CS199094B1 - Anti-virus medicament - Google Patents
Anti-virus medicament Download PDFInfo
- Publication number
- CS199094B1 CS199094B1 CS737877A CS737877A CS199094B1 CS 199094 B1 CS199094 B1 CS 199094B1 CS 737877 A CS737877 A CS 737877A CS 737877 A CS737877 A CS 737877A CS 199094 B1 CS199094 B1 CS 199094B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- virus
- effect
- substance
- cells
- combination
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 8
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 title 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 claims description 9
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 3
- GSLQFBVNOFBPRJ-RXMQYKEDSA-N (2r)-3-(6-aminopurin-9-yl)propane-1,2-diol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2C[C@@H](O)CO GSLQFBVNOFBPRJ-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 2
- GSLQFBVNOFBPRJ-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-(6-aminopurin-9-yl)propane-1,2-diol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2C[C@H](O)CO GSLQFBVNOFBPRJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- GRTOGORTSDXSFK-XJTZBENFSA-N ajmalicine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN3C[C@@H]4[C@H](C)OC=C([C@H]4C[C@H]33)C(=O)OC)=C3NC2=C1 GRTOGORTSDXSFK-XJTZBENFSA-N 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 6
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 4
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 238000002768 Kirby-Bauer method Methods 0.000 description 3
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000001790 virustatic effect Effects 0.000 description 3
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical class NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 2
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- -1 2,3-dihydroxypropyl Chemical group 0.000 description 1
- LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-3-(3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1C(F)=CNC(=O)N1C1C2=CC=CC=C2C(=O)O1 LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000005100 Herpetic Keratitis Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028400 Mutagenic effect Diseases 0.000 description 1
- 206010073938 Ophthalmic herpes simplex Diseases 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- TTZUCVNWOZLIGL-UHFFFAOYSA-N chembl362994 Chemical compound C1=CC=C2N(C)C(O)=C(N=NC(S)=N)C2=C1 TTZUCVNWOZLIGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000531 effect on virus Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 201000010884 herpes simplex virus keratitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Vynález řeší léčivo s viroatatickým účinkem při terapii virových onemocněni.The invention provides a medicament with a viroatatic effect in the treatment of viral diseases.
Virová onemocnění působí velké národohospodářské ákody a působí velké škody na zdraví lidu. Kromě humánních virů mají z národohospodářského hlediska velký význam v zemědělství a veterinářství viry zvířecí a rostlinné. Nekterá virová oněmocnění se podařilo zvládnput imunologickou prevencí vakcinami. V chemotherapii virových onemocnění se dosud dosáhlo pouze částečných úspěchů.Viral diseases cause great economic damage and cause great damage to people's health. In addition to human viruses, animal and plant viruses are of great economic importance in agriculture and veterinary medicine. Some viral diseases have been managed by immunological prevention with vaccines. So far only partial success has been achieved in chemotherapy of viral diseases.
Marboran (Bauer D. J.: Intern. Encyklopedie of Pharmacology and Therapeutics, Section 61, Chemotherapy of Virus Diseases Vol. I, str. 35 Pergamon Press, Oxford 1972) je účinný při chronických komplikacích způsobených vakcinálním virem, proti pravým neštovicím je účinný jen profylakticky. 5-Jod-2-desoxyuridin (Herrmann E. C., jr: Proč. Soe. Exp. Biol. Med. 107. 142 (1961), Kaufman Η. E. et al.: Archs. Ophtal. 68, 235 (1962) byl po několik let užíván v therapii herpetických keratitid, méně při herpetických kožních afekcích. V poslední době však bylo zjištěno, že působí v nádorových buňkách indukci virových partikulí typu C. Amantadin (Davies L. W. et al., Science 144. 862 (1964) je účinný pouze proti viru chřipky typu A2 při aplikaci profylaktické, cytosinarabinosid (Renis Η. E., Johnson H. G.: Bact. Proč., American Soc. for Microbiology, str. 140. 1962; Kaufman Η. E., Maloney E. D., Archs. Ophtal. 69. 629 (1963) inhibuje DNK viry a Virazol (Sidwell R. W. et al., Science 177. 705 (1972) je patrně účinný proti hepatitide a méně účinný proti chřipce a některým DNK virům.Marboran (Bauer, D. J., Intern. Encyclopedia of Pharmacology and Therapeutics, Section 61, Chemotherapy of Virus Diseases Vol. I, p. 35, Pergamon Press, Oxford 1972) is effective in chronic complications caused by the vaccine virus, only prophylactically against smallpox. 5-Iodo-2-desoxyuridine (Herrmann EC, Jr.: Proc. Soe. Exp. Biol. Med. 107. 142 (1961), Kaufman E.E. et al .: Archs. Ophtal. 68, 235 (1962) was used for several years in the treatment of herpetic keratitis, less in herpetic skin affections, but recently it has been found to act in tumor cells to induce C. viral particles of Amantadine (Davies LW et al., Science 144. 862 (1964) is effective. only against influenza virus type A2 when administered prophylactically, cytosinarabinoside (Renis, E., Johnson, HG: Bact. Proc., American Soc. for Microbiology, p. 140, 1962; Kaufman, E., Maloney ED, Archs. Ophtal. 69, 629 (1963) inhibits DNA viruses and Virazol (Sidwell RW et al., Science 177. 705 (1972) appears to be effective against hepatitis and less effective against influenza and some DNA viruses.
199 094199 094
199004199004
Zvýšení chemotherapeutického efektu proti virovým onemocněním kombinací více látek bylo dosud málo studováno. Synergický efekt 6-azauridinu (1) a některých přirozených derivátů adeninu byl nalezen při inhibici viru Newcastleské nemoci NDV - modelového zástupce velkých RNK virů (Rada B., Dragúň M.: Acta virol. 20, 97 (1976)4 Acta virol. 20, 102 (1976).The increase in chemotherapeutic effect against viral diseases by combination of multiple agents has not been studied so far. The synergistic effect of 6-azauridine (1) and some natural adenine derivatives has been found to inhibit Newcastle disease virus NDV - a model representative of large RNK viruses (Rada B., Dragún M .: Acta virol. 20, 97 (1976) 4 Acta virol. 20 102 (1976).
9-(S)-(2,3-dihydroxypropyl(adenin (II) byl popsán jako látka s vysokým antivirovým účinkem ne některé viry (če. autorské osvědčení č. 199 093), Holý A., DeClerq E.: Science 200 : 563 (1978), A. Holý, Colleetion JO : 187 (1975)} Kritzyn A. M., Kolobushkina L. I., Mikhailov S. N., Florentiev V. L.: Khim. Geterotsikl. Soed. 125 (1975)j Scheffer H. J., Vogel D., Vince R.; J. Med. Chem. 8 : 502 (1965)} Seita T., Kinoshita M., Imoto M.: Bull.9- (S) - (2,3-dihydroxypropyl (adenine (II)) has been described as having a high antiviral effect not on some viruses (No. Certificate No. 199 093), Holý A., DeClerq E .: Science 200: 563 (1978), A. Holý, Colleetion JO: 187 (1975)} Kritzyn AM, Kolobushkina LI, Mikhailov SN, Florentiev VL: Khim Geterotsikl Soed 125 (1975) J Scheffer HJ, Vogel D., Vince R. J. Med Chem 8: 502 (1965)} Seita T., Kinoshita M., Imoto M., Bull.
Chem. Soc. Japan 46 : 926 (1972). Důležitou vlastností této látky je její snadná přístupnost, nízký cytostatický účinek a malá toxicita. 6-Azauridin (1) (če. patent č. 88 063) nemá sám výraznou antivirovou účinnost při nízkých aplikovaných dávkách. Therapií těch typů virových infekcí, vůči nimž jsou jednotlivé' látky I a II málo účinné, ae zabývá předmětný vynález, jehož význakem je použití kombinace 6-ezauridinu a (S) - nebo (RS)-9(2,3-dihydroxypropyl)adeninu v hmotnostním poměru 1 : 1 až 1000 : 1, v absolutní koncentraci 10 pg/ml až 1000 pg/ml jednotlivých složek, jako léčiva humánní a veterinární medicíně, zvyšující účinek inhibice cytopathogenního působení viru, a to při koncentraci nižší nejméně o řád, než je minimální cytótoxioká koncentrace jednotlivých složek i jejich kombinací.Chem. Soc. Japan 46: 926 (1972). An important property of this substance is its easy accessibility, low cytostatic effect and low toxicity. 6-Azauridine (1) (U.S. Patent No. 88,063) does not itself have significant antiviral activity at low dosages. The therapy of those types of viral infections to which individual compounds I and II are poorly effective and that the present invention is characterized by the use of a combination of 6-ezauridine and (S) - or (RS) -9 (2,3-dihydroxypropyl) adenine in a weight ratio of 1: 1 to 1000: 1, in an absolute concentration of 10 pg / ml to 1000 pg / ml of the individual components, as a medicine for human and veterinary medicine, enhancing the effect of inhibiting the cytopathogenic effect of the virus, at a concentration lower than is the minimal cytotoxic concentration of individual components and combinations thereof.
Dokladem účinnosti uvedené kombinace je měření inhibice tvorby plaků na monolayeru kuřecích embryonálních buněk infikovaných virem a převrstvených agarovou půdou při difusi látky ze středu misky (agar-difusní test). Výsledky spolu s údaji ostatních antivirových látek uvádí tabulka 1. Kombinace látky I difundující agarem a látky II inkorporované do agarové vrstvy vykazuje zřetelný synergický účinek, celkově převyšující účinek cytosinarabinosidu, který je za daných podmínek dosud najúčinnejší popsanou látkou. V suspensních kulturách buněk HeLa, kde je při nízkých koncentracích obou složek I a II celkový efekt aditivní (virus vakcinie), při vysokých koncentracích látky II se však již dále neprohluhuje. Synergiemus se zjevně projevuje inhibici cytopathického efektu (tabulka 2).Evidence of the efficacy of this combination is the measurement of plaque inhibition on the monolayer of chicken embryonic cells infected with virus and overlaid on agar soil by diffusion of the substance from the center of the dish (agar-diffusion test). The results, together with data from other antiviral agents, are shown in Table 1. The combination of agar diffusing substance I and substance II incorporated into the agar layer exhibits a distinct synergistic effect, overall superior to that of cytosinarabinoside, which is the most potent ever reported under the given conditions. However, in HeLa cell suspension cultures, where the overall effect is additive (vaccinia virus) at low concentrations of both components I and II, it does not increase further at high concentrations of substance II. Synergiemus appears to inhibit the cytopathic effect (Table 2).
Toxicita obou jednotlivých složek I a II i jejich kombinací je nízká: pro kuřecí embryonální buňky je maximální netoxické koncentrace látky II 1000 pg/ml, pro HeLa buňky se toxicita projevuje teprve při kombinaci 1000 pg/ml obou složek, a to zřejmě vlivem látky i samotně. Pro dosažení výrazného virostatiokého efektu však plně dostačují koncentrace látky II o řád nižší, tj. 100 pg/ml; za těchto podmínek nedochází k cytopathogennímu efektu ani k mprfologiekým změnám hostitelských buněk.Toxicity of both individual components I and II and their combination is low: for chicken embryonic cells the maximum non-toxic concentration of substance II is 1000 pg / ml, for HeLa cells toxicity occurs only when combination of 1000 pg / ml of both components. alone. However, concentrations of substance II of the order of 100 pg / ml are fully sufficient to achieve a significant virostatic effect; under these conditions, there is no cytopathogenic effect or mprfologic changes in the host cells.
Výhodou popsané kombinace je, že obě složky jsou snadno dostupné, dobře rozpustné ve vodě a ze běžných sterilních podmínek stálé. 6-Azauridin (I) nemá kancerogenní ani mutagenní účinek. Lze očekávat, že při aplikaci kombinace bude zachována možnost tvorby protilátek v organismu. Využití vynálezu přichází v úvahu v terapii infekčních virových oněmocnění, v terapii nádorových onemocnění a v infekční veterinární medicíně.An advantage of the described combination is that both components are readily available, well soluble in water and stable under normal sterile conditions. 6-Azauridine (I) has no carcinogenic or mutagenic effect. It is expected that the application of the combination will retain the possibility of producing antibodies in the body. Use of the invention is contemplated in the treatment of infectious viral diseases, in cancer therapy and in infectious veterinary medicine.
V dalším je vynález osvětlen v příkladech provedení virostatiokých a cytotoxických zkoušek, aniž se tím jakkoli omezuje.In the following, the invention is illustrated by non-limiting examples of virostatic and cytotoxic assays.
Inhibice množení viru vakcinie v suaper?sních kulturách buněk HeLa kombinací látek I a II (provedení viz příklad 3)Inhibition of Vaccinia Virus Multiplication in Superative HeLa Cell Cultures by Combination of Substances I and II (see Example 3 for embodiments)
Tabulka 2Table 2
Titr viru 2 hod. po infekci: 2.6 x 103 PFU/mlVirus titer 2 hours post infection: 2.6 x 10 3 PFU / ml
Ostatní titry viru (PFU/ml) zjištěné 24 hod. po infekci.Other virus titers (PFU / ml) detected 24 h after infection.
Příklad 3Example 3
Inhibice množení viru vakcinie v suspensních kulturách buněk HeLa kombinací látek I a II (metoda viz. Rada B., Blaškovič D.: Acta virol. 10, 1, 1966).Inhibition of Vaccine Virus Multiplication in HeLa Cell Suspension Cultures by Combination of Substances I and II (Method See Council B., Blaškovič D .: Acta virol. 10, 1, 1966).
Suspense buněk HeLa 2 x 10^ bunek/ml se infikuje virem vakcinie, po 1 hodinové adsorpcii se suspense promyje trojnásobně k odstranění neadsorbovaného viru. Buňky se naředí na hustotu 2 x 10 bunek/ml a k jednotlivým kulturám se přidají odpovídající koncentrace látek I a II a jejich kombinací. Titr viru v kulturách se stanoví 24 hod. po infekci po třech cyklech zmrazení a rozmražení kultur.HeLa cell suspension at 2 x 10 6 cells / ml is infected with vaccinia virus, after 1 hour adsorption, the suspension is washed three times to remove unadsorbed virus. Cells are diluted to a density of 2 x 10 6 cells / ml and appropriate concentrations of Compounds I and II and combinations thereof are added to each culture. The virus titer in the cultures is determined 24 hours after infection after three cycles of freezing and thawing of the cultures.
Látka II samotná v nejvyšší koncentraci účinné inhibuje množení viru vakcinie (efekt dosahuje maximální hranici mohutnosti metody - udržení viru na hladině 2 hod. po infekci, tabulka 2. Při nižších koncentracích obou látek je efekt na množení viru aditivní.Substance II alone at the highest concentration effectively inhibits the multiplication of vaccinia virus (the effect reaches the maximum severity of the method - keeping the virus at the level 2 hours after infection, Table 2. At lower concentrations of both substances the effect on virus multiplication is additive.
Příklad 4Example 4
Stanovení toxicity kombinací látek I a II na buňkách HeLa. Teety byly provedeny na buňkách HeLa (American Type Colleetion) ve stacionárních zkumavkách; pro fotografii na Petriho miskách. K testům toxicity byla zvolena komcentrace buněk 5 x 104 buněk HeLa v 1 ml (a 1 ml ve stacionárních zkumavkách nebo á 7 ml v Petriho miskách o průměru 6 cm) vyrůstajících v monolayer, aby bylo možno vedle morfologie buněk pozorovat a porovnávat růst buněk a jeho inhibici podle hustoty buněčné vrstvy.Determination of toxicity of combinations of compounds I and II on HeLa cells. Teets were performed on HeLa (American Type Colleetion) cells in stationary tubes; for photography on Petri dishes. For toxicity tests, a cell concentration of 5 x 10 4 HeLa cells in 1 ml (and 1 ml in stationary tubes or ml 7 ml in 6 cm diameter Petri dishes) grown in monolayer was chosen to observe and compare cell growth in addition to cell morphology and its inhibition by cell layer density.
U kultur exponovaných 3 dny ke studované kombinaci látek nedochází k závažným změnám v morfologii buněk. Pouze při použití nejvyšších koncentrací (II 1000 yg/ml + I 1000 (íg/ml) lze pozorovat lehké zakulacení malé čáeti buněk; takové změny působí v této koncentraci látka I sama. Tlumení růstu buněk HeLa při kombinaci (látka II 1000 jjg/ml + látka I 1000 pg/ml je způsobeno látkou I samou jak vyplývá ze srovnání s kontrolními kulturami I 1000 pg/ml a II 1000 |ig/ml. V hustotě buněčného monolayeru mezi kontrolou a skupinami II 1000 Vg/ml + I 100 pg/ml látkou I 100 pg/al a látkou II 1000 yg/ml není podstatný rozdíl.In cultures exposed for 3 days to the studied combination of substances, there are no significant changes in cell morphology. Only at the highest concentrations (II 1000 µg / ml + I 1000 (µg / ml), a slight rounding of a small cell count can be observed, and such changes act at this concentration alone). + Compound I 1000 pg / ml is due to Compound I alone as shown by comparison with control cultures I 1000 pg / ml and II 1000 µg / ml In cell monolayer density between control and group II 1000 Vg / ml + I 100 pg / ml ml of substance I 100 µg / ml and substance II of 1000 yg / ml there is no significant difference.
199 094199 094
Příklad 1Example 1
Účinek kombinace látek I a II na virus vakcinie v agar-difusním testu (metoda viz Rada B., Závada J.: Neopleema 57, 1962).Effect of combination of compounds I and II on vaccinia virus in an agar-diffusion test (see Method B., Glitch J .: Neopleema 57, 1962)
Kultury kuřecích embryonálních buněk v 15 cm Petriho miskách ae infikují dávkou viru vakcinie tvořící semikonfluentní plaky a kultury se po adsorpci viru převrství agarem, v němž byla předem rozpuštěna látka II v koncentraci 100 ^g/ml. Kultura se obarví 3 dny po infekci. Za těchto podmínek dojde jen k malému nebo žádnému zmenšení velikosti plaků.Chicken embryonic cell cultures in 15 cm Petri dishes are infected with a dose of vaccinia virus forming semiconfluent plaques and the cultures are overlaid with agar in which the substance II was previously dissolved at a concentration of 100 µg / ml after adsorption of the virus. The culture is stained 3 days after infection. Under these conditions, there will be little or no reduction in plaque size.
Po ztuhnutí agaru se do válečku v centru kultury pro difusi agarem vnese roztok látky I (500 mg/ml). Dojde k zábraně tvorby plakú až téměř k okraji misky.After the agar has solidified, a solution of compound I (500 mg / ml) is introduced into the roller at the center of the agar diffusion culture. This prevents plaque formation almost to the edge of the bowl.
Příklad 2Example 2
Stanovení toxicity látky II na kuřecích buňkách. Ke kuřecím embryonálním buňkám ve stacionárních zkumavkách (4 paralelní zkumavky tvoří experimentální skupinu) po vytvoření monovrstvy byl přidán roztok látky II tak, aby výsledná koncentrace byla 30 ^g - 10 000 ljg/ml. Kultury byly denne hodnoceny mikroskopicky. Maximální netoxické koncentrace látky II po třídenní exposici je 1000 pg/ml.Determination of toxicity of substance II on chicken cells. To the chicken embryonic cells in stationary tubes (4 parallel tubes form the experimental group) after the monolayer formation, the solution of compound II was added to a final concentration of 30 µg - 10,000 µg / ml. Cultures were evaluated microscopically daily. The maximum non-toxic concentration of Compound II after three days of exposure is 1000 pg / ml.
Vyšší koncentrace látky II 3000 |ig/ml vykazuje lehké změny ve srovnáni s kontrolou, monovrstva buněk není zcela souvislá, buňky jeou protáhlého fibroblastového typu; pH média je nepatrně alkaličtější ve srovnání e kontrolou. Teprve kultury inkubované a 10 000 pg/ml ukázaly zřetelný toxický efekt projevující se zrnitostí, zakulacováním a snížením počtu buněk.Higher concentrations of 3000 µg / ml of compound II showed slight changes compared to control, monolayer cells were not completely continuous, cells were elongated fibroblast type; The pH of the medium is slightly more alkaline compared to the control. Only cultures incubated at 10,000 pg / ml showed a distinct toxic effect manifested by granularity, rounding, and cell count reduction.
Srovnání inhibičního účinku některých virostatik agar-difusním testemComparison of inhibitory effect of some virostatics by agar-diffusion test
Tabulka 1Table 1
a500 mg/ml látky I pro difusi, 100 pg/ml látky II v agarové vretvě. and 500 mg / ml of compound I for diffusion, 100 µg / ml of compound II in an agar backbone.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS737877A CS199094B1 (en) | 1977-11-11 | 1977-11-11 | Anti-virus medicament |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS737877A CS199094B1 (en) | 1977-11-11 | 1977-11-11 | Anti-virus medicament |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS199094B1 true CS199094B1 (en) | 1980-07-31 |
Family
ID=5422802
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS737877A CS199094B1 (en) | 1977-11-11 | 1977-11-11 | Anti-virus medicament |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS199094B1 (en) |
-
1977
- 1977-11-11 CS CS737877A patent/CS199094B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bucknall et al. | Antiviral effects of aphidicolin, a new antibiotic produced by Cephalosporium aphidicola | |
| Hilleman | Prospects for the use of double-stranded ribonucleic acid (poly I: C) inducers in man | |
| US4963533A (en) | Therapeutic application of dideoxycytidinene | |
| CA1145257A (en) | Method and agent for inducing an interferon | |
| Isaacs et al. | Studies on the mechanism of action of interferon | |
| Bauer | A history of the discovery and clinical application of antiviral drugs | |
| Gresser et al. | Role of endogenous interferon in the anti‐tumor effect of poly I· C and statolon as demonstrated by the use of anti‐mouse interferon serum | |
| CN116969854A (en) | 2,2'-Binaphthyl-6,6'-dicarboxylic acid derivatives and preparation methods and applications thereof | |
| AU623341B2 (en) | Antiviral therapy for hepatitis b | |
| RU2036198C1 (en) | N-METHYL- N- (α-D- GLUCOPYRANOSYL) -AMMONIUM -2-(ACRIDONE -9-ONE -10-YL) -ACETATE (CYCLOFERON) SHOWING INTERFEROGENIC, ANTIVIRAL AMONG THEM ANTI-HIV, ANTIPARASITIC, ANTIPROMOTER AND RADIOPROTECTIVE ACTIVITIES | |
| Miller et al. | Antiviral activity of carbobenzoxy di-and tripeptides on measles virus | |
| GB1599612A (en) | Antiviral agent and treatment of viral infections | |
| KR19990028256A (en) | Antiviral agents | |
| CS199094B1 (en) | Anti-virus medicament | |
| JPH07500581A (en) | 6-[X-(2-Hydroxyethyl)aminoalkyl]-5,11-dioxo-5,6-dihydro-11H-indeno[1,2-c]isoquinoline derivatives, their preparation and their use | |
| Kimura et al. | In vitro antiviral effect of 9-(2-hydroxyethoxymethyl) guanine on the fish herpesvirus, Oncorhynchus masou virus (OMV) | |
| JPS61109723A (en) | Treatment for human viral disease by use of 1-beta-d-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide | |
| Takemoto et al. | Influence of acid polysaccharides on plaque formation by influenza A2 and B viruses | |
| Meldrum et al. | Cell culture studies on the antiviral activity of ether derivatives of 5-hydroxymethyldeoxyuridine | |
| RU2118163C1 (en) | Drug for treatment of patients with viral disease | |
| CN112263671A (en) | Compound preparation capable of effectively inhibiting HIV, HBV, H1N1, H3N2 and nCoV | |
| RU2005475C1 (en) | Antiviral agent | |
| Sheffield | Inhibition of rabbitpox virus replication by isatin β-thiosemicarbazone | |
| CN106727489A (en) | Application of the 2 furacrolein class compounds in anti-human gamma herpes viruses medicine is prepared | |
| Groupé et al. | Studies on the Chemotherapy of the Pox Viruses: I. The Effect of Commercial Penicillin and Other Selected Substances on Canary Pox Virus |