CN217688978U - 一种血液胰岛素水平的快速检测结构 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种血液胰岛素水平的快速检测结构,为毛细虹吸采样结构、检测液装载结构和层析检测结构的组合套装，毛细虹吸采样结构为一种两端开口的毛细虹吸定量管状结构，其中一端开口可直接用于血液样本的定量采集，层析检测结构所包含的检测试剂条中的标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体，适用于末梢微量血样的血液胰岛素水平的测定，提高了检测效率、便捷性和准确性，具有重要的临床意义。

Description

一种血液胰岛素水平的快速检测结构

技术领域

本实用新型涉及医疗器械技术领域，尤其涉及一种血液胰岛素水平的快速检测结构。

背景技术

胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞分泌的一种蛋白质激素，由A和B两个肽链组成，受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的调节。胰岛素是人体促进合成代谢的最重要的蛋白质激素，对糖代谢可促进组织细胞对葡萄糖的摄取和利用，促进糖原合成，抑制糖异生，使血糖降低；对脂肪代谢可促进脂肪酸合成和脂肪贮存，减少脂肪分解；对蛋白质可促进氨基酸进入细胞，促进蛋白质合成的各个环节以增加蛋白质合成。

免疫学检测技术是目前常用的血液胰岛素水平检测方法，有免疫比浊法、化学发光法、酶联免疫法、化学发光免疫分析法、时间分辨免疫荧光法、量子点免疫荧光层析法、胶乳免疫比浊法、胶乳增强免疫比浊法、荧光免疫层析法等。高灵敏度、快速、便捷、小型化、全定量、自动化是目前临床免疫检测技术的发展趋势。床旁快检（POCT）是目前免疫学检测技术领域发展最快的一个分支，层析免疫检测是其最常用的检测方法，其中胶体金层析、荧光层析和乳胶微球层析技术的产品使用最广，但血液胰岛素水平的检测仍以免疫比浊法和化学发光法为主，虽然免疫层析法也有使用，但并没有从采样、检测到结果判读一体化的检测技术，使其检测仍限于检验室和专业人员操作使用，无法向家庭和缺乏相应检测条件的医疗机构推广使用。大量的研究证明，胰岛素已经成为直接影响包括糖尿病在内的各种代谢相关疾病及不良健康状态的蛋白质激素及重要的调节指标和标志物，适用于各种院内和院外的疾病及健康状态检测，因此，开发可用于居家自测和缺乏相应检测条件的医疗机构检测使用，同时又具有操作简便、使用快捷、成本低廉的血液胰岛素水平快速检测技术，利于提高医疗质量和效率，具有重要的临床意义和应用价值。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种血液胰岛素水平的快速检测结，与现有技术比较，具有检测操作方便、快速、成本低等优点，提高了检测质量。

针对上述目的，本实用新型提供的一种血液胰岛素水平的快速检测结构,其特征在于：

1）所述快速检测结构为毛细虹吸采样结构、检测液装载结构和层析检测结构的组合套装；

2）所述毛细虹吸采样结构由毛细虹吸定量结构和固定所述毛细虹吸定量结构的固定结构组成，两者间为非拆装式的固定连接且所述固定结构一侧为非密闭式结构；

3）所述层析检测结构包括检测试剂条、位于所述检测试剂条外侧的检测外壳和位于所述检测外壳起始端的加样连接结构；

4）所述检测试剂条包括样本垫、标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中所述样本垫位于所述加样连接结构的对应位置并与其形成液相交通连接，所述标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体；

5）所述毛细虹吸定量结构为两端开口的管状结构，其中一端开口与所述样本垫连接，所述定量为被采集血液样本的体积，以所述管状结构的整体容积为样本的定量体积，选择1-30微升；

6）所述检测液装载结构为设置有滴加液体的出液口的装载液相的容器结构，不与所述层析检测结构直接固定连接；

7）所述检测液装载结构内装载有检测液相，所述检测液相为水溶性缓冲盐溶液。

所述层析检测结构的加样连接结构包括与保护套样结构形成连接的连接结构、位于层析检测结构上的加样窗或加样孔。

所述检测液装载结构设置的滴加液体的出液口为不同出液口径的滴头，滴出液的定量可以通过口径的大小进行调节控制。

上述快速检测结构中，所述毛细虹吸采样结构与所述层析检测结构为相互直接连接的组合结构，所述毛细虹吸定量结构位于所述层析检测结构的近端并固定连接，且其远端开口与所述样本垫连接并形成液相交通，近端呈游离状态并在采样时能够将近端开口伸入到血液样本内，所述层析检测结构同时作为所述毛细虹吸定量结构的所述固定结构使用；所述近端设置有可拆装式的保护套样结构，所述保护套样结构设置有加样孔，与所述毛细虹吸定量结构的近端开口位于所述保护套内，直接与所述加样孔形成液相交通，所述检测液装载结构的出液口位于所述保护套的外部，直接与所述加样孔形成可拆装式的液相交通。

上述快速检测结构中，所述毛细虹吸采样结构与所述层析检测结构为可相互移动形成可拆装式连接的组合结构，所述毛细虹吸定量结构和所述固定结构直接固定连接，形成可以手持采样的所述毛细虹吸采样结构，此时所述固定结构作为采样时的采样手柄使用，所述固定结构的另一端呈游离状态的所述毛细虹吸定量结构并在采样时能够将所述毛细虹吸定量结构的游离端开口伸入到血液样本内采样；所述层析检测结构近端设置有所述加样连接结构，在位于与所述样本垫相对应的位置上设置有加样开口，与所述毛细虹吸定量结构的游离端开口直接与所述加样开口形成液相交通，所述检测液装载结构的出液口直接与所述加样开口形成液相交通。

上述快速检测结构中，所述检测试剂条上设置有血细胞过滤结构，包括血细胞过滤膜和红细胞抗体处理膜垫的至少一种。

上述快速检测结构中，所述毛细虹吸定量结构选择毛细滴加定量管状结构，由手柄和连接手柄的滴头组成，所述滴头开口端的横截面积选择0.10-3.0平方毫米。

上述快速检测结构中，所述检测试剂条为胶体金免疫检测试剂条、荧光免疫检测试剂条、乳胶微球免疫检测试剂条的至少一种，所述指示剂为彩色微球和荧光物质的至少一种。

上述快速检测结构中，所述快速检测结构配置有与所述指示剂颜色一致的半定量比色卡，所述比色卡上印制有3个及以上的不同颜色深度的比色条带。

上述快速检测结构中，所述快速检测结构配置有便携式的定量检测仪，包括色度定量分析仪和荧光定量分析仪的至少一种。

上述快速检测结构中，所述快速检测结构包括刺血针和酒精消毒片。

上述快速检测结构中，所述检测试剂条的制备还包括生物素/亲和素反应系统，所述标记物结合垫上包被有由所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体和生物素标记第二抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的亲和素及其类似物。此时待检样本中的胰岛素同时与所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体和生物素标记第二抗胰岛素抗体结合，形成所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体-胰岛素-生物素标记第二抗胰岛素抗体复合物，然后流经亲和素包被的硝酸纤维素膜，被捕获形成所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体-胰岛素-生物素标记第二抗胰岛素抗体-亲和素复合物，在包被条带上聚集并显示可见的颜色或荧光，作为定量或半定量的依据。亲和素及其类似物包括亲和素、链亲和素及其它具有与生物素特异性结合的物质。

上述快速检测结构中，所述快速检测结构的操作使用，包括如下步骤：

1）取出层析检测结构、毛细虹吸采样结构、检测液装载结构、刺血针和酒精消毒片，暴露毛细虹吸定量结构开口端采样头；

2）取酒精消毒片给指尖采血部位消毒，用刺血针穿刺；

3）将毛细虹吸定量结构开口端采样头插入血样内，自然虹吸血液样本并吸满毛细虹吸定量结构的管状结构；

4）转移管状结构内的血液样本至检测试剂条样本垫；

5）定量添加检测液相至样本垫并与血液样本混合，向前流经标记物结合垫、血细胞过滤结构、硝酸纤维素膜、吸水垫；

6）从观察窗口读取检测结果，完成检测。

上述快速检测结构在血液胰岛素水平快速检测产品开发中的应用。

上述快速检测结构中，所述快速检测结构的操作使用，还包括如下步骤：

1）取出层析检测结构、毛细虹吸采样结构、检测液装载结构、刺血针和酒精消毒片，暴露毛细虹吸定量结构开口端采样头；

2）取酒精消毒片给指尖采血部位消毒，用刺血针穿刺；

3）将毛细虹吸定量结构开口端采样头插入血样内，自然虹吸血液样本并吸满毛细虹吸定量结构的管状结构；

4）将管状结构内的血液样本与检测液混合，定量转移混合液至检测试剂条样本垫；

5）流经标记物结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；

6）从观察窗口读取检测结果，完成检测。

所述检测试剂条为PVC底片上依次粘贴的样本垫、标记物结合垫、血细胞过滤过滤结构、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述检测试剂条放置于检测外壳内，检测外壳选择刚性结构或柔性结构。

本实用新型由于采取以上技术方案，其具有以下优点：

1、本实用新型为一种血液胰岛素水平的快速检测结，包括毛细虹吸采样结构、检测液装载结构和层析检测结构的组合套装以及采样用的刺血针和酒精消毒片，可一次性完成从样本采集到完成检测的全过程，这样可以显著提高临床检测的及时性和普及推广的可行性，提高临床诊治效果。

2、本实用新型采用毛细虹吸定量结构，通过毛细虹吸管内的容积控制样本的采集量，而且采集的微量，即微升级的量，同时采集过程是自然虹吸，不需要专用的定量设备，使为定量可行且便于操作，实现了技术产品的便检和快速的可操作性。

3、本实用新型检测用血液样本量很少，仅为1-30微升，与末梢血糖检测用的样本量类似，显著提高了检测技术产品被用户接受的顺应性。

4、本实用新型设置了用于半定量检测的检测条带颜色强度的比色卡，可以通过比色卡比对进行检测结果的半定量判断，适用于不需要精准定量，只需观察血液胰岛素水平变化趋势的临床应用场景，提高了临床应用价值。

5、本实用新型设置了用于半定量检测的检测条带颜色强度的比色卡，可以通过比色卡比对进行检测结果的半定量判断，适用于不需要精准定量，只需观察血液胰岛素水平变化趋势的临床应用场景，提高了临床应用价值。

6、本实用新型操作步骤简单，易于实现家庭化使用或自我检测，不仅使用方便、减少原料的浪费，同时也显著提高工作效率，可以应用于专业和业余检测的诸多领域。

附图说明

图1为本实用新型的整体结构示意图；

图2为本实用新型的毛细虹吸采样结构与层析检测结构一体化的组合结构纵切面示意图；

图3为本实用新型的毛细虹吸采样结构与层析检测结构一体化使用状态的组合结构示意图；

图4为本实用新型的毛细虹吸定量采样结构示意图；

图5为本实用新型的层析检测结构示意图；

图6为本实用新型的毛细虹吸采样结构与层析检测结构可拆装式组合使用状态的结构示意图；

图7为本实用新型的检测液装载结构示意图；

图8为本实用新型的毛细虹吸采样结构与检测液装载结构可拆装式的组合结构示意图；

图9为本实用新型的检测试剂条结构示意图；

图10为本实用新型的毛细滴加定量采样结构示意图；

图11为本实用新型的毛细滴加定量采样结构与层析检测结构可拆装式组合使用状态的结构示意图；

图12为本实用新型的检测液装载结构与层析检测结构可拆装式组合使用状态的结构示意图；

图13为本实用新型的半定量比色卡示意图。

图中标记如下：

毛细虹吸采样结构1；检测液装载结构2；层析检测结构3；毛细虹吸定量管状结构4；检测液装载容器5；检测液滴头6；检测液7；保护套结构8；加样窗9；检测连接结构10；观察窗11；检测试剂条12；检测外壳上盖13；检测外壳底座14；采样手柄15；毛细虹吸管状固定结构16；毛细虹吸管状结构交通开孔17；可拆装式层析检测结构底座18；可拆装式层析检测结构上盖19；可拆装式层析检测结构加样孔20；可拆装式层析检测结构观察窗21；检测液装载容器管盖22；检测试剂条样本垫23；检测试剂条标记物结合垫24；检测试剂条硝酸纤维素膜垫25；检测试剂条吸水垫26；检测试剂条PVC底片27；毛细滴加定量管状结构滴头28；半定量比色卡29。

具体实施方式

为更进一步阐述本实用新型为达成预定目的所采取的技术手段及功效，以下所述实施例结合附图对本实用新型进行进一步说明，但本实用新型并不局限于以下说明。

如图1所示，本实用新型整体结构包括毛细虹吸采样结构1、检测液装载结构2和层析检测结构3，其中毛细虹吸采样结构1包含有毛细虹吸定量管状结构4，定量采样过程由定量管状结构4的虹吸定容过程完成；检测液装载结构2包含有检测液装载容器5、检测液滴头6和检测液7；层析检测结构3包含有加样窗9、观察窗11、检测试剂条12、检测外壳上盖13和检测外壳底座14，检测试剂条12放置于检测外壳底座14和检测外壳上盖13形成的内腔并可通过加样窗9加样，观察窗11观察检测结果。

如图2所示，本实用新型的毛细虹吸采样结构与层析检测结构一体化的组合结构，毛细虹吸定量管状结构4由层析检测结构3近端固定形成层析检测结构3内的固定段4A和层析检测结构3外的游离段4B，固定段4A的开口端与层析检测结构3的样本垫连接并形成液相交通，游离段4B呈游离状态并在采样时能够将游离端开口伸入到血液样本内，层析检测结构3同时作为毛细虹吸定量结构的固定结构使用；近端设置有可拆装式的保护套样结构8，保护套样结构8上设置有加样孔9，毛细虹吸定量结构4的近端（游离端4B）开口位于保护套样结构8内，直接与加样孔9形成液相交通。

如图3所示，本实用新型的毛细虹吸采样结构与层析检测结构一体化使用状态的组合结构，包括保护套样结构8插入检测连接结构10，形成毛细虹吸采样结构1和层析检测结构3的一体化结构，其中毛细虹吸定量结构4的近端（游离端4B）开口位于加样孔9，与加样孔9形成液相交通连接，通过观察窗11观察检测结果。

如图4所示，本实用新型的毛细虹吸定量采样结构，包括采样手柄15、毛细虹吸管状固定结构16、毛细虹吸管状结构交通开孔17和毛细虹吸定量结构4，其中毛细虹吸定量结构4为两端开口的毛细管状结构，通过毛细虹吸管状固定结构16固定并与采样手柄15连接，在采样手柄15的上端设置有毛细虹吸管状结构交通开孔17，以保证毛细虹吸定量结构4的非采样开口端为非密闭式结构。毛细虹吸定量结构4和固定所述毛细虹吸定量结构4的固定结构16之间为非拆装式的固定连接。毛细虹吸定量结构4的一端开口与检测试剂条的样本垫连接，另一端开口伸入待检血液样本内采样，其中定量为被采集血液样本的体积，以毛细管状结构的整体容积为样本的定量体积，选择1-30微升。

如图5、图6所示，本实用新型的层析检测结构及与毛细虹吸采样结构形成可拆装式组合使用状态的结构，其中层析检测结构包括可拆装式层析检测结构底座18和可拆装式层析检测结构上盖19，设置于可拆装式层析检测结构上盖19上的可拆装式层析检测结构加样孔20和可拆装式层析检测结构观察窗21以及与加样孔20和观察窗21所对应位置的放置于可拆装式层析检测结构底座18上的检测试剂条12；毛细虹吸采样结构包括采样手柄15、毛细虹吸管状固定结构16、与固定结构16固定连接的毛细虹吸定量管状结构4以及位于采样手柄15上端的毛细虹吸管状结构交通开孔17；可拆装式组合使用状态的结构为毛细虹吸定量管状结构4与可拆装式层析检测结构加样孔20之间的可拆装式液相交通连接。具体使用时将层析检测结构平面放置，用手持采样手柄15，保持交通开孔17为开放状态，将毛细虹吸定量管状结构4的游离端开口插入血液样本中，使血液样本自然虹吸吸满定量管状结构4，移动定量管状结构4至可拆装式层析检测结构加样孔20，向加样孔内的检测试剂条12释放全部血液样本。

如图7、图12所示，本实用新型的检测液装载结构及与层析检测结构形成的可拆装式组合使用状态的结构，其中检测液装载结构2包含有检测液装载容器5、位于顶端的检测液滴头6、装载于检测液装载容器5内的检测液7和检测液装载容器管盖22；可拆装式组合使用状态的结构为检测液滴头6与可拆装式层析检测结构加样孔20之间的可拆装式液相交通连接。具体使用时将层析检测结构平面放置，用手持检测液装载容器5，保持检测液滴头6的方向向下，至可拆装式层析检测结构加样孔20，向加样孔内的检测试剂条12滴加检测液7。

如图7、图8所示，本实用新型的毛细虹吸采样结构与检测液装载结构可拆装式的组合结构，为毛细虹吸定量管状结构4与检测液装载容器5之间的可拆装式液相交通连接。具体使用时将检测液装载容器5平面放置，用手持采样手柄15，保持交通开孔17为开放状态，将毛细虹吸定量管状结构4的游离端开口插入血液样本中，使血液样本自然虹吸吸满定量管状结构4，移动定量管状结构4至检测液装载容器5的检测液7内，向检测液7内释放全部血液样本。

如图1、图2、图5、图9所示，本实用新型的检测试剂条结构，包括检测试剂条样本垫23、检测试剂条标记物结合垫24、检测试剂条硝酸纤维素膜垫25和检测试剂条吸水垫26，由近及远依次贴附在检测试剂条PVC底片27上，与层析检测结构依次对应的位置为检测试剂条样本垫23在加样窗9或可拆装式层析检测结构加样孔20的对应位置，检测试剂条硝酸纤维素膜垫25在观察窗11或可拆装式层析检测结构观察窗21的对应位置；检测试剂条标记物结合垫24上包被有由第一抗胰岛素抗体标记的胶体金微粒、彩色乳胶微粒或荧光微球、荧光素的指示剂标记结合物；检测试剂条硝酸纤维素膜垫25上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体。

如图10、图11所示，本实用新型的毛细滴加定量采样结构及与层析检测结构可拆装式组合使用状态的结构，本实用新型的毛细虹吸定量采样结构，包括采样手柄15、固定结构16和毛细滴加定量管状结构滴头28，其中毛细滴加定量管状结构滴头28为末端开口的毛细管状结构，通过固定结构16固定并与采样手柄15连接，滴头28末端的横截面积选择0.10-3.0平方毫米。具体使用时将层析检测结构平面放置，用手持采样手柄15，将毛细滴加定量管状结构滴头28插入血液样本中，吸取一定量的待检血液样本，毛细滴加定量管状结构滴头28至可拆装式层析检测结构加样孔20，向加样孔内的检测试剂条12滴加一定滴数的血液样本。

如图13所示，本实用新型的半定量比色卡29，为卡上印制有10个不同梯度颜色深度的与指示剂同类颜色线条的比色卡。

这样在实际操作时，当本实用新型快速检测结构为胶体金免疫检测结构时，检测试剂条11用胶体金法制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有胶体金标记第一抗胰岛素抗体的胶体金结合垫、血细胞过滤结构、包被有非标记第二抗胰岛素抗体的硝酸纤维素膜垫和吸水垫；当本实用新型快速检测结构为乳胶微球免疫检测结构时，检测试剂条11用乳胶微球免疫法制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有乳胶微球标记物的乳胶微球结合垫、血细胞过滤结构、包被有非标记捕获试剂的硝酸纤维素膜垫和吸水垫；当本实用新型快速检测结构为荧光免疫检测结构时，检测试剂条11用荧光免疫法以荧光微球或荧光素为指示剂进行制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有乳胶微球标记物的乳胶微球结合垫、血细胞过滤结构、包被有非标记捕获试剂的硝酸纤维素膜垫和吸水垫。

半定量检测具体操作包括如下步骤：1）取出层析检测结构3、毛细虹吸采样结构1、检测液装载结构2、半定量比色卡29、刺血针和酒精消毒片，暴露毛细虹吸定量结构开口端采样头；2）取酒精消毒片给指尖采血部位消毒，用刺血针穿刺；3）将毛细虹吸定量结构开口端4B采样头插入血液样本内，自然虹吸血液样本并吸满毛细虹吸定量结构的管状结构；4）转移管状结构内的血液样本至检测试剂条样本垫；5）定量添加检测液相至样本垫并与血液样本混合，向前流经标记物结合垫、血细胞过滤结构、硝酸纤维素膜、吸水垫；6）从观察窗口读取检测结果，与半定量比色卡29比对检测线的颜色深度，读取半定量范围值，完成检测。

定量检测具体操作包括如下步骤：1）取出层析检测结构3、毛细虹吸采样结构1、检测液装载结构2、定量检测仪、刺血针和酒精消毒片，暴露毛细虹吸定量结构开口端采样头；2）取酒精消毒片给指尖采血部位消毒，用刺血针穿刺；3）将毛细虹吸定量结构开口端4B采样头插入血液样本内，自然虹吸血液样本并吸满毛细虹吸定量结构的管状结构；4）转移管状结构内的血液样本至检测试剂条样本垫；5）定量添加检测液相至样本垫并与血液样本混合，向前流经标记物结合垫、血细胞过滤结构、硝酸纤维素膜、吸水垫；6）将层析检测结构3置于定量检测仪，读取检测结果，定量计算测定值，完成检测。

本实用新型的实验研究：下述实验说明本实用新型的检测方法及其效果，但不是对本实用新型的限定。下述实验中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实验一：免疫胶体金法血液胰岛素快速检测实验：

一、检测试剂条制备：

采用常规免疫胶体金检测技术双抗体夹心法制备检测试剂条，采用本实用新型快速检测结构制备检测试剂盒进行胰岛素检测实验，其中检测试剂条的检测线T的胶体金标记指示抗体为10ug/ml的抗胰岛素单克隆抗体，采用粒径50nm的胶体金颗粒，包被在玻璃纤维素膜胶体金结合垫上；检测试剂条的检测线T的捕获抗体为1.0mg/ml的配对的抗胰岛素单克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上；检测试剂条的质控线C的捕获抗体为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上，用于捕获未被特异性捕获的胶体金标记抗胰岛素单克隆抗体。在硝酸纤维素膜垫印膜两端分别粘贴吸水垫及胶体金标记结合垫，在胶体金标记结合垫一侧粘贴样本垫。置粘贴好的检测片于切条机上，切成 3.5mm的检测试剂条。

二、本实用新型快速检测结构制备：

采用Solidworks设计本实用新型快速检测结构检测外壳的上盖、底座和保护套样结构并用3D打印样品，采用市售毛细管并切割为10mm，约10ul，采用小型实验使用的保存管作为稀释液装载容器，制备的快速检测结构样品用于实验检测。印制不同颜色深度的红色比色卡。

三、实验方法及结果：

实验时取上述制备的检测试剂条和快速检测结构，装配成一体化的检测结构，将装配好的检测结构放入有干燥剂的铝箔密封袋内，在封口机上封口，加贴标签。印制10个不同颜色深度的紫红色比色卡。用10mM的磷酸缓冲盐溶液配置1、5、10、15、20、25、30 uIU/ml的长秀霖重组甘精胰岛素注射液（100 IU/ml）。取地特胰岛素溶液100ul，直接滴加不同浓度的地特胰岛素溶液至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果对应的浓度范围，结果比色卡紫红色线条1号对应5uIU/ml，2号为10uIU/ml，3号为15uIU/ml，4号为20uIU/ml，5号为25uIU/ml，6号为30uIU/ml。

用制备的快速检测结构样品的虹吸采样管分别采集10例健康捐献者的空腹和餐后2小时末梢血液10ul，分别直接加载至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果的浓度范围，结果空腹在5-15uU/ml左右，餐后2小时在15-25uU/ml左右，符合正常人检测范围。

实验二：乳胶微球免疫层析法胰岛素快速检测实验：

一、检测试剂条制备：

采用常规乳胶微球免疫层析技术双抗体夹心法制备检测试剂条，采用本实用新型快速检测结构制备可拆装式层析检测结构检测试剂盒进行胰岛素检测实验，其中乳胶微球均采用度生物300nm红色微球，检测试剂条的检测线T的乳胶微球标记指示抗体为50ug/ml的抗胰岛素单克隆抗体，包被在玻璃纤维素膜结合垫上；检测试剂条的检测线T的捕获抗体为1.0mg/ml的配对的抗胰岛素单克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上；检测试剂条的质控线C的捕获抗体为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上，用于捕获未被特异性捕获的乳胶微球标记抗胰岛素单克隆抗体。在硝酸纤维素膜垫印膜两端分别粘贴吸水垫及乳胶微球标记结合垫，在乳胶微球标记结合垫一侧粘贴样本垫。置粘贴好的检测片于切条机上，切成 3.5mm的检测试剂条。

二、本实用新型快速检测结构制备：

采用市售的毛细管和滴管，市售毛细管切割为10mm，约10ul，从滴管头部将约一半长度插入滴管内，另一半留在滴管外为游离端。可拆装式层析检测结构采用市售层析检测扣卡。检测液装载结构采用小型实验使用的保存管。印制不同颜色深度的红色比色卡。

三、实验方法及结果：

实验时取上述制备的检测试剂条和快速检测结构，装配成一体化的检测结构，将装配好的检测结构放入有干燥剂的铝箔密封袋内，在封口机上封口，加贴标签。印制10个不同颜色深度的紫红色比色卡。用10mM的磷酸缓冲盐溶液配置1、5、10、15、20、25、30 uIU/ml的长秀霖重组甘精胰岛素注射液（100 IU/ml）。取地特胰岛素溶液100ul，直接滴加不同浓度的地特胰岛素溶液至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果对应的浓度范围，结果比色卡紫红色线条1号对应5uIU/ml，2号为10uIU/ml，3号为15uIU/ml，4号为20uIU/ml，5号为25uIU/ml，6号为30uIU/ml。

用制备的快速检测结构样品的虹吸采样管分别采集10例健康捐献者的空腹和餐后2小时末梢血液10ul，直接分别加载至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果的浓度范围，结果空腹在5-15uU/ml，餐后2小时在15-25uU/ml左右，符合正常人检测范围。

实验三：免疫荧光法胰岛素快速检测实验：

一、检测试剂条制备：

采用常规免疫荧光检测技术双抗体夹心法及生物素/亲和素反应系统制备检测试剂条，采用本实用新型快速检测结构制备的可拆装式层析检测结构检测试剂盒进行胰岛素检测实验，其中检测试剂条的荧光微球标记指示抗体采用20ug/ml的第一抗胰岛素单克隆抗体，生物素化标记抗体采用20ug/ml的第二抗胰岛素单克隆抗体，荧光微球采用粒径300nm，两种标记抗体均包被在玻璃纤维素膜标记物结合垫上；检测试剂条的捕获抗体为1.0mg/ml的重组链亲和素，包被在硝酸纤维素膜上；检测试剂条的质控线C的捕获抗体为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜上，用于捕获未被特异性捕获的荧光微球标记抗胰岛素单克隆抗体。在硝酸纤维素膜印膜两端分别粘贴吸水纸膜垫及荧光微球标记结合膜垫，在结合膜垫一侧粘贴样品垫。置粘贴好的检测片于切条机上，切成 3.5mm试纸条。

二、本实用新型快速检测结构制备：

同“实验二”制备。

三、荧光检测器：采用市售的蓝勃AFS-100荧光检测仪。

四、实验方法及结果：

实验时取上述制备的检测试剂条和快速检测结构，装配成检测试剂盒，将装配的检测试剂盒放入有干燥剂的铝珀密封袋内，在封口机上封口，加贴标签。用10mM的磷酸缓冲盐溶液配置1、5、10、15、20、25、30 uIU/ml的长秀霖重组甘精胰岛素注射液（100 IU/ml），用制备的检测试剂盒和荧光定量分析仪建立地特胰岛素浓度与荧光反应的标准曲线。用制备的毛细虹吸采样管分别采集10例健康捐献者的空腹和餐后2小时末梢血液10ul，直接分别加载至制备的检测试剂盒加样窗，静置20分钟，置于荧光定量分析仪检测荧光值并经标准曲线计算样本血液胰岛素浓度，结果空腹在8.42 ± 2.70uIU/ml，餐后2小时在17.27 ±4.31uIU/ml，符合正常人检测范围。

Claims (10)

1.一种血液胰岛素水平的快速检测结构,其特征在于：

1）所述快速检测结构为毛细虹吸采样结构、检测液装载结构和层析检测结构的组合套装；

2）所述毛细虹吸采样结构由毛细虹吸定量结构和固定所述毛细虹吸定量结构的固定结构组成，两者间为非拆装式的固定连接且所述固定结构一侧为非密闭式结构；

3）所述层析检测结构包括检测试剂条、位于所述检测试剂条外侧的检测外壳和位于所述检测外壳起始端的加样连接结构；

4）所述检测试剂条包括样本垫、标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中所述样本垫位于所述加样连接结构的对应位置并与其形成液相交通连接，所述标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体；

5）所述毛细虹吸定量结构为两端开口的管状结构，其中一端开口与所述样本垫连接，所述定量为被采集血液样本的体积，以所述管状结构的整体容积为样本的定量体积，选择1-30微升；

6）所述检测液装载结构为设置有滴加液体的出液口的装载液相的容器结构，不与所述层析检测结构直接固定连接；

7）所述检测液装载结构内装载有检测液相，所述检测液相为水溶性缓冲盐溶液。

2.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述毛细虹吸采样结构与所述层析检测结构为相互直接连接的组合结构，所述毛细虹吸定量结构位于所述层析检测结构的近端并固定连接，且其远端开口与所述样本垫连接并形成液相交通，近端呈游离状态并在采样时能够将近端开口伸入到血液样本内，所述层析检测结构同时作为所述毛细虹吸定量结构的所述固定结构使用；所述近端设置有可拆装式的保护套样结构，所述保护套样结构设置有加样孔，与所述毛细虹吸定量结构的近端开口位于所述保护套内，直接与所述加样孔形成液相交通，所述检测液装载结构的出液口位于所述保护套的外部，直接与所述加样孔形成可拆装式的液相交通。

3.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述毛细虹吸采样结构与所述层析检测结构为可相互移动形成可拆装式连接的组合结构，所述毛细虹吸定量结构和所述固定结构直接固定连接，形成可以手持采样的所述毛细虹吸采样结构，此时所述固定结构作为采样时的采样手柄使用，所述固定结构的另一端呈游离状态的所述毛细虹吸定量结构并在采样时能够将所述毛细虹吸定量结构的游离端开口伸入到血液样本内采样；所述层析检测结构近端设置有所述加样连接结构，在位于与所述样本垫相对应的位置上设置有加样开口，与所述毛细虹吸定量结构的游离端开口直接与所述加样开口形成液相交通，所述检测液装载结构的出液口直接与所述加样开口形成液相交通。

4.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述检测试剂条上设置有血细胞过滤结构，包括血细胞过滤膜和红细胞抗体处理膜垫的至少一种。

5.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述毛细虹吸定量结构选择毛细滴加定量管状结构，由手柄和连接手柄的滴头组成，所述滴头开口端的横截面积选择0.10-3.0平方毫米。

6.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述检测试剂条为胶体金免疫检测试剂条、荧光免疫检测试剂条、乳胶微球免疫检测试剂条的至少一种，所述指示剂为彩色微球和荧光物质的至少一种。

7.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述快速检测结构配置有与所述指示剂颜色一致的半定量比色卡，所述比色卡上印制有3个及以上的不同颜色深度的比色条带。

8.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述快速检测结构配置有便携式的定量检测仪，包括色度定量分析仪和荧光定量分析仪的至少一种。

9.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述快速检测结构包括刺血针和酒精消毒片。

10.如权利要求1所述快速检测结构，其特征在于，所述检测试剂条的制备还包括生物素/亲和素反应系统，所述标记物结合垫上包被有由所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体和生物素标记第二抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的亲和素。

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