CS201892B1 - Process for preparing flurosceinylisothiocyanates - Google Patents

Process for preparing flurosceinylisothiocyanates Download PDF

Info

Publication number
CS201892B1
CS201892B1 CS886678A CS886678A CS201892B1 CS 201892 B1 CS201892 B1 CS 201892B1 CS 886678 A CS886678 A CS 886678A CS 886678 A CS886678 A CS 886678A CS 201892 B1 CS201892 B1 CS 201892B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
aminofluorescein
reaction
solution
thiophosgene
formula
Prior art date
Application number
CS886678A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Josef Pitra
Vaclav Zoula
Original Assignee
Josef Pitra
Vaclav Zoula
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Josef Pitra, Vaclav Zoula filed Critical Josef Pitra
Priority to CS886678A priority Critical patent/CS201892B1/en
Publication of CS201892B1 publication Critical patent/CS201892B1/en

Links

Landscapes

  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu přípravy fluoresceinylisothiokyanátů vzorce IThe invention relates to a process for the preparation of fluoresceinyl isothiocyanates of the formula I

které pod obchodním označením isomer I a směs isomerů slouží jako diagnostická fluorescenční činidla, například při imunofluorescenční analýze.which under the trade name isomer I and the mixture of isomers serve as diagnostic fluorescent agents, for example in immunofluorescence analysis.

Pod pojmem isomer I se rozumí látka, která nese isothiokyanátovou funkční skupinu v poloze 5 fluoreseeinového skeletu. Směsný preparát obsahuje kromě této látky ještě isomerní sloučeninu, analogicky substituovanou v poloze 6, jak je ze vzorce patrno.Isomer I refers to a substance that carries an isothiocyanate functionality at the 5-position of a fluorescein backbone. The mixed preparation contains, in addition to this, an isomeric compound analogously substituted at the 6-position, as can be seen from the formula.

Přípravou uvedených činidel se zabývá například čs. autorské osvědčení č. 190 225, a to obecně známou reakcí thiofosgenu s primárními aminy v prostředí dimethylforrnamidu jako činidla usnadňující rozpouštění obtížně rozpustných aromatických aminů, v tomto případě 5- nebo 6-aminofluoresceinu vzorce II, resp. jejich solí.The preparation of said reagents is dealt with, for example, in Czechoslovakia. No. 190,225, by the generally known reaction of thiophosgene with primary amines in dimethylformamide as a facilitator for the dissolution of sparingly soluble aromatic amines, in this case 5- or 6-aminofluorescein of formula II, respectively. their salts.

Jak je uvedeno, reaguje dimethylf ormamid s thiofosgenem velmi energicky. Při tom překvapivě nastává i reakce s aminem za vzniku příslušného isothiokyanátu. Reakce thiofosgenu s dimethylforinaímidem je provázena silným vývojem tepla a značná část thiofosgenu přichází touto cestou nazmar.As mentioned, dimethylformamide reacts very strongly with thiophosgene. Surprisingly, the reaction with an amine also occurs to form the corresponding isothiocyanate. The reaction of thiophosgene with dimethylforinaimide is accompanied by strong heat development, and much of the thiophosgene is lost in this way.

Silné tepelné zabarvení průvodní reakce a s ní spojené ztráty thiofosgenu omezují použitelnost zmíněného postupu na laboratorní měřítko. Tato okolnost byla podnětem ke hledání metody, které by nebyla zatížena uvedeným nedostatkem. Cílem bylo nalézt reakční podmínky pro· technologii zpracování libovolně velkých násad, a to způsobem hospodárným a spolehlivě ovladatelným.The strong thermal coloration of the accompanying reaction and the associated loss of thiophosgene limit the applicability of the process to laboratory scale. That circumstance prompted a search for a method that would not be burdened by that deficiency. The aim was to find reaction conditions for processing technology of any size in a manner that is economical and reliable to operate.

Soli 5-, resp. 6-aminofluoresceinu, především hydrochlorid, jsou dobře rozpustné v bezvodé nebo zředěné kyselině octové, například 80 až 85 %. Bylo zjištěno, že v tomto prostředí reagují s thiofosgenem za vzniku meziproduktu, zřejmě fluoresceinylthiokarbamoylchloridu, ve smyslu obecné reakceSalts of 5-, respectively. The 6-aminofluorescein, especially the hydrochloride, is readily soluble in anhydrous or dilute acetic acid, for example 80 to 85%. It has been found that in this environment they react with thiophosgene to form an intermediate, possibly fluoresceinylthiocarbamoyl chloride, in the sense of the general reaction

RNH2 + CSC12 = RNH . CSC1 + HC1RNH 2 + CSCl 2 = RNH. CSC1 + HCl

Látky tohoto typu, tj. substituované thiokarbamoylchloridy, jsou popisovány jako sloučeniny citlivé na styk s vodou (Dyson, George, J. Ghem. Soc. 125, 1702, 1924), která vyvolává jejich rychlou přeměnu na odpovídající isothiokyanáty podle vztahuSubstances of this type, ie substituted thiocarbamoyl chlorides, are described as water-sensitive compounds (Dyson, George, J. Ghem. Soc. 125, 1702, 1924), which induces their rapid conversion to the corresponding isothiocyanates according to the relationship

RNHCSC1 RN = C = S + HC1RNHCSC1 RN = C = S + HCl

Proti očekávání se však výše zmíněný meziprodukt projevil jako značně stálý. Vlitím reakční směsi do vody nebo jejím rychlým zředěním vodou se vyloučil v nezměněném stavu. Teprve velice pomalým ředěním vodou za vydatného míchání se měnil na fluoresceinylisothiokyanát, který byl získán jako amorfní prášek. Protože se tato cesta ukázala pro preparativní účely jako nespolehlivá, byl hledán vhodnější způsob zpracování reakčního roztoku, především takový, který by vedl ke krystalické látce.Contrary to expectations, however, the above-mentioned intermediate proved to be quite stable. By pouring the reaction mixture into water or by rapidly diluting it with water, it precipitated unchanged. Only with very slow dilution with water with vigorous stirring was it converted to fluoresceinyl isothiocyanate, which was obtained as an amorphous powder. Since this route proved to be unreliable for preparative purposes, a more suitable method of treating the reaction solution, especially one that would lead to a crystalline substance, was sought.

Studium stability fluoresceinylthiokarbamoylchloridu v prostředí zředěné kyseliny octové, obsahující chlorovodík, vedlo k poznatku, že k rychlé přeměně na žádaný isothiokyanát dochází působením octanu alkalického kovu nebo alkalické zeminy, například octanu sodného. V této souvislosti bylo prokázáno, že pro kvantitativní přeměnu je nutné, aby množství octanu bylo nejméně ekvivalentní množství chlorovodíku již přítomného i touto reakcí vznikajícího.The study of the stability of fluoresceinylthiocarbamoyl chloride in a dilute acetic acid medium containing hydrogen chloride has led to the finding that rapid conversion to the desired isothiocyanate occurs by the action of an alkali metal acetate or an alkaline earth metal such as sodium acetate. In this context, it has been shown that for quantitative conversion it is necessary that the amount of acetate is at least equivalent to the amount of hydrogen chloride already present in the reaction.

Osvědčila se dávka 1,8 až 2,0 ekvivalentu octanu sodného, čímž se současně dosáhne rychlého rozkladu nezreagovaného thiofosgenu, jehož se používá 40 až 80 % nadbytek, vztaženo na množství aminofluoresceinu. S výhodou se přidává octan rozpuštěný v takovém množství vody, aby se zředěním reakční směsi vyvolala krystalizace fluoresceinylisothiokyanátu. Takto získaná látka se snadno odsává nebo odstřeďuje a dobře promývá.A dose of 1.8 to 2.0 equivalents of sodium acetate has been found to simultaneously achieve rapid decomposition of unreacted thiophosgene using a 40-80% excess based on the amount of aminofluorescein. Advantageously, acetate dissolved in an amount of water is added so as to induce crystallization of the fluoresceinyl isothiocyanate by diluting the reaction mixture. The substance thus obtained is easily aspirated or centrifuged and washed well.

Jak z uvedeného vyplývá, je předmětem vynálezu způsob přípravy fluoresceinylisothiokyanátů vzorce I reakcí s aminofluoresceinem vzorce II, jehož podstata spočívá v tom, že se do roztoku soli aminofluoresceinu vzorce II v bezvodé nebo zředěné kyselině octové, s výhodou do roztoku hydrochloridu aminofluoresceinu v 80 až 85 % kyselině octové, vnáší thiofosgen, vytvořený fluoresceinylthiokarbamoylchlorid se zpracovává vodným roztokem octanu alkalického kovu nebo kovu alkalické zeminy, s výhodou vodným roztokem octanu sodného a vzniklý fluoresceinylizothiokyanát se z reakční změsi po vykrystalování isoluje.Accordingly, the present invention provides a process for the preparation of fluoresceinyl isothiocyanates of formula I by reaction with an aminofluorescein of formula II, comprising the step of reacting a solution of the aminofluorescein of formula II in anhydrous or dilute acetic acid, preferably a solution of aminofluorescein hydrochloride in 80-85. The thiophosgene formed by fluoresceinylthiocarbamoyl chloride is treated with an aqueous solution of an alkali metal or alkaline earth metal acetate, preferably an aqueous solution of sodium acetate, and the resulting fluoresceinyl isothiocyanate is isolated from the reaction mixture after crystallization.

Za popsaných podmínek se reakce projevuje nepatrným vývojem tepla a daří se nejlépe při 15 až 30 °C; při nižších pracovních teplotách může dojít k vyloučení soli aminofluoresceinu z roztoku, popřípadě k vyloučení meziproduktu reakce. Vyšší teploty neprospívají citlivému fluoresceinylisothiokyanátu a zbytečně prodlužují dobu potřebnou k jeho vykrystalování. Výtěžky se pohybují u isomeru I v rozmezí 89 až 92 %, u směsí isomerů v rozmezí 85 až 87 % teorie. Obsah fluoresceinylisothiokyanátu v získaném produktu je najméně 93 % hmotn.Under the conditions described, the reaction exhibits slight heat development and thrives best at 15 to 30 ° C; at lower operating temperatures, the aminofluorescein salt may precipitate out of solution or the reaction intermediate may be excluded. Higher temperatures do not benefit the sensitive fluoresceinyl isothiocyanate and unnecessarily prolong the time required to crystallize it. The yields for isomer I are 89 to 92%, for mixtures of isomers 85 to 87% of theory. The content of fluoresceinyl isothiocyanate in the product obtained is at least 93% by weight.

Hlavní předností způsobu podle vynálezu je možnost provedení v neomezeném měřítku. Reakce je odstupňovaně vedena dávkováním thiofosgenu a roztoku octanu alkalického kovu nebo alkalické zeminy. Tím je dosaženo jejího jednoznačného průběhu za podstatného potlačení tvorby vedlejších látek, zejména odvozenin thiomočoviny. Současně se zamezí znečistění produktu příměsemi, které vyvolávají jeho rozklad při přechovávání. Až na nezbytnou opatrnost při práci s jedovatým thiofosgenem nevyžaduje způsob podle vynálezu techniky náročné aparaturní vybavení. Odpady neobsahují zdraví škodlivé látky, zejména thiofosgen, jsou cenově zanedbatelné a po jednoduché úpravě mohou být vypouštěny do kanalizace.The main advantage of the method according to the invention is the possibility to perform in an unlimited scale. The reaction is conducted in a stepwise manner by dispensing thiophosgene and an alkali metal or alkaline earth acetate solution. In this way, it is unambiguous in the course of the process, with substantial suppression of the formation of by-products, in particular thiourea derivatives. At the same time, contamination of the product with impurities that cause its decomposition during storage is avoided. Apart from the necessary caution in working with poisonous thiophosgene, the method of the invention does not require a complex apparatus. The wastes do not contain any harmful substances, especially thiophosgene, they are negligible and can be discharged into the sewer after simple treatment.

V příkladech provedení je uveden běžně dostupný octan sodný, čímž však není omezeno analogické použití jiných octanů alkalických kovů nebo alkalických zemin.In the examples, commercially available sodium acetate is mentioned, but this does not limit the analogous use of other alkali metal or alkaline earth acetate.

Příklad 1Example 1

V 800 ml vody se suspenduje 120 g 5-aminofluoresceinu a převede přídavkem 44,5 ml konc. kyseliny chlorovodíkové na hydrochlorid. Při teplotě 45 °C se přidá 3600 ml kyseliny octové a získaný roztok se ochladí na 18 °C. Při této teplotě se zá vydatného míchání postupně vnese 120 ml 42,7% roztoku thiofosgenu v dichlorethanu a roztok 433 g trihydrátu octanu sodného v 800 ml vody. Vzniklá velmi řídká krystalická kaše se míchá 1 až 2 hodiny, látka se odsaje a promývá vodou do vymizení reakce filtrátu na chloridové ionty. Po vysušení do konstantní hmotnosti volně na vzduohu a poté ve vakuu se získá 122 g isomeru I, tj. 90,6 % teorie.120 g of 5-aminofluorescein are suspended in 800 ml of water and converted by the addition of 44.5 ml of conc. hydrochloric acid to the hydrochloride. 3600 ml of acetic acid are added at 45 ° C and the solution obtained is cooled to 18 ° C. At this temperature, 120 ml of a 42.7% solution of thiophosgene in dichloroethane and a solution of 433 g of sodium acetate trihydrate in 800 ml of water are introduced successively with vigorous stirring. The resulting very thin crystalline slurry was stirred for 1 to 2 hours, the material was filtered off with suction and washed with water until the filtrate-chloride reaction disappeared. After drying to constant weight freely on air and then in vacuo, 122 g of isomer I is obtained, i.e. 90.6% of theory.

Příklad 2Example 2

Suspenze směsi 60 g 5-aminofluoresceinu a 60 g 6-aminofluoresceinu v 800 ml vody se převede přídavkem 44,5 ml konc. kyseliny chlorovodíkové na směs hydrochloridů. Při teplotě 45 °C se přidá 3000 ml kyseliny octové a získaný roztok se ochladí na 28 °C. Při této teplotě se za vydatného míchání postupně vnese 120 ml 42,7 % roztoku thiofosgenu v dichlorethanu a roztok 433 g trihydrátu octanu sodného v 800 ml vody. Dále se postupuje jako v příkladu 1. Výtěžek 116 g směsi isomerů, tj. 86,2 % teorie.A suspension of a mixture of 60 g of 5-aminofluorescein and 60 g of 6-aminofluorescein in 800 ml of water is added by the addition of 44.5 ml of conc. hydrochloric acid to a mixture of hydrochlorides. 3000 ml of acetic acid are added at 45 ° C and the solution obtained is cooled to 28 ° C. At this temperature, 120 ml of a 42.7% solution of thiophosgene in dichloroethane and a solution of 433 g of sodium acetate trihydrate in 800 ml of water are introduced successively with vigorous stirring. The yield of 116 g of the mixture of isomers is 86.2% of theory.

Claims (1)

PREDMET VYNALEZUOBJECT OF THE INVENTION Způsob přípravy fluoresceinylisotfaiokyanátů vzorce I vyznačující se tím, že se do roztoku soli aminofluoresceinu vzorce II v bezvodé nebo zředěné kyselině octové, s výhodou do roztoku hydroehloridu aminofluoresceinu v 80 až 85% kyselině octové, vnáší thiofosgen, vytvořeny fluoresceinylthiokarbamoylchlorid se zpracovává vodným roztokem octanu alkalického kovu nebo' kovu alkalické zeminy, s výhodou vodným roztokem octanu sodného a vzniklý fluoresceinylisothiokyanát se z reakční směsi po vykrystalování izoluje.A process for the preparation of fluoresceinyl isothiocyanates of the formula I, characterized in that the solution of aminofluorescein of the formula II in anhydrous or dilute acetic acid, preferably in a solution of aminofluorescein hydrochloride in 80 to 85% acetic acid, introduces thiophosg. or an alkaline earth metal, preferably an aqueous solution of sodium acetate, and the fluoresceinyl isothiocyanate formed is isolated from the reaction mixture after crystallization. reakcí thiofosgenu s aminofluoresceinem vzorce IIby reaction of thiophosgene with an aminofluorescein of formula II
CS886678A 1978-12-22 1978-12-22 Process for preparing flurosceinylisothiocyanates CS201892B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS886678A CS201892B1 (en) 1978-12-22 1978-12-22 Process for preparing flurosceinylisothiocyanates

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS886678A CS201892B1 (en) 1978-12-22 1978-12-22 Process for preparing flurosceinylisothiocyanates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS201892B1 true CS201892B1 (en) 1980-11-28

Family

ID=5439819

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS886678A CS201892B1 (en) 1978-12-22 1978-12-22 Process for preparing flurosceinylisothiocyanates

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS201892B1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106831807A (en) * 2017-01-12 2017-06-13 苏州百灵威超精细材料有限公司 A kind of method for preparing 5 fluorescein isothiocynate esters

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106831807A (en) * 2017-01-12 2017-06-13 苏州百灵威超精细材料有限公司 A kind of method for preparing 5 fluorescein isothiocynate esters
CN106831807B (en) * 2017-01-12 2019-04-02 苏州百灵威超精细材料有限公司 A method of preparing 5-isothiocyanate fluorescein ester

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS236873B2 (en) Processing of n-alkylnorskopine
Dyer et al. Nitro and Amino Triphenylguanidines1
JPS60172984A (en) Manufacture of 1,2,4-triazolo(1,5-a)- pyrimidine-2-sulfonylchloride
RU2021271C1 (en) Method of synthesis of 4-[5,6,7,8-tetrahydroimidazo(1,5-a)-pyridine-5-yl]-benzonitrile hydrochloride
CS201892B1 (en) Process for preparing flurosceinylisothiocyanates
CS208793B2 (en) Method of making the very pure derivatives of the pyraz
Scott et al. Studies in the Pyrazole Series. I. Halogenation of the 1-Guanylpyrazoles1
EP0069445B1 (en) Process for making benzimidazoles
US3365462A (en) 2-imidazolin-2-yl-benzimidazoles
EP0090203B1 (en) Process for preparing p.chlorophenoxyacetyl-piperonylpiperazine
Fishbein et al. Some New 1-(Nitroxyalkyl)-3-nitroguanidines and their Cyclic Products1
US2580847A (en) Thiouronium antimonyl catechol halides and methods of making the same
JPH08176150A (en) Production of 5-chloro-4-(2-imidazolin-2-ylamino)-2,1,3-benzothiadiazole or its salt
FI57404B (en) FRAMEWORK FOR CYCLING OF NEW N-SUBSTITUTES
JP4479863B2 (en) N-monobromoisocyanuric acid metal salt hydrate and process for producing the same
US1906200A (en) 4-brom-diethylacetylamino-1-phenyl-2, 3-dimethyl-5-pyrazolone and the process of preparing the same
CZ2004331A3 (en) Process for preparing N-alkyl-2-benzthiazolylsulfenimides, apparatus for their preparation and method of their purification
PT86113B (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF 2-GUANIDINOTIAZOLE DERIVATIVES
Ertan et al. Synthesis of New Annellated Flavonoid Derivatives Possessing Spasmolytic Activity‐VII
EP0080555B1 (en) Process for the preparation of 5(6)-thiocyano-benzimidazole derivatives
CS225537B1 (en) Antineoplastic effective ethyl 5-/2-chlorethylcarbamyol/ amine-4-oxo-6-hydroxy-3,4-dihydropyrimidine-5-yl/pentanoate and its manufacture
SK142295A3 (en) Preparation of n-cyanodithioimino-carbonates and 3-mercapto-5- -amino-1h-1,2,4-triazole
US3117993A (en) Purification of dehydroabietyl lower alkylene-diamine dihalide
Bami et al. STUDIES IN ANTIMALARIALS Part IX. N 1-Aryl-N 5-alkyl-biguanides*.
US4065465A (en) Process for the preparation of substituted trichloroacetamidine derivatives