CN218036557U - 电泳和电转移系统、用于执行凝胶电泳的系统以及用于执行电转移的系统 - Google Patents
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Abstract
本实用新型提供了电泳和电转移系统,所述系统包括一个或多个腔室,所述一个或多个腔室能够可拆卸地且可互换地接纳电泳盒或电转移盒,并且提供用于生物分子的电泳和电转移两者的电接口。本实用新型还提供了用于执行凝胶电泳的系统以及用于执行电转移的系统。
Description
技术领域
本实用新型一般涉及可执行对生物分子的电泳和电转移两者的系统。本实用新型进一步涉及电泳系统、电泳装置、电转移系统和电转移装置。还描述了使用这些系统和装置进行电泳和电转移的方法。
背景技术
电泳是一种常用的根据诸如核酸、DNA、RNA、多肽和蛋白质等生物分子(biological molecule/biomolecule)的大小和电荷进行分离的方法。在凝胶电泳中,生物分子可通过电场分离成条带,电场使分子迁移通过过滤基质。典型的过滤基质包括凝胶。电泳盒包括过滤基质(诸如凝胶)板条,该板条夹在两个玻璃板或塑料板之间。凝胶具有开放的分子网络结构,其限定了用包含盐的导电缓冲溶液饱和的孔隙。这些孔足够大,使得生物分子能够响应于电场而迁移通过凝胶。对于电泳,可使用若干类型的凝胶,诸如但不限于聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和淀粉凝胶。
在电泳期间,凝胶(在预铸或自铸电泳盒中)通常装载含有生物分子和示踪染料的样品,并被放置在具有阴极和阳极的腔室中,阴极和阳极与缓冲溶液接触,使得当连接到电源时,能够跨凝胶形成电场。由此生成的电场被跨凝胶施加,并由一端的负电荷和另一端的正电荷组成,导致样品生物分子和示踪染料彼此分离并向凝胶底部迁移。在相关生物分子到达凝胶末端之前,电泳停止。
电泳分离的生物分子通常从分离凝胶转移到另一种材料上,以便对生物分子进行另外的分析,诸如但不限于免疫学表征、化学反应、定量等。电转印或电转移是本领域已知的用于将解析的或分离的生物分子从凝胶转移到另一种材料上的方法。
在电转移中,在生物分子电泳分离后,将含有分离的生物分子的电泳凝胶放置成与相对薄的材料或载体接触。该材料通常是多孔材料,诸如但不限于基于硝化纤维素的膜、基于PVDF的膜、活化纸、活化尼龙膜等。将缓冲液加入到电转移装置中,并使电流以大体垂直于转印膜表面的方向通过夹在中间的凝胶和印迹膜。这导致部分或大部分生物分子从凝胶电泳转移到多孔材料。
现有的电泳或电转移的系统、装置和方法要求每个程序有单独的系统和装置。例如,对于电泳而言,凝胶盒、保持凝胶盒和电泳缓冲液的凝胶罐以及支持电连接的电极是所需的多个独立装备中的一些。对于电转移,需要电转移叠堆件、电极、容纳叠堆件和电转移缓冲液的容器以及电连接。每个程序都有多个耗时的步骤,需要不同的装备组。此外,现有的电泳系统经常存在使用了大量缓冲液的问题,诸如缓冲液溢流和/或缓冲液从阳极缓冲液贮存器和阴极缓冲液贮存器溢出和/或泄漏。本领域的湿式电转移系统也存在类似的问题,包括缓冲液溢出、和/或组装和运行期间的缓冲液泄漏、叠堆件组装期间的大量缓冲液的使用和浪费等。湿式电转移系统也经常生成大量的危险废物,诸如通常含有甲醇或其他危险物质的废物转移缓冲液。本领域需要更好的凝胶电泳和电转移装置、系统和方法。
实用新型内容
本文描述的系统、装置和方法解决了本领域中的几个问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供可用于凝胶电泳和电转移两者的单个系统来解决本领域的问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供无泄漏凝胶电泳和/或电转移装置和系统来解决本领域的问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供用于电泳和/或电转移的增加的吞吐量、较低的缓冲体积要求和液体危险废物的减少的体积来解决本领域的问题。
在一个实施例中,一种用于凝胶电泳和电转移的系统包括至少一个腔室、一个隔室、一个容器或一个部件,其可以可拆卸地和可互换地接纳电泳盒或电转移盒,并且可为生物分子的电泳和电转移两者提供电接口。
在一个实施例中,该系统具有至少两个腔室以允许在两个或更多个凝胶或转移膜上并行处理生物分子的电泳和/或电转移。
在一些实施例中,本实用新型的系统可包括两个或更多个腔室,以使得多个凝胶/基质/膜/材料能够同时进行电泳分离和/或同时进行电转移。
虽然本实用新型中的大多数实施例以两个腔室的非限制性示例进行描述,但本教导可扩展到一个腔室,或者扩展到多于两个腔室,该两个腔室与彼此相邻地放置以增加吞吐量。在一些实施例中,本实用新型的系统中的至少两个腔室可背靠背、或并排、或彼此相邻布置,或可串联布置,或可彼此相邻,或者彼此相邻放置,或可叠堆,或者可一个在另一个上方竖直叠堆,或对角地接合,或一个腔室在另一腔室的上方,另一腔室在另一腔室后面竖直叠堆和交错,和/或一个或两个腔室以一定角度相对彼此倾斜。
一些实施例描述了可放置到本实用新型的系统中的凝胶电泳盒和夹持系统,其中该系统可执行凝胶电泳和电转移。一些实施例描述了可放置到本实用新型的系统中的各种电转移盒,其中该系统可执行凝胶电泳和电转移两者。
本实用新型的系统、装置、盒和方法有利地产生前述一项或多项:包括:一种用于电泳和电转移的系统;同时在两种或更多种凝胶或转移膜中进行高通量电泳和/或生物分子电转移的能力;与现有的用于电泳和电转移的系统和装置相比,设备或部件的数量的减少、成本的降低、配件的减少、所需装备的占地面积的减少、系统和装置的储存空间的减少、缓冲区溢出的减少、泄漏的减少、缓冲区溢出的减少或不溢出、缓冲区使用量的减少以及液体危险废物的减少。与一些现有的用于电泳或电转移的装置和系统相比,本实用新型的用于电泳和电转移的系统和装置通过不需要使用冷却缓冲液或冷冻冰袋来降低使用期间的温度而减少了准备工作。在一些实施例中,本实用新型的装置和系统使用较低的电压和功率。
在一个实施例中,本实用新型描述了一种系统,该系统包括至少一个腔室或一个隔室,该腔室或隔室构造成接纳电泳盒或电转移盒。该系统进一步包括电极和电连接件,该电极和电连接件可连接到电源以提供与腔室的电连接性,用于促进电泳盒或放置在腔室内的电转移盒中的电泳或电转移。
在一些实施例中,本实用新型的系统包括至少两个腔室,其中每个腔室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒、第一电极和第二电极。
在一些实施例中,本实用新型的系统包括:至少两个腔室,每个室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒;第一电极;以及第二电极,其中电极具有电接口,该电接口可连接到外部电源或内部电源。在一些实施例中,第一电极和第二电极在每个腔室中具有接口,使得每个腔室具有阳极和阴极。
在一些实施例中,第一电极跨越两个腔室或具有跨越两个腔室并且构造成电接触位于电转移盒上的电接口的接口。在一些实施例中,第一电极具有进入每个腔室的电延伸部,该电延伸部在电泳期间用作阳极。
在一些实施例中,第二电极具有构造成接触位于电转移盒上的第二电极接口的延伸部。在一些实施例中,第二电极跨越两个腔室或具有跨越两个腔室并且构造成电接触位于电转移盒上的电接口的接口。在一些实施例中,第二电极具有在电泳期间用作每个腔室中的阴极的延伸部。
在一些实施例中,第一电极为阳极并且第二电极为阴极。
在一些实施例中,第一电极跨越两个腔室或分成位于本实用新型的系统的每个腔室中的部件或电极接口。在一些实施例中,第二电极跨越两个腔室或分成位于本实用新型的系统的每个腔室中的部件或电极接口。
在本实用新型的系统的一些实施例中,第一电极(包括其接口和部件)连接到共同的第一电节点并且第二电极(包括其接口和部件)连接到共同的第二电极节点。在一些实施例中,第一电极节点和第二电极节点位于腔室或系统的构造成与电源电连接的部分上。
在一些实施例中,第一电极节点和第二电极节点位于腔室或系统的与构造成覆盖系统的封盖接触的部分上。
在一些实施例中,本实用新型的系统可另外包括封盖,该封盖构造成覆盖至少一个或多个腔室或隔室。在一个实施例中,本实用新型的系统的封盖包括:电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源;以及一个或多个电接触件,该一个或多个电接触件构造成在封盖放置在装置上时,与腔室电极电连接,以使腔室或隔室中的电路完整,从而促进电泳和/或电转移。至少一个腔室中的电极还构造成与本实用新型的电转移盒的电接口电连接。
在一些实施例中,系统的封盖可包括电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源,该电源包括一个或多个电缆和/或可插入电源的一个或多个插头。外部电源通常与本实用新型的系统一起使用。然而,本实用新型的系统也可包括内部电源。
在一些实施例中,该系统的封盖包括机械特征部,该机械特征部与腔室的顶部上的互补机械特征部相互作用,使得封盖上的电接触件与第一电节点和第二电节点以一定取向连接,该取向在系统使用时防止电极发生反转。在一些实施例中,封盖包括机械特征部,诸如可与用户手指接合以允许容易地移除封盖的凹槽。
在一些实施例中,该系统的封盖包括颜色编码的特征部,该颜色编码的特征部可被操作为以允许封盖电接触件与相应的第一电节点和第二电节点连接的取向覆盖腔室,该取向在使用期间防止电极发生反转。
在一些实施例中,系统的封盖可包括至少一个特征诸如一个或多个电缆钩,该一个或多个电缆钩允许电缆卷绕封盖并在贮存期间保持牢固。在一些实施例中,系统的封盖具有一个或多个排气口,该一个或多个排气口允许在电泳或电转移期间排出缓冲蒸汽。在一些实施例中,封盖由透明或半透明材料制成,这允许在使用期间具有可见性以查看设置是否正确并查看性能。
在一些实施例中,当封盖与电泳系统一起使用时,仅当凸轮手柄(用于将电泳凝胶盒固定到系统)锁定时,封盖下侧的机械特征部(诸如脊或凹槽)允许封盖配合在腔室上。
在一个实施例中,本实用新型描述了一种系统,该系统包括:至少两个腔室,每个腔室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒;三个电极;以及封盖,该封盖构造成覆盖腔室,该封盖包括电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源;以及一个或多个电接触件,该一个或多个电接触件构造成在封盖放置在两个腔室上时与电极电连接,以针对两个腔室中的每一个,使电路完整。在系统的一些实施例中,三个电极包括跨越两个腔室的第一电极和位于每个腔室中的第二电极。在一些实施例中,封盖包括至少两个电接触件,该至少两个电接触件构造成在封盖放置在两个腔室上时,与第一电极和第二电极电连接,以针对两个腔室中的每一个,使电路完整。
在一些实施例中,本实用新型的系统的至少两个腔室通过它们之间的至少一个共同的表面分开。腔室之间的共同的表面的非限制性示例包括两个腔室的至少一部分之间的壁、两个腔室的至少一部分之间的隔板、公共连接器等。在一些实施例中,至少两个腔室被两个腔室之间的空间分开。
在一些实施例中,至少两个腔室被共同的表面和至少两个腔室之间的空间分开。
每个腔室至少具有第一内表面和第二内表面。可存在另外的内表面。
在一些实施例中,本实用新型的系统可进一步包括垫圈,该垫圈与腔室的内表面中的一个内表面的部分相邻或定位于该部分上。在一些实施例中,本实用新型的系统可进一步包括垫圈,该垫圈与第一内表面的部分相邻或定位于该部分上。通常,使用三面垫圈,其在非限制性示例中可为C形垫圈或U形垫圈。替代地,也可使用双面垫圈或四面垫圈。
在本实用新型的系统或其至少一个腔室用于电泳的实施例中,可将一个或两个电泳盒放置到系统的腔室或隔室中。在一些实施例中,在本实用新型的系统中使用的电泳盒包括两个平行板,在该两个板之间封闭有凝胶。本实用新型的系统的每个腔室或隔室构造成独立地接纳电泳盒并且被进一步构造成独立地接纳可被操作为将电泳盒夹持在一个或多个腔室/隔室中的夹持或固定机构。在一些实施例中,本实用新型的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到腔室/隔室的内表面。在一些实施例中,本实用新型的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到密封机构(诸如垫圈),或腔室/隔间内部的夹持或固定机构。在一些实施例中,垫圈放置在本实用新型的系统的腔室/隔间的内表面的至少一部分上。通常,使用三面垫圈,其在非限制性示例中可为C形垫圈或U形垫圈。替代地,也可使用双面垫圈或四面垫圈。
在一些实施例中,本实用新型提供了一种用于执行凝胶电泳的系统,该系统包括:基部,该基部包括至少两个腔室,每个腔室构造成独立地接纳电泳盒,该电泳盒包括封闭凝胶的两个平行板,每个腔室构造成独立地接纳用于将电泳盒固定到每个腔室的表面的夹具;单个第一电极,该单个第一电极跨越两个腔室,每个腔室具有连接在共同的电节点处的单独的第二电极;可拆卸的封盖,该可拆卸的封盖提供与电源的电连接;以及封盖,该封盖具有电连接器,以在放置在基部上方时,使腔室电极之间的电路完整。在一个实施例中,本实用新型的用于电泳的系统包括一个电泳盒。在一个实施例中,本实用新型的用于电泳的系统包括两个电泳盒。
在一些实施例中,腔室的第一电极进一步包括导线,该导线沿着每个腔室的底部延伸,以使电流能够流过腔室以进行电泳。在一些实施例中,当电泳盒被放置在一个或两个腔室中时,沿着每个室的底部延伸的线在电泳期间用作阳极。导线由任何导电材料制成,诸如但不限于铂、金、银、铜、钯、钢、不锈钢、铱、导电塑料或任何涂覆的导电材料。
本实用新型的实施例涉及一种用于将电泳盒固定到表面的夹具。在一个实施例中,本实用新型的夹具包括:凸轮板,该凸轮板具有平坦表面和两个突出脊,两个突出脊和两个突出边缘两者均位于平坦表面的第一侧上,凸轮板的突出脊构造成与电泳盒的第一板的边缘相邻地放置并与该边缘接触;两个可独立移动的凸轮手柄,该凸轮手柄可被操作为朝向凸轮板向前移动或远离凸轮板向后移动,两个凸轮手柄经由位于凸轮板上的栓附接到凸轮板,其中将凸轮手柄朝向凸轮板向前移动将电泳盒固定到表面,并且其中将凸轮手柄远离凸轮板向后移动将电泳盒从表面释放。垂直于面向电泳盒的凸轮板的平坦表面定位的两个突出边缘邻近凸轮臂定位并且为电泳盒的放置提供引导。任选地,凸轮板还可具有位于凸轮板的平坦表面的第二侧上的两个附加突起,该两个附加突起在凸轮板的边缘处在垂直于背向电泳盒的凸轮板的平坦表面的平面中突出。
在另一实施例中,本实用新型的夹具包括:凸轮板,该凸轮板具有平坦表面和两个突出脊,凸轮板的突出脊构造成与电泳盒的第一板的边缘相邻地放置并与第一板的边缘接触;两个可独立移动的凸轮手柄,该凸轮手柄可被操作为朝向凸轮板向前移动或远离凸轮板向后移动,两个凸轮手柄经由位于凸轮板上的栓附接到凸轮板,其中将凸轮手柄朝向凸轮板向前移动将电泳盒固定到表面,并且其中将凸轮手柄远离凸轮板向后移动将电泳盒从表面释放。
在一些实施例中,本实用新型的夹具的凸轮手柄可在0度到180度的运动范围内移动。在一些实施例中,本实用新型的夹具的凸轮手柄可在0 度到45度的运动范围内移动。
在一些实施例中,本实用新型的夹具在凸轮板的平坦表面的底部侧面上包括多个凸块。在一些实施例中,本实用新型的夹具在面向凝胶盒的凸轮板的平坦表面的底部侧面上包括多个凸块。凸块的数量可变化。在一些非限制性示例性实施例中,1个凸块、2个凸块、3个凸块、4个凸块、5 个凸块、6个凸块、7个凸块、8个凸块、9个凸块、10个凸块等位于面向凝胶盒的凸轮板的平坦表面的底部侧面上。凸块设计的形状和尺寸可变化。在一些实施例中,凸块构造成在底部在凝胶盒板的所有部分上分配压力以防止在电泳期间和/或在凝胶盒被固定用于电泳时凝胶盒的翘曲或弯曲。在一些实施例中,凸块允许在盒底部的缓冲离子的自由循环。
在一些实施例中,本实用新型的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是电泳槽的一部分或部分上的表面。在一些实施例中,本实用新型的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是本实用新型的系统的一部分或部分上的可执行电泳和/或电转移两者的表面。
在一些实施例中,本实用新型的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是位于电泳槽的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈,或位于可执行电泳和/或电转移两者的本实用新型的系统的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈。
本实用新型的夹持机构或本实用新型的夹具在系统的腔室/隔室中在电泳盒和垫圈之间产生或形成不透液体的密封。在一些实施例中,将电泳盒夹持到本实用新型的系统的腔室或隔室中,导致在腔室或隔室中形成两个流体地隔开的子腔室/子隔室。在一些实施例中,在腔室/隔室的第一内表面的一部分、垫圈的一部分和面向电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的第一内表面的电泳盒的板之间形成第一子腔室/子隔室。在一些实施例中,形成第一子腔室的垫圈的一部分包括垫圈的三个侧面,并且可包括垫圈的左侧面和右侧面以及底部侧面。在一些实施例中,在凝胶盒的左侧面和右侧面、面向第二内表面的凝胶盒的侧面和电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的其余部分之间形成第二子腔室/子隔室。
在系统使用期间如此形成的子腔室或子隔室可填充有用于电泳的缓冲液并且可用作第一缓冲液贮存器和第二缓冲液贮存器。
在一些实施例中,在腔室/隔室的第一内表面的一部分、垫圈的一部分和面向电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的第一内表面的电泳盒的板之间形成第一缓冲液贮存器。在一些实施例中,在凝胶盒的左侧面和右侧面、面向第二内表面的凝胶盒板/侧面和电泳盒和夹具被放置到其中的腔室的其余部分之间形成第二缓冲液贮存器。
本实用新型的系统不限于任何尺寸,并且可放大或缩小以容纳任何尺寸的电泳盒或电转移盒。例如,可使用的电泳盒可包括一个或多个微型凝胶盒、中型凝胶盒、大型凝胶盒。在其他非限制性示例中,本实用新型的系统的每个腔室可容纳约30ml至5升的电泳缓冲液体积。
在本实用新型的系统的一些实施例中,系统的一个或两个腔室具有电泳盒和夹具。在本实用新型的系统的一些实施例中,系统的一个或两个腔室具有电转移盒。
在本实用新型的系统的一些实施例中,系统的一个腔室具有电泳盒和夹具,并且系统的另一腔室具有电转移盒。
本实用新型的实施例涉及电转移盒。在一个实施例中,本实用新型的电转移盒包括:两个板(或壳),该两个板可通过至少一个接合机构可逆地或永久地接合,以允许两个板在打开位置和闭合位置之间移动;锁定机构,该锁定机构用于将两个板锁定在闭合位置;密封机构,该密封机构可被操作为将两个板密封在闭合位置,以在至少三个侧面上形成不透液体的密封;第二板,该第二板构造成在其内部侧面接纳转移叠堆件的部件,并且第一板和第二板的外部侧面包括至少一个电接口,该至少一个电接口各自连接到位于每个板的内侧上的电极。
在其中在电转移盒的三个侧面上形成不透液体的密封的实施例中,三个侧面是盒的底部侧面、左侧面和右侧面。在一些实施例中,在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。
在一些实施例中,电转移盒的接合机构包括以下一者或多者:铰链;多个铰链;断开连接的铰链;夹具;一个或多个钩;一个或多个夹具;两个板(或壳)上的机械部件,这些机械部件可滑动和联锁,从而将两个板粘合、胶粘、粘结或焊接在一起;连杆设计,两个板用柔性材料连接;或外部元件,该外部元件用于接合两个板。在一些实施例中,接合机构是可逆接合机构或永久接合机构。永久接合机构允许两板作为一个部件保持在一起。这对于用户来说是有利的,因为他们提供较少的部件和/或允许更轻松地闭合板,因为在闭合之前不需要对齐板。可逆接合机构允许具有两个单独壳。
在一些实施例中,位于本实用新型的电转移盒的两个板内部的电极是嵌入每个板的内表面中或放置在每个板的内表面上的板电极。在替代实施例中,位于电转移盒的两个板内部的电极可以是线电极、线网电极或棒电极。这些电极可由导电材料制成,诸如但不限于钢、不锈钢、铜、铂、钯、铱、钛、导电涂层材料、导电塑料等。
在一些实施例中,板电极的外部电接口可以是弹簧、电节点、支架、引脚、插头、允许电接触的任何设计,诸如电极的电镀接口。外部电接口构造成与电极或电极延伸部物理地或电地连接,该电极或电极延伸部具有与电源的电连接。电极或电极延伸部可包含在本实用新型的可执行电泳和/ 或电转移两者的系统中。电极或电极延伸部可包含在任何可执行电转移的系统中。
在一个实施例中,在本实用新型的系统中,跨越两个腔室的第一电极构造成接触可放置到一个或多个腔室中的电转移盒上的第一电极接口。在一些实施例中,电转移盒的第一电极接口为阳极接口。
在一些实施例中,本实用新型的腔室/隔室的第二电极具有延伸部,这些延伸部构造成接触可放置到一个或多个腔室中的电转移盒上的第二电极接口。在一些实施例中,电转移盒的第二电极接口为阴极接口。
本实用新型的系统、盒、装置和其他部件中的电极接口的非限制性示例可以是弹簧、节点、适配器、插头、连接器、插头和插脚。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的锁定机构包括滑块。在一些实施例中,滑块包括:带,该带卷绕第一板的外部侧面的宽度的部分;带的侧延伸部,该侧延伸部进一步卷绕第一板的外部侧面的深度的部分;以及元件,该元件可被操作为与第二板的外部侧面上的部分可逆地啮合以在啮合时在第一板和第二板之间形成锁定。在一些实施例中,当两个板闭合时,本实用新型的电转移盒的滑块与第二板上的相应元件对齐,这些元件可被操作为滑动以形成锁定。
在一些实施例中,锁定机构可以是滑块,其可经由一个或多个安装特征部附接到板中的一个。在一些实施例中,滑块可具有配合安装特征部,该配合安装特征部是可被操作的并且将滑块永久地或可逆地附接到板。在一些实施例中,锁定机构可以是位于一个板上的滑块,其中该滑块上的机械配合特征部可与位于另一板上的相应机械特征部配合。匹配特征部通常位于每个板的两侧上。
在一些实施例中,锁定机构可以是一个板上的夹具和位于另一板上的夹具闭合件。夹持机构通常经由安装特征附接到一个板。夹具通常具有配合安装特征部,这些配合安装特征部允许夹具附接到另一板。可使用若干安装特征部,例如,栓孔机构等。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的密封机构包括至少一个滑块。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块(如上所述)在朝向板的顶端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块在朝向板底端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例实施例中,当两个板闭合时,位于闭合板的侧面中的一个侧面上的滑块向上或向下移动以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一些实施例中,可在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。不透液体的密封(或液密的密封)的形成在电转移盒内部产生或形成液体贮存器。在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的密封机构可另外包括垫圈,该垫圈被放置在电转移盒的两个板中的一个板上。
在一些实施例中,唇缘或突起可位于第一板或第二板上。唇缘或开口允许将液体轻松分配到电转移盒中或从电转移盒分配出来。唇缘或突起还可为盒提供附加的结构支撑。在一些实施例中,第二板在顶部侧面上具有唇缘或突起或开口,该唇缘或突起或开口可被操作为在其他三个侧面上密封电转移盒之后将液体(诸如转移缓冲液)分配到电转移盒中,或在电转移完成之后将液体从盒中倒出。电转移盒可在液体贮存器内部具有可视标记,诸如填充线或其他指示,以指示用户要填充的液体(诸如电转移缓冲液)的量。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒进一步包括提供位于第一板或第二板的外侧或内侧的支撑结构的元件。在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的支撑结构可位于盒的外部。在非限制性示例中,支撑结构可减少或防止第一板的翘曲或弯曲。在非限制性示例性实施例中,支撑结构可包括一个或多个肋、一个或多个脊、一个或多个凹槽、一个或多个突出结构、凹表面凸结构、可在外部添加或与位于电转移系统中的为电转移盒的电极板提供支撑和/或刚性的板、凸块、插入件、支撑件组合的一个或多个加强元件。在一些实施例中,一个或多个支撑结构允许两个电极板彼此平行,这允许对于在电转移期间生物分子的有效转移具有均匀的电场。
在一些实施例中,支撑结构允许第二板以一定角度抵靠。在一些实施例中,由支撑结构引起的角度使得组装和/或查看转移叠堆件具有人体工程学优势。在一些实施例中,支撑结构的角度允许第二板含有一定体积的转移缓冲液,这有助于使转移叠堆件在整个组装过程中保持含水。在一些实施例中,在转移叠堆件组装在第二板上期间,支撑结构的角度减少了缓冲液溢出。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒构造成放置在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统中。在一些实施例中,本实用新型的电转移盒构造成放置在可执行电转移的任何系统中。在一些实施例中,电转移盒在被锁定和密封之后位于电转移系统中。
在非限制性示例中,可使用的电转移盒可包括可用于将生物分子从一个或多个微型凝胶盒、一个或多个中型凝胶盒、一个或多个大型凝胶盒同时转移到一个或多个电转移膜的盒。
在一些实施例中,在使用中,本实用新型的封闭和密封的电转移盒的液体贮存器填充有缓冲液并放置在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统的腔室中,并且该系统的封盖被放置在腔室上并连接到电源以使电转移盒系统的电路完整。在一些实施例中,在使用中,在电转移之前,缓冲液不填充在液体贮存器中。
在一些实施例中,本实用新型提供了一种用于执行电转移的系统,该系统包括:至少两个腔室;单个第一电极,该单个第一电极跨越基部的两个腔室,连接到位于基部顶部侧面的第一电节点;第二电极,该第二电极位于每个腔室中,两个第二电极连接在位于基部顶部侧面的共同的第二电节点处,每个腔室构造成独立地接纳电转移盒,该电转移盒包括:两个板,该两个板由接合机构接合,该接合机构构造成允许两个板从打开位置和闭合位置移动;锁定机构,该锁定机构可被操作为锁定两个板;以及密封机构,该密封机构可被操作为在电转移盒的至少三个侧面上实现不透液体的密封;第二板,该第二板构造成在其内部侧面接纳转移叠堆件的部件,并且其中第一板和第二板的外部侧面各自包括至少一个电连接件,该至少一个电连接件连接到位于每个板内侧的电极,第一板和第二板上的电连接件与腔室的第一电极和第二电极电接触;以及可拆卸的封盖,该可拆卸的封盖覆盖腔室,该封盖提供与电源的电连接,并且封盖具有电连接器,当电转移盒被放置在基部中并且封盖覆盖基部时,电连接器与电转移盒的电连接件电连接以使电路完整。在一些实施例中,锁定机构包括滑块,该滑块可被操作为将两个板锁定(或夹持或偏置)在闭合位置。在一些实施例中,密封机构包括滑块,该滑块可将两个板密封在闭合位置以在至少三个侧面形成不透液体的密封。在一些实施例中,密封机构进一步包括位于两个板中的至少一个的至少一个垫圈。在一个实施例中,本实用新型的用于电转移的系统包括一个电转移盒。在一个实施例中,本实用新型的用于电转移的系统包括两个电转移盒。
本实用新型的实施例涉及使用本文所述的装置和系统执行凝胶电泳或电转移的方法。
在一些实施例中,一种执行凝胶电泳的方法包括:获得具有凝胶的电泳盒;从电泳盒中取出凝胶梳;任选地用水或运行缓冲液冲洗孔;将电泳盒放置到本实用新型的系统的至少一个腔室中;将本实用新型的夹具放置到腔室中并将凝胶盒夹持到腔室的表面的一部分上;将电泳缓冲液倒入第一缓冲液贮存器中;将电泳缓冲液倒入通第二缓冲液贮存器中;将样品和对照品装载到孔中;将系统的电节点/接口/连接件(其电连接到腔室的电极)连接到电源;选择供电单元上的电压和时间;对样品和对照品执行电泳。
在该方法的一些实施例中,凝胶盒与存在于至少一个腔室的壁上的垫圈相邻地放置。在一些实施例中,夹持步骤包括将本实用新型的夹具的凸轮手柄朝向凝胶盒移动以将它们锁定在适当位置。
在一些实施例中,其中本实用新型的系统具有封盖,将系统中的电节点/接口/连接件连接到电源的步骤包括:将封盖放置到系统上,使得封盖电连接件以正确的极性连接到系统电极接口/节点/连接件;以及将封盖中的插头连接到电源。
本实用新型还提供电转移盒和电转移系统。在一些实施例中,生物分子从凝胶到转移膜上的电转移所使用的凝胶是在任何电泳系统中运行的凝胶。在其他实施例中,本实用新型的电转移方法所使用的凝胶可以是在电泳系统中运行的凝胶,如上所述。
在一些实施例中,首先从电泳盒中移除已在其上执行电泳以解析生物分子的凝胶。这通常涉及用凝胶刀撬开或破开电泳盒并移除凝胶,然后再组装转移叠堆件。转移叠堆件通常包括海绵和一个或多个滤纸层(和/或浸泡在电转移缓冲液中的其他多孔/凝胶状材料)、之后是通过电泳解析的生物分子被放置到其上的凝胶、之后是转移膜(通常是硝化纤维素、PVDF 或任何多孔材料)、浸泡在电转移缓冲液中的一个或多个滤纸层和另一海绵的另一叠堆件。该叠堆可组装到电转移盒的一个板上。通常,具有阴极的电转移盒中的板是叠堆组装在其顶部的板。在本实用新型的一些实施例中,本实用新型的托盘被设计成将电转移盒置于打开位置并组装转移叠堆件。本实用新型的托盘被设计成容纳过量的缓冲液,并避免在实验室工作台和桌子上溢出和弄脏,并提供容器以在转移前将耗材浸泡在缓冲液中。
在一个实施例中,一种执行生物分子的电转移的方法包括:获得生物分子通过电泳分离到其上的凝胶;将转移叠堆件组装到本实用新型的电转移盒的第二板上,包括将转印材料放置在凝胶顶部以及将滤纸和海绵进一步放置在转印材料和凝胶叠堆件的上方和下方;将电转移盒的第一板闭合到第二板上);通过电转移盒上的锁定和密封机构在至少三个侧面上锁定和密封电转移盒;将电转移盒放置到本实用新型的系统的至少一个腔室中,该系统可执行电转移和电泳;将系统上的电连接件/节点/接口连接到电源;在电源上选择转移电压和运行时间;执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。
在一个实施例中,锁定和密封是通过在电转移盒上滑动滑块以锁定和密封电转移盒来实现的。在一个实施例中,锁定和密封是通过将夹具夹持在电转移盒上以锁定和密封电转移盒来实现的。在一个实施例中,密封是通过位于电转移盒的两个板中的至少一个板上的垫圈来实现的。垫圈可为三面垫圈或四面垫圈。
在一些实施例中,密封形成不透液体的密封。在一些实施例中,在电转移盒的至少三个侧面上形成不透液体的密封。在一个实施例中,将电转移盒放置到本实用新型的系统的腔室中包括:使电转移盒直立,使得接合侧(铰链/钩侧)位于系统的底部,而未密封的第四侧位于顶部。在此阶段,该方法可包括任选地将电转移缓冲液倒入电转移盒顶部的开口中。在一些实施例中,不需要将附加的电转移缓冲液倒入电转移盒中,因为转移叠堆件具有足够的缓冲液。在其中本实用新型的系统具有封盖的实施例中,将系统的电连接件连接到电源的步骤包括:将封盖放置到腔室上,使得封盖电连接件与腔室电极连接件连接;以及将封盖上的电连接件连接到电源。
在一些实施例中,在电转移盒的所有侧面上形成不透液体的密封。
在一些实施例中,通过将打开的电转移盒放置到托盘中来完成转移叠堆件在第二板中的组装,以避免缓冲液溢出在表面上。在一些实施例中,叠堆件组装包括:将滤纸和海绵浸泡在转移缓冲液中;将转移缓冲液倒入第一板中;将海绵层、之后将滤纸放置在第二板上;将凝胶以孔朝向电转移盒的底部侧面取向,并将该凝胶放置在滤纸上方;将转印材料(诸如但不限于膜、PVDF膜、尼龙膜或生物分子可被转移到其上的任何多孔材料等)放置在凝胶顶部;使用辊来去除叠堆的每一层的任何气泡;将另一张滤纸放置在转印材料(膜)的顶部;将另一海绵放置在滤纸的顶部。
在一些实施例中,本实用新型提供了一种用于同时执行电转移和电泳两者的方法,该方法包括:将电泳盒利用夹具固定在本实用新型的系统的第一腔室中;将待电泳的包含生物分子的样品装载到电泳盒中;将具有转移叠堆件的电转移盒放置到本实用新型的系统的第二腔室中,该转移叠堆件具有带生物分子的凝胶和生物分子期望电转移到其上的转印材料;使用电源装置选择电压和任选地选择期望电压运行的时间;在电泳盒中执行电泳并执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。在一些实施例中,由于使用公共电压,电泳和电转移在不同时间进行。
本传授内容的这些实施例和其他特征部将从以下部分中的详细描述变得更清楚。
附图说明
参考下面的一个或多个附图可更好地理解本实用新型的一个或多个实施例。本领域的技术人员将理解,下文描述的附图仅用于举例说明的目的。所述附图并不旨在以任何方式限制本教导内容的范围。
图1是根据一个实施例的本实用新型的具有两个腔室的示例性系统的透视图的示意图,该示例性系统可用于执行电泳和/或电转移;
图2是根据一个实施例的图1的分解图,其示出了部件层;
图3是根据一个实施例的图1和图2所示的本实用新型的系统的侧视图;
图4是根据一个实施例的图1和图2所示的本实用新型的系统的前透视图,该系统具有放置在其上的封盖;
图5A是根据一个实施例的本实用新型的系统的封盖的前透视图;
图5B是根据一个实施例的本实用新型的系统的封盖的顶视图;
图5C是根据一个实施例的本实用新型的系统的封盖的底视图;
图6A和图6B是根据一个实施例的本实用新型的系统的封盖的各部分的详细视图,在图6A中描绘了示例性电缆保持器和弹簧夹,并且在图 6B中描绘了电缆的电极节点和电连接器的一部分;
图7A、图7B、图7C和图7D描绘了用于将电泳盒夹持到本实用新型的系统的腔室中的示例性夹具。根据一个实施例,图7A描绘了夹具的前透视图,图7B描绘了夹具的前视图,图7C描绘了夹具的后视图,并且图 7D描绘了夹具的侧视图,其描绘了定位到夹具的一侧的凸轮臂;
图8A描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电泳系统的前透视图,其示出了放置在本实用新型的系统的两个腔室内部的电泳凝胶盒和夹具,其中夹具处于解锁位置;
图8B描绘了根据一个实施例的图8A的电泳系统的前透视图,其示出了放置在本实用新型的系统的两个腔室内部的电泳凝胶盒和夹具,其中夹具处于锁定位置时;
图8C描绘了根据一个实施例的图8B的电泳系统的前视图,其示出了放置在本实用新型的系统的两个腔室内部的电泳凝胶盒和夹具,其中夹具处于锁定位置;
图9A描绘了根据一个实施例的图8B的具有上面示出的封盖的前透视图,该封盖可被放置在系统上;
图9B描绘了根据一个实施例的其中封盖放置在系统上的图9A的前透视图;
图10A描绘了根据一个实施例的处于打开位置的示例性电转移盒的内侧的前透视图;
图10B描绘了根据一个实施例的处于打开位置的图10A的电转移盒的内侧的前视图;
图10C描绘了根据一个实施例的处于打开位置的图10B的电转移盒的背侧的后视图;
图10D描绘了根据一个实施例的处于闭合和解锁位置的图10A的电转移盒的前透视图;
图10E描绘了根据一个实施例的处于闭合和解锁位置的图10D的电转移盒的前视图;
图10F描绘了根据一个实施例的处于闭合和解锁位置的图10E的电转移盒的后视图;
图10G描绘了根据一个实施例的处于闭合和锁定位置的图10A的系统的电转移盒的前透视图;
图10H描绘了根据一个实施例的处于闭合和锁定位置的图10G的电转移盒的前视图;
图10I描绘了根据一个实施例的处于闭合和锁定位置的图10H的电转移盒的后视图;
图11A、图11B和图11C描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒具有夹具闭合和锁定机构,其中图11A描绘了打开位置,图11B描绘了闭合位置,并且图11C描绘了锁定位置;
图12A、图12B、图12C、图12D和图12E描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒具有铰链并且具有两个板,在其中一个板上具有用于闭合和锁定的滑块,其中图12A描绘了具有转移叠堆件组件的分解图的打开位置,图12B描绘了具有组装好的叠堆件的打开位置;图12C描绘了半开位置,图12D描绘了滑块可向下滑动以锁定盒的闭合位置,并且图12E描绘了滑块向下滑动的锁定位置;
图13A、图13B和图13C描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒不具有铰链但具有两个板,其中滑块锁附接到一个板,其中图13A描绘了打开位置,图13B描绘了滑块在顶部的闭合但解锁位置,并且图13C描绘了滑块向下滑动的锁定位置;
图14A、图14B、图14C、图14D和图14E描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒不具有铰链但具有两个单独板,在其中一个板上具有用于闭合和锁定的滑块,其中图14A描绘了具有转移叠堆件组件的分解图的打开位置,图14B描绘了具有组装好的叠堆件的打开位置;图14C描绘了具有锁定机构细节的半开位置,图14D描绘了滑块可向上滑动以锁定盒的闭合位置,并且图14E描绘了闭合和解锁位置以及关于联锁机构的附加细节;
图15A、图15B、图15C和图15D描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒具有至少一个铰链并且在这些板中的一个上具有用于闭合和锁定的至少一个滑块,其中图15A描绘了打开位置的内侧的前视图,图15B描绘了打开位置的外部的后视图;图15C描绘了滑块可向下滑动以锁定盒的闭合但解锁位置,并且图15D描绘了滑块向下滑动的锁定位置;
图16描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒具有至少一个铰链并且在这些板中的一个上具有用于闭合和锁定的至少一个滑块,其中滑块向下滑动以形成锁定和密封并且向上滑动以解锁和打开;
图17A和图17B描绘了根据一个实施例的根据本实用新型的两个不同的示例性电转移盒,该两个不同的示例性电转移盒具有与滑块锁定在一起的两个未连接的单独板,每个板针对滑块的锁定接口具有不同数量的接触点;
图18描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移盒,该示例性电转移盒具有两个单独板,在板的底部具有接合机构(诸如钩或可断开连接的铰链)以及用于闭合和锁定的滑块,其中滑块向下滑动以锁定盒并且向上滑动以解锁;
图19A描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移系统的前透视图,示出了插入到系统的一个腔室中的图10H的示例性电转移盒;
图19B描绘了根据一个实施例的图16的示例性电转移系统的前视图;
图19C描绘了根据一个实施例的其中封盖放置在顶部的图16的示例性电转移系统的前透视图;
图20描绘了根据一个实施例的用于组装电转移叠堆件和盒的示例性托盘的前透视图;
图21图示地描绘了根据一个实施例的示例性电泳方法;并且
图22A至图22F图示地描绘了示例性电转移方法,其中图22A描绘了放置在托盘中的处于打开配置的电转移盒,图22B描绘了具有转移叠堆件的分解图的电转移盒,图22C描绘了托盘中的处于闭合和锁定位置的电转移盒。根据一个实施例,图22D描绘了被定位成放置到电转移系统中的处于闭合和锁定位置的电转移盒;图22E描绘了电转移系统内部的电转移盒,并且图22E描绘了电转移系统内部的电转移盒,在该电转移盒上具有封盖以实现电连接。
具体实施方式
应理解,前文一般描述和下文详细描述仅是示例性和解释性的,且并非旨在限制当前教导的范围。在本专利申请中,除非另外具体陈述,否则单数的使用包含复数。例如,除非上下文另有规定,否则如本说明书和所附权利要求书中所用,单数形式“一个/一种(a/an)”和“该/所述(the)”也包括复数个方面。类似地,除非上下文另有规定,否则本说明书中所使用的任何单数术语也表示复数,反之亦然。
另外,“包括/包含(comprise/include)”、和“含有(contain)”的使用或这些根词的变型(例如但不限于“包括/包含(comprises/including)”、和“含有(contained)”)并非旨在予以限制。除非另外说明,否则“或”的使用意指“和/或”。术语“和/或”意指前后的术语可连在一起或单独采用。作为解释目的,而不是作为限制,“X和/或Y”可以意指“X”或“Y”或“X和Y”。
当本文提供值的范围时,除非另有明确说明,否则所述范围意在包括起始值和结束值,以及其间的任何值或值的范围。例如,“从0.2至0.5”是指0.2、0.3、0.4、0.5;其间的范围诸如0.2-0.3、0.3-0.4、0.2-0.4;其间的增量诸如0.25、0.35、0.225、0.335、0.49;其间的增量范围诸如0.26- 0.39等。
如本文所用的术语“或它们的组合”是指在所述术语前面所列术语的所有排列和组合。例如,“A、B、C或它们的组合”旨在包括以下各项中的至少一者:A、B、C、AB、AC、BC或ABC,并且如果在特定情况下顺序是重要的,那么还包括BA、CA、CB、ACB、CBA、BCA、BAC或CAB。继续此实例,明确地包括含有一或多个项目或术语之重复的组合,例如BB、AAA、AAB、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等。本领域的技术人员将理解,除非另外从上下文显而易见,否则通常不存在对任何组合中的项目或术语之数量的限制。
本文描述了用于生物分子的电泳和电转移的系统、装置和方法。本实用新型的系统、装置和方法克服了本领域的几个问题。在一些实施例中,描述了可用于凝胶电泳和电转移两者的系统。在一些实施例中,一种用于凝胶电泳和电转移的系统包括一个或两个或更多个腔室、隔室或部件,这些腔室、隔室或部件可以可拆卸地且可互换地接纳电泳盒或电转移盒,并且可为生物分子的电泳和/或电转移两者提供电接口。因此,本实用新型的系统提供用于进行两种不同生物分子分析方法的单一仪器平台。
在一些实施例中,本文所述的系统、装置和方法通过提供电泳和/或电转移系统而提供用于电泳和/或电转移的增加的吞吐量来克服本领域中的问题,该电泳和/或电转移系统具有多个腔室以允许并行处理电泳凝胶或从多个凝胶到多个电转移膜的电转移。在一些实施例中,一种系统具有至少两个腔室以允许在两个或更多个凝胶或转移膜上对生物分子进行并行的电泳和/或电转移。
本文所述的系统、装置和方法还通过提供无泄漏凝胶电泳系统来克服本领域的其他问题。本文所述的系统、装置和方法还通过提供无泄漏电转移装置和电转移系统来克服本领域的其他问题。
因此,与现有的用于电泳或电转移的系统和装置相比,本实用新型的系统、装置、盒和方法有利地产生前述益处中的至少一个或多个,包括:一个系统或平台用于电泳和电转移;通过同时处理两个或更多个凝胶或转移膜中的生物分子,在单个装置中进行多个电泳和/或电转移过程的能力;用于电泳和电转移的吞吐量的增加;装置或零件或部件的数量的减少;成本的降低;装备储存的占地面积的减少;溢出的减少;泄漏的减少;清理的减少;缓冲液和试剂的使用量的减少;以及液体危险废物(诸如与现有的用于电泳或电转移的系统和装置相比,转移缓冲液废物中的甲醇)的减少。与一些现有的用于电泳或电转移的装置和系统相比,本实用新型的用于电泳和电转移的系统和装置通过不需要在系统或装置的使用期间使用冷却缓冲液或冷冻冰袋来降低温度而减少了准备工作。与现有装置相比,本实用新型提供的附加优点是电流和功率要求较低。
本文所用的章节标题仅用于组织目的并且不应解释为以任何方式限制所描述的主题。本申请中引用的所有文献和类似材料(包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、论文和因特网网页),无论此类文献和类似材料的格式如何,都出于任何目的以全文引用的方式明确并入。如果并入的文献和类似材料中一者或多者定义或使用的术语与本申请中该术语的定义相矛盾,则以本申请为准。虽然结合各种实施例描述本教导内容,但是并非旨在将本教导内容限制于此类实施例。相反,本领域的技术人员应当了解,根据本教导内容,本教导内容涵盖各种替代方案、修改以及等效形式。
本说明书中提供的附图和图纸将用于描述示例性实施例。本领域技术人员将注意到,附图和示例仅用于说明想法和概念,并不旨在以任何方式限制本教导内容的范围。并非所有零件都在每个附图中标记,除非另有说明,否则类似零件具有类似编号,这些可能未在每个附图或说明书的每个部分中描述。
I.系统和装置:
本实用新型的实施例描述了可用于凝胶电泳和电转移两者的系统。在一个实施例中,本实用新型的系统包括至少一个腔室、隔室、容器或部件,该至少一个腔室、隔室、容器或部件构造成可移除地且可拆卸地接纳电泳盒或电转移盒。该系统进一步包括电极和封盖,该封盖可覆盖至少一个腔室、隔室或部件并提供电连接。术语“腔室”、“隔室”或“容器”或“部件”或“基部”或“系统基部”可在本规范中互换使用。
1)用于电泳和电转移的系统:
本实用新型的实施例描述了用于凝胶电泳和电转移的系统,该系统包括一个或多个腔室,该一个或多个腔室可以可拆卸地且可互换地接纳电泳盒或电转移盒,并且提供用于生物分子的电泳和电转移两者的电接口。在一个实施例中,一种系统具有至少两个腔室以允许在两个或更多个凝胶或转移膜上并行处理生物分子的电泳和/或电转移。
图1是可用于凝胶电泳和电转移的示例性系统100′的透视图的示意图。在一个示例性实施例中,系统100’具有两个腔室10a和10b,该两个腔室构造成执行电泳和/或电转移。每个腔室10a和10b被独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒。虽然图1和本实用新型中的若干其他附图和实施例使用两个腔室的非限制性示例来描述,但本教导内容可扩展到仅具有一个腔室的用于电泳和电转移的系统,或具有多于两个彼此相邻地放置的腔室的系统,以增加本实用新型的系统的吞吐量。在一些实施例中,本实用新型的系统具有多于两个腔室,以在其每个腔室中实现凝胶/基质/膜/材料中的生物分子的电泳分离或电转移。
如图1的实施例所示,两个腔室10a和10b以背靠背配置邻近彼此布置。在替代实施例中,本实用新型的系统中的腔室可邻近彼此、并排、背靠背、串联、彼此邻接布置,或者彼此相邻布置、对角放置,或者一个腔室在另一腔室的上方,另一腔室在另一腔室后面竖直叠堆和交错,和/或一个或两个腔室以一定角度相对彼此倾斜。
如图1所示,系统100’包括腔室10a和10b,每个腔室构造成接纳电泳盒或电转移盒,并且包括第一电极12和第二电极13,其中每个电极具有电接口或节点12d和13d,该第一电极和第二电极电连接到电源(未描绘)。电源可为外部电源或内部电源。在一些实施例中,第一电极12 和第二电极13具有延伸部或接口诸如12a、12b、12c、13a、13b、13c、 13c',13c',这些延伸部或接口延伸到每个腔室中,使得每个腔室具有阳极和阴极。
在一些实施例中,第一电极12跨越两个腔室10a和10b或具有跨越这两个腔室的接口(诸如12a和12b),这些接口构造成电接触位于电转移盒上的电接口。在一些实施例中,第一电极12具有进入每个腔室的电延伸部(诸如但不限于线12c),该电延伸部在电泳期间用作阳极。
在一些实施例中,第二电极13具有延伸部或接口(诸如但不限于 13c’和13c”),该延伸部或接口构造成接触位于电转移盒上的电极接口。在一些实施例中,第二电极13跨越两个腔室或具有跨越两个腔室的接口 (在非限制性示例中描绘为13c’和13c”),该接口构造成电接触位于电转移盒上的电接口。在一些实施例中,第二电极13具有延伸到每个腔室的延伸部(在非限制性示例中描绘为13a和13b),该延伸部在电泳期间在每个腔室中用作阴极。
图2是根据一个实施例的图1的分解图,其示出了系统100’的示例性部件的布置。至少两个腔室10a和10b各自被独立地构造成可互换地接纳电泳盒或电转移盒。两个腔室还包括三个电极12、13a和13b。在一些实施例中,三个电极包括跨越两个腔室的第一电极12和位于每个腔室中的第二电极13a和13b。第一电极12具有分别跨越腔室10a和10b的延伸部12a和12b。第一电极12具有两个延伸部12c,每个腔室10a和10b中一个。
如图1和图2中所示,跨越两个腔室的第一电极12(作为延伸部12a 和12b,和/或作为位于每个腔室中的延伸线12c)连接到第一电节点 12d,并且两个第二电极13a和13b(每个第二电极位于系统100的基部100’中的一个腔室10a和10b中)连接到公共同的第二电极节点13d。在一些实施例中,第一电极节点12d和第二电极节点13d是与电源连接的接口。
在一些实施例中,在本实用新型的系统中跨越两个腔室的第一电极12 为阳极。在一些实施例中,存在于本实用新型的系统的一个或多个腔室中的第二电极13a和13b为阴极。
在一些实施例中,如图2所示,第一电极12进一步包括导线12c,该导线沿着每个腔室10a和10b的底部延伸,以使电流能够流过腔室以进行电泳。导线12c由任何导电材料制成,诸如但不限于铂、金、银、铜、钯、钢、不锈钢、铱、导电塑料或任何涂覆的导电材料。当电泳盒被放置在一个或两个腔室10a和/或10b中时,沿着每个室的底部延伸的线12c在电泳期间用作阳极。在一些实施例中,线12c由保持装置18覆盖,该保持装置在非限制性示例中描绘为带穿孔的塑料条带。这些穿孔允许线12c与腔室中的电泳缓冲液进行物理接触,而保持装置允许线12c固定到腔室的底板上。这允许电场从阳极线12c传递到缓冲液。保持装置18还保护阳极线12c在系统使用期间不受损坏。
可使用具有类似功能的其他保持装置。框架11可任选地是保持装置 18的一部分并且也可用作三个电极12、13a和13b的安装件。在一些实施例中,框架11和保持装置18组合形成单个零件。
当线电极12c从电极12伸出并沿每个腔室10a和10b的侧面向下延伸时,框架11保护线电极。在一些实施例中,框架11结合穿孔18优化阳极线12c和阴极生成的电场。
本实用新型的系统的至少两个腔室10a和10b通过它们之间的至少一个共同的表面14分开。腔室之间的共同的表面14的非限制性示例包括两个腔室的至少一部分之间的壁、两个腔室的至少一部分之间的隔板、多个壁或多个隔板。在一些实施例中,两个腔室10a和10b通过两个腔室之间的空间15分开。在一些实施例中,两个腔室10a和10b通过至少两个腔室之间的共同的表面14和空间15分开。
每个腔室10a和10b至少具有第一内表面16a和第二内表面16b。可存在其他内表面(未明确描绘)。在一些实施例中,本实用新型的系统可进一步包括垫圈17,该垫圈与腔室的内表面中的一个内表面的部分相邻或定位于该部分上。如图1和图2中的示例所示,系统100的基部100’包括垫圈17,该垫圈与第一内表面16a的部分相邻或定位于第一内表面的部分上。垫圈17一般为三面垫圈,在非限制性示例中可为C形垫圈或U形垫圈。替代地,也可使用双面垫圈或四面垫圈。在一些实施例中,垫圈17 可放置在邻近内表面16a的凹槽19中。
图3是根据一个实施例的如图1和图2所示的系统100’的侧视图。
在一些实施例中,系统100’(在图4中也描绘为系统100)可进一步包括封盖20,该封盖构造成覆盖两个腔室10a和10b。图4是前透视图,并且描绘了覆盖系统100’的封盖20,其中封盖20包括:电连接件 21,该电连接件可拆卸地连接到电源;一个或多个电接触件23a和24a (位于封盖内部,参见图5C),该一个或多个电接触件构造成在封盖20 放置在腔室10a和10b上时通常经由电接口或电极节点(诸如12d和 13d)与第一电极12和第二电极13电连接,以针对两个腔室中的每一个,使电极之间的电路完整。22描绘了电缆夹。
在一些实施例中,第一电极节点12d和第二电极节点13d位于与封盖 20接触的系统的腔室的部分上(电极节点见图1、图2、图3,并且关于封盖20的更多细节参见图4和图5A至图5C)。
如图4所示,封盖20包括可拆卸地连接到电源的电连接件21。在一些实施例中,系统100的封盖20可包括电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源,该电源包括一个或多个电缆和/或可插入电源的一个或多个插头。外部电源通常与本实用新型的系统一起使用。然而,也考虑使用内部电源的系统。
如图4所示,电连接件21通常是具有一个或多个香蕉插头21a和21b 的插头,该插头可插入外部电源(未示出)。电连接件21可包括电缆夹 22。电缆21c和21d从电连接件21连接到电缆21c和21d,电缆21c和 21d连接到封盖两侧的电缆保持器23和24。电缆21c和21d通常具有一个带负电电缆(通常用颜色编码为黑色)和一个带正电电缆(通常用颜色编码为红色)以及一个或多个电接触件(在此处示为23a和24a)(通常为香蕉插孔、金属突片或任何电接口),该一个或多个电接触件构造成在封盖20放置在腔室10a和10b上时经由电极节点12d和13d(通常为但不限于香蕉插头)与腔室电极12和13电连接,以针对两个腔室10a和10b中的每一个,使电路完整。
在一些实施例中,封盖20可具有至少两个电缆钩26,该至少两个电缆钩允许电缆卷绕封盖并在储存期间保持牢固。在一些实施例中,封盖20 可在顶表面上具有一个或多个狭槽27c,该一个或多个狭槽使得通风或气流能够允许排出在电泳或电转移期间积聚的任何湿度。在一些实施例中,封盖20可在顶表面上具有一个或多个狭槽27c,该一个或多个狭槽提供封盖下缓冲液的部分可视性。在一些实施例中,封盖由透明或半透明材料 (通常是塑料)制成,允许可见性。例如,用户可在电泳或电转移期间看到缓冲液中形成的气泡,从而知道插入时装置正在工作。替代地,用户可观察系统内侧以查看系统内部部件的放置。
图5A是根据一个实施例的本实用新型的系统100的示例性封盖20的前透视图。图5B是如图5A所示的封盖20的顶视图,图5C是封盖的底视图。如图5A至图5C所示,封盖20包括来自电连接件21a和21b的电缆21c和21d,这些电连接件进一步连接到封盖内部的一个或多个电接触件或电连接器(诸如但不限于23b和24b),构造成当封盖放置在腔室上时与腔室电极电连接,以针对一个或多个腔室使电路完整,从而促进系统 100的电泳和/或电转移。
图6A和图6B是封盖20的各部分的详细视图,在图6A中描绘了示例性电缆保持器24(与另一侧上的23类似)和弹簧夹25,并且在图6B 中描绘了其末端在电连接器23a和24a中(此处示出了24a)的电缆的一部分。封盖20上的电连接器或电接触件23a和24a与腔室电极节点12d和 13d相连。通常,电接触件23a和24a为香蕉插孔,并且电极节点12d和 13d为香蕉插头。然而,还设想了其他类型的电接触件和节点。
在一些实施例中,系统100的封盖20可包括用于在储存期间卷绕电缆的至少一个特征(诸如电缆卷绕物26)。在一些实施例中,系统100的封盖20可包括机械特征部27a和27b,这些机械特征部与腔室顶部的互补机械特征部(诸如10c和10d)相互作用,使得封盖上的电接触件23a和24a与第一电节点12d和第二电节点13d以一定取向连接,该取向在系统100使用期间防止电极发生反转。
在一些实施例中,系统的封盖可包括颜色编码的特征部(诸如一个带负电电缆,其通常用颜色编码为黑色;和一个带正电电缆,其通常用颜色编码为红色(图纸中未明确显示颜色)),这些颜色编码的特征部可被操作为以允许封盖电接触件23a和24a与相应的第一电节点13d和第二电节点12d连接的取向覆盖腔室10a和10b,该取向在使用期间防止电极发生反转。
2)用于电泳的系统和装置:
在一些实施例中,本实用新型提供用于执行凝胶电泳的系统100。在一个实施例中,描述了可放置到本实用新型的可执行凝胶电泳和电转移两者的系统中的凝胶电泳盒和夹持系统。电泳盒可包括本领域中使用来分离生物分子的任何预铸或自铸电泳盒(诸如但不限于凝胶盒)。电泳盒通常包括两个彼此平行布置的塑料板或玻璃板,在它们之间夹有生物分子可在其中迁移和解析的基质。电泳盒是本领域已知的并且通常包括分隔板、保持板和基质。基质的非限制性示例包括由聚合材料诸如琼脂糖、丙烯酰胺、聚丙烯酰胺、葡聚糖、淀粉等制成的凝胶。通常在电泳盒的顶端在两个板之间放置带齿的梳子,以在凝胶顶部形成凹痕,可将包含生物分子的样品装载到其中。对于本实用新型的夹具和电泳/电转移系统,预期使用任何平行板凝胶闭合件。
本实用新型的用于电泳的系统包括系统100,如上述实施例中所描绘,该系统具有:基部100’,该基部具有电泳盒被放置到其中的腔室10a 和10b;以及封盖20。电泳盒通过夹具固定到腔室10a或10b的内表面 (并且在一些实施例中,固定到其中的垫圈,诸如垫圈17)。
3)夹具:
本实用新型提供用于将电泳盒固定到系统100中的新颖夹具。图 7A、图7B、图7C和图7D描绘了根据本实用新型的一个实施例的用于将电泳盒夹持到系统(诸如系统100)的腔室(诸如10a或10b)中的示例性夹具28。
图7A描绘了示例性夹具28的前透视图,该示例性夹具包括:凸轮板 29,该凸轮板具有平坦表面,该平坦表面具有两个侧面29a和29b。两个突出脊29c和29d在第一侧面29a上垂直延伸。凸轮板28的第一侧面29a 上的突出脊29c和29d构造成与电泳盒35的第一板33a的边缘相邻地放置并与其接触(在图8A中描绘了零件35以及板33a和33b)。突起29e和 29f在板29的第二侧面29b的每个拐角上延伸。两个可独立移动的凸轮手柄30a和30b(凸轮手柄可被操作为朝向凸轮板向前移动或远离凸轮板向后移动)经由位于凸轮板28上的栓31附接到凸轮板28。两个突出边缘 29c’和29d'位于第一侧面29a上,垂直于凸轮板的面向电泳盒的平坦表面29a。突出边缘20c’和29d’邻近凸轮臂30a和20b定位。突出边缘 29c’和29d’引导电泳盒35的放置。在一个实施例中,向前(即朝向凸轮板29)移动凸轮手柄30a和30b,将电泳盒35固定到表面或其一部分 (未明确描绘的表面),并且其中向后(即远离凸轮板29)移动凸轮手柄 30a和30b,将电泳盒35从表面释放。在一些实施例中,凸轮28将电泳盒固定到的表面或表面的一部分是位于电泳系统100中的垫圈17。在一些实施例中,本实用新型的夹具的凸轮手柄可在0度到180度的运动范围内移动。在一些实施例中,本实用新型的夹具的凸轮手柄可在0度到45度的运动范围内移动。
在一些实施例中,本实用新型的夹具在凸轮板29的平坦表面第一侧 29a的底部侧面上包括多个凸块32。在一些实施例中,本实用新型的夹具在面向凝胶盒35的凸轮板29的平坦表面29a的底部侧面上包括多个凸块 32。在一些非限制性示例性实施例中,1个凸块、2个凸块、3个凸块、4 个凸块、5个凸块、6个凸块、7个凸块、8个凸块、9个凸块、10个凸块等位于面向凝胶盒35的凸轮板28的平坦表面29a的底部侧面上。凸块设计的形状和尺寸和数量可变化。在一些实施例中,凸块构造成在底部在凝胶盒板的所有部分上分配压力以防止在电泳期间和/或在凝胶盒被固定用于电泳时凝胶盒的翘曲或弯曲。在一些实施例中,凸块允许在电泳盒底部的缓冲离子的自由循环。
在一些实施例中,凸块32,结合本实用新型的电泳系统的穿孔18,允许放置在电泳系统中的电泳盒底部的缓冲离子自由循环,其中阳极线 12c位于穿孔18下方。
图7B描绘了夹具28的前视图,并且图7C描绘了夹具28的后视图。图7D描绘了根据一个实施例的夹具28的侧视图,其描绘了定位在夹具一侧的凸轮臂30a。凸轮臂30具有插座(诸如孔),该插座定位在位于凸轮板29侧的栓31中。在一个实施例中,栓31为弹簧夹,凸轮臂30经由插座定位到弹簧夹中。在一些实施例中,凸轮臂30因此经由弹簧夹永久地固定到凸轮板29。替代地,栓31可位于凸轮臂30上,并且插座(诸如孔)位于凸轮板29上。在替代实施例中,凸轮臂30可使用螺钉或插入件组装,诸如但不限于允许凸轮臂或凸轮手柄旋转的带肩螺钉,或柱、或销或其他夹具、或枢轴或旋转设计。
在一些实施例中,当凸轮臂30处于锁定位置时,封盖20配合到系统 100上。这是为了确保电泳盒在启用电连接之前正确固定在系统100中。
在一些实施例中,本实用新型的夹具28将电泳盒夹持或固定到其上的表面是电泳槽的一部分或部分上的表面在图8A中描绘为所述系统100 的基部110’(无封盖20)。在一些实施例中,本实用新型的夹具28将电泳盒35夹持或固定到其上的表面是本实用新型的系统100的一部分或部分上的可执行电泳和/或电转移两者的表面。在一些实施例中,夹具28 可与任何电泳槽表面结合使用。
在一些实施例中,本实用新型的夹具28将电泳盒夹持或固定到其上的表面是位于电泳槽的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈(诸如垫圈 17),或位于可执行电泳和/或电转移两者的本实用新型的系统100的基部 110’的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈。垫圈17可为三面垫圈或四面垫圈。
4)电泳系统:
图8A描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电泳系统100的基部110’的前透视图,其示出了放置在两个腔室10a和10b内部的电泳凝胶盒35和夹具28,其中夹具28处于解锁位置。
图8B描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电泳系统基部 110’的前透视图,其示出了各自放置在两个腔室10a和10b内部的电泳凝胶盒35和夹具28,其中夹具处于锁定位置(其中凸轮臂30a和30b朝向凸轮板28向上移动)。
图8C描绘了根据一个实施例的图8B的电泳系统100的基部110’的前视图,其示出了放置在系统的两个腔室内部的电泳凝胶盒35和夹具 28,其中夹具处于锁定位置。
图9A描绘了电泳系统100的前透视图,其中基部110’和封盖20被示为位于上方,可放置在基部110′上,如封盖下面的粗体箭头所示。图 9B描绘了根据一个实施例的其中封盖20放置在基部110’上的系统100 的前透视图。在一些实施例中,用于执行凝胶电泳的系统100包括:基部 110',该基部包括至少两个腔室10a和10b,每个腔室构造成独立地接纳电泳盒35,该电泳盒包括两个平行板33a和33b,从而封闭凝胶,每个腔室构造成独立地接纳用于将电泳盒35固定到每个腔室的表面的夹具28;单个第一电极12,两个线电极12c从该单个第一电极沿着每个腔室10a和 10b的基部运行,每个腔室具有连接在共同的电节点13d处的单独的第二电极13a和13b。一些实施例具有可拆卸的封盖20,该可拆卸的封盖用于提供与电源的电连接,其中封盖20具有电连接器(诸如23a和24a),该电连接器可在放置在基部上方时分别与电节点13d和12d连接,以使腔室电极之间的电路完整。在一个实施例中,本实用新型的用于电泳的系统100包括一个电泳盒35和一个夹具28。在一个实施例中,本实用新型的用于电泳的系统100包括两个电泳盒35和两个夹具28。
在一些实施例中,本实用新型的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到基部110’的腔室/隔室的内表面。在一些实施例中,本实用新型的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到腔室/隔室内部的垫圈17。在一些实施例中,垫圈17放置在本实用新型的系统100的腔室/隔室的内表面16a的至少一部分上或附连到内表面的至少一部分。放置或粘附垫圈的非限制性示例包括但不限于将垫圈二次成型或将垫圈粘合到内表面16a的至少一部分上。
在一些实施例中,本实用新型的夹持机构(诸如夹具28)在系统100 的腔室/隔室10a或10b中在电泳盒35和垫圈17之间产生或形成不透液体的密封。将电泳盒夹持到本实用新型的系统的腔室或腔室中,在腔室10a 中形成两个流体地隔开的子腔室/子隔室10a’和10a”,并且在腔室10b中形成子腔室/子隔室10b’和10b”。在一些实施例中,在腔室10a(或10b) 的第一内表面16a的一部分、垫圈17的一部分和面向系统的腔室的第一内表面16a的电泳盒35的板33b之间形成第一子腔室10a’。在一些实施例中,在凝胶盒35的左侧面和右侧面、面向第二内表面16b的凝胶盒35的板33a的外边缘和电泳盒35和夹具28被放置到其中的系统100的腔室 10a(或10b)的其余部分之间形成第二子腔室/子隔室10a”。
在系统使用期间如此形成的子腔室或子隔室可填充有用于电泳的缓冲液并且可用作第一缓冲液贮存器和第二缓冲液贮存器。
在一些实施例中,在腔室10a的第一内表面16a的一部分、垫圈17 的一部分和面向电泳盒35和夹具29被放置到其中的系统100的腔室10a 的第一内表面16a的电泳盒33b的板之间形成第一缓冲液贮存器10a’。在一些实施例中,在面向第二内表面16b的凝胶盒33a的板和电泳盒35和夹具28被放置到其中的腔室10a的其余部分之间形成第二缓冲液贮存器10a”。
本实用新型的系统不限于任何尺寸,并且可放大或缩小以容纳任何尺寸的电泳盒或电转移盒。例如,可使用的电泳盒可包括一个或多个微型凝胶盒、中型凝胶盒、大型凝胶盒。例如,在非限制性示例中,本实用新型的系统的每个腔室可容纳约30ml至5升的电泳缓冲液体积。
5)电转移盒:
本实用新型的实施例涉及电转移盒。描述了可放置到本实用新型的系统100中的若干电转移盒实施例,该系统可执行凝胶电泳和电转移两者。
在一个实施例中,本实用新型的电转移盒包括:两个板(或壳),该两个板可通过至少一个接合机构可逆地或永久地接合,以允许两个板在打开位置和闭合位置之间移动;锁定机构,该锁定机构用于将两个板锁定在闭合位置;密封机构,该密封机构可被操作为将两个板密封在闭合位置,以在至少三个侧面上形成不透液体的密封;第二板,该第二板构造成在其内部侧面接纳转移叠堆件的部件,并且第一板和第二板的外部侧面包括至少一个电接口,该至少一个电接口各自连接到位于每个板的内侧上的电极。
在一些实施例中,在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。在其中在电转移盒的三个侧面上形成不透液体的密封的实施例中,三个侧面是盒的底部侧面、左侧面和右侧面。
在一些实施例中,电转移盒的接合机构包括以下一者或多者:铰链;多个铰链;断开连接的铰链;夹具;一个或多个钩;一个或多个夹具;两个板(或壳)上的机械部件,这些机械部件可滑动和联锁,从而将两个板粘合、胶粘、粘结或焊接在一起;连杆设计,两个板用柔性材料连接;或外部元件,该外部元件用于接合两个板。在一些实施例中,接合机构是可逆接合机构或永久接合机构。永久接合机构允许两板作为一个部件保持在一起。这对于用户来说是有利的,因为他们提供较少的部件和/或允许更轻松地闭合板,因为在闭合之前不需要对齐板。可逆接合机构允许具有两个单独壳。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的锁定机构包括滑块。在一些实施例中,滑块包括:带,该带卷绕第一板的外部侧面的宽度的部分;带的侧延伸部,该侧延伸部进一步卷绕第一板的外侧的深度的部分;以及元件,该元件可被操作为与第二板的外部侧面上的部分可逆地啮合以在啮合时在第一板和第二板之间形成锁定。在一些实施例中,当两个板闭合时,本实用新型的电转移盒的滑块与第二板上的相应元件对齐,这些元件可被操作为滑动以形成锁定。
在一些实施例中,锁定机构可以是滑块,其可经由一个或多个安装特征部附接到板中的一个。在一些实施例中,滑块可具有配合安装特征部,该配合安装特征部是可被操作的并且将滑块永久地或可逆地附接到板。在一些实施例中,锁定机构可以是位于一个板上的滑块,其中该滑块上的机械配合特征部可与位于另一板上的相应机械特征部配合。匹配特征部通常位于每个板的两侧上。
在一些实施例中,锁定机构可以是一个板上的夹具和位于另一板上的夹具闭合件。夹持机构通常经由安装特征附接到一个板。夹具通常具有配合安装特征部,这些配合安装特征部允许夹具附接到另一板。可使用若干安装特征部,例如,栓孔机构等。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的密封机构包括至少一个滑块。在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的密封机构可另外包括垫圈,该垫圈被放置在电转移盒的两个板中的一个板上。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块(如上所述)在朝向板的顶端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块在朝向板底端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例实施例中,当两个板闭合时,位于闭合板的侧面中的一个侧面上的滑块向上或向下移动以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一些实施例中,可在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。不透液体的密封(或液密的密封)的形成在电转移盒内部产生或形成液体贮存器。
图10A至图10I描绘了本实用新型的电转移盒40的一个实施例,该电转移盒包括:两个板(或壳),即第一板41和第二板42,该两个板由接合机构(诸如至少一个铰链43)接合,以允许两个板在打开位置(打开位置见图10A至图10C)和闭合位置(闭合位置见图10D至图10I)之间移动;锁定机构,该锁定机构用于将两个板锁定在闭合位置;密封机构,该密封机构进一步可被操作为密封两个板以在三个侧面上形成不透液体的密封;第二板42,该第二板构造成在其内部侧面42a接纳转移叠堆件的部件,并且外部侧面42b和第一板41包括至少一个电接口45a、45b,45c和 /或45d,该至少一个电接口各自连接到位于每个板内侧的电极(第一板电极46;第二板电极47)。其中形成不透液体的密封的电转移盒40的三个侧面是盒内壁的底部侧面48、左侧面49和右侧面50。在一些实施例中,本实用新型的电转移盒包括两个板(或壳41和42),该两个板由多于一个铰链43接合。
在一些实施例中,位于本实用新型的电转移盒的两个板内部的电极是嵌入每个板的内表面中的板电极。在替代实施例中,电极46和47可以是线电极、线网电极、棒电极或板电极。这些电极可由导电材料制成,诸如但不限于钢、不锈钢、铜、铂、钯、铱、钛、导电涂层材料、导电塑料等。在一些实施例中,板电极的外部电接口45(45a、45b、45c、45d等) 可以是弹簧、电节点、支架、引脚、插头、允许电接触的任何设计,诸如电极的电镀接口。板电极46和47的外部电接口45a、45b、45c和45d构造成与腔室电极12、13a和13b或这些电极的电极延伸部(例如12a、 12b、13c’、13c”等)物理地连接和/或电连接,这些电极延伸部具有与电源的电连接。电极或电极延伸部可包含在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统100或100’中。替代地,电极或电极延伸部可包含在任何可执行电转移的系统(包括本文未明确描绘的电转移系统)中。
在一个实施例中,在本实用新型的系统100中,如例如图1所示,跨越两个腔室的第一电极12构造成接触可放置到一个或多个腔室10a或10b 中的电转移盒40上的第一电极接口45c或45d。在一些实施例中,电转移盒40的第一电极接口45c或45d为阳极接口并且连接到内部板电极46。
在一些实施例中,本实用新型的系统100的腔室/隔室的第二电极13a 或13b具有延伸部13c’和13c”,该延伸部构造成接触可放置到一个或多个腔室10a或10b中的电转移盒40上的第二电极接口45a或45b。在一些实施例中,电转移盒40的第二电极接口45a或45b为阴极接口并且连接到内部板电极47。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒的锁定机构包括滑块44。如图10D所示,在一些实施例中,滑块44包括:带,该带卷绕第一板41的外部侧面41b的宽度的部分;带的侧延伸部,该侧延伸部进一步卷绕第一板41的外部侧面41b的深度41c的部分;以及元件,该元件可被操作为与第二板42的外部侧面上的部分可逆地啮合以在啮合时在第一板和第二板之间形成锁定。如图10D、图10E和图10F所示,在一些实施例中,当两个板41和42闭合时,电转移盒40的滑块44与第二板42上的相应元件对齐,这些元件可被操作为滑动以形成锁定(滑动方向参见图10E中的向上箭头)。如图10D和图10E所示,在一些实施例中,当两个板41和42 闭合时,滑块在朝向板的顶端的方向上移动(滑动方向参见图10D和图 10E中的向上箭头),以在电转移盒40的内表面上在三个侧面48、49和 50上形成锁定和不透液体的密封,如图10G和图10H所示。
在一些实施例中,锁定机构(诸如滑块44)也用作密封机构。电转移盒40a的附加的密封机构部件包括垫圈17,该垫圈可被放置在两个板41 或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。在图10A和图10B中,垫圈17位于板42上,并且当锁定机构44滑动到电转移盒40 的锁定和密封位置时,在两个板之间形成不透液体的密封。在电转移盒的三个侧面上形成不透液体的密封在电转移盒内部产生或形成液体贮存器。在使用中,如果需要,在一些实施例中,可将附加的缓冲液倒入液体贮存器中,以使电流能够在电转移盒中流动,以用于将生物分子在转移叠堆件中从凝胶/基质转移到膜/材料。在一些实施例中,在使用中,不需要附加的缓冲液,并且液体贮存器用于在转移叠堆件中包含缓冲液而不会溢出,并且使得电流能够在电转移盒中流动,以用于将生物分子在转移叠堆件中从凝胶/基质转移到膜/材料。
在一些实施例中,第二板42在顶部侧面51上具有唇缘或突起52,该唇缘或突起可被操作为在其他三个侧面48、49和50上密封电转移盒40 之后将液体分配到电转移盒中。电转移盒可在液体贮存器内部具有可视标记,诸如填充线或其他指示,以指示用户要填充的液体(诸如电转移缓冲液)的量。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒进一步包括提供位于第二板或第一板的外部侧面的支撑结构的元件。在非限制性示例中,支撑结构可减少或防止第一板和/或第二板的翘曲或弯曲。在一个非限制性示例性实施例中,支撑结构53可包括一个或多个肋、一个或多个脊、一个或多个凹槽、一个或多个突出结构、凹面突起或表面或结构。
在一些实施例中,支撑结构53允许第二板42以一定角度抵靠。在一些实施例中,由支撑结构引起的角度允许组装和/或查看转移叠堆件轻松符合人体工程学。在一些实施例中,在转移叠堆件组装在第二板42上期间,支撑结构53减少了缓冲液溢出。在一些实施例中,支撑结构向板电极提供支撑,使得两个板电极基本上彼此平行以允许两个板电极之间的最佳电场,以促进在电转移期间生物分子的有效转移。
图11A、图11B和图11C描绘了根据一个实施例的本实用新型的具有夹具闭合、锁定和密封机构的示例性电转移盒40a。图11A描绘了处于打开位置的电转移盒40a,其示出了两个单独板,即第二板42和第一板41,该第二板可被操作为接纳转移叠堆件,该第二板可操作为封闭具有转移叠堆件的第二板42。转移叠堆件(未明确示出)通常包括转移缓冲液或包含在凝胶或基质或海绵和滤纸的组合中的导电离子;具有生物分子的凝胶;以及将生物分子转移到其上的膜(未示出)。每个板41和42分别容纳或包括一个电极(类似于图10A至图10I中的46和47)。板电极46和47 包括可连接到电源的电接口(未明确示出)。第一板41包括或具有附接或连接到第一板的夹持机构60,该夹持机构可被操作为将两个板闭合、锁定和/或密封在一起。图11B描绘了其中板41和42闭合但尚未锁定或夹持或密封的闭合位置,其中夹具60仍然直立。在一些实施例中,夹持机构 60也用作密封机构。一个或两个板41和42可另外具有支撑结构,诸如本文中板41上所描绘的示例性肋/脊53。支撑结构(诸如53)可减少或防止夹持时板弯曲或翘曲。电转移盒40a的附加的密封机构部件包括垫圈(未示出),该垫圈可被放置在两个板41或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。当夹持机构60如图11C中所描绘向下夹持时,垫圈在两个板之间形成不透液体的密封,图11C描绘了电转移盒40a的锁定和密封位置。
在一些实施例中,夹持机构60经由第二板上的安装特征61附接到第一板41。夹持机构60具有配合安装特征62,这些配合安装特征部允许夹具60附接到第一板41。如图11A、图11B和图11C所示,这些安装特征部被描绘为栓孔机构,该栓孔机构使夹具60能够在打开位置/闭合位置之间枢转。此0-180度旋转夹具移动允许夹具60从打开和/或解锁和/或未密封位置(~0度)移动到闭合和/或锁定和/或密封位置(~180度)。当夹具 60闭合时(如图11B和图11C所示),夹具上的特征与第二板42上的特征62接合,以形成液密密封(参见图11C)。在该非限制性示例性实施例中,安装和接合特征部被描绘为钩栓接口。可替换其他类似特征部。
图12A、图12B、图12C、图12D和图12E描绘了本实用新型的示例性电转移盒40b,该示例性电转移盒具有铰链并且具有两个单独板41和 42,在其中一个板上具有用于闭合和锁定的滑块44。两个单独板41和42 的接合机构是一个或多个钩43',该一个或多个钩在此处被示为位于每个板的底部,以将两个板连接在一起,并经由铰链运动促进板在打开位置和闭合位置之间移动。替代地,钩43’可位于板41或42的左侧面或右侧面。
与图10A至图10I的电转移盒40的两个板41和42相比,40b的这两个板不是永久附接的,并且可彼此脱钩。图12A描绘了示例性电转移盒 40b的打开位置,具有放置在第二板42和第一板41中的转移叠堆组件63 的分解图(关于转移叠堆件组件的详细信息,参见以下章节),该转移叠堆组件可被操作为封闭具有转移叠堆63的第二板42。每个板41和42容纳或包括每个电极(未描绘)。板电极包括可连接到电源的电接口(未明确示出)。第一板41包括或具有附接或连接到第一板的锁定机构(描绘为滑块44),该锁定机构可被操作为将两个板闭合、锁定和/或密封在一起。在本实施例中,滑块44还用作密封机构。第一板41还具有引导滑块 44的滑动运动的机械特征部,以能够为用户实现平滑的闭合/锁定/密封。
电转移盒40b的附加的密封机构部件包括垫圈17,该垫圈可被放置在两个板41或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。图 12B描绘了具有组装好的转移叠堆件63的电转移盒40b的打开位置,并且在本实施例中,垫圈17被示为第二板42内侧的边界。当锁定机构44和密封机构44如图12E中所描绘向下时,垫圈17在两个板之间形成不透液体的密封,图12E描绘了电转移盒40b的锁定和密封位置。
一个或两个板41和42可另外具有支撑结构,诸如本文中板41上所描绘的示例性肋/脊。支撑结构可减少或防止夹持时板弯曲或翘曲。图12C 描绘了两个板41和42闭合时的半开位置。
如图12C、图12D和图12E所示,锁定和密封机构(此处由滑块44 实现)利用滑块经由第二板上的一个或多个安装或配合特征部附接到第一板41。滑块44具有配合安装特征部,这些配合安装特征部可被操作为使滑块44能够永久地附接到第二板。如图12D和图12E中所描绘的,滑块 44与电转移盒40b两侧的第二板42上的一个或多个配合特征部61接合。图12D描绘了具有滑块44和顶部的闭合位置。滑块44可向下滑动以锁定盒,并且图12E描绘了滑块向下滑动的锁定位置。
图13A、图13B和图13C描绘了本实用新型的示例性电转移盒40c,该示例性电转移盒不具有铰链但具有两个板41和42,其中滑块锁44附接到一个板。在电转移盒的本实施例中,滑块44也包括接合机构、锁定和密封机构。图13A描绘了示例性电转移盒40c的打开位置,其中转移叠堆件组件(未示出)可被放置在第二板42中。第一板41可被操作为封闭第二板42和转移叠堆件。每个板41和42容纳或包括一个电极。板电极包括可连接到电源的电接口(未明确示出)。第一板41包括或具有附接或连接到第一板的锁定机构(描绘为滑块44),该锁定机构可被操作为将两个板闭合、锁定和/或密封在一起。在本实施例中,滑块44还用作密封机构。第一板41还具有引导滑块44的滑动运动的机械特征部,以能够为用户实现平滑的闭合/锁定/密封。电转移盒40c的附加的密封机构部件包括垫圈17,该垫圈可被放置在两个板41或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。根据一个实施例,图13B描绘了滑块位于顶部的闭合但解锁位置,并且图13C描绘了滑块向下滑动的锁定位置。
图14A、图14B、图14C、图14D和图14E描绘了本实用新型的示例性电转移盒40d,该示例性电转移盒不具有铰链但具有两个单独板41和 42,其中一个板上具有用于闭合、锁定和密封的滑块44。接合机构43’由两个元件43’构成,一个位于滑块44上,另一个位于第二板42上。接合机构43’是配合锁定特征部从位于其侧面上的滑块44和第二板42 的延伸部。每个板41和42容纳或包括每个电极(未描绘)。板电极包括可直接或间接连接到电源的电接口(未明确示出)。第一板41包括或具有附接或连接到第一板的锁定机构(描绘为滑块44),该锁定机构可被操作为将两个板闭合、锁定和/或密封在一起。在本实施例中,滑块44还用作密封机构。第一板41还具有引导滑块44的滑动运动的机械特征部,以能够为用户实现平滑的闭合/锁定/密封。电转移盒40d的附加的密封机构部件包括垫圈,该垫圈可被放置在两个板41或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。图14A描绘了具有转移叠堆件组件63的分解图的打开位置。图14B描绘了板42中具有组装好的叠堆63的打开位置,并且描绘了锁定和密封机构44在板41上的定位。图14C描绘了具有锁定和密封机构44的细节的半开位置,该锁定和密封机构经由第二板上的配合特征部附接到第一板41。配合和安装特征部使得滑块44能够永久地附接到第一板41。如图14D所示,滑块与第二板42上的一个或多个配合特征部接合。这些特征部位于两个板的两侧和底部上。图14D描绘了在每个侧面或每个边缘上具有三个配合特征部以及在第二板42的底部上具有相应特征部的闭合位置,滑块44与该对应特征部接合以形成锁定。然后,通过滑动滑块44向上运动形成密封。图14E描绘了根据一个实施例的解锁位置以及关于联锁机构的附加细节。
图15A、图15B、图15C和图15D描绘了本实用新型的示例性电转移盒40e,该示例性电转移盒具有铰链43作为接合机构,并且在其中一个板的侧面上具有用于闭合和锁定的滑块44。图15A描绘了处于打开位置的电转移盒40e的内侧的前视图,并且描绘了由一个或多个铰链43连接的板 41和42。每个板41和42容纳或包括电极板46和47。板电极包括可连接到电源的电接口(未明确示出)。第二板42包括或具有锁定机构(该锁定机构被描绘为滑块44),该锁定机构通过卡扣特征部附接到第二板的侧面,这些卡扣特征部允许滑块永久地夹持到第二板的侧面上。滑块44具有配合安装特征部,这些配合安装特征部允许夹具夹持到第二板中。滑块 44可被操作为闭合、锁定和/或密封两个板。在本实施例中,滑块44还用作密封机构。第一板41还具有引导滑块44的滑动运动的机械特征部,以能够为用户实现平滑的闭合/锁定/密封。电转移盒40e的附加的密封机构部件包括垫圈(未示出),该垫圈可被放置在两个板41或42中的一个板的内侧,以便在板闭合时位于两个板之间。图15B描绘了处于打开位置的电转移盒40e的外部的后视图,其描绘了提供机械支撑的支撑结构53。
图15C描绘了具有滑块的闭合但解锁位置,该滑块可向下滑动以锁定盒。当滑块44向下滑动时,夹具上的特征与设计到第一板中的特征接合,以锁定和密封两个板以形成液密密封。图15D描绘了根据一个实施例的电转移盒40e的锁定和密封位置,其中滑块44向下滑动。
图16描绘了根据一个实施例的本实用新型的处于闭合和锁定位置的示例性电转移盒40f,该示例性电转移盒具有至少一个铰链43作为接合机构并且在这些板中的一个上具有用于闭合和锁定的至少一个滑块44,其中滑块向下滑动以形成锁定和密封并且向上滑动以解锁和打开。密封机构的其他部件可包括位于这些板中的至少一个板的内侧表面上的垫圈。
图17A和图17B分别描绘了根据本实用新型的两个不同的示例性电转移盒40g和40h,该两个不同的示例性电转移盒具有可通过接合特征部而在打开位置和闭合位置之间移动的两个未连接的单独板,该接合特征部包括一个或多个断开连接的铰链,该一个或多个断开连接的铰链可与滑块 44锁定和密封在一起,每个板针对滑块的锁定接口具有不同数量的接触点。滑块44包括密封和锁定机构。密封机构的其他部件可包括位于这些板中的至少一个板的内侧表面上的垫圈。
滑块44通过与设计在相对板上的一个或多个配合特征部接合而形成液密密封。配合特征部位于这些板的两侧和底部上。在一些实施例中,通过随着滑块移动到锁定位置而在垫圈和板之间产生的压力形成液密密封。图17A在板的每一侧上具有三个接合特征部,滑块44在该三个接合特征部上在相对板上与电转移盒接合,并且在底部具有一个特征部以与电转移盒接合,从而锁定和密封电转移盒。图17B示出了滑块44在相对板上接合的每一侧/边缘上的特征和在底部接合的一个特征部。
图18描绘了本实用新型的示例性电转移盒40i,该示例性电转移盒具有两个单独板41和42,其中在板的底部具有接合机构43(诸如钩或可断开连接的铰链)以及用于闭合和锁定的滑块44,其中滑块向下滑动以锁定盒并且向上滑动以解锁。滑块44包括密封和锁定机构。密封机构的其他部件可包括位于这些板中的至少一个板的内侧表面上的垫圈。
6)用于电转移的系统:
如图19A至图19C所示,本实用新型的电转移盒40构造成放置在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统100中。在一些实施例中,如图10A至图18中所示和所述,电转移盒(诸如40和40a-40i)构造成放置在系统100或可执行电转移的任何其他系统中。类似零件具有与先前附图中所示类似的编号并且不再重复。
在一些实施例中,本实用新型的电转移盒构造成放置在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统中或在其被密封之后防止在任何电转移系统中。
在一些实施例中,在使用中,本实用新型的封闭和密封的电转移盒的液体贮存器填充有缓冲液并放置在本实用新型的可执行电泳和/或电转移两者的系统的腔室中,并且该系统的封盖被放置在腔室上并连接到电源以使电转移盒系统的电路完整。
图19A描绘了根据一个实施例的本实用新型的示例性电转移系统100 的前透视图,其示出了插入到系统的一个腔室中的图10H的示例性电转移盒。图19B描绘了根据一个实施例的图19A的示例性电转移系统的前视图。图19C描绘了根据一个实施例的其中封盖放置在顶部的图19A的示例性电转移系统的前透视图。
如图19C中所描绘的,用于执行电转移的系统100具有封盖20。如图19A和图19B所示,系统100包括:至少两个腔室10a和10b;单个第一电极12,该单个第一电极横跨两个腔室,连接到位于腔室顶部侧面的第一电节点12d;第二电极13a和13b,该第二电极位于每个腔室中,两个第二电极连接在位于腔室顶部侧面的共同的第二电节点13d处,每个腔室构造成独立地接纳电转移盒40。尽管图19A至图19C中所描绘的实施例示出了电转移盒40,但本实用新型的其他电转移盒(诸如40a-40i)也可插入腔室10a和10b中以到达用于电转移的系统100。类似地,尽管说明书另外详细地描述了电转移盒40,作为描述电转移系统的示例性实施例,但这不应被解释为限制本申请的范围。还描述了具有类似部件的电转移盒 40a-40i,并且在以上各章节中详细说明了差异。
电转移盒40包括:两个板41和42,该两个板由至少一个铰链43接合,该至少一个铰链构造成允许两个板从打开位置和闭合位置移动;滑块 44,该滑块可被操作为将两个板锁定在闭合位置并将两个板密封在闭合位置,以在三个侧面48、49和50上形成不透液体的密封,其中第二板42 构造成在其内部侧面42a上接纳转移叠堆件的部件,并且其中第二板的外侧42b和第一板41的外部侧面41b包括至少一个电连接件45(诸如45a、 45b、45c和45d),该至少一个电连接件各自连接到位于每个板内侧的电极46或47,第一板41和第二板42上的电连接件45与腔室10a和10b的第一电极12a和/或12b和第二电极13c’和/或13c”电接触;以及可拆卸的封盖20,该可拆卸的封盖覆盖基部120。封盖20提供与电源的电连接,封盖20具有电连接器诸如23a和24a,当电转移盒40被放置在基部 120中并且封盖20覆盖基部时,这些电连接器与电转移盒40的电连接/接口45电连接以使电路完整。在一个实施例中,本实用新型的用于电转移的系统100包括一个电转移盒。在一个实施例中,本实用新型的用于电转移的系统包括两个电转移盒。
在非限制性示例中,可使用的电转移盒可包括可用于将生物分子从一个或多个微型凝胶盒、一个或多个中型凝胶盒、一个或多个大型凝胶盒同时转移到一个或多个电转移膜的盒。
7)用于电转移的托盘:
图20描绘了根据一个实施例的用于将电转移叠堆件63组装在电转移盒(40或40a-40i)的示例性托盘55的前透视图。托盘55包括两个隔室 57和58、隔板59和倒口56,其中较大的隔室57用于将转移叠堆件63组装在电转移盒(40或40a-40i)中。图22A描绘了根据一个实施例的与打开的电转移盒40一起使用的示例性托盘55。在使用中,本实用新型的打开的电转移盒(诸如40、40a-h)被放置在托盘55中。打开的电转移盒 (诸如如图22B中所示)被放置成使得隔板59分隔托盘55的部分。托盘 55的后壁呈锥形,因此当用户组装转移叠堆件时,电转移盒是打开的。隔室58(在图20中示为前隔室)用于润湿转移叠堆件材料和部件,并且隔室57(在图20中示为后隔室)用于将转移叠堆件组装在打开的电转移盒 40的第二板42内部。较大后腔室57是电转移盒40以其打开配置被放置的地方,其中第二板42(阴极侧)被放置在腔室57的底部(在腔室57的平坦表面上),并且第一板41(阳极侧)被放置在腔室57的成角表面上。当用户将转移叠堆件63组装/构建到电转移盒40的第二板42中时,当在托盘中时,从电转移盒溢出的任何缓冲液被托盘捕获以防止在实验室中发生缓冲液溢出。
隔板59具有更高的表面59”,两侧是凸耳59'。更高的表面59'’可具有转移叠堆配置的印刷图像,以引导用户将转移叠堆件正确地组装到电转移盒中。表面成一定角度,使得在用户组装时,印刷图像(此处未示出) 不会被转移叠堆件阻挡。凸耳59’允许后腔室57中的任何液体流入前腔室58,以便在转移叠堆件组装完毕且电转移盒40闭合且锁定后进行处置。托盘55在前拐角具有两个倾注点56,以便安全处置所用的缓冲液。倾倒口56的配置方便、符合人体工程学并且安全地将危险废物倒入废物容器中。由于转移缓冲液中含有必须在危险废物容器中处置而不是倒在水槽中的危险化学品甲醇,因此倾倒口56特别有用。
II.方法:
本实用新型的实施例涉及执行凝胶电泳的方法,该方法包括以下至少一项:获得凝胶电泳系统;获得包含待电泳生物分子的至少一个样品;以及执行电泳。本实用新型的实施例涉及使用本文所述的装置和系统执行生物分子的电转移的方法。可电泳或可转移的生物分子的非限制性实例包括但不限于核酸、DNA、RNA、多肽和蛋白质。
1)电泳方法
图21描绘了组装用于电泳的电泳系统100、100’或110’的示例性方法步骤,其中本实用新型的系统100’首先接纳夹具28。之后,将电转移盒35插入在夹具与系统的内腔室壁之间,并通过将凸轮手柄30移动到锁定位置,将夹具28的凸轮手柄30夹持到锁定位置。替代地,系统100 可首先接纳电泳盒35,然后接纳夹具28。
虽然图21描绘了在两个腔室中接纳电转移盒35和夹具28,但如从以上各章节中的描述中可以明显看出,只有一个腔室可组装有一个电泳盒和一个夹具。
图21描绘了处于锁定位置的凸轮手柄30。在将夹具28插入系统100 期间,凸轮臂30将处于解锁位置,并且在插入盒35之后将移动到锁定位置。
在其中封盖20是系统100的一部分的系统中,可在将系统100'上的电接口经由封盖电连接器连接到电源之前,将封盖20放在顶部。替代地,系统100’的电接口12d和13d可直接或间接地连接到电源。夹具、凸轮手柄、电极和节点/接口如本规范其他部分所示和所述。
在一些实施例中,一种执行凝胶电泳的方法包括:获得具有凝胶的电泳盒35;从电泳盒中取出凝胶梳;任选地用水或运行缓冲液冲洗孔;将电泳盒放置到本实用新型的系统100’或100的至少一个腔室10a或10b 中;将本实用新型的夹具28放置到腔室中并将凝胶盒夹持到腔室的表面的一部分上;将电泳缓冲液倒入通过夹持形成的第一缓冲液贮存器中;将电泳缓冲液倒入通过夹持形成的第二缓冲液贮存器中;将样品以及任选地对照品装载到凝胶的孔中;将系统的电节点/接口/连接件12d和13d(其电连接到腔室的电极)连接到电源;选择电源的电压和时间;对样品和对照品执行电泳。
在该方法的一些实施例中,凝胶盒与至少一个腔室的壁上的垫圈17 相邻地放置。
在一些实施例中,夹持步骤包括将本实用新型的夹具的凸轮手柄30 朝向凝胶盒35移动以将它们锁定在适当位置。
在一些实施例中,第一缓冲液贮存器和第二缓冲液贮存器含有相同的缓冲液。在一些实施例中,第一缓冲液贮存器和第二缓冲液贮存器含有不同的缓冲液。缓冲液的选择取决于凝胶基质和凝胶缓冲液的组成。
在一些实施例中,其中本实用新型的系统具有封盖20。在这些实施例中,将系统100中的电节点/接口/连接件12d和13d连接到电源的步骤包括:在夹持臂30a和30b被锁定之后,将封盖20放置到腔室上,使得封盖电连接件23a和24a以正确的极性连接到系统电极接口/节点/连接件12d和 13d;以及将封盖中的插头21连接到电源。
在一些实施例中,一种执行本实用新型的凝胶电泳的方法包括:获得具有凝胶的电泳盒;从电泳盒中取出凝胶梳;从电泳盒中取出条带;任选地用水或运行缓冲液冲洗孔;将电泳盒放置到本实用新型的用于电泳的系统的至少一个腔室中,其中凝胶的孔开口朝向阴极电极取向;将本实用新型的夹具放置到腔室中并将凝胶盒夹持到腔室的表面的一部分上,从而形成两个独立的贮存器,即阴极贮存器和阳极贮存器;将缓冲液倒入第一缓冲液贮存器,即阴极贮存器中;(阴极贮存器的缓冲液可任选地添加抗氧化剂);将缓冲液倒入第二缓冲液贮存器,即阳极贮存器中;将样品和对照品装载到凝胶盒的孔中;将系统的封盖放置到腔室上;将封盖上的电连接件连接到电源;选择电源的电压和时间;对样品和对照品执行电泳。
2)电转移方法
本实用新型还提供了电转移盒(40,40a-40i)以及电转移系统100和 100’。在一些实施例中,生物分子从凝胶到转移膜上的电转移所使用的凝胶是在任何电泳系统中运行的凝胶。在其他实施例中,本实用新型的电转移方法所使用的凝胶可以是在电泳系统100、100’或110中运行的凝胶,如上所述。
在一些实施例中,首先从电泳盒中移除已在其上执行电泳以解析生物分子的凝胶。这可包括用凝胶刀撬开或破开电泳盒并移除凝胶,然后再组装转移叠堆件。转移叠堆件通常包括浸泡在电转移缓冲液中的海绵和一个或多个滤纸层(或浸泡在电转移缓冲液中的任何多孔材料诸如凝胶/基质),之后是通过电泳解析的生物分子被放置到其上的凝胶,之后是转移膜(通常是硝化纤维素、PVDF、尼龙膜或任何多孔材料)、浸泡在电转移缓冲液中的一个或多个滤纸层和另一海绵的另一叠堆件(参见图 22B)。该叠堆可组装到电转移盒的一个板上。通常,具有阴极的电转移盒中的板是叠堆组装在其中的板。在本实用新型的一些实施例中,本实用新型的托盘被设计成将电转移盒置于打开位置并组装转移叠堆件(关于托盘和电转移盒在托盘中的放置,参见图22A)。本实用新型的托盘被设计成容纳过量的缓冲液,并避免在实验室工作台和桌子上溢出和弄脏。
图22A至图22F描绘了使用本实用新型的装置和系统进行的电转移的方法和步骤。在一个实施例中,一种执行生物分子的电转移的方法包括:获得生物分子通过电泳分离到其上的凝胶;将转移叠堆件组装到本实用新型的电转移盒的第二板上,包括将转印材料放置在凝胶顶部以及将滤纸和海绵进一步放置在转印材料和凝胶的上方和下方(图22B);将电转移盒的第一板闭合到第二板上(图22C);通过电转移盒上的锁定和密封机构在至少三个或更多个侧面上锁定和密封电转移盒(图22D或图10H);将电转移盒放置到本实用新型的系统的至少一个腔室中,该系统可执行电转移和电泳(图22D和图22E);将系统上的电连接件/节点/接口连接到电源(未描绘);在电源上选择转移电压和运行时间;执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。
在一个实施例中,锁定和密封是通过在电转移盒上滑动滑块以锁定和密封电转移盒来实现的(例如,图22C和图22D或图10H)。在另一实施例中,锁定和密封是通过将夹具夹持在电转移盒上以锁定和密封电转移盒来实现的(例如,图11A至图11C)。
在一些实施例中,密封形成不透液体的密封。在一些实施例中,在电转移盒的至少三个侧面上形成不透液体的密封(图22D或图10H)。在一个实施例中,将电转移盒放置到本实用新型的系统的腔室中包括:使电转移盒直立,使得接合侧(铰链/钩侧)位于系统的底部,而未密封的第四侧位于顶部(图22D或图10H)。在此阶段,该方法可包括任选地将电转移缓冲液倒入电转移盒顶部的开口中。在一些实施例中,不需要将附加的电转移缓冲液倒入电转移盒中,因为转移叠堆件具有足够的缓冲液。在其中本实用新型的系统具有封盖的实施例中,将系统上的电连接件连接到电源的步骤包括:将封盖放置到腔室上,使得封盖电连接件(诸如23a和 24a)与腔室电极连接件(诸如12d和13d)连接;以及将封盖上的电连接件(诸如21)连接到电源(图22F)。
在一些实施例中,通过将打开的电转移盒放置到托盘中来完成转移叠堆件在第二板中的组装,以避免缓冲液溢出在表面上(图22A和图 22C)。在一些实施例中,叠堆件组装的步骤包括以下步骤:将滤纸和海绵浸泡在转移缓冲液中;将转移缓冲液倒入第一板中;将海绵层、之后将滤纸放置在第二板上;将包含已解析生物分子(核酸或蛋白质)的凝胶以孔朝向电转移盒的底部侧面取向,并将该凝胶放置在滤纸上方;将转移膜放置在凝胶的顶部;使用辊来去除叠堆的每一层的任何气泡(图22B)。
在一些实施例中,叠堆件组装的步骤包括以下步骤:使用凝胶或基质或具有离子的材料;将包含已解析生物分子(核酸或蛋白质)的凝胶放置在凝胶/基质/具有离子的材料上方并以孔朝向电转移盒的底部侧面取向。本实施例涉及干阴极叠堆件组件的组装。在一些非限制性示例中,凝胶/基质/具有离子的材料可包含离子库或凝胶/基质/材料中非液体缓冲液的导电离子。
在一些实施例中,本实用新型提供了一种用于同时执行电转移和电泳两者的方法,该方法包括:将电泳盒利用夹具固定在本实用新型的系统的第一腔室中;将待电泳的包含生物分子的样品装载到电泳盒中;将具有转移叠堆件的电转移盒放置到本实用新型的系统的第二腔室中,该转移叠堆件具有带生物分子的凝胶和生物分子期望电转移到其上的转印材料;使用电源装置选择电压和任选地选择期望电压运行的时间;在电泳盒中执行电泳并执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。在一些实施例中,由于使用公共电压,电泳和电转移在不同时间进行。
实例
实例1:使用不同凝胶化学物质进行的电泳
本实用新型的电泳系统和装置用于对几种不同的凝胶化学物质和制剂执行电泳。表格1提供了对于浇铸为中型凝胶的凝胶的各种类型的凝胶化学物质,电泳期间的一些非限制性的示例性运行条件。下表格中的电流值适用于一种凝胶。如果运行两种凝胶,电流将增加一倍。需注意,电流值和行时间值是近似值,会因凝胶百分比和用于电泳的电源而异。
表格1:
实例2:与现有电转移装置相比的电转移系统、装置和方法的性能
在电转移实验中,将本实用新型的电转移系统与Bio-Rad’s Criterion 槽式转印(电转移)系统进行比较。在一些实施例中,与Bio-Rad Criterion槽相比,本实用新型的电转移系统以低得多的电压、电流和功率执行蛋白质的电转移。在一个示例中,在两个系统中使用一种NuPAGE中型凝胶执行电转移得到以下结果:
本实用新型的系统中的电转移在25V/725mA/18.1W下执行(注: 25V*0.725A=18.1W)
相比之下,Bio-Rad’s Criterion槽式转印机中的电转移需要高得多的电压和功率(100V/930mA/93.0W)。
因此,与现有系统相比,本实用新型的电转移系统可使用更低功率以及因此更便宜的电源单元。例如,在本实用新型的电转移系统和盒中,可使用3A电源来执行四种NuPAGE微型凝胶中的蛋白质的电转移。
实例3:电转移系统和装置的组装和性能
在电转移实验中,将本实用新型的电转移系统与Thermo Fisher微型印迹模块B1000(其是现有的电转移系统)进行比较,以通过进行实验以研究比较泄漏率来分析不透液体的密封。定时泄漏试验执行如下:
1.润湿电转移系统单元,以在水下运行时打开和闭合装置。每次泄漏试验前,确保单元湿润。
2.在测量之前,构建电转移叠堆件并将所有部件完全浸透在水中:
1)1)润湿海绵(数量2)。
2)润湿滤纸(数量4)
3)按以下顺序组装电转移叠堆件:海绵(x1)、滤纸(x4)和海绵(x1)
4)用转印辊滚动每一层,移除每一叠堆之间的任何气泡。
3.用托盘去皮称重,电转移系统单元将放置在托盘中
4.将计时器设置为至少30分钟的不同时间间隔,其中30分钟是电转移的建议时间。
5.闭合并夹持电转移系统
6.摇晃/敲掉多余的水
7.将电转移系统直立在秤上的托盘中
8.加水至加水线底部
9.启动计时器
10.通过将电转移系统从托盘中提起并记录可能泄漏到托盘中的水的重量来记录泄漏率。
表格2和表格3分别提供了现有的Thermo Fisher微型印迹模块B1000 对本实用新型的示例性电转移系统的结果。从表格2和表格3中可以看出,虽然现有的微型印迹模块的平均重量为9.9675克,但表格3中本实用新型的电转移系统在不同时间间隔的0-30分钟测量中没有泄漏。
表格2:Thermo Fisher微型印迹模块B1000的泄漏试验结果:
注意事项:微型印迹模块1、2、3和4是用于实验的不同电转移单元
表格3:本实用新型的示例性电转移系统的泄漏试验结果:
注意事项:DVT#1、#2和#3是用于实验的不同电转移单元。
实例4:电转移系统和装置的性能
在电转移实验中,本实用新型的电转移系统通过在80℃下处理电转移系统不同小时数以模拟“实时老化”,从而经受“加速老化”这些设备也要经过转移运行、重复夹持和打开以及转移缓冲来模拟随时间推移的实际使用。通过进行实验以研究比较泄漏率,分析了老化单元的不透液体的密封性能与其“老化”的关系。定时泄漏试验的设置如上述实例3中所述进行。下面的表格4列出了与老化有关的泄漏率数据。如表格4所示,“老化”时间与电转移单元在货架上的等效时间相关。例如,时间=0对应于80℃下不老化,时间=1个月对应于在80℃下老化14.39小时。时间=24个月对应于在80℃下老化345.36小时等。该实验证明,即使老化,本实用新型的电转移系统的泄漏率也比现有系统的泄漏率低得多。
表格4:加速寿命试验—本实用新型的示例性电转移系统的泄漏试验:*DVT单元的年龄在0-24个月之间
由于在30分钟泄漏试验中测试的现有系统是较旧的使用系统,因此它们相当于本实用新型的电转移系统,这些电转移系统经受了如上所述的加速老化。下面的表格5和表格6提供了本实用新型的加速老化电转移系统与从上表格中提取的较旧的现有系统相比的30分钟泄漏试验的数据汇总,以便更轻松地比较30分钟性能。
表格5:
表格6:
从30分钟泄漏试验的数据汇总中可以看出,现有的微型印迹模块 B1000系统具有9.97g的30分钟泄漏率,而本实用新型的电印迹系统的一些试验具有1.09g的泄漏率。
本说明书中提及的所有公开案、专利和专利申请以引用方式并入本文,就像每个单独的公开案、专利或专利申请被具体和单独地指明以引用方式并入本文中一样。
虽然已在本文示出和描述本实用新型的实施例,但本领域的普通技术人员应清楚,此类实施例仅是作为实例而提供的。本领域的技术人员现在将在不脱离本实用新型的情况下意识到多种变型、变化和取代。应该理解的是,可在实践本实用新型时采用在本文中所描述的本实用新型的实施例的各种替代方案。意图在于仅由以下权利要求限定本实用新型的范围,并且由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同物。
Claims (42)
1.一种电泳和电转移系统,其特征在于,其包括:
至少两个腔室;
每个腔室独立地构造成可拆卸地且可互换地接纳电泳盒或电转移盒;
第一电极;以及
第二电极,
其中所述电极具有电接口,所述电接口可连接到电源。
2.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述两个腔室背靠背布置,所述两个腔室彼此相邻,或者所述两个腔室串联布置。
3.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述两个腔室被它们之间的至少一个共同的表面分开。
4.根据权利要求3所述的电泳和电转移系统,其中所述共同的表面是所述两个腔室的至少一部分之间的壁。
5.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述两个腔室被所述两个腔室之间的空间分开。
6.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极和所述第二电极在每个腔室中具有接口,使得每个腔室具有阳极和阴极。
7.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其特征在于,其进一步包括:
封盖,所述封盖构造成覆盖所述两个腔室,所述封盖包括:
电连接件,所述电连接件能够可拆卸地连接到电源;
一个或多个电接触件,所述一个或多个电接触件构造成在所述封盖放置在所述两个腔室上时,与所述第一电极和所述第二电极电连接,以针对所述两个腔室中的每一个,使所述电极之间的电路完整。
8.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中每个腔室具有第一内表面和第二内表面。
9.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其特征在于,其进一步包括垫圈,所述垫圈位于所述第一内表面的一部分上或与所述第一内表面相邻。
10.根据权利要求9所述的电泳和电转移系统,其中所述垫圈为至少三面垫圈。
11.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述电泳盒包括两个平行板,在所述两个板之间封闭有凝胶。
12.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中每个腔室被进一步构造成独立地接纳夹持机构,所述夹持机构可被操作为将所述电泳盒夹持在所述腔室中。
13.根据权利要求12所述的电泳和电转移系统,其中每个腔室包括垫圈,所述夹持机构可被操作为将所述电泳盒夹持到每个腔室的所述垫圈。
14.根据权利要求12所述的电泳和电转移系统,其中将所述电泳盒放置和夹持到所述两个腔室中的一个腔室中,可在所述腔室中形成两个流体地隔开的子腔室。
15.根据权利要求14所述的电泳和电转移系统,其中每个腔室具有第一内表面,包括垫圈,所述电泳盒包括两个平行板,在所述第一内表面的一部分、所述垫圈的一部分和面向所述腔室的所述第一内表面的所述电泳盒的所述板之间形成第一子腔室。
16.根据权利要求14所述的电泳和电转移系统,其中每个腔室具有第二内表面,所述电泳盒包括两个平行板,在凝胶盒的左侧面和右侧面、面向所述第二内表面的所述凝胶盒的所述板的外边缘以及所述电泳盒和夹具被放置到其中的所述腔室的其余部分之间形成第二子腔室。
17.根据权利要求14所述的电泳和电转移系统,其中所述子腔室用作缓冲液贮存器。
18.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极跨越两个腔室并且被构造成电接触所述电转移盒上的电接口。
19.根据权利要求18所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极具有进入每个腔室的电延伸部,所述电延伸部在电泳期间用作阳极。
20.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极为阳极。
21.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第二电极具有构造成接触所述电转移盒上的第二电极接口的延伸部。
22.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第二电极为阴极。
23.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第二电极具有在每个腔室中用作阴极的延伸部。
24.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极连接到第一电节点,并且其中所述第二电极连接到共同的第二电节点。
25.根据权利要求24所述的电泳和电转移系统,其中还包括封盖,所述第一电节点和所述第二电节点位于所述腔室的与所述封盖接触的部分上。
26.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述第一电极进一步包括线,所述线沿着每个腔室的底部延伸。
27.根据权利要求7所述的电泳和电转移系统,其中所述封盖进一步包括电缆缠绕特征部,以在储存期间缠绕电缆。
28.根据权利要求7所述的电泳和电转移系统,其中所述封盖包括机械特征部,所述机械特征部与所述腔室的顶部上的互补机械特征部相互作用,使得所述封盖上的所述电接触件与第一电节点和第二电节点以一定取向连接,所述取向在所述系统被使用期间防止电极发生反转。
29.根据权利要求7所述的电泳和电转移系统,其中所述封盖包括颜色编码的特征部,所述颜色编码的特征部可被操作为以允许封盖电接触件与相应的第一电节点和第二电节点连接的取向覆盖所述腔室,所述取向防止电极在使用期间发生反转。
30.根据权利要求7所述的电泳和电转移系统,其中可拆卸地连接到所述电源的所述电连接件包括可插入所述电源中的一根或多根电缆。
31.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中所述电源在所述腔室的外部。
32.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中两个腔室都具有电泳盒和夹具。
33.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中两个腔室都具有电转移盒。
34.根据权利要求1所述的电泳和电转移系统,其中一个腔室具有电泳盒和夹具且另一腔室具有电转移盒。
35.一种用于执行凝胶电泳的系统,其特征在于,所述系统包括:
基部,所述基部包括两个腔室;
每个腔室构造成独立地接纳电泳盒;
每个腔室构造成独立地接纳用于将所述电泳盒固定到每个腔室的表面的夹具;
每个腔室具有连接在共同的第一电节点处的第一电极;
每个腔室具有连接在共同的第二电节点处的第二电极;
可拆卸的封盖,所述可拆卸的封盖提供与电源的电连接性;并且
所述封盖具有电连接器,以在放置在所述基部上方时,使腔室电极之间的电路完整。
36.根据权利要求35所述的用于执行凝胶电泳的系统,其特征在于,其包括一个电泳盒或两个电泳盒。
37.根据权利要求35所述的用于执行凝胶电泳的系统,其中所述第一电极包括位于每个腔室中的电极丝。
38.根据权利要求37所述的用于执行凝胶电泳的系统,其中当所述封盖被放置在所述基部上时,共同的第一电节点和所述共同的第二电节点与所述封盖的电连接器进行电接触。
39.一种用于执行电转移的系统,其特征在于,所述系统包括:
基部,所述基部包括:
两个腔室;
单个第一电极,所述单个第一电极跨越所述基部的所述两个腔室,连接到位于所述基部的顶部侧面上的第一电节点;
第二电极,所述第二电极位于每个腔室中,两个第二电极连接在位于所述基部的所述顶部侧面上的共同的第二电节点处;
每个腔室构造成独立地接纳电转移盒,
所述电转移盒包括:
两个板,所述两个板通过至少一个铰链接合,所述至少一个铰链构造成允许所述两个板在打开位置和闭合位置之间移动;
滑块,所述滑块可被操作为将所述两个板锁定在所述闭合位置并将所述两个板密封在所述闭合位置以在至少三个侧面上形成不透液体的密封;
第二板,所述第二板构造成在其内部侧面上接纳转移叠堆件的部件;并且
第一板和所述第二板的外部侧面包括至少一个电连接件,所述至少一个电连接件各自连接到位于每个板的内侧上的电极,其中
所述第一板和所述第二板上的所述电连接件与所述腔室的所述第一电极和所述第二电极电接触;以及
可拆卸的封盖,所述可拆卸的封盖覆盖所述基部,
封盖,所述封盖提供与电源的电连接性;并且
所述封盖具有电连接器,当所述电转移盒被放置在所述基部中并且所述封盖覆盖所述基部时,所述电连接器与所述电转移盒的所述电连接件电连接以使电路完整。
40.根据权利要求39所述的用于执行电转移的系统,其特征在于,其包括一个电转移盒。
41.根据权利要求39所述的用于执行电转移的系统,其特征在于,其包括两个电转移盒。
42.一种电泳和电转移系统,其特征在于,其包括:
至少两个腔室;
每个腔室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒;
第一电极;
第二电极;以及
封盖,所述封盖构造成覆盖所述两个腔室,所述封盖包括:
电连接件,所述电连接件能够可拆卸地连接到电源;
一个或多个电接触件,所述一个或多个电接触件构造成在所述封盖放置在所述两个腔室上时,与所述第一电极和所述第二电极电连接,以针对所述两个腔室中的每一个,使所述电极之间的电路完整
其中所述电极具有电接口,所述电接口可连接到电源。
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