CS198692B1 - Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material - Google Patents

Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material Download PDF

Info

Publication number
CS198692B1
CS198692B1 CS216378A CS216378A CS198692B1 CS 198692 B1 CS198692 B1 CS 198692B1 CS 216378 A CS216378 A CS 216378A CS 216378 A CS216378 A CS 216378A CS 198692 B1 CS198692 B1 CS 198692B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
solution
standard serum
biological material
phospholipids
lipide
Prior art date
Application number
CS216378A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Josef Tovarek
Jana Vojtkova
Original Assignee
Josef Tovarek
Jana Vojtkova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Josef Tovarek, Jana Vojtkova filed Critical Josef Tovarek
Priority to CS216378A priority Critical patent/CS198692B1/en
Publication of CS198692B1 publication Critical patent/CS198692B1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Vynález'se týká standardního séra pro kontrolu správnosti stanovení obsahu lipidovýcb složek v biologickém materiálu a způsobu jeho přípravy ·The invention relates to a standard serum for checking the correctness of the determination of lipid components in biological material and to a process for its preparation.

V laboratořích, provádějících stanovení cholesterolu, neutrálních .tuků a fosfol.ípidc·, se používají pro, kontrolu správnosti výsledků standardní séra s normálními nebo jetí. nepatrně zvýšerými hodnotami, nebo roztoky uvedených složek o známé koncentraci v org.a.nidý.ch rozpouštědlech.In laboratories carrying out the determination of cholesterol, neutral fats and phospholipids, standard sera with normal or serum are used to check the accuracy of the results. slightly elevated values, or solutions of said components of known concentration in organic solvents.

Roztoky lipidových složek v organických rozpouštědlech je možno připravit· v rozmezí tzv, normálních až patologických hodnot (cholesterol od.· 150 do 700 mg/100 ml = 3,& až. .Solutions of lipid components in organic solvents can be prepared in the range of so-called normal to pathological values (cholesterol from 150 to 700 mg / 100 ml = 3 to 100 mg / ml).

mmol/1, celková lipemie od 3 do 15 g/1, neutrální tuky od 150 do 1500 mg./lOQ ml·= ·, 1,7 až 17 mmol/1, foofolipidy od 150 do 750 mg/100 ml = 2 až 10 mmol/1 (Hořejší a spol·'Základy chemického'vysetřováni v lékařství, SZdN Praha 1964, Jiří Homolka: Klinická biochemie , SZdN Praha 1959). Rozmezí se volí s ohledem na potřebu kontrolovat nemocné s normálními i značně zvýšenými hodnotami těchto složek. ,mmol / l, total lipemia from 3 to 15 g / l, neutral fats from 150 to 1500 mg./10Q ml · = ·, 1.7 to 17 mmol / l, foopholipids from 150 to 750 mg / 100 ml = 2 to 10 mmol / 1 (Horejsi et al. 'Fundamentals of Chemical' Investigation in Medicine, SZdN Praha 1964, Jiri Homolka: Klinicka biochemie, SZdN Praha 1959). The range is chosen with regard to the need to control patients with both normal and significantly elevated levels of these components. ,

Protože však viskozita roztoků organických rozpouštědel (alkoholu, acetonu, chloroformu, isopropanolu, kyseliny octové aj ) se značně liší od viskozity vyšetřovaného biologického materiálu (krve, séra, plasmy, výpotků), dochází při pipetování k rozdílnému odměřeni vyšetřovaného vžorku a kontroly a tím i k chybám ve stanoveních 2 • Z těchto důvodů se jako kontrolní vzorky zpracovávají standardní séra. Standardní sér, pro stanoveni lipidových složek, komerčně dostupná, mají následující hodnoty: cholesterol 140 až 305 mg%, neutrální tuky 43 až 195 mg%, fosfolipidy 150 až 330 mg% a celkové lipidy 360 až 1150 mg%. Protože se uvedené koncentrace pohybuji v oblasti normálních nebo jen lehce zvýšených hodnot, lze těmito séry spolehlivě kontrolovat správnost vyšetřeni jen v sérech pacientů s normálními, nebo jen lehce zvýšenými hodnotami.However, since the viscosity of organic solvent solutions (alcohol, acetone, chloroform, isopropanol, acetic acid, etc.) differs considerably from the viscosity of the test biological material (blood, serum, plasma, effusions), pipetting results in different metering of the examined specimen and control. assay errors 2 • For these reasons, standard sera are processed as controls. Standard sera, commercially available for determining lipid components, have the following values: cholesterol 140-305 mg%, neutral fats 43-195 mg%, phospholipids 150-330 mg%, and total lipids 360-1150 mg%. Since these concentrations are within the range of normal or only slightly elevated values, these sera can reliably check the correctness of the examination only in the sera of patients with normal or only slightly elevated values.

Shora uvedené nedostatky v podstatné míře odstraňuje standardní sérum podle vynálezu. Podstatůu vynálezu je standardní sérum pro kontrolu správnosti stanoveni obsahu lipidových složek v biologickém materiálu obsahující cholesterol, neutrální tuky a fosfolipidy, vyznačené tim, že obsahuje zvýšené koncentrace lipidových složek až.do pětinásobku horni hra· nice obsahu lipidových složek v séru zdravých lidi v molárnich poměrech cholesterol : neutrální tuky : fosfolipidy 5 : 2 : 2,5 až 5 5 : 3,5, Standardní sérum podle vynálezu se s výhodou připraví tak, že se lipoppoteiny krevního' séra vysráži 0,020 až 0,030 M roztokem chloridu vápenatého v 0,05 až 0,07 mM heparinu, sraženina ae suspenduje v 0,004 až 0,006 M roztoku tris (hydroxymethyl)-aminomethanu a rozpustí ee v roztoku látky, která komplexně váže ionty vápníku a v roztoku neutrální soli, s výhodou lze použit 0,20 až 0,25 M citran sodný v 1 až 1,5 M chloridu sodném a potom se pořadí na požadované koncentra· ce roztokem albuminu, s výhodou 0,7 milimolárnim.The above-mentioned drawbacks are substantially eliminated by the standard serum according to the invention. SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a standard serum for checking the lipid content of biological material containing cholesterol, neutral fats and phospholipids, characterized in that it contains elevated concentrations of lipid components up to 5 times the molar ratio of the lipid content of healthy people. Cholesterol: Neutral Fats: Phospholipids 5: 2: 2.5 to 5: 3.5. The standard serum of the invention is preferably prepared by precipitating blood serum lipoppoteins with a 0.020-0.030 M solution of calcium chloride in 0.05-0.5 0.07 mM heparin, precipitate ae is suspended in a 0.004-0.006 M solution of tris (hydroxymethyl) -aminomethane and dissolved ee in a solution of a complex that binds calcium ions and a neutral salt solution, preferably 0.20-0.25 M sodium citrate in 1 to 1.5 M sodium chloride and then the order of the desired concentration with an albumin solution, preferably 0.7 millimeters olárnim.

PřikladExample

Ve skleněné nádobě, například kádince o obsahu 3000 ml, se smíchá za stálého mícháni 1900 ml 0,025 M chloridu vápenatého, ve kterém je rozpuštěno 250 mg heparinu, se 100 ml séra, získaného z čerstvě odebrané krve. Smis se ponechá v klidu při pokojové teplotě 30 min. a potom se vysrážené lipoprotpiny odstředí. Nejvýhodnějši je odstřeňovánl v malém počtu velkých zkumavek po částech vždy aei po 3 min, při 4000 G, Po odstředění se supernatant sleje, k sedimentu llpoproteinů se přidá další směs, která se odstředí, supernatarit se opět odleje · tak se pokračuje, až je celý objem odstředěn. Sraženina lipoproteinů se převede do jedné zkumavky pomocí 0,005 M tria(hydroxymethyl) aminomethanu. Vzniklé silně zkalená suspenze se změní v opaleskujici roztok přidáním několika kapek roztoku (200 mg citran sodný NagCgHgO? . 2H20 a 200 mg chloridu sodného NaCl ve 3,0 ml destilované vody),In a glass vessel, for example a 3000 ml beaker, 1900 ml of 0.025 M calcium chloride, in which 250 mg of heparin is dissolved, is mixed with 100 ml of serum obtained from freshly collected blood. The mixture is allowed to stand at room temperature for 30 min. and then the precipitated lipoprotpins are centrifuged. Most preferably, it is centrifuged in a small number of large tubes in portions at least every 3 min, at 4000 G. centrifuged volume. The lipoprotein precipitate is transferred to one tube with 0.005 M tria (hydroxymethyl) aminomethane. A strongly turbid suspension turns into opalescent solution by adding a few drops of solution (200 mg sodium citrate NagCgHgO?. 2H 2 0 and 200 mg NaCl in 3.0 ml distilled water)

Tento roztok přidáváme za stálého mícháni jen velmi opatrně právě do rozpuštěni sraženiny. Po promíchání se v tomto koncentrátu určí hodnoty jednotlivých složek přesně, nejlépe dvěma nezávislými způsoby, např. cholesterol metodou Lieberman-Burchardt a enzymovou metodou, neutrální tuky metodou fotometrickou a enzymovou, fosfolipidy po mineralizaci a přímou metodou. Potom se koncentrát,pořadí vzestupnou řadou roztokem 5% albuminu, Tim získáme sérii standardních sér s atestem pro spolehlivější kontrolu správnosti výsledků u nemocných se zvláště vysokými hodnotami lipidových složek. Při zachování vzájemných poměrů roztoků chloridu vápenatého, heparinu a krevního séra jak bylo popsáno výěe je možno provádět přípravu Ve velkém množství.This solution is added with vigorous stirring just to dissolve the precipitate. After mixing, the values of the individual components in this concentrate are determined accurately, preferably by two independent methods, for example, cholesterol by the Lieberman-Burchardt method and the enzyme method, neutral fats by the photometric and enzyme method, phospholipids after mineralization and the direct method. Then, with the concentrate, in ascending order of 5% albumin solution, Tim, we obtain a series of standard sera with a certificate to more reliably check the correctness of results in patients with particularly high lipid component values. While maintaining the proportions of the calcium chloride, heparin and blood serum solutions to each other as described above, large amounts of preparation can be performed.

Rozptyl měřených patologicky zvýšených hodnot je podstatně nižší při kontrole sérem vynálezu, s komerčně dostupnými séry byl rozptyl nad 10 % měřených hodnot. Sa stan dním kontrolním sérem podle vynálezu je přesnost lepší a rozptyl měřených hodnot patoinkých případů je pod 5 %. Standardní sérum podle vynálezu umožňuje tak přesnější vyřenl nemocných s patologicky zvýšenými hodnotami lipidových složek, přičemž přesnost netřeni při normálních hodnotách je stejná.The variance of the measured pathologically elevated values is substantially lower when controlled by the sera of the invention, with commercially available sera the variance was above 10% of the measured values. With the standard control serum according to the invention, the accuracy is better and the variance of the measured values of the pathogenic cases is below 5%. The standard serum according to the invention thus enables more precise exclusion of patients with pathologically elevated lipid component values, while the precision of non-friction at normal values is the same.

Claims (1)

Standardní sérum pro kontrolu správnosti stanoveni obsahu lipidových složek v biologickém materiálu obsahující cholesterol, neutrální tuky a fosfolipidy, vyznačené tím, že obsahuje zvýšené koncentrace lipidových složek až do pětinásobku horní hranice obsahu lipidových složek v séru zdravých lidí v molárních poměrech cholesterol ku neutrální tuky ku fosfolipidy 5 ku 2 ku 2,5 až 5 ku 5 ku 3,5.Standard serum to check for the correct determination of lipid content in biological material containing cholesterol, neutral fats and phospholipids, characterized in that it contains increased lipid constituents up to five times the upper limit of lipid constituents in healthy people in molar ratios of cholesterol to neutral fat to phospholipids 5 to 2 to 2.5 to 5 to 5 to 3.5. Způsob přípravy standardního séra podle bodu 1, vyznačený tim, že se lipoproteiny krevního séra vysráží 0,020 až 0,030 M roztokem chloridu vápenatého v 0,05 až 0,07 mM heparinu, sražeňina se suspenduje v 0,004 až 0,006 M roztoku tris (hydroxymethyl)-aminomethanu a rozpustí se v roztoku látky, která komplexně váže ionty vápníku a v roztoku neutrální soli, s výhodou lze použit 0,20 až 0,25 M citran sodný 1 až 1,5 M chloridu sodném a potom se poředi na požadované koncentrace roztoku albuminu β výhodou 0,7 milimolárnim.The method of preparation of standard serum according to claim 1, characterized in that the blood lipoproteins are precipitated with a 0.020-0.030 M calcium chloride solution in 0.05-0.07 mM heparin, the precipitate is suspended in a 0.004-0.006 M tris (hydroxymethyl) aminomethane solution. and dissolve in the solution of the calcium complexing agent and in the neutral salt solution, preferably 0.20-0.25 M sodium citrate 1-1.5 M sodium chloride and then diluted to the desired concentrations of the albumin β solution preferably 0.7 millimolar.
CS216378A 1978-04-04 1978-04-04 Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material CS198692B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS216378A CS198692B1 (en) 1978-04-04 1978-04-04 Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS216378A CS198692B1 (en) 1978-04-04 1978-04-04 Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS198692B1 true CS198692B1 (en) 1980-06-30

Family

ID=5357956

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS216378A CS198692B1 (en) 1978-04-04 1978-04-04 Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS198692B1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Brodie et al. The estimation of quinine in human plasma with a note on the estimation of quinidine
Sudlow et al. Spectroscopic techniques in the study of protein binding. A fluorescence technique for the evaluation of the albumin binding and displacement of warfarin and warfarin‐alcohol
Howell et al. Partition of calcium, phosphate, and protein in the fluid phase aspirated at calcifying sites in epiphyseal cartilage
US4226713A (en) Diagnostic agents
US4701417A (en) Control or calibration serum for lipid diagnosis
Thompson et al. Reduced lateral mobility of a fluorescent lipid probe in cholesterol-depleted erythrocyte membrane
Ebadi et al. MICROASSAY OF ADENOSINE‐3′, 5′‐MONOPHOSPHATE (CYCLIC AMP) IN BRAIN AND OTHER TISSUES BY THE LUCIFERIN‐LUCIFERASE SYSTEM 1
SHoHET Release of phospholipid fatty acid from human erythrocytes
US4486531A (en) Method and reagent for the determination of β-lipoprotein
CN106591267B (en) Thromboplastin, extraction method thereof and PT reagent
US4946775A (en) Composition, kit and method for assaying heparin and a method for making the composition
Momose et al. Organic analysis—XXIII: Determination of blood sugar and urine sugar with 3: 6-dinitrophthalic acid
IE46193B1 (en) Test-kit and method for the estimation of lp-x
Anner et al. Hypothalamic Na (+)-K (+)-ATPase inhibitor characterized in two-sided liposomes containing pure renal Na (+)-K (+)-ATPase
Fowweather The determination of iron in blood-plasma
DE68912477T2 (en) METHOD FOR MEASURING THE BIOLOGICAL EFFECT OF ANTITHROMBIN III AND REAGENTS FOR MEASURING IT.
Hill et al. Bromocresol purple and the measurement of albumin: Falsely high plasma albumin concentrations eliminated by increased reagent ionic strength
Jououanel et al. A rapid and sensitive fluorometric assay of serum phospholipid
CS198692B1 (en) Standard serum for correctness checking of lipide components determination in biological material
US4474887A (en) Method for the determination of low density lipoprotein
Lin et al. A rapid assay for actin-associated high-affinity cytochalasin binding sites based on isoelectric precipitation of soluble protein
Warnick et al. Interlaboratory proficiency survey of high-density lipoprotein cholesterol measurement.
US3764556A (en) Alcoholic precipitation and 1000x centrifugation preparation of hypercholesterolemic and hypertriglyceridemic sera as lipid determination control
Dasgupta et al. Monitoring free digoxin instead of total digoxin in patients with congestive heart failure and high concentrations of digoxin-like immunoreactive substances
Grey et al. Myotonic muscular dystrophy: defective phospholipid metabolism in the erythrocyte plasma membrane.