CS198692B1 - Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu - Google Patents

Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu Download PDF

Info

Publication number
CS198692B1
CS198692B1 CS216378A CS216378A CS198692B1 CS 198692 B1 CS198692 B1 CS 198692B1 CS 216378 A CS216378 A CS 216378A CS 216378 A CS216378 A CS 216378A CS 198692 B1 CS198692 B1 CS 198692B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
solution
standard serum
biological material
phospholipids
lipide
Prior art date
Application number
CS216378A
Other languages
English (en)
Inventor
Josef Tovarek
Jana Vojtkova
Original Assignee
Josef Tovarek
Jana Vojtkova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Josef Tovarek, Jana Vojtkova filed Critical Josef Tovarek
Priority to CS216378A priority Critical patent/CS198692B1/cs
Publication of CS198692B1 publication Critical patent/CS198692B1/cs

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Vynález'se týká standardního séra pro kontrolu správnosti stanovení obsahu lipidovýcb složek v biologickém materiálu a způsobu jeho přípravy ·
V laboratořích, provádějících stanovení cholesterolu, neutrálních .tuků a fosfol.ípidc·, se používají pro, kontrolu správnosti výsledků standardní séra s normálními nebo jetí. nepatrně zvýšerými hodnotami, nebo roztoky uvedených složek o známé koncentraci v org.a.nidý.ch rozpouštědlech.
Roztoky lipidových složek v organických rozpouštědlech je možno připravit· v rozmezí tzv, normálních až patologických hodnot (cholesterol od.· 150 do 700 mg/100 ml = 3,& až. .
mmol/1, celková lipemie od 3 do 15 g/1, neutrální tuky od 150 do 1500 mg./lOQ ml·= ·, 1,7 až 17 mmol/1, foofolipidy od 150 do 750 mg/100 ml = 2 až 10 mmol/1 (Hořejší a spol·'Základy chemického'vysetřováni v lékařství, SZdN Praha 1964, Jiří Homolka: Klinická biochemie , SZdN Praha 1959). Rozmezí se volí s ohledem na potřebu kontrolovat nemocné s normálními i značně zvýšenými hodnotami těchto složek. ,
Protože však viskozita roztoků organických rozpouštědel (alkoholu, acetonu, chloroformu, isopropanolu, kyseliny octové aj ) se značně liší od viskozity vyšetřovaného biologického materiálu (krve, séra, plasmy, výpotků), dochází při pipetování k rozdílnému odměřeni vyšetřovaného vžorku a kontroly a tím i k chybám ve stanoveních 2 • Z těchto důvodů se jako kontrolní vzorky zpracovávají standardní séra. Standardní sér, pro stanoveni lipidových složek, komerčně dostupná, mají následující hodnoty: cholesterol 140 až 305 mg%, neutrální tuky 43 až 195 mg%, fosfolipidy 150 až 330 mg% a celkové lipidy 360 až 1150 mg%. Protože se uvedené koncentrace pohybuji v oblasti normálních nebo jen lehce zvýšených hodnot, lze těmito séry spolehlivě kontrolovat správnost vyšetřeni jen v sérech pacientů s normálními, nebo jen lehce zvýšenými hodnotami.
Shora uvedené nedostatky v podstatné míře odstraňuje standardní sérum podle vynálezu. Podstatůu vynálezu je standardní sérum pro kontrolu správnosti stanoveni obsahu lipidových složek v biologickém materiálu obsahující cholesterol, neutrální tuky a fosfolipidy, vyznačené tim, že obsahuje zvýšené koncentrace lipidových složek až.do pětinásobku horni hra· nice obsahu lipidových složek v séru zdravých lidi v molárnich poměrech cholesterol : neutrální tuky : fosfolipidy 5 : 2 : 2,5 až 5 5 : 3,5, Standardní sérum podle vynálezu se s výhodou připraví tak, že se lipoppoteiny krevního' séra vysráži 0,020 až 0,030 M roztokem chloridu vápenatého v 0,05 až 0,07 mM heparinu, sraženina ae suspenduje v 0,004 až 0,006 M roztoku tris (hydroxymethyl)-aminomethanu a rozpustí ee v roztoku látky, která komplexně váže ionty vápníku a v roztoku neutrální soli, s výhodou lze použit 0,20 až 0,25 M citran sodný v 1 až 1,5 M chloridu sodném a potom se pořadí na požadované koncentra· ce roztokem albuminu, s výhodou 0,7 milimolárnim.
Přiklad
Ve skleněné nádobě, například kádince o obsahu 3000 ml, se smíchá za stálého mícháni 1900 ml 0,025 M chloridu vápenatého, ve kterém je rozpuštěno 250 mg heparinu, se 100 ml séra, získaného z čerstvě odebrané krve. Smis se ponechá v klidu při pokojové teplotě 30 min. a potom se vysrážené lipoprotpiny odstředí. Nejvýhodnějši je odstřeňovánl v malém počtu velkých zkumavek po částech vždy aei po 3 min, při 4000 G, Po odstředění se supernatant sleje, k sedimentu llpoproteinů se přidá další směs, která se odstředí, supernatarit se opět odleje · tak se pokračuje, až je celý objem odstředěn. Sraženina lipoproteinů se převede do jedné zkumavky pomocí 0,005 M tria(hydroxymethyl) aminomethanu. Vzniklé silně zkalená suspenze se změní v opaleskujici roztok přidáním několika kapek roztoku (200 mg citran sodný NagCgHgO? . 2H20 a 200 mg chloridu sodného NaCl ve 3,0 ml destilované vody),
Tento roztok přidáváme za stálého mícháni jen velmi opatrně právě do rozpuštěni sraženiny. Po promíchání se v tomto koncentrátu určí hodnoty jednotlivých složek přesně, nejlépe dvěma nezávislými způsoby, např. cholesterol metodou Lieberman-Burchardt a enzymovou metodou, neutrální tuky metodou fotometrickou a enzymovou, fosfolipidy po mineralizaci a přímou metodou. Potom se koncentrát,pořadí vzestupnou řadou roztokem 5% albuminu, Tim získáme sérii standardních sér s atestem pro spolehlivější kontrolu správnosti výsledků u nemocných se zvláště vysokými hodnotami lipidových složek. Při zachování vzájemných poměrů roztoků chloridu vápenatého, heparinu a krevního séra jak bylo popsáno výěe je možno provádět přípravu Ve velkém množství.
Rozptyl měřených patologicky zvýšených hodnot je podstatně nižší při kontrole sérem vynálezu, s komerčně dostupnými séry byl rozptyl nad 10 % měřených hodnot. Sa stan dním kontrolním sérem podle vynálezu je přesnost lepší a rozptyl měřených hodnot patoinkých případů je pod 5 %. Standardní sérum podle vynálezu umožňuje tak přesnější vyřenl nemocných s patologicky zvýšenými hodnotami lipidových složek, přičemž přesnost netřeni při normálních hodnotách je stejná.

Claims (1)

  1. Standardní sérum pro kontrolu správnosti stanoveni obsahu lipidových složek v biologickém materiálu obsahující cholesterol, neutrální tuky a fosfolipidy, vyznačené tím, že obsahuje zvýšené koncentrace lipidových složek až do pětinásobku horní hranice obsahu lipidových složek v séru zdravých lidí v molárních poměrech cholesterol ku neutrální tuky ku fosfolipidy 5 ku 2 ku 2,5 až 5 ku 5 ku 3,5.
    Způsob přípravy standardního séra podle bodu 1, vyznačený tim, že se lipoproteiny krevního séra vysráží 0,020 až 0,030 M roztokem chloridu vápenatého v 0,05 až 0,07 mM heparinu, sražeňina se suspenduje v 0,004 až 0,006 M roztoku tris (hydroxymethyl)-aminomethanu a rozpustí se v roztoku látky, která komplexně váže ionty vápníku a v roztoku neutrální soli, s výhodou lze použit 0,20 až 0,25 M citran sodný 1 až 1,5 M chloridu sodném a potom se poředi na požadované koncentrace roztoku albuminu β výhodou 0,7 milimolárnim.
CS216378A 1978-04-04 1978-04-04 Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu CS198692B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS216378A CS198692B1 (cs) 1978-04-04 1978-04-04 Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS216378A CS198692B1 (cs) 1978-04-04 1978-04-04 Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS198692B1 true CS198692B1 (cs) 1980-06-30

Family

ID=5357956

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS216378A CS198692B1 (cs) 1978-04-04 1978-04-04 Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS198692B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Brodie et al. The estimation of quinine in human plasma with a note on the estimation of quinidine
Sudlow et al. Spectroscopic techniques in the study of protein binding. A fluorescence technique for the evaluation of the albumin binding and displacement of warfarin and warfarin‐alcohol
Howell et al. Partition of calcium, phosphate, and protein in the fluid phase aspirated at calcifying sites in epiphyseal cartilage
Srinivasan et al. Complexing of serum pre-β-and β-lipoproteins and acid mucopolysaccharides
US4115538A (en) Assay kit for cAMP and/or cGMP and method of using the same
US4226713A (en) Diagnostic agents
US4701417A (en) Control or calibration serum for lipid diagnosis
Ebadi et al. MICROASSAY OF ADENOSINE‐3′, 5′‐MONOPHOSPHATE (CYCLIC AMP) IN BRAIN AND OTHER TISSUES BY THE LUCIFERIN‐LUCIFERASE SYSTEM 1
Thompson et al. Reduced lateral mobility of a fluorescent lipid probe in cholesterol-depleted erythrocyte membrane
US4486531A (en) Method and reagent for the determination of β-lipoprotein
CN106591267B (zh) 一种凝血活酶及其提取方法以及pt试剂
US4414326A (en) Diagnostic agents
US4946775A (en) Composition, kit and method for assaying heparin and a method for making the composition
IE46193B1 (en) Test-kit and method for the estimation of lp-x
Momose et al. Organic analysis—XXIII: Determination of blood sugar and urine sugar with 3: 6-dinitrophthalic acid
Illsley et al. Chloride transport across placental microvillous membranes measured by fluorescence
Scott et al. Diet-related reference values for plasma amino acids in newborns measured by reversed-phase HPLC
Anner et al. Hypothalamic Na (+)-K (+)-ATPase inhibitor characterized in two-sided liposomes containing pure renal Na (+)-K (+)-ATPase
Fowweather The determination of iron in blood-plasma
Hill et al. Bromocresol purple and the measurement of albumin: Falsely high plasma albumin concentrations eliminated by increased reagent ionic strength
Jououanel et al. A rapid and sensitive fluorometric assay of serum phospholipid
CS198692B1 (cs) Standardní, sérum pro kontrolu správnosti stanovení obsahu .lipidovýcb slpšek . - v biologickém materiálu
Sandhu Serum phospholipids determined without acid digestion.
US4474887A (en) Method for the determination of low density lipoprotein
Warnick et al. Interlaboratory proficiency survey of high-density lipoprotein cholesterol measurement.