CN2377532Y - 微量荧光细胞计数板 - Google Patents
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Abstract
本实用新型是一种微量荧光细胞计数板,是对常规血细胞计数板的改进,其中央的计数池长宽各20mm,纵横均等分成80格×80格,共6400个正方形小格,池深0.1mm,其覆盖的盖玻片也作相应扩大,一次检测样品量为40μl,是常规血细胞计数板的40多倍,在荧光显微镜下可大大提高荧光细胞检出率,最低可达1/105。
Description
本实用新型属于细胞生物学荧光检测技术领域,是一种微量荧光细胞计数板。
荧光细胞计数是荧光方法中的一项基本技术。荧光方法具有灵敏度高、特异性强、方法简便的特点。该方法可用于研究细胞及细胞内各化学成分的分布、定位、吸收、转运。当前应用于荧光细胞计数的仪器主要有两种,即流式细胞仪和荧光显微镜。流式细胞仪的检测精确度只有1%左右,在某些检测工作中难以满足要求,而且仪器设备价格昂贵,技术复杂,难以普及;至于荧光显微镜,它必须结合一定的观察视野和容量才能进行计数:其中一种做法是在载玻涂片上随机选择任一视野进行检测计数,由于该法受视野的大小和选择次数的限制,受检的样品量受到很大的限制。一般在4X物镜下,每视野的受检样品量不超过1μl,因而可重复性差,对微量荧光细胞计数无统计学意义。如果进行连续检测计数,则因载玻涂片没有一定的刻度来定位细胞涂片的深度和视野坐标,而导致细胞堆积重叠和漏检及重检,难以满足微量荧光细胞计数工作的需要。另一种做法是结合应用常规的血细胞计数板进行计数,该法又由于每次检测的样品量仅为0.9μ1,而难以满足微量荧光细胞计数工作的需要。
本实用新型的目的在于提供一种结合荧光显微镜的应用,既可人工操作又可微机处理、技术简单、价格低廉、检出率高的微量荧光细胞计数板。
本微量荧光细胞计数板是对常规血细胞计数板的改进,其板面如图1所示。
图1为计数板俯视结构示意图:包括计数板板身1、计数池2、导液凹槽3。计数板板身1,与现有血细胞计数板相同,长度为74mm,宽度为33mm,厚度为10mm;计数池2位于计数板中央,其长宽各20mm,以刻度线纵横平均等分80×80格,共计6400个正方形小格,其深度为0.1mm;盖玻片也相应扩大,其长度约40mm,宽度约25mm,厚度约3mm;该计数板一次检测样品量可达40μl,是常规的血细胞计数板或随机视野检测容量的40多倍,增加了检测样品量,提高了微量荧光细胞检出率(最低可达1/105阳性率);导液凹槽3位于计数池的两侧,长度与计数板板身1的宽度相同,槽宽约3mm、深为板厚度的1/2-2/3约6mm。
本微量荧光细胞计数板检测方法与常规的血细胞计数板计数类似,但有以下几点注意事项:
①上样:取待检样品约100μl,滴于计数池的一端,并在该端盖上盖玻片,顺势赶出气泡并放下另一端,使样品充盈整个计数池,静置2分钟后便可检测;
②计数样品细胞总数:用常规的血细胞计数板计数细胞总数,即包括荧光阳性和阴性细胞数;
③将荧光显微镜目镜作适当的技术处理:由于一般的目镜其视野为圆形,而计数池为正方形,为便于计数,可以用锡箔纸等薄片剪成外圆内方的屏蔽,嵌衬于目镜镜筒中,使视野变为方形,与计数池的方格线相吻合。一般使用4X物镜和10X目下,可将一直径为13mm的圆形锡箔纸中央剪出一个15mm×4mm的矩形方框嵌衬于目镜镜筒中,这样在一个视野中便可纵向观察和检测14格(排)了;
④计数方法:在荧光视野下,由于荧光细胞数少而且清晰可见,可以快速水平横向连续移动计数池,上下不重叠连续纵向移动以换行,共换6行(次)便可计数完毕(6行×14排);
⑤按需要可重复检测2-3次,计算阳性荧光细胞率。例如:以红色荧光PKH-26标记的CD34+造血干细胞104个通过静脉输入到一个受体小鼠体内(该小鼠骨髓细胞总数一般为108个),3天后杀死小鼠取两条股骨的骨髓细胞,先以常规的血细胞计数板计数一定量的骨髓细胞数,然后离心浓缩至每80-100μl细胞悬液含108个细胞,再以本微量荧光细胞计数板在荧光显微镜下重复检测2-3次,用来计数红色荧光细胞数(约1×102-2×102个),则阳性细胞率为1×10-5~5×10-4,由此可计算出CD34+造血干细胞的归巢率(10%-20%)。在这种情况下若用流式细胞仪和常规的血细胞计数板,是不能完成此项计数工作的。
⑥为了节省工作量,也可以结合高分辨摄像或数码照像,通过电脑分析计数,则过程更为简单和精确。
优点和积极效果:
本微量荧光细胞计数板使用简单方便,一次检测样品量可达40μl,大大提高了检出率,最低可达1/105。本实用新型既可用于检测各种生物活性荧光细胞,也可以用于检测非荧光标记的微量细胞(如,精子细胞等)。
Claims (1)
1.一种细胞计数板,其特征在于计数池(2)位于计数板(1)中央,长宽各20mm,以纵横刻度线平均等分成80格×80格,共计6400个小格,池深0.1mm,盖玻片也作相应扩大。
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Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1314955C (zh) * | 2005-01-28 | 2007-05-09 | 晏芸 | 荧光原位杂交计数板及其计数方法 |
CN100383513C (zh) * | 2005-09-28 | 2008-04-23 | 长春迪瑞实业有限公司 | 一种计数室的制造方法 |
CN100432653C (zh) * | 2005-07-26 | 2008-11-12 | 上海师范大学 | 一种微量悬浮肿瘤细胞的计数方法 |
CN102321729A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-18 | 华中农业大学 | 一种检测土壤和沉积物中细菌数量的荧光显微计数方法 |
CN101859022B (zh) * | 2009-04-09 | 2012-07-25 | 上海中晶科技有限公司 | 玻片及其形成方法 |
CN103773671A (zh) * | 2014-01-28 | 2014-05-07 | 爱威科技股份有限公司 | 一种细胞计数板、模具及制造细胞计数板的方法 |
CN103954545A (zh) * | 2014-05-16 | 2014-07-30 | 山东省医学科学院 | 循环肿瘤细胞检测专用滤膜表面细胞计数板 |
CN104428677A (zh) * | 2011-12-09 | 2015-03-18 | 斯克利普斯研究所 | 用于识别循环肿瘤细胞的设备、系统和方法 |
CN112161910A (zh) * | 2020-09-19 | 2021-01-01 | 湖南伊鸿健康科技有限公司 | 一种血细胞计数方法 |
-
1999
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Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1314955C (zh) * | 2005-01-28 | 2007-05-09 | 晏芸 | 荧光原位杂交计数板及其计数方法 |
CN100432653C (zh) * | 2005-07-26 | 2008-11-12 | 上海师范大学 | 一种微量悬浮肿瘤细胞的计数方法 |
CN100383513C (zh) * | 2005-09-28 | 2008-04-23 | 长春迪瑞实业有限公司 | 一种计数室的制造方法 |
CN101859022B (zh) * | 2009-04-09 | 2012-07-25 | 上海中晶科技有限公司 | 玻片及其形成方法 |
CN102321729A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-18 | 华中农业大学 | 一种检测土壤和沉积物中细菌数量的荧光显微计数方法 |
CN102321729B (zh) * | 2011-07-06 | 2013-06-05 | 华中农业大学 | 一种检测土壤和沉积物中细菌数量的荧光显微计数方法 |
CN104428677A (zh) * | 2011-12-09 | 2015-03-18 | 斯克利普斯研究所 | 用于识别循环肿瘤细胞的设备、系统和方法 |
CN103773671A (zh) * | 2014-01-28 | 2014-05-07 | 爱威科技股份有限公司 | 一种细胞计数板、模具及制造细胞计数板的方法 |
CN103773671B (zh) * | 2014-01-28 | 2015-07-08 | 爱威科技股份有限公司 | 一种细胞计数板、模具及制造细胞计数板的方法 |
CN103954545A (zh) * | 2014-05-16 | 2014-07-30 | 山东省医学科学院 | 循环肿瘤细胞检测专用滤膜表面细胞计数板 |
CN112161910A (zh) * | 2020-09-19 | 2021-01-01 | 湖南伊鸿健康科技有限公司 | 一种血细胞计数方法 |
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