CS199478B1 - Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor - Google Patents
Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor Download PDFInfo
- Publication number
- CS199478B1 CS199478B1 CS786768A CS676878A CS199478B1 CS 199478 B1 CS199478 B1 CS 199478B1 CS 786768 A CS786768 A CS 786768A CS 676878 A CS676878 A CS 676878A CS 199478 B1 CS199478 B1 CS 199478B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tumor
- cells
- biological activity
- tissue
- nuclear pores
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 11
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 title claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 210000004492 nuclear pore Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 8
- 238000005530 etching Methods 0.000 claims description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 11
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 10
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 9
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 206010004173 Basophilia Diseases 0.000 description 3
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 3
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000981 basic dye Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000030944 contact inhibition Effects 0.000 description 1
- 210000000448 cultured tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000011273 social behavior Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Vynélez se týká způsobu diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nédoru pomoci, metody mrazového leptání (freeze etching).The invention relates to a method of diagnostic determination of the level of biological activity of a neoplastic aid, a freeze etching method.
Míra biologické aktivity nádoru má značný význam pro určení správné diagnosy a následné určení léčebného postupu. Dosud byla míra proliferační aktivity sledována z nádorového materiálu několika složitými a náročnými postupy, přičemž se pracuje s omezenou přesností. Jeden ze způsobů je založen na schopnosti inkorpořace prekurzorů DNA do jádra proliferující buňky.The level of biological activity of the tumor is of great importance for determining the correct diagnosis and then determining the treatment procedure. So far, proliferation activity has been monitored from tumor material in a number of complex and demanding procedures, with limited accuracy. One method is based on the ability to incorporate DNA precursors into the nucleus of a proliferating cell.
Lze ji aplikovat na tkáňových kulturách buněk, případně i na bioptickém materiálu. Postup vyžaduje isotopové vybavení pracoviště, přitom historadiografické odečtení nelze rutinně provádět. Předpokladem je, že všechny nádorové buňky jsou aktivizované, část v GQ fázi cyklu není zachycena. Další metoda je založena na tak zvaném sociálním chování buněk v populaci. Lze ji použít pouze na měření na tkáňových kulturách, ne však z biopsií. Vykultivované nádorové populace buněk se filmují časosběrným filmem a sleduje se jejich chování při vzájemném kontaktu. Míra ztráty kontaktní inhibice ukazuje na proliferační a invazivní schopnost nádoru. Tato metoda zatím nepřekročila stupeň základního výzkumu a nebyla dosud použita na lidském nebo zvířecím bioptickém materiálu, ale pouze v systému zdravých a nádorovým virusem transformovaných buněk. Na schopnosti vázat na· jaderné struktury bézická barviváIt can be applied to tissue cultures of cells or even to biopsy material. The procedure requires isotopic equipment of the workplace, while historadiographic reading cannot be routinely performed. Assuming that all tumor cells are activated, a portion in the G Q phase of the cycle is not captured. Another method is based on the so-called social behavior of cells in the population. It can only be used for tissue culture measurements, but not from biopsies. The cultured tumor cell populations are filmed with a time-lapse film and monitored for contact behavior. The degree of loss of contact inhibition indicates the proliferative and invasive capacity of the tumor. This method has not yet gone beyond basic research and has not yet been applied to human or animal biopsy material, but only to a system of healthy and tumor-transformed cells. The ability to bind to the nuclear structures of the basic dyes
4'4 '
-2-. . .-2-. . .
je založena metoda vycházející z poznání, že nádorové buňky obsahují vetší množství chromatinu a ten bývá u nádorů kondenzovanější. Úměrně ke zvětšení množství chromatinu se zvýší i bazofilie jádra. Lze sledovat i u histogramů nádorové buněčné populace, avšak není prokázáno dostatečně, že bazofilie jader je opravdu výrazem nádorové proliferační aktivity. Metoda je dále zatížena chybou vznikající při preparaci buněk z nádoru, protože i mrtvé buňky mají kondenzovanější chromatin a tím i zvýšenou bazofilii jader. Nejběžnější orientační test z bioptického materiálu, který je dosud používán, je založen na sledování mitotického indexu, to je množství mitóz v daném zorném poli světelného mikroskopu. Je však subjektivní, neboť nepostihuje fáze buňky mezi mitózami. Je silně ovlivněn jakýmikoliv cytostatiky, která dostává pav cient. Zachycuje jen zlomek života buňky, mitózu.is a method based on the recognition that tumor cells contain a greater amount of chromatin and this is more condensed in tumors. The basophilia of the nucleus also increases in proportion to the increase in chromatin. Histograms of the tumor cell population can also be observed, but it is not sufficiently demonstrated that basophilia of nuclei is indeed an expression of tumor proliferative activity. The method is further burdened with the error resulting from the preparation of cells from the tumor, because even dead cells have more condensed chromatin and thus increased basophilia of the nuclei. The most common screening test of biopsy material currently in use is based on monitoring the mitotic index, that is, the amount of mitosis in a given light microscope field of view. However, it is subjective as it does not affect the cell phase between mitoses. It is strongly influenced by any cytostatics that receive the cient. It captures only a fraction of the cell's life, mitosis.
Výše uvedené nedostatky podstatně snižuje způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru podle vynálezu. Jeho podstata spočívá v tom, že se porovnává počet aktivních buněk vyjádřený počtem jaderných pórů na jednotku plochy v normální tkáni a v tkáni a předpokládaným nádorovým bujením, přičemž zvýšený počet aktivních buněk v tkáni, zpravidla s počtem jaderných pórů vyšším než 10 jaderných pórů na 1 čtvereční mikrometr je ukazatelem nádorového bujení. Výše procenta aktivních buněk ve zkoumané tkáni určuje prognózu nádorového bujení. Hustota jaderných pórů ee zjišťuje metodou mrazového leptání s následným vyhodnocením v elektronovém mikroskopu a určuje se na zhotovených elektrogramech.The above drawbacks substantially reduce the method of diagnostic determination of the level of biological activity of a tumor according to the invention. It consists in comparing the number of active cells expressed by the number of nuclear pores per unit area in normal tissue and tissue and the anticipated tumor growth, with an increased number of active cells in the tissue, usually with a number of nuclear pores greater than 10 nuclear pores per 1 square micrometer is an indicator of tumor growth. The percentage of active cells in the tissue examined determines the prognosis of tumor growth. Nuclear pore density ee is determined by the method of frost etching followed by evaluation in an electron microscope and determined on the made electrograms.
Počet aktivních buněk v poměru k počtu buněk málo aktivních vyjadřuje kvantitativně biologickou aktivitu nádorového bujení. Dává tedy možnost číselného vyjádření buněk aktivizovaných proti normálním jako zpřesňující, doplněk k histologickému vyšetření pomocí světelného mikroskopu, zvláště v těch případech, kdy je nutno stanovit aktivitu proliferace nádorového bujení. Metoda podle vynálezu určuje míru aktivity, ale sama o sobě nemůže určit typ nádorového bujení, neboť jednotlivé druhy buněk lze jen těžko určit metodou mrazového leptání, pokud tyto buňky nevykazují v cytoplazme zvláštní útvary, například tonofibrily v buňkách empdermia, protože jádra a jejich blány se jeví u všech buněk stejné, vyjma dané frekvence pórů. Typ nádorového bujení je proto nutno nadále zjišťovat histologickým šetřením Ve světelném mikroskopu. Způsob podle vynálezu podává přesnější, kvantitativně vyjádřitelný obraz o rychlosti proliferace a je proto použitelný i k prognostickým účelům.The number of active cells relative to the number of low active cells expresses quantitatively the biological activity of tumor growth. Thus, it gives the possibility of numerical expression of cells activated against normal as a refinement, in addition to histological examination by light microscopy, especially in those cases where it is necessary to determine the activity of tumor proliferation. The method of the invention determines the level of activity, but cannot determine the type of tumor growth itself, since individual cell types are difficult to determine by frost etching unless these cells exhibit specific features in the cytoplasm, such as tonofibrils in empdermal cells, appears the same for all cells except for a given pore frequency. The type of tumor growth must therefore continue to be determined by histological examination in a light microscope. The method of the invention provides a more accurate, quantitatively expressive picture of the rate of proliferation and is therefore also useful for prognostic purposes.
Praktické provedení způsobu je názorně uvedeno v následujících příkladech.The following examples illustrate the practice of the process.
Příklad 1Example 1
Byly použity biopsie z operovaných melanomů a srovnávány s biopsiemi normální kůže člověka, neboť nelze najít vhodný adekvátní kontrolní objekt (víz hypotézy o vzniku melanomů). Bioptický materiál byl hned po operačním odběru přenesen do 30% glycerinu a 2 hodiny ponechán při pokojové teplotě,Biopsies from surgical melanomas were used and compared with biopsies of normal human skin, because it is not possible to find a suitable adequate control object (visions of melanoma hypothesis). The biopsy material was transferred to 30% glycerin immediately after surgery and left at room temperature for 2 hours.
- 3 poté zmrazen v mrazicí aparatuře, přenesen do tekutého dusíku a zpracován v aparatuře pro mrazové leptání. Repliky byly fotografovány v elektronovém mikroskopu a frekvence pórů vypočítávána na snímcích při zvětšení 36..000 krát. Pri porovnání buněk normální pokožky s melanomy bylo zjištěno, žé při zachycení 18 jader epitelových buněk pokožky byla průměrná hustota pórů 8,4 na jeden čtvereční mikrometr. Z počtu sledovaných.jader pouze 11 % vykazovalo větší frekvenci než 10, viz graf 1 a obr. 1. Aktivizované buňky jsbu zřejmě rostoucími buňkami pokožky. U biopsie melanomu bylo sledováno 30 jader buněk, přičemž byla zjištěna průměrná hustota pórů 11,5, avšak 77 % jader vykazovalo větší frekvenci než 10 pórů na čtvereční mikrometr, viz graf 1 a obr. 2. Na grafu 1 a obr. 1 a 2 je názorně zobrazen výsledek porovnávání podle tohoto příkladu.- 3 then frozen in a freezing apparatus, transferred to liquid nitrogen and processed in a frost-etching apparatus. The replicas were photographed in an electron microscope and the pore frequency calculated in images at a magnification of 36,000 times. When comparing normal skin cells with melanomas, it was found that, when capturing 18 nuclei of epithelial cells of the skin, the average pore density was 8.4 per square micrometer. Of the number of nuclei studied, only 11% showed a frequency greater than 10, see Graph 1 and Figure 1. Activated cells are apparently growing skin cells. In a melanoma biopsy, 30 nuclei of cells were observed for an average pore density of 11.5, but 77% of the nuclei had a frequency greater than 10 pores per square micrometer, see graphs 1 and 2. In graphs 1 and 1 and 2, respectively. the comparison result of this example is illustrated.
Příklad 2Example 2
Stejným postupem jako v příkladu 1 byl sledován melanom po úspěšném léčení a bylo zjištěno pouze 8,3 pórů na jeden čtvereční mikrometr a jen 9 % buněk aktivizovaných.Following the same procedure as in Example 1, melanoma was followed after successful treatment and found only 8.3 pores per square micrometer and only 9% of the cells activated.
Příklad 3Example 3
Postupem podle příkladu 1 byl sledovém nodulární exophytický melanom progredující a četnými metaatázemi, který vedl ke smrti pacienta během několika dní. Tento melanom mel v průměru 19,3 pórů na jeden čtvereční mikrometr a 99 % buněk bylo aktivizovaných.Following the procedure of Example 1, the successive nodular exophytic melanoma was progressive and numerous metaatases, leading to patient death within a few days. This melanoma had an average of 19.3 pores per square micrometer and 99% of the cells were activated.
Příklad 4Example 4
Byly porovnávány biopsie děložních sliznic ve fázi proliferační i sekreční s karcinomem sliznice děložní. Odběr vzorků a měření bylo prováděno jako v příkladě 1. Biopsie normální sliznice ukázala frekvenci pórů u 41 jader ; v průměru 7,3 a jen 10 % buněk překročilo počet pórů 10, viz graf 2 a obr. 3· Aktivita 10 % buněk souvisí s obnovováním sliznice. U rakoviny sliznice děložní, sledované na 59 jádrech byla průměrná frekvence pórů 10,5, avšak 56 % v z' 1 buněk bylo aktivizováno, to je málo více jak 10 pórů na jeden čtvereční mikrometr, viz znázornění na grafu 2 a obr. 4.Biopsy of the uterine mucosa in the proliferative and secretory phases was compared with the carcinoma of the uterine mucosa. Sampling and measurement were performed as in Example 1. Biopsy of normal mucosa showed pore frequency in 41 nuclei; on average 7.3 and only 10% of the cells exceeded the pore number of 10, see Figure 2 and Figure 3 · 10% of the cells are related to mucosal restoration. In cancer of the endometrium, reference to cores 59, the average pore rate of 10.5, but the 56% mod 'cells were activated by 1, it is little more than 10 pores per square micrometer, see plotted 2 and FIG. 4.
Obdobné výsledky byly zjištěny v řadě dalších případů.Similar results were found in a number of other cases.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (en) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (en) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS199478B1 true CS199478B1 (en) | 1980-07-31 |
Family
ID=5415446
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (en) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS199478B1 (en) |
-
1978
- 1978-10-18 CS CS786768A patent/CS199478B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wade et al. | Characterization of microtubule protofilament numbers: how does the surface lattice accommodate? | |
| Bonting et al. | Quantitative histochemistry of the nephron. II. Alkaline phosphatase activity in man and other species | |
| Kingston et al. | Role of frozen section and clinical parameters in distinguishing benign from malignant follicular neoplasms of the thyroid | |
| Shafir et al. | Pitfalls in frozen section diagnosis of malignant melanoma | |
| Teasdale | Functional significance of the zonal morphologic differences in the normal human placenta: a morphometric study | |
| Griffiths et al. | Punch biopsy of the cervix | |
| Gladstone | Sponge biopsy in cancer diagnosis | |
| Pfitzer et al. | Investigation of DNA-content of leukoplakia cells of oral mucosa | |
| CS199478B1 (en) | Diagnostical detection method of measure of biological activity of tumor | |
| Helweg‐Larsen et al. | Clinical relevance of histological grading of cancer of the larynx | |
| Kirkland | Atypical epithelial changes in the uterine cervix | |
| Reagan et al. | Morphology of the malignant squamous cell: A study of six thousand cells derived from squamous cell carcinomas of the uterine cervix | |
| RU2310197C1 (en) | Method for predicting pre-cancer diseases of uterine cervix in women with papilloma-viral infection | |
| Czemiak et al. | Nuclear pores and DNA ploidy in human bladder carcinomas | |
| Watkins et al. | Histochemical fibre typing and ultrastucture of the small fibres in Duchenne muscular dystrophy | |
| Lewis et al. | Incidence of lobular carcinoma in bilateral breast cancer | |
| Kumar et al. | Tissue measurements in senile sebaceous gland hyperplasia | |
| Resau et al. | Cell injury and regeneration of human epithelium in organ culture | |
| RU2134535C1 (en) | Diagnosis method of inflammatory diseases of uterus neck and vagina | |
| Ireland | Diagnostic criteria in the assessment of glomerular capillary basement membrane lesions in newly diagnosed juvenile diabetics | |
| Gordon et al. | Evaluation of cytodiagnosis of cutaneous basal cell carcinoma | |
| Graham et al. | Papanicolaou smears and frozen sections on selected cutaneous neoplasms | |
| Carr et al. | Low temperature scanning electron microscope studies of mouse small intestine | |
| Waddell et al. | The Cervex: an ectocervical brush sampler | |
| Ghadially et al. | Nuclear fibrous lamina in pathological human synovial membrane |