CN219578157U - 一种用于冷冻胚胎的简易操作装置 - Google Patents

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Abstract

一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,本实用新型为了解决现有的用于小鼠、大鼠、及其它哺乳动物胚胎冷冻装置结构复杂,操作不简便,在户外操作或实验室条件简单的情况下冷冻胚胎难以完成的问题,本实用新型包括注射器、胶管和冻存管,注射器的乳头端与胶管的一端连接,胶管的另一端与冻存管连接。注射器吸取一段0.5M蔗糖到冻存管中,然后吸取一段空气到冻存管,之后吸取冷冻保存液到冻存管,再利用自制口吸移卵针吸取胚胎吹入这段冻存液中,之后再利用注射器吸取一段空气到冻存管,最后吸取少量冷冻保存液到冻存管,冻存管头部留有空隙,然后用加热的宽头镊子烧灼这段冻存管空隙,使其加热后黏着封口,直接扔到液氮中,长期保存。

Description

一种用于冷冻胚胎的简易操作装置
技术领域
本实用新型涉及一种冷冻胚胎用装置,具体涉及一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,本实用新型涉及生物工程技术领域。
背景技术
胚胎冷冻保存是胚胎工程领域一项重要的操作技术。即利用冷冻保护剂以及降温程序,使胚胎在低温,通常在液氮(-196℃)中长期保存,升温后能够维持正常代谢能力的一种长期保存技术。
胚胎冷冻技术源于1971年,首先发明的是慢速冷冻法,Whittingham成功地保存了小鼠胚胎。之后胚胎冷冻技术取得长足发展,尤其Rau和Fahy在1985年发明了玻璃化冷冻方法,利用高浓度的溶质,包括DMSO、乙酰胺、丙二醇和聚乙二醇等配置玻璃化冷冻保护剂,通过一步冷冻法,以3000℃/min的速度降温,使高浓度冷冻保护剂由液态直接到无结构的玻璃样固体状态,该方法冻存小鼠胚胎取得87.5%的胚胎复苏发育率,暗示胚胎冷冻技术逐渐成熟。在此之后,研究工作者分别利用该方法取得了牛、羊、马、家兔、大鼠、猴及对冷极度敏感的猪等哺乳动物胚胎冷冻的成功。玻璃化冷冻技术与传统程序化冷冻技术相比,操作简单、费用低、存活率高,目前已经成为主要冷冻方式。
胚胎冷冻技术是一项重要的胚胎工程操作技术,通过该方法可以一次性保存大量胚胎,应用于牛、羊、猪等大家畜,可以充分发挥优良种畜的繁殖潜力,在体外环境中快速、大量的生产和保存优质胚胎,使胚胎工厂化批量生产和规模移植成为现实,通过对胚胎数量和质量的提高而大幅度增加畜牧养殖业的生产效益。另外,通过该技术可以让濒危野生动物得到拯救,通过将濒危动物的胚胎冷冻保存,在一定程度上能延缓其灭绝历程。对于人类而言,冷冻胚胎技术,既可以妥善安置通过人工受精移植后剩余的可用胚胎,增加IVF治疗的累积妊娠率;也可为高龄产妇或者疾病患者保存生育能力。
胚胎冷冻无论对于实验动物、经济动物还是人类而言,都是一项重要的技术手段,因此能保证顺利完成胚胎冷冻的仪器装置的设计变得尤为重要。现有的用于小鼠、大鼠、及其它哺乳动物胚胎冷冻装置结构复杂,操作不简便,在户外操作或实验室条件简单的情况下冷冻胚胎难以完成。
实用新型内容
本实用新型为了解决现有的用于小鼠、大鼠、及其它哺乳动物胚胎冷冻装置结构复杂,操作不简便,在户外操作或实验室条件简单的情况下冷冻胚胎难以完成的问题,进而提供了一种用于冷冻胚胎的简易操作装置。
本实用新型为解决上述问题采取的技术方案是:
本实用新型包括注射器、胶管和冻存管,注射器的乳头端与胶管的一端连接,胶管的另一端与冻存管连接。
进一步地,所述冻存管包括管体和棉签,管体内设有棉签,所述棉签位于管体与胶管连接处的端部。
进一步地,所述管体为0.25ml的麦管。
进一步地,所述管体内由右至左依次设有庶糖段、第一段空气、包含胚胎的冻存液、第二段空气和冻存液,管体的左侧设有封口端。
进一步地,所述庶糖段的庶糖量为0.5M。
进一步地,所述胶管的一端设有宽头段,注射器的乳头端插装在宽头段内。
进一步地,所述注射器为1ml的注射器。
本实用新型的有益效果是:
1、用本实用新型中的注射器吸取一段0.5M蔗糖到冻存管中,然后吸取一段空气到冻存管,之后吸取冷冻保存液到冻存管,再利用自制口吸移卵针吸取胚胎吹入这段冻存液中,之后再利用注射器吸取一段空气到冻存管,最后吸取少量冷冻保存液到冻存管,冻存管头部留有空隙,然后用加热的款头镊子烧灼这段冻存管空隙,使其加热后黏着封口,直接扔到液氮中,长期保存。
2、本实用新型可以用于小鼠、大鼠及其它哺乳动物胚胎冷冻,其结构简单,制备该装置的材料容易获得,操作方便,冷冻胚胎功率高,解决了在户外操作或实验室条件简单情况下冷冻胚胎难以完成的问题。
附图说明
图1是本实用新型的整体结构示意图;
图2为胚胎装入冻存管内模式图。
具体实施方式
具体实施方式一:结合图1说明本实施方式,本实施方式所述一种用于冷冻胚胎的简易操作装置包括注射器1、胶管2和冻存管3,注射器1的乳头端1-1与胶管2的一端连接,胶管2的另一端与冻存管3连接。
具体实施方式二:结合图1说明本实施方式,本实施方式所述冻存管3包括管体3-1和棉签3-2,管体3-1内设有棉签3-2,所述棉签3-2位于管体3-1与胶管2连接处的端部。棉签的作用是防止冷冻胚胎丢掉,防止注射器在吸的过程中,胚胎被吸入到注射器中,导致胚胎丢失。
其它组成以连接关系与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:结合图1说明本实施方式,本实施方式所述管体3-1为0.25ml的麦管。
其它组成及连接关系与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四:结合图2说明本实施方式,本实施方式所述管体3-1内由右至左依次设有庶糖段3-3、第一段空气3-4、包含胚胎的冻存液3-5、第二段空气3-6和冻存液3-7,管体3-1的左侧设有封口端3-8。
其它组成及连接关系与具体实施方式一、二或三相同。
具体实施方式五:结合图2说明本实施方式,本实施方式所述庶糖段3-3的庶糖量为0.5M。
其它组成及连接关系与具体实施方式一、二、三或四相同。
具体实施方式六:结合图1说明本实施方式,本实施方式所述胶管2的一端设有宽头段2-1,注射器1的乳头端1-1插装在宽头段2-1内。
其它组成及连接关系与具体实施方式一、二、三、四或五相同。
具体实施方式七:结合图1说明本实施方式,本实施方式所述注射器1为1ml的注射器。
其它组成及连接关系与具体实施方式一、二、三、四、五或六相同。
实施例:
一、仪器试剂
1.实验仪器:实体显微镜、倒置显微镜、自制冷冻胚胎装置、冲卵器、自制口吸移卵针、冻存管、表面皿、滤纸、钟表镊、眼科剪、酒精棉等
2.药品试剂:超排药物(PMSG和HCG)、操作液PB1液、冷冻保存液(EFS20/40法,用聚蔗糖、蔗糖、BSA、mPBS和乙二醇配置冷冻保护液)、0.5M蔗糖
3.实验动物:性成熟的雄性和雌性小鼠
二、操作步骤:
1.实验动物的准备
超排卵处理:选择性成熟的雌性小鼠,间隔48h依次腹腔内注射各10单位PMSG和hCG;
交配:在上述进行hCG处理的同时,与性成熟的雄性小鼠合笼交配,在第二天,雌性小鼠的阴道口见有阴道栓者判定为交配成功。
2.胚胎采集
(1)输卵管胚胎的采集:将经过超排和交配过的雌性小鼠,在处理hCG后的38-48h,剖腹采取输卵管及与之相连的子宫和卵巢,并置于铺有灭菌滤纸的操作盘内,分离输卵管,并将其导入含有操作液PB1的表面皿中,在实体显微镜下,用带有27-30G注射针的注射器,通过输卵管腹腔口(伞部)或宫管连接部口,利用PB1溶液灌流输卵管。随后在实体显微镜下,观察灌流输卵管的灌流液,查找2-cell期-8-cell时期胚胎,将收集到期胚胎用PB1溶液清洗2~3次后,移到胚胎冻存液中。
(2)子宫内胚胎的采集:上述经过超排和交配过的雌性小鼠,在处理hCG后的96~120h,剖腹采取输卵管及与之相连的子宫和卵巢,并置于铺有灭菌滤纸的操作盘内;用眼科剪等仔细去掉子宫周围的脂肪,在切断输卵管的同时,切断子宫颈部,使完整子宫置于含有操作液PB1的表面皿中;准备含有操作液的1ml一次性注射器,用注射针,将上述处理后的单侧子宫角的宫管连接部的子宫端刺破,然后用注射器由子宫颈端向输卵管端灌流,灌流量约0.5~1.0ml;在实体显微镜下,观察桑椹胚和囊胚,用移卵针转移胚胎在PB1溶液清洗2~3次,最后移到胚胎冻存液中。
3.胚胎冷冻
(1)冷冻步骤:
将上述收集胚胎现放到冻存液EFS20中30秒,然后转移到冻存液EFS40中2分钟,之后转移到冻存管。
冷冻管的填充:利用胚胎冷冻简易装置,即用1mL一次性注射器连接胶管2(可选用一次性静脉输液器带针的一段软管,剪去针头一端可连接0.25ml麦管,另一端带有宽头端可以连接1ml注射器),再连接冻存管3(可选用0.25ml麦管,连接有棉签一头)。利用注射器1吸取一段0.5M蔗糖到冻存管中,然后吸取一段空气到冻存管3,之后吸取冷冻保存液到冻存管3,再利用自制口吸移卵针吸取10-20胚胎注入这段冷冻保护剂中,之后再利用注射器1吸取一段空气到冻存管3,最后吸取少量冷冻保存液到冻存管3,冻存管3头部留有空隙,然后用加热的款头镊子烧灼这段冻存管空隙,使其加热后黏着封口,直接扔到液氮中,长期保存。
以上所述,仅是本实用新型的较佳实施例而已,并非对本实用新型作任何形式上的限制,虽然本实用新型已以较佳实施例揭露如上,然而并非用以限定本实用新型,任何熟悉本专业的技术人员,在不脱离本实用新型技术方案范围内,当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例,但凡是未脱离本实用新型技术方案内容,依据本实用新型的技术实质,在本实用新型的精神和原则之内,对以上实施例所作的任何简单的修改、等同替换与改进等,均仍属于本实用新型技术方案的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,其特征在于:所述一种用于冷冻胚胎的简易操作装置包括注射器(1)、胶管(2)和冻存管(3),注射器(1)的乳头端(1-1)与胶管(2)的一端连接,胶管(2)的另一端与冻存管(3)连接;
所述冻存管(3)包括管体(3-1)和棉签(3-2),管体(3-1)内设有棉签(3-2),所述棉签(3-2)位于管体(3-1)与胶管(2)连接处的端部。
2.根据权利要求1所述的一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,其特征在于:所述管体(3-1)为0.25ml的麦管。
3.根据权利要求1所述一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,其特征在于:所述胶管(2)的一端设有宽头段(2-1),注射器(1)的乳头端(1-1)插装在宽头段(2-1)内。
4.根据权利要求1所述的一种用于冷冻胚胎的简易操作装置,其特征在于:所述注射器(1)为1ml的注射器。
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