sloučenin z roztoku krevního albuminu(54) A method for removing low molecular weight compounds from a blood albumin solution
Poznáni skutéčnosti,že albumlnová trakce krevních bílkovin je zodpovědná za udržováni osmotické rovnováhy v organismu způsobilo,že albuminový roztok,upravený do Intusnl tormy o koncentraci bílkovin 5 nebo 20% se stal jedním z nejčastěji užívaných preparátů,vyrobených z krevní plazmy.Až dosud se při výrobě albuminu kladl důraz na jeho výtěžnost a na elektrotoretickou čistotu.Základní podmínkou pro klinickou efektivnost účinku albuminového preparátu je co nejnižši obsah nlzkomolekulárnich anorganických nebo organických sloučenin,která se do albuminového roztoku dostávají v souvislosti s jeho technologickou formou separace. Vynález řeži způsob odstraňováni těchto sloučenin z roztoku krevního albuminu.Recognizing the fact that albumin traction of blood proteins is responsible for maintaining the osmotic balance in the body, the albumin solution, adjusted to the Intussion 5 or 20% protein concentration, has become one of the most commonly used preparations made from blood plasma. The basic condition for the clinical effectiveness of the effect of the albumin preparation is the lowest possible content of low molecular weight inorganic or organic compounds that enter the albumin solution in connection with its technological form of separation. The invention provides a method for removing these compounds from a blood albumin solution.
Na precipitaci albuminu ze směsi plasmatických nebo sérových krevních bílkovin byl použit siran amonný/Schultze H.,Sch8nenberger M.,Matheke H.D.:Behringwerke Mitt. 26,21,1952; Dietzel E.,Geiger H.: Behringwerke Hitt. 43,1 29,1 964/,polymetafostát /Nitschman H.S.,Rickli E.,Kistler P.: Vox Sang. 5,232,1 960/,trich loroctová kyselina /Hichel S.E.; Biochem.J. 82,Ammonium sulfate / Schultze H., Schunenberger M., Matheke H.D., Behringwerke Mitt. 26.21.1952; Dietzel E., Geiger H., Behringwerke Hitt. 43.1 29.1 964], polymetaphostate (Nitschman H.S., Rickli E., Kistler P .: Vox Sang. 5,232,1960], trichloroacetic acid (Hichel S.E .; Biochem.J. 82,
2,1 962/,kapry lát /Hoch H.,Chanutin A.:Arch.Biochem.Biophys. 51,271,1 954/,aceton/Schwert2,1, 962], carp carp (Hoch H., Chanutin A.:Arch.Biochem.Biophys. 51,271,1954), acetone (Schwert)
G.U.: J.Amer.Chem.Soc. 79,139,1957 /,étér / Kekwitz R.A.,Hc Kay H.E.,Nance H.H.,Record B.R:Biochem.J. 60,671,1 955 /, etanol / Cohn E.J.,Strong L.E., Hughes W.L.,Hulford D.J., Ashworth J.N.,Melin H.,Taylor H.L.:J.Amer.Chem.Soc. 68,459,1946; Taylor H.L.,Bloom F.C.,G.U .: J.Amer.Chem.Soc. 79,139,1957], ether (Kekwitz R.A., Hc Kay H.E., Nance H.H., Record B.R: Biochem. J. 60,671,1955), ethanol (Cohn E. J., Strong L. E., Hughes W. L., Hulford D. J., Ashworth J. N., Melin H., Taylor H. L., J.Amer.Chem.Soc. 68,459,1946; Taylor H.L., Bloom F.,
Mc Call K.B.,Hyndman L.A.:J.Amer.Chem.Soc. 78,1353,1956/,etanol spolu se Zn++ a Ba ++ / Cohn E.J.,Gurd F.N.R.,Surgener D.H.,Barnes B.A.,Broun R.K.,Derounaux G.,Gillespie J.M., Kahnt F.U.,Lewer W.F.,Liu C.H.,Mitte Iman D.,Mouton R.F.,Schmid K.,Uroma E.: J.Amer. Chem.Mc Call KB, Hyndman LA: J.Amer.Chem.Soc. 78,1353, 1956 /, ethanol together with Zn ++ and Ba ++ / Cohn EJ, Gurd FNR, Surgener DH, Barnes BA, Broun RK, Derounaux G., Gillespie JM, Kahnt FU, Lewer WF, Liu CH, Mitte Iman, D., Mouton, RF, Schmid, K., Uroma, E .: J.Amer. Chem.
202 181202 181
202 181202 181
Soc. 72,465,1960/ a ionty Zn++ /Cohn E.J.,TuLlis J.L.,Surgener D.M.,D*Hont M.: Science 114,479,1951 /.Soc. 72,465,1960 (and Zn ++ ions (Cohn EJ, TuLlis JL, Surgener DM, D * Hont M .: Science 114,479,1951)).
Současná technologická praxe však na jedné straně sice odděluje albumin od směsi jiných krevních bílkovin,ale na druhé straně zanáší do albuminového roztoku nizkomolekulárni anorganické nebo organické sloučeniny.Technologický postup může taktéž část některých nizkomolekulárnich sloučenin s biochemickofyziologickou aktivitou v roztoku koncentračně obohacovat vzhledem k jejich koncentraci ve výchozí surovině,ze které byl albumin izolován.However, current technological practice, on the one hand, separates albumin from a mixture of other blood proteins, but on the other hand enters low-molecular inorganic or organic compounds into the albumin solution. The technological process may also concentrate some of the low-molecular compounds with biochemical-physiological activity in solution the starting material from which albumin was isolated.
Přítomnost netěkavých anorganických soli snižuje v injekčním roztoku albuminu jeho osmotickou kapacitu.Přítomnost netěkavých nizkomolekulárnich organických molekul v roztoku albuminu vytváří předpoklady pro vznik nežádoucích interakci těchto látek s molekulami albuminu,a to zejména při lyofilizaci nebo pasteurizaci,popřípadě v průběhu skladováni v podobě terapeutického preparátu.The presence of non-volatile inorganic salts reduces the osmotic capacity of the albumin solution for injection. The presence of non-volatile low molecular weight organic molecules in the albumin solution creates conditions for undesirable interaction of these substances with albumin molecules, especially during lyophilization or pasteurization or during storage as a therapeutic agent.
Nedostatkem dosud užívané technologie je skutečnost,že takto připravené lyofi lizované preparáty obsahuji 2,5 +. 0,5 X sodíku,který citelně snižuje klinický efekt preparátu, zejména při odčerpáváni tekutin tělesných tkáni za patologických podmínek.A disadvantage of the technology used hitherto is the fact that the lyophilized preparations thus prepared contain 2.5 +. 0.5% sodium, which noticeably reduces the clinical effect of the formulation, particularly when pumping fluid into body tissues under pathological conditions.
U nově navrhované technologie se tyto potiže nevyskytovaly v tak výrazné intenzitě, což lze dokumentovat údajem,že z 10 připravených experimentálních šarži podle předloženého vynálezu bylo dosaženo sníženi sodíku u lyofi lizovaného preparátu o 95 X až 99,9 X ve srovnáni s týmž materiálem,který byl lyofilizován bez předcházející separace nlzkomolekulárnich sloučenin.With the newly proposed technology, these problems did not occur at such a significant intensity, as evidenced by the indication that out of the 10 experimental batches of the present invention, a sodium reduction of the lyophilized formulation of 95X to 99.9X was achieved compared to the same material. was lyophilized without prior separation of the low molecular weight compounds.
Podstata odstraňováni nizkomolekulárnich sloučenin z roztoku krevního albuminu spočívá podle předloženého vynálezu v tom,že bílkovinný mateřiá l,obsahujici purifikovaný albumin se suspenduje za aseptických podmínek v takovém množství destilované apyrogenni vody o teplotě 0 °C až +6 °C,aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2 X až 15 X s optimem 8 Z+ 2 X,albuminový roztok se vyčeři například filtraci a separace nizkomolekulárnich sloučenin z albuminového roztoku se provádí elučni gelovou chromatografll s vylučovací mezi gelu,vyjádřenou molekulovou hmotnosti nizkomolekulárnich sloučenin do 10.000, pomoci eluce s destilovanou apyrogenni vodou anebo s roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenni vodě v koncentraci až 0,9 X,s optimem jen v destilované apyrogenni vodě o teplotě 0 °C až +6 °c s hodnotou pH v rozmezí 4,0 až 6,0 při průtoku 2According to the present invention, the principle of removing low molecular weight compounds from a blood albumin solution is that the proteinaceous material containing the purified albumin is suspended under aseptic conditions in an amount of distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C. found in the range of 2 X to 15 X with an optimum of 8 Z + 2 X, the albumin solution is clarified, for example, by filtration and separation of the low molecular weight compounds from the albumin solution is carried out by gel elution chromatography with gel exclusion. pyrogen-free water or sodium chloride solution in distilled pyrogen-free water at a concentration of up to 0.9%, with optimum only in distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° c with a pH of 4.0 to 6.0 at flow 2
O, 01 ml až 3,0 ml za minutu na cm výtokové plochy gelové části kolony.0.01 ml to 3.0 ml per minute per cm outlet area of the gel portion of the column.
Za optimální průtok je možno považovat objem v rozmezí od 0,05 ml do 1 ml za minutu na cm ,kdy vzniká naředěnl na čele a konci výtoku bílkoviny z kolony,při čemž cca 80 X naloženého objemu roztoku bílkovin vytéká z kolony prakticky v té koncentraci,v jaké byl roztok bílkovin na kolonu nasazen.Průtoky kolem 5 ml za minutu na cm2/Friedli H.,KistlerA volume ranging from 0.05 ml to 1 ml per minute per cm can be considered as optimal flow rate, resulting in a dilution at the head and end of the protein effluent, with approximately 80% of the loaded protein solution flowing out of the column at practically the same concentration. in which the protein solution was applied to the column. Flow rates of about 5 ml per minute per cm 2 / Friedli H., Kistler
P. sChimia 26,25,1972/ způsobuji naředěnl roztoku vice než na dvojnásobný objem.P. sChimia 26,25,1972] cause dilution of the solution more than twice the volume.
Z gelové chromatografické kolony vyteklý albuminový roztok se podrobí sterilizaci, například filtraci nebo radiační sterilizaci a potom dalšímu zpracováni,například lyofilizaci nebo zakoncentrovánl pomoci vakuové dešti láce,popřípadě pomoci membrán.The spilled albumin solution from the gel chromatography column is subjected to sterilization, for example filtration or radiation sterilization, and then further processing, for example, lyophilization or concentration by means of vacuum rain or membranes.
Vynález je dále objasněn na příkladech provedeni,ji miž jeho obsah není ani omezen,The invention is illustrated by the following non-limiting examples.
202 181 ani vyčerpán.202 181 not exhausted.
Přiklad 1Example 1
Výchozi surovinou je pasta frakce V,izolovaná podle Cohna.Bi Ikovinný albuminový materiál se rozpouští v takovém množství destilované apyrogenni vody o teplotě 0 °C až +6 °C,aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2 Z až 15 Z s optimem 8 % + 2 %.Rozpouštěni se urychluje mícháním.Po rozpuštěni se albuminový roztok vyčeři, například fiItraci.The starting material is a paste of fraction V, isolated according to Cohn.Bi The proteinaceous albumin material is dissolved in an amount of distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C such that the protein concentration is in the range 2 Z to 15 Z The dissolution is accelerated by stirring. After dissolution, the albumin solution is clarified, for example by filtration.
V technologických poměrech jsou výše uvedená podmínky zpravidla zachovány tehdy, když rozpustíme 1 kg albuminové pasty ve 2 000 ml destilované apyrogenni vody o teplotě 0 °C až +6 °C.Hodnota takto vzniklého albuminového roztoku bývá zpravidla mezi pH 4,0 až 6,0 a koncentrace bílkovin bývá v rozmezí 8*2 Z.Takto připravený roztok purifi kovaného albuminu se vyčeři například filtraci a nizkomolekulárni sloučeniny se z albuminového roztoku odstraní gelovou chromatografi 1,napřiklad na dextranových gelech,pod komerčním označením Sephadex G-25,G-50,na polyakrylových gelech pod označením Biogel P-2,P-4,P-6, na metakrylátových gelech,pod komerčním označením Spheron P-40,nebo na jiných materiálech, jako jsou například domácí vývojové materiály na bázi řetězeného škrobu s epichlorhydrinem nebo na bázi perlové celulózy,s vylučovací mezi gelu,vyjádřenou molekulovou hmotnosti nlzkomolekulárnich sloučenin do 10 000,přičemž uvedené materiály je nutno používat v optimálním zrněni,zaručujicim průtok pro technologická podmínky.In technological conditions, the above conditions are generally maintained when 1 kg of albumin paste is dissolved in 2 000 ml of distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C. The value of the resulting albumin solution is usually between pH 4.0 and 6, Such a purified albumin solution is clarified, for example, by filtration, and the low molecular weight compounds are removed from the albumin solution by gel chromatography 1, for example on dextran gels, under the commercial designation Sephadex G-25, G-50. , on polyacrylic gels under the designation Biogel P-2, P-4, P-6, on methacrylate gels, under the commercial designation Spheron P-40, or on other materials such as home-made developmental materials based on chain starch with epichlorohydrin or bead cellulose, with a gel exclusion agent, expressed by the molecular weight of low molecular weight compounds up to 10 000, the guided materials must be used in optimum grain size, guaranteeing flow for technological conditions.
Nabobtnalý get,promytý apyrogenni vodou,před tim předestilovanou o teplotě 0 °C až +6 °C se plni do kolony.Za optimální rozměry technologických gelově-chromatografických kolon se považuji taková,kde průměr kruhová,nebo úhlopříčka Čtvercové nebo obdélníkové základní plochy kolony k výšce kolony se pohybuje v poměru 1:5 až 1:10.The swollen get, washed with pyrogen-free water, previously distilled at 0 ° C to + 6 ° C is packed into the column. For optimum size of the technological gel-chromatography columns, it is considered that the diameter of the round or diagonal square or rectangular base area the column height ranges from 1: 5 to 1:10.
Do kolony necháme nasávat albuminový roztok takovou rychlost1,aby průtok spodní o plochou kolony se pohyboval mezi 0,01 ml až 3,0 ml za minutu na plochu 1 cm .Množství albuminového roztoku,nasazeného na kolonu nemá překročit 25 % až 30 Z objemu gelové části chromatografické kolony.Allow the albumin solution to be sucked into the column at a rate of 1 such that the flow through the bottom of the column is between 0.01 ml and 3.0 ml per minute per area of 1 cm. The amount of albumin solution applied to the column should not exceed 25% to 30% parts of the chromatography column.
Po nasazeni celého objemu albuminového roztoku se chromatografické kolona promývá s destilovanou apyrogenni vodou anebo s roztokem chloridu sodného v destilované apyrogenni vodě o koncentraci až 0,9 Z, s optimem jen s destilovanou apyrogenni vodou o teplotě 0 °C až +6 °C při zachováni stejné průtokové rychlosti.After loading the entire volume of the albumin solution, the chromatography column is washed with distilled pyrogen-free water or with sodium chloride solution in distilled pyrogen-free water at a concentration of up to 0.9 Z, preferably only with distilled pyrogen-free water at 0 ° C to + 6 ° C of the same flow rate.
Po výtoku albuminového roztoku,zbaveného nlzkomolekulárnich sloučenin se gelově 2 chromatografické kolona promývá rychlosti cca 0,3 ml až 0,6 ml za minutu na cm minimálně 10ti násobkem objemu své gelové části s 1M roztokem chloridu sodného v apyrogenni destilované vodě.Potom se chromatografické kolona promyje minimálně 15ti násobkem objemu své gelové části s apyrogenni destilovanou vodou o teplotě 0 °C až +6 °C,při čemž lze oddělováni nlzkomolekulárnich sloučenin z albuminového roztoku opakovat.Following the effluent of the low-molecular-weight albumin solution, the gel 2 chromatography column is washed at a rate of about 0.3 ml to 0.6 ml per minute per cm at least 10 times the volume of its gel portion with 1M sodium chloride solution in pyrogen-free distilled water. Wash with at least 15 times the volume of its gel portion with pyrogen-free distilled water at 0 ° C to + 6 ° C, whereby the separation of low molecular weight compounds from the albumin solution can be repeated.
V případě,že bychom prováděli odsolováni vzhledem až k 0,9 Znimu roztoku chloridu sodného v apyrogenni vodě,ekvilibrizujeme chromatografickou kolonu po promyti s destilovanou vodou s lOtinásobkem objemu gelové části se zvolenou koncentraci chloridu sodného a potom lze děleni nlzkomolekulárnich sloučenin opakovat.If desalination is carried out with respect to 0.9% sodium chloride solution in pyrogen-free water, equilibrate the chromatography column after washing with distilled water with 10 times the volume of the gel portion with the selected sodium chloride concentration, and then the separation of the low molecular weight compounds can be repeated.
202 181202 181
Albuminový roztok po eluci z gelově chromatografické kolony se podrobí sterilizaci, například filtraci nebo radiační sterilizaci a potom dalšímu zpracováni,například lyofilizaci nebo zakoncentrovánl pomoci vakuové dešti láce,popřípadě pomoci membrán.The albumin solution, after elution from the gel chromatography column, is subjected to sterilization, for example filtration or radiation sterilization, and then further processing, for example, lyophilization or concentration by vacuum distillation or by means of membranes.
Numerické hodnoty,uváděné jako optima,jsou vhodné pro technologické provedeni,které bylo úspěšně odzkoušeno.The numerical values, referred to as optimum, are suitable for a technological embodiment which has been successfully tested.
Přiklad 2Example 2
Výchozí surovinou může být bílkovinné pasta albuminu,izolovaná 1 pomoci síranu amonného,po týmetafosfátu,tri chloroctové kyše liny,kapry létu,acetonu,étéru,etanolu spolu s Zn++a Ba ++,anebo jenom pomoci Zn++.B1Ikovinná pasta se zpracovává v dalším postupu jakoThe starting material may be albumin protein paste, isolated with ammonium sulfate, after thetaphosphate, tri chloroacetic acid, summer carp, acetone, ether, ethanol together with Zn ++ and Ba ++ , or only with Zn ++ . processes in the following procedure as
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS753977A CS202181B1 (en) | 1977-11-16 | 1977-11-16 | Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS753977A CS202181B1 (en) | 1977-11-16 | 1977-11-16 | Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS202181B1 true CS202181B1 (en) | 1980-12-31 |
Family
ID=5424720
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS753977A CS202181B1 (en) | 1977-11-16 | 1977-11-16 | Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS202181B1 (en) |
-
1977
- 1977-11-16 CS CS753977A patent/CS202181B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Elgin et al. | Limited heterogeneity of the major nonhistone chromosomal proteins | |
| Markey et al. | Human platelets contain profilin, a potential regulator of actin polymerisability | |
| Safer et al. | Isolation of a 5-kilodalton actin-sequestering peptide from human blood platelets. | |
| Thompson et al. | Phosphorylation of ovine rhodopsin. Identification of the phosphorylated sites | |
| Bellvé et al. | Synthesis and amino acid composition of basic proteins in mammalian sperm nuclei | |
| MacGillivray et al. | The heterogeneity of the non-histone chromatin proteins from mouse tissues | |
| FI81720C (en) | Procedure for inactivating increase-prone filterable disease readers in blood products | |
| Michael | The isolation of albumin from blood serum or plasma by means of organic solvents | |
| FI102036B1 (en) | Process for the preparation of stable preparations containing fat-soluble substances | |
| Böhm et al. | Proteolytic Digestion Studies of Chromatin Core‐Histone Structure: Identification of a Limit Peptide of Histone H2A | |
| Tuan et al. | Calcium-binding protein of chorioallantoic membrane: identification and development expression. | |
| Evans et al. | Zinc transport by transferrin in rat portal blood plasma | |
| Chiu et al. | DNA-binding chromosomal nonhistone proteins. Isolation, characterization, and tissue specificity | |
| PL99599B1 (en) | THE METHOD OF OBTAINING EXTREMELY TOLERATED GAMMAGLOBULIN | |
| Kahlenberg et al. | Studies on the characterization of the sodium-potassium transport adenosinetriphosphatase: V. Partial purification of the lubrol-solubilized beef brain enzyme | |
| Johns et al. | A method for the large scale preparation of the avian erythrocyte specific histone F2C | |
| Silversand et al. | Isolation of turbot (Scophthalmus maximus) vitellogenin by high-performance anion-exchange chromatography | |
| PL210616B1 (en) | Processes for the preparation of fibrinogen | |
| Sherman et al. | In vivo transformation between fibrinogens of varying ethanol solubilities: a pathway of fibrinogen catabolism | |
| Mikhailidis et al. | Effect of human plasma proteins on stabilisation of platelet anti-aggregatory activity of prostacyclin | |
| CS202181B1 (en) | Method of removing the low molecular compounds from solution of the blood albumine | |
| Schoenenberger et al. | Peptide inhibitors of lactic dehydrogenase (LDH). II. Isolation and characterization of peptides I and II | |
| Schwartz | Rat embryo nonhistone chromosomal proteins: interaction in vitro with normal and bromodeoxyuridine-substituted DNA | |
| Po-Chao Lin et al. | Isolation and properties of nonhistone chromosomal proteins from pea chromatin | |
| Gronow et al. | Nuclear protein changes during the nitrosamine-induced carcinogenesis of rat liver |