CS200780B1

CS200780B1 - Water calibrating solution for uric acid determination

Info

Publication number: CS200780B1
Application number: CS457278A
Authority: CS
Inventors: Marta Valickova; Vratislav Chromy
Original assignee: Marta Valickova; Vratislav Chromy
Priority date: 1978-07-10
Filing date: 1978-07-10
Publication date: 1980-09-15

Description

Předmětem vynálezu je vodný kalibrační roztok pro stanoveni kyseliny močové.The present invention provides an aqueous calibration solution for the determination of uric acid.

Kyselina močová je hlavním purinem obsaženým v plasmě a u člověka představuje konečný produkt purinového metabolismu. Oaji nadměrná tvorba nebo nedostatečné vylučováni z organismu, hyperurikemie, má vztah k celé řadě chorob. Stanoveni kyseliny močové v biologických tekutinách, zejména pak v krevním séru, mé tedy značný diagnostický význam.Uric acid is the major purine in plasma and is the end product of purine metabolism in humans. Oaji overproduction or insufficient excretion, hyperuricemia, is related to a variety of diseases. Thus, the determination of uric acid in biological fluids, particularly blood serum, is of great diagnostic importance.

Metody stanoveni kyseliny močové jsou založeny na její chemické nebo enzymové oxidaci na allantoin. V poslední době převládají metody enzymové 8 enzymem urikasou, které jsou specifické. Stanovuje se buď allantoin, fotometricky v ultrafialové oblasti spektra, nebo se využívá stanoveni přes souběžně vznikající peroxid vodíku. Do této skupiny lze zařadit stanoveni s enzymem katalasou, které za přítomnosti peroxidu vodíku oxiduje methanol na formaldehyd, jež lze stanovit kopulaci a acetylacetonem a amonnými ionty jako žlutý 3,5-diacetyl-l,4-dihydrolutidin. Při věech metodách stanoveni kyseliny močové v biologických . materiálech Je nutné provádět kalibraci roztokem kyseliny močové o známé koncentraci.Methods for the determination of uric acid are based on its chemical or enzymatic oxidation to allantoin. Recently, enzymatic δ methods have been predominated by the uricase enzyme, which are specific. Either allantoin is determined, photometrically in the ultraviolet range of the spectrum, or the assay is performed via concurrently generated hydrogen peroxide. This group includes the enzyme catalase assay which oxidizes methanol to formaldehyde in the presence of hydrogen peroxide, which can be determined by coupling with acetylacetone and ammonium ions such as yellow 3,5-diacetyl-1,4-dihydrolutidine. In all methods of determination of uric acid in biological. Materials Calibration must be performed with a known concentration of uric acid solution.

Kalibrace při stanoveni kyseliny močové s sebou přináší řadu problémů, které spočívají v obtížné rozpustnosti a malé stabilitě kelibrečnich roztoků. Kyselina močové je ve vodných roztocích prakticky nerozpustná, málo rozpustné jsou i jeji sodné nebo draselné soli. Známé postupy přípravy kalibračních roztoků kyseliny močové rozpouštěním v roztoku uhličitanu lithného se též ukázaly jako nevhodné, nebož také navedou k roztokům dostatečně sta2Calibration in the determination of uric acid poses a number of problems, consisting in the difficulty of solubility and the low stability of the kelibre solutions. Uric acid is practically insoluble in aqueous solutions, and its sodium or potassium salts are poorly soluble. Known processes for preparing uric acid calibration solutions by dissolving in lithium carbonate solution have also been shown to be unsuitable, since they also lead to sufficient

200 700 bilnim, z nichž by se při sníženi teploty kyseliny močová nevylučovala. Problémy působí i stálost těchto roztoků vůči bakteriální kontaminaci. Běžně užívaná a známá konservačni činidla vitěinou interferuji při vlastním stanoveni. Nelze např. užit chloroform, toluen, formaldshyd ani rtulnaté preparáty. Konaervace starilisaci vylučuje dlouhodobou stabilitu při opakovaném použiti. Tyto potíže se vyskytují i u kalibračních roztoků kyseliny močové vyráběných některými firmami, v nichž s časem klesá koncentrace kyseliny močová v roztoku. Tyto kalibrační roztoky jsou tedy nevhodné, nebol mohou při stanoveni v séru nemocných vést k závažným diagnostickým chybám.200,700 bilnim, of which would not be excreted when the uric acid temperature was lowered. The stability of these solutions to bacterial contamination also causes problems. Commonly used and known preservatives most often interfere with the assay. For example, chloroform, toluene, formaldshyd and mercury preparations cannot be used. Conservation of starilization precludes long-term stability upon repeated use. These problems also occur with uric acid calibration solutions manufactured by some companies, where the concentration of uric acid in the solution decreases over time. These calibration solutions are therefore unsuitable as they may lead to serious diagnostic errors in the serum of patients.

Výěs uvedená nedostatky odstraňuje vodný kalibrační roztok pro stanoveni kyseliny močové podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, žs obsahuje: 5,9.10 až 1,2.10 mol/1 kyseliny močové. 2.5.1Ο“⁴ až 2,5.10^-2 mol/1 D(-)-N-methylglukaminu a 3,9.10^-5 až 1,6.10^-4mol/1 1,6-bis-(4*-chlorphenyl-di-quanidlnium)-hexandichloridu.The above drawbacks eliminate the aqueous calibration solution for the determination of uric acid according to the invention, which comprises: 5.9.10 to 1.2.10 mol / l uric acid. 2.5.1Ο “ ⁴ to 2.5.10 ^-2 mol / l D (-) - N-methylglucamine and 3.9.10 ^-5 to 1.6.10 ^-4 mol / l 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di) (quanidinium) -hexane dichloride.

Kalibrační roztok podle vynálezu vykazuje dlouhodobou a výbornou stabilitu, kyselina močová se z roztoku nevylučuje ani při snížené teplotě a roztok nevykazuje bakteriální kontaminaci. D(-)-N-methylglukamin a 1,6-bis-(4'-chlorphenyl-di-quanidinium)-hexandichlorid neinterferuji při běžně užívaných fotometrických metodách stanovení kyseliny močové. Tyto výhodné vlastnosti kalibračního roztoku podle vynálezu, zejména jeho dokonalá a dlouhodobá stabilita zvyšují přesnost a správnost stanoveni kyseliny močové v séru, a tím zvyěujl i diagnostickou hodnotu tohoto vyěetřeni. Kalibrační roztok lze snadno připravit z dostupných surovin.The calibration solution according to the invention exhibits long-term and excellent stability, uric acid is not eliminated from the solution even at reduced temperature, and the solution does not show bacterial contamination. D (-) - N-methylglucamine and 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexane dichloride do not interfere with commonly used urometric acid photometric methods. These advantageous properties of the calibration solution according to the invention, in particular its perfect and long-term stability, increase the accuracy and correctness of the determination of uric acid in the serum and thus increase the diagnostic value of this assay. The calibration solution can be easily prepared from available raw materials.

Přiklad 1Example 1

0,002 g kyseliny močové, 0,005 g D(-)-N-msthylglukaminu a 0,02 g 1,6-bis-(4*-chlorphenyl-di-quanidinium)-hexandichloridu(100 ml vodného roztoku. Používá se přímo.0.002 g of uric acid, 0.005 g of D (-) - N-methylglucamine and 0.02 g of 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexanedichloride (100 ml of an aqueous solution.

Přiklad 2Example 2

Připraví ee koncentrovaný roztok obsahující ve 100 ml: 0,200 g kyseliny močové, 0,5 g D(-) -N-methylglukaminu s 0,008 g 1,6-bis-(4'-chlorphenyl-di-quanidinium)-hexandichloridu. Koncentrovaný roztok ee ředí vodným roztokem obsahujícím 7 mg 1,6-bis-(4'-chlorphenyl-di-quanidinium)-hsxandichloridu/100 ml takto: 2,4,6,10,15 a 20 ml koncentrovaného roztoku se zředí v odměrných baňkách na 100 ml vodným roztokem 1,6-bis-(4*-chlorphenyl-di-quanidiniura) -hexandichloridu. Tyto neředěné kalibrační roztoky jsou vhodné pro sestrojeni kalibračních křivek pro celý rozsah použiti obvyklý v klinické biochemii.Prepare a concentrated solution containing in 100 ml: 0.200 g of uric acid, 0.5 g of D (-) - N -methylglucamine with 0.008 g of 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexanedichloride. The concentrated solution was diluted with an aqueous solution containing 7 mg of 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexane dichloride / 100 ml as follows: 2,4,6,10,15 and 20 ml of the concentrated solution were diluted in standard in 100 ml flasks with an aqueous solution of 1,6-bis- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexane dichloride. These undiluted calibration solutions are suitable for constructing calibration curves for the full range of uses common in clinical biochemistry.

Claims

OBJECT OF THE INVENTION

Aqueous calibration solution for the determination of uric acid, characterized in that it contains 5,9.10 ^-5 to 1,2,1O ^- 3 uric acid, 2,5,10 ^-4 to 2,5,10 ^-2 mol / l D (-) - N- methylglucamine and 3.9.10 ^-5 to 1.6.10 ^-4 mol / l 1,6-bie- (4'-chlorophenyl-di-quanidinium) -hexanedichloride.