CS199478B1 - Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru - Google Patents
Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru Download PDFInfo
- Publication number
- CS199478B1 CS199478B1 CS786768A CS676878A CS199478B1 CS 199478 B1 CS199478 B1 CS 199478B1 CS 786768 A CS786768 A CS 786768A CS 676878 A CS676878 A CS 676878A CS 199478 B1 CS199478 B1 CS 199478B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tumor
- cells
- biological activity
- tissue
- nuclear pores
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 11
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 title claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 210000004492 nuclear pore Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 8
- 238000005530 etching Methods 0.000 claims description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 11
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 10
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 9
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 206010004173 Basophilia Diseases 0.000 description 3
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 3
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000981 basic dye Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000030944 contact inhibition Effects 0.000 description 1
- 210000000448 cultured tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000011273 social behavior Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Vynélez se týká způsobu diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nédoru pomoci, metody mrazového leptání (freeze etching).
Míra biologické aktivity nádoru má značný význam pro určení správné diagnosy a následné určení léčebného postupu. Dosud byla míra proliferační aktivity sledována z nádorového materiálu několika složitými a náročnými postupy, přičemž se pracuje s omezenou přesností. Jeden ze způsobů je založen na schopnosti inkorpořace prekurzorů DNA do jádra proliferující buňky.
Lze ji aplikovat na tkáňových kulturách buněk, případně i na bioptickém materiálu. Postup vyžaduje isotopové vybavení pracoviště, přitom historadiografické odečtení nelze rutinně provádět. Předpokladem je, že všechny nádorové buňky jsou aktivizované, část v GQ fázi cyklu není zachycena. Další metoda je založena na tak zvaném sociálním chování buněk v populaci. Lze ji použít pouze na měření na tkáňových kulturách, ne však z biopsií. Vykultivované nádorové populace buněk se filmují časosběrným filmem a sleduje se jejich chování při vzájemném kontaktu. Míra ztráty kontaktní inhibice ukazuje na proliferační a invazivní schopnost nádoru. Tato metoda zatím nepřekročila stupeň základního výzkumu a nebyla dosud použita na lidském nebo zvířecím bioptickém materiálu, ale pouze v systému zdravých a nádorovým virusem transformovaných buněk. Na schopnosti vázat na· jaderné struktury bézická barvivá
4'
-2-. . .
je založena metoda vycházející z poznání, že nádorové buňky obsahují vetší množství chromatinu a ten bývá u nádorů kondenzovanější. Úměrně ke zvětšení množství chromatinu se zvýší i bazofilie jádra. Lze sledovat i u histogramů nádorové buněčné populace, avšak není prokázáno dostatečně, že bazofilie jader je opravdu výrazem nádorové proliferační aktivity. Metoda je dále zatížena chybou vznikající při preparaci buněk z nádoru, protože i mrtvé buňky mají kondenzovanější chromatin a tím i zvýšenou bazofilii jader. Nejběžnější orientační test z bioptického materiálu, který je dosud používán, je založen na sledování mitotického indexu, to je množství mitóz v daném zorném poli světelného mikroskopu. Je však subjektivní, neboť nepostihuje fáze buňky mezi mitózami. Je silně ovlivněn jakýmikoliv cytostatiky, která dostává pav cient. Zachycuje jen zlomek života buňky, mitózu.
Výše uvedené nedostatky podstatně snižuje způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru podle vynálezu. Jeho podstata spočívá v tom, že se porovnává počet aktivních buněk vyjádřený počtem jaderných pórů na jednotku plochy v normální tkáni a v tkáni a předpokládaným nádorovým bujením, přičemž zvýšený počet aktivních buněk v tkáni, zpravidla s počtem jaderných pórů vyšším než 10 jaderných pórů na 1 čtvereční mikrometr je ukazatelem nádorového bujení. Výše procenta aktivních buněk ve zkoumané tkáni určuje prognózu nádorového bujení. Hustota jaderných pórů ee zjišťuje metodou mrazového leptání s následným vyhodnocením v elektronovém mikroskopu a určuje se na zhotovených elektrogramech.
Počet aktivních buněk v poměru k počtu buněk málo aktivních vyjadřuje kvantitativně biologickou aktivitu nádorového bujení. Dává tedy možnost číselného vyjádření buněk aktivizovaných proti normálním jako zpřesňující, doplněk k histologickému vyšetření pomocí světelného mikroskopu, zvláště v těch případech, kdy je nutno stanovit aktivitu proliferace nádorového bujení. Metoda podle vynálezu určuje míru aktivity, ale sama o sobě nemůže určit typ nádorového bujení, neboť jednotlivé druhy buněk lze jen těžko určit metodou mrazového leptání, pokud tyto buňky nevykazují v cytoplazme zvláštní útvary, například tonofibrily v buňkách empdermia, protože jádra a jejich blány se jeví u všech buněk stejné, vyjma dané frekvence pórů. Typ nádorového bujení je proto nutno nadále zjišťovat histologickým šetřením Ve světelném mikroskopu. Způsob podle vynálezu podává přesnější, kvantitativně vyjádřitelný obraz o rychlosti proliferace a je proto použitelný i k prognostickým účelům.
Praktické provedení způsobu je názorně uvedeno v následujících příkladech.
Příklad 1
Byly použity biopsie z operovaných melanomů a srovnávány s biopsiemi normální kůže člověka, neboť nelze najít vhodný adekvátní kontrolní objekt (víz hypotézy o vzniku melanomů). Bioptický materiál byl hned po operačním odběru přenesen do 30% glycerinu a 2 hodiny ponechán při pokojové teplotě,
- 3 poté zmrazen v mrazicí aparatuře, přenesen do tekutého dusíku a zpracován v aparatuře pro mrazové leptání. Repliky byly fotografovány v elektronovém mikroskopu a frekvence pórů vypočítávána na snímcích při zvětšení 36..000 krát. Pri porovnání buněk normální pokožky s melanomy bylo zjištěno, žé při zachycení 18 jader epitelových buněk pokožky byla průměrná hustota pórů 8,4 na jeden čtvereční mikrometr. Z počtu sledovaných.jader pouze 11 % vykazovalo větší frekvenci než 10, viz graf 1 a obr. 1. Aktivizované buňky jsbu zřejmě rostoucími buňkami pokožky. U biopsie melanomu bylo sledováno 30 jader buněk, přičemž byla zjištěna průměrná hustota pórů 11,5, avšak 77 % jader vykazovalo větší frekvenci než 10 pórů na čtvereční mikrometr, viz graf 1 a obr. 2. Na grafu 1 a obr. 1 a 2 je názorně zobrazen výsledek porovnávání podle tohoto příkladu.
Příklad 2
Stejným postupem jako v příkladu 1 byl sledován melanom po úspěšném léčení a bylo zjištěno pouze 8,3 pórů na jeden čtvereční mikrometr a jen 9 % buněk aktivizovaných.
Příklad 3
Postupem podle příkladu 1 byl sledovém nodulární exophytický melanom progredující a četnými metaatázemi, který vedl ke smrti pacienta během několika dní. Tento melanom mel v průměru 19,3 pórů na jeden čtvereční mikrometr a 99 % buněk bylo aktivizovaných.
Příklad 4
Byly porovnávány biopsie děložních sliznic ve fázi proliferační i sekreční s karcinomem sliznice děložní. Odběr vzorků a měření bylo prováděno jako v příkladě 1. Biopsie normální sliznice ukázala frekvenci pórů u 41 jader ; v průměru 7,3 a jen 10 % buněk překročilo počet pórů 10, viz graf 2 a obr. 3· Aktivita 10 % buněk souvisí s obnovováním sliznice. U rakoviny sliznice děložní, sledované na 59 jádrech byla průměrná frekvence pórů 10,5, avšak 56 % v z' 1 buněk bylo aktivizováno, to je málo více jak 10 pórů na jeden čtvereční mikrometr, viz znázornění na grafu 2 a obr. 4.
Obdobné výsledky byly zjištěny v řadě dalších případů.
Claims (3)
- Predmet vynálezu1. Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru, vyznačený tím, že se porovnává počet aktivních, buněk vyjádřený počtem jaderných pórů na jednotku plochy v normální tkáni a v tkáni s předpokládaným nádo-i rovým bujením, přičemž zvýšený počet aktivních buněk v tkáni, zpravidla s počtem jaderných pórů vyšším než 10 jaderných pórů na 1 čtvereční mikrometr je ukazovatelem nádorového bujení.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že hustota jaderných pórů se zjišťuje metodou mrazového leptání s následným vyhodnocením v elektronovém mikroskopu.
- 3. Způsob podle bodu 1 a 2, vyznačený tím, že hustota jaderných pórů se určuje na zhotovených elektronogramech. .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (cs) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (cs) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS199478B1 true CS199478B1 (cs) | 1980-07-31 |
Family
ID=5415446
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS786768A CS199478B1 (cs) | 1978-10-18 | 1978-10-18 | Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS199478B1 (cs) |
-
1978
- 1978-10-18 CS CS786768A patent/CS199478B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wade et al. | Characterization of microtubule protofilament numbers: how does the surface lattice accommodate? | |
| Bonting et al. | Quantitative histochemistry of the nephron. II. Alkaline phosphatase activity in man and other species | |
| Kingston et al. | Role of frozen section and clinical parameters in distinguishing benign from malignant follicular neoplasms of the thyroid | |
| Shafir et al. | Pitfalls in frozen section diagnosis of malignant melanoma | |
| Teasdale | Functional significance of the zonal morphologic differences in the normal human placenta: a morphometric study | |
| Griffiths et al. | Punch biopsy of the cervix | |
| Gladstone | Sponge biopsy in cancer diagnosis | |
| Pfitzer et al. | Investigation of DNA-content of leukoplakia cells of oral mucosa | |
| CS199478B1 (cs) | Způsob diagnostického zjišťování míry biologické aktivity nádoru | |
| Helweg‐Larsen et al. | Clinical relevance of histological grading of cancer of the larynx | |
| Reagan et al. | Morphology of the malignant squamous cell: A study of six thousand cells derived from squamous cell carcinomas of the uterine cervix | |
| RU2704966C1 (ru) | Способ диагностики степени дисплазии шейки матки | |
| RU2310197C1 (ru) | Способ прогнозирования предраковых заболеваний шейки матки у женщин с папиллома-вирусной инфекцией | |
| Czemiak et al. | Nuclear pores and DNA ploidy in human bladder carcinomas | |
| Watkins et al. | Histochemical fibre typing and ultrastucture of the small fibres in Duchenne muscular dystrophy | |
| Lewis et al. | Incidence of lobular carcinoma in bilateral breast cancer | |
| Kumar et al. | Tissue measurements in senile sebaceous gland hyperplasia | |
| Resau et al. | Cell injury and regeneration of human epithelium in organ culture | |
| RU2134535C1 (ru) | Способ диагностики воспалительных заболеваний шейки матки и влагалища | |
| Ireland | Diagnostic criteria in the assessment of glomerular capillary basement membrane lesions in newly diagnosed juvenile diabetics | |
| Graham et al. | Papanicolaou smears and frozen sections on selected cutaneous neoplasms | |
| Carr et al. | Low temperature scanning electron microscope studies of mouse small intestine | |
| Waddell et al. | The Cervex: an ectocervical brush sampler | |
| Ghadially et al. | Nuclear fibrous lamina in pathological human synovial membrane | |
| SU1712820A1 (ru) | Способ патологоанатомической диагностики задержки внутриутробного развити плода |