CS197667B1 - Analog vasopresínu a způsob jeho výroby - Google Patents
Analog vasopresínu a způsob jeho výroby Download PDFInfo
- Publication number
- CS197667B1 CS197667B1 CS676377A CS676377A CS197667B1 CS 197667 B1 CS197667 B1 CS 197667B1 CS 676377 A CS676377 A CS 676377A CS 676377 A CS676377 A CS 676377A CS 197667 B1 CS197667 B1 CS 197667B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- gly
- glycyl
- cys
- vasopressin
- treatment
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 claims description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- -1 benzyltyrosyl-phenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl -S-benzylcysteine Chemical compound 0.000 claims description 7
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- JQJPBYFTQAANLE-UHFFFAOYSA-N Butyl nitrite Chemical compound CCCCON=O JQJPBYFTQAANLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- CQHXWGMCWPWSEX-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylformamide;azide Chemical compound [N-]=[N+]=[N-].CN(C)C=O CQHXWGMCWPWSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 4
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 4
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 4
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 4
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 4
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 4
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N N-ethylpiperidine Chemical compound CCN1CCCCC1 HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002686 anti-diuretic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002315 pressor effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Chemical class 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical class NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010056 Terlipressin Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Chemical class OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000003552 hormonogenic effect Effects 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229960003837 lypressin Drugs 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical class [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003813 terlipressin Drugs 0.000 description 1
- BENFXAYNYRLAIU-QSVFAHTRSA-N terlipressin Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CN)CSSC1 BENFXAYNYRLAIU-QSVFAHTRSA-N 0.000 description 1
- 230000001810 trypsinlike Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Předmětem vynálezu je nový analog vasopresínu a způsob jeho výroby.
Jedná se o nový analog vasopresínu, který je typicky neštěpitelný a má specifický presorický účinek.
Přírodní hormon vasopresín má v organismu velmi krátký poločas, daný hlavně rychlou enzymovou degradací. Jedním z nej exponovanějších míst je peptidická vazba mezi basickou aminokyselinou v poloze 8 a glycinovým zbytkem v poloze 9, která je štěpena v organismu trypsinem nebo enzymy trypsinové povahy. Zjistili jsme nyní, že záměna lysinu případně argininu za ornithin toto štěpení vylučuje. Kromě toho způsobuje i disociaci mezi antidiur etickou a presorickou aktivitou ve prospěch presorické aktivity, což je velmi výhodné v případech, kdy se klinicky využívá presorického účinků vasopresínu a antidiuretický efekt je na závadu. Protrahovaný účinek připraveného analogu podle vynálezu je ještě zvýšen tím, že struktura analogu je založena na tzv. hormonogenovém principu (Cort J. H., Jošt K., Kasafírek E., Rudinger J., Šorm F., Zaoral M.: čs. patent č. 123 273).
Analog vasopresínu-Na-gly cyl-glycyl-glycyl-8-ornithin vasopresín (t.j. cyklický disulfid N“-glycyl-glycyl-glycyl-cysteinyltyrosyl-fenyl-alanyl-glutaminyl-asparaginyl-cysteinyl-prolyl-ornithyl-glycinamidu) má vzorec I
Gly-Gly-Gly-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Orn-Gly-NHz I.
kde všechny aminokyseliny jsou L-řady. Podstatou způsobu výroby nového analogu vasopresínu podle vynálezu je,'že se z dvanáctipeptidu vzorce II,
C«HsCHOCÓ-Gly-Gly-Gly-Cys(C«H5CH2)-Tyr (C6H5CH2)-Phe-Gln-Asn-Cys(C«H5CH2)-Pro-Om(CeHsCH2OCO)-Gly-NH2 II., ve kterém všechny aminokyseliny jsou L-řady, který se připraví reakcí amidu prolyl-ÍP-benzyloxykarbonylornithylglycinu, získaného z jeho o-nitrobenzensulfenyl derivátu působením chlorovodíku v dimethylformamidu, s azidem benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-glycyl-S-benzyl-cysteinyl-O-benzyltyrosyl-fenylalanyl-S-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinu, získaného z odpovídajícího hydrazidu působením butylrtitritu v přítomnosti chlorovodíku, přičemž tento hydrazid byl získán z odpovídajícího methylesteru působením hydrazinu, odštěpí všechny chránící skupiny působením roztoku sodíku v kapalném amoniaku a vzniklá disulfhydrylová látka je oxidována na konečný produkt roztokem ferrikyanidu draselného.
Připravený nový analog má následující farmakologickou účinnost: antidiuresa 0,7 I.U/ /mg, tlak despinalisovaná krysa — 1,33 I.U/ /mg (ve srovnání s glypressinem v daném testu 0,5 I.U/mg), děloha in vitro 0,008 I.U/ /mg. Ve srovnání s dříve popsanou látkou, N“-glycyl-glycyl-glycyl-8-Lysin-vasopresinem (Cort J. H, Jošt K, Kasafírek E, Rudinger L, Sorm F, Zaoral M.; čs. patent č. 123 273) 2,5krát vyšší presorický účinek a 3krát nižší antidiuretický účinek, což je zejména výhodné pro potencielní klinické využití analogů vasopresinu, kde je žádoucí disociace uvedených biologických účinků, Obě aktivity mají silně prodlouženou dobu trvání účinků.
Příklady provedení:
Příklad 1
Methylester N“-benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-glytyl-S-benzylcysteinyl-O-benzyltýrosylfenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinu.
K roztoku 1,3 g methylesteru benzylox.ykarbonylglutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinu (Katsoyannis P. G, Gish G. T, Hess P. G, du Vigneaud V.: J. Am. Chem. Soc. 80, 2558 (1958); Boissonnas R. A, Guttmann S, Jaquenoud P.. A, Waller J. P.: Helv. Chim. Acta 38, 1491 (1955); Zaoral M.: Collection Czechoslov. Chem. Commun. 30, 1853 (1965) v kyselině octové (3,5 ml) byl přidán HBr v kyselině octové (35%; 3,5 ml), směs byla zahřívána 10 min. na 55 °C a zředěna etherem. Produkt byl několikrát rozetřen s etherem, vysušen a rozpuštěn v dimethylformamidu (7 ml). K roztoku 1,86 g chráněného hexapeptidu-hydrazidu benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-glycyl-S-benzylsysteinyl-O-benzyl-tyrosyl-fenylalaninu (Procházka Z., Krejčí I, Kupková B., Slaninová J, Bojanovská V, Prusík Z, Vosekalna I. A., Maloň P, Barth T, Fric I, Bláha K, Jošt K.: Collection Czechoslov. Chem. Commun, 43, 1285 (.1978) ve směsi dimethylformamidu (20 ml) a 6 M-HC1 v tetrahydrofuranu (1,7 ml), ochlazenému na —30 °C, byl přidán n-butylnitrit (0,34 ml) a po 4 min. míchání při —30 °C roztok hydrobromidu tripeptidu, ochlazený na —30 °C. Ke směsi byl přidán N-ethylpiperidin do pH
8,5 až 9,0 (vlhký pH papírek). Po 4 dnech stání při 0 °C byla reakční směs odpařena, odparek byl rozetřen s 1 M-HC1, odsát a promyt 1 M-HC1, vodou a methanolem. Po- přesrážení z kyseliny octové etherem bylo získáno 2,66 g (98 %) produktu o t.t. 239 až 243 °C. Vzorek pro analýzu byl přesrážen stejným způsobem, t.t. zůstala beze změny. [a]n —30,l°(c 0,2, dimethylformamid). Pro Ce9H7’NnO«Sí.C2H«.Oí.3H2O (1480) vypočteno: 57,59 % C, 6,06 % H, 10,40 % N: nalezeno: 57,45 % C, 5,87 % H, 10,25 % N.
Příklad 2
Hydrazid N“-benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-glycyl-S-benzylcysteinyl-O-benzýltyrosyl-fenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinu
K roztoku výše připraveného esteru (1,0 g) v dimethylformamidu (11 ml) byl přidán hydrát hydrazinu (2 ml). Směs byla míchána při teplotě místnosti 92 hod, zředěna vodou (70 ml) a po ochlazení na 0 °C byl produkt odsát a promyt vodou. Bylo získáno 0,96 g (96 %) látky o t.t. 230 až 235 °C. Vzorek k analyse byl krystalován z dimethylformamidu a vody bez změny bodu tání [«]d —31,8° (C 0.,2, dimethylf ormamid). Pro CesHÁNůOnS^HO (1402) vypočteno: 58,23 % C, 5,96 % H, 12,98 % N; nalezeno: 57,97 % C, 5,85 % H, 13,11 % N.
Příklad 3
Amid N“-benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-glycyl-S-benzylcysteinyl-O-benzyltyrosyl-fenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinyl-prolyl-Ní-benzyloxykarbonylornithyi-glycinu
K roztoku 0,40 g amidu o-nitrobenzensulfenylpropyl-Ní-benzyloxykarbonylornithyl-glycinu (Jošt K, Procházka Z, Cort J. H, Barth T, Škopková J, Prusík Z, Sorm F.: Collection Czechoslov. Chem. Commun. 39, 2835 (1974)) v dimethylformamidu (3 ml) byl přidán 2 M-HC1 v etheru (0,77 ml). Po 4 min. .při teplotě místnosti byl hydrochlorid vysrážen etherem, vysušen a rozpuštěn ,v dimethylformamidu (3,5 ml). K roztoku výše popsaného hydrazidu (0,47 g) ve směsi dimethylformamidu (10 ml) a 4,5 M/HCl v tetrahydrofuranu (0,78 ml), ochlazenému na —30 °C, byl přidán n-butylriitrit (60rjl) a po 4 min. míchání roztok hydrochloridu tripeptidu a N-ethylpiperidin (na pH 8,5; vlhký pH papírek). Po 70 hod. stání při 0 °C byla směs odpařena, odparek byl rozetřen s i M-HC1, odfiltrován, promyt 1 M HC1 a vodou. Po •řesrážení z kyseliny octové vodou bylo získáno 0,51 g (84 %) látky o t.t. 175 až 182 °C. Část produktu (50 mg) byla filtrována přes sloupec gelu (Sephadex LH-20) v dimethylformamidu. Eluční frakce s žádaným produktem byly odpařeny a přesráženy z dimethylformamidu etherem. Bylo získáno 37 mg (74 %) látky o' t.t. 183 až 187 °C. [«]1J —34,4° (c 0,2 dimethylf ormamid). Aminokyselinová analysa: Om 0,94, Asp 1,01, Glu 1,00, Pro 1,00, Gly 3,72, Tyr 0,99, Phe 1,03, Cys (Bzl) 1,74. Pro C»»Hw«N«Oi’S2.2H2O (1808) vypočteno: 58,46 % C, 6,13 % H, 12,39 % N; nalezeno: 58,23 % C, 5,92 % H, 12,28 % N.
Příklad 4
N -Glycyl-glycyl-glycyl-8-ornithin-vasopresin Amid N“-benzyloxykarbonylglycyl-glycyl-gly-cyl-S-benzylcysteinyl-O-benzyltyrosyl-fenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinyl·prolyl·Nδ-benzyloxykarbonylornithyl·glycinu (300 mg) byl rozpuštěn v čerstvě destilovaném kapalném amoniaku (30 ml) a redukován sodíkem. Když byla modrá barva stálá 60 sek., byla směs odbarvena chloridem amonným a lyofilisována. Lyofilisát byl rozpuštěn v 0,1 M-HC1 (16 ml), roztok byl zředěn vodou (30 ml) a extrahován eťhylacetátem a etherem. Po zředění vodou (250 ml) bylo pH roztoku upraveno na hodnotu 7,0 a za míchání byl k němu během 30 min. přidán roztok K>Fe(CN)e (105 mg) ve vodě (30 ml). Směs byla míchána dalších 30 min. při teplotě místnosti, její pH bylo upraveno kyselinou octovou na 4,1 a roztok byl nanesen na kolonu karboxylátov ého katexu (Amberlit CG-50I; 15 ml), Kolona byla promyta 0,25% kyselinou octovou (do negativní reakce na chloridové ionty) a produkt byl vymyt 50% kyselinou octovou. Lyofilisací bylo získáno 190 mg látky, která byla rozpuštěna v 20% kyselině octové (4 ml) a roztok byl vnesen do přístroje pro beznosičovou elektroforesu (2800 V, 2,03 ml/hod.). Lyofilisací frakcí obsahujících žádaný produkt bylo získáno 108 mg (52 %) látky, jejíž část (50 mg) byla podrobena gelové filtraci. Bylo získáno 36 mg (37 %, počítáno na chráněný dodekapeptid). [a]o — 84,6° (c 0,1, voda). Aminokyselinová analysa; Orn 1,02, Asp 0,98, GIu 0,98, Pro 1,01,' Gly 4,02, Cys 1,88, Tyr 0,97, Phe 1,04. Pro OH7«Ni»0«S*.3C2H<02.4HO (1468) vypočteno: 46,65 % C, 6,45 % H, 15,27 % N; nalezeno:. 46,68 % G, 6,14 % H, 15,02 % N.
Zkouška štěpení připraveného analogu trypsinem;
K roztoku analogu (50 7jg) ve směsi vody (0,7 ml) a Tris-HCI pufru (200 ηΐ; 0,2 M;pH 7,8) byl přidán roztok trypsinu (0,1 mg) v Tris-HCI pufru (0,1 ml), obsahujícího 10‘4M CaCb. Směs byla inkubována 60 min. při 37 °C. Jako slepý pokus (blank) byl inkubován vzorek bez trypsinu. Biologická aktivita, stanovená presorickým testem, byla stejná jako u vzorku neobsahujícího trypsin. Aktivita použitého trypsinu byla kontrolována rychlostí hydrolysy p-nitranilidu N“-benzoylargininu.
Claims (2)
1. Analog vasopresínu -N“-glycyl-glycyl-glycyl-8-ornithin vasopresín vzorce I i i
Gly Gly-Gly-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-PrJ-Orn-Gly-NHa I, kde všechny aminokyseliny jsou L-řady.
2. Způsob výroby analogu vasopresínu podle bodu 1, vyznačený tím, že se z dodekapeptidu vzorce II
OHsCHOCO-Gly-Gly-Gly-CysíCtfBCHz)-Tyr(C8H5CH2)-Phe-Gln-Asn-Cys(C6H5CHJ)-Pro-Orn(CeH5CHiOCO)-Gly-NH2 II, ve kterém všechny aminokyseliny jsou L-řady, který se připraví reakcí amidu prolyl-NJ-benzyloxykarbonylornithylglycinu, získaného z jeho o-nitrobenzensulfenyl derivátu působením chlorovodíku v dimethylformamidú, s azidem benzyloxykarbonyl-glycyl-glycyl-glycyl-S-benzylcysteinyl-O-benzyltyrosyl-fenylalanyl-glutaminyl-asparaginyl-S-benzylcysteinu, získaného z odpovídajícího hydrazídu působením butylnitritu v přítomnosti chlorovodíku, při čemž tento hydrazid byl získán z odpovídajícího methylesteru působením hydrazinu, odštěpí všechny chránící skupiny působením roztoku sodíku v kapalném amoniaku a vzniklá disulfhydrylová látka je oxidována na konečný produkt roztokem ferrikyanidu draselného.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS676377A CS197667B1 (cs) | 1977-10-18 | 1977-10-18 | Analog vasopresínu a způsob jeho výroby |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS676377A CS197667B1 (cs) | 1977-10-18 | 1977-10-18 | Analog vasopresínu a způsob jeho výroby |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS197667B1 true CS197667B1 (cs) | 1980-05-30 |
Family
ID=5415385
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS676377A CS197667B1 (cs) | 1977-10-18 | 1977-10-18 | Analog vasopresínu a způsob jeho výroby |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS197667B1 (cs) |
-
1977
- 1977-10-18 CS CS676377A patent/CS197667B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Manning | Synthesis by the Merrifield method of a protected nonapeptide amide with the amino acid sequence of oxytocin | |
| Andrews et al. | Solid‐phase synthesis of a range of O‐phosphorylated peptides by post‐assembly phosphitylation and oxidation | |
| EP0234888B1 (en) | Process for producing human epidermal growth factor and analogs thereof | |
| Li et al. | Synthesis and analgesic activity of human. beta.-endorphin | |
| Bodanszky et al. | Synthesis of arginine-containing peptides through their ornithine analogs. Synthesis of arginine vasopressin, arginine vasotocin, and L-histidyl-L-phenylalanyl-L-arginyl-L-tryptophylglycine | |
| Kruszynski et al. | [1-(. beta.-mercapto-. beta.,. beta.-cyclopentamethylenepropionic acid), 2-(O-methyl) tyrosine] arginine-vasopressin and [1-(. beta.-mercapto-. beta.,. beta.-cyclopentamethylenepropionic acid)] arginine-vasopressin, two highly potent antagonists of the vasopressor response to arginine-vasopressin | |
| KR0144144B1 (ko) | Lhrh 동족체 및 이를 함유하는 약제학적 조성물 | |
| Hofmann et al. | Studies on polypeptides. XXXIV. Enzymic properties of partially synthetic De (16-20)-and De (15-20)-ribonucleases S'1-3 | |
| US3992365A (en) | Agonist analogues of luteinizing hormone releasing hormone | |
| Nicolaides et al. | Studies on the synthesis of polypeptides. Bradykinin | |
| Ondetti et al. | Bradykinin analogs containing. beta.-homoamino acids | |
| Heller et al. | Neurospora crassa Cytochrome c: II. CHYMOTRYPTIC PEPTIDES, TRYPTIC PEPTIDES, CYANOGEN BROMIDE PEPTIDES, AND THE COMPLETE AMINO ACID SEQUENCE | |
| HU196227B (en) | Process for producing new cyclic vasopressin antagonist peptides and pharmaceutics comprising the same | |
| US4487765A (en) | Peptides | |
| IE44532B1 (en) | Somatostatin analogues | |
| EP0042753B1 (en) | Nonapeptide and decapeptide agonists of luteinizing hormone releasing hormone containing heterocyclic amino acid residues, methods for their preparation, pharmaceutical compounds containing them, and their pharmaceutical use | |
| CA1246055A (en) | N-.omega.-substituted hormonogens of vasopressin and its synthetic analogs | |
| Lutz et al. | Isoasparagine-oxytocin: The Isoasparagine Isomer of Oxytocin1 | |
| Ciardelli et al. | Des-N-tetramethyltriostin A and bis-L-seryldes-N-tetramethyltriostin A, synthetic analogs of the quinoxaline antibiotics | |
| Moore et al. | Pharmacological effects of introducing a double bond into a binding site of oxytocin. Analogs with L-3, 4-dehydroproline in position 7 | |
| DK148085B (da) | Dipeptidet pyrglu-his(2,4-dinitrophenyl)-oh og fremgangsmaade til fremstilling af lh-rh og lh-rh-analoge peptider under anvendelse af dette dipeptid | |
| Storey et al. | Polypeptides. LI. Application of S-ethylcarbamoylcysteine to the synthesis of a protected heptatetracontapeptide related to the primary sequence of ribonuclease T1 | |
| Chung et al. | Adrenocorticotropins. XXXVII. Synthesis of lysine8-. alpha. 1-17NH2-ACTH and its biological properties | |
| Rosenberry et al. | [13] Acetylcholinesterase | |
| CS197667B1 (cs) | Analog vasopresínu a způsob jeho výroby |