CN217173755U - 一种利用六孔板点式转染装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种利用六孔板点式转染装置，涉及细胞电转染技术领域，该实用新型包括六孔板体(4)、板盖(5)、点形电极和控制电路(2)，所述的点形电极为多排列电极，所述多排列电极施加周期性电极电脉冲，本实用新型针对目前电转染管体处理量局限和重复操作过多的问题，采用多排同时进液进行电转染，保证每腔样品获得较均匀的电转染，液体进入后充满腔体后进行电转染，同时电转染时产生的气泡也可以及时的随着六孔板体上部的小孔排出，电转染完成后，液体流出腔体，腔体再次形成大气平衡，实现重复式进液，能够适应较样品较多时候的电转染需求。

Description

一种利用六孔板点式转染装置

技术领域

本实用新型涉及细胞电转染技术领域，具体涉及一种利用六孔板点式转染装置。

背景技术

细胞膜是包围在细胞外周的一层薄膜，是细胞与外界进行选择性物质交换的通透性屏障。细胞膜使细胞成为一个独立的生命单位，并拥有一个相对稳定的内环境。周围环境中的一些物质可以通过细胞膜，其它的物质则不行。细胞可以通过细胞膜从周围环境摄取养料，排出代谢产物，使物质的转运达到平衡状态。所以，细胞膜的基本功能就是维持细胞内微环境的相对稳定并有选择地与外界环境进行物质交换

电转染技术(也叫电渗透技术、电穿孔技术)是一种常见的将细胞膜不透过物质(如染料、药物、激素、蛋白、质粒)向细胞内转移的技术。

与传统方法相比(病毒和化学)，电转染技术因为其无污染、更容易控制、不会对细胞造成永久损伤和效率高等优点，已经被广泛应用于分子生物学、临床医学等领域

研究发现，如果对细胞施加一定强度的电刺激并持续一段时间，就可以诱导细胞膜上产生一些微孔，使细胞的通透性增强，所谓细胞电穿孔(Electroporation)就是指细胞在外加脉冲电场的作用下，细胞膜脂双层上形成瞬时微孔的生物物理过程。电转染(Electrotransfection)是利用电穿孔技术将外源的生物大分子，如DNA、RNA或蛋白质导入细胞的技术。当细胞膜发生电穿孔时，其通透性和膜电导会瞬时增大，使亲水分子、DNA、蛋白质、病毒颗粒、药物颗粒等正常情况下不能通过细胞膜的分子得以通过微孔进入细胞。在短时间内撤除电刺激后，细胞膜上微孔消失，细胞膜重新成为选择性通透屏障。

现阶段技术中，主要有三种细胞转染办法：将细胞放置于一对相距数毫米至数厘米的平行电极之间，使得细胞在两电极产生的电场之间受到电脉冲刺激，从而实现转染的过程。例如美国专利US5389069。

使用微型针状电极扎入组织或细胞液中，对细胞进行电脉冲刺激，从而达到电转染的目的。例如美国专利US5389069。

将一个空腔内放置一对电极之间，使得细胞悬液在空腔内流动的同时受到电刺激，从而达到电转染的目的。例如美国专利US6773669。

在现阶段的电转染，大多是在单只试管中进行的，因此，其电转染的最大容积为1mL左右，所以在处理大量的样品时候，会面临劳动强度较大的问题。

实用新型内容

针对现有技术中的缺陷，本实用新型提供一种利用六孔板点式转染装置，以解决上述技术问题。

一种利用六孔板点式转染装置，包括六孔板体、板盖、点形电极和控制电路，所述的点形电极为多排列电极，所述多排列电极施加周期性电极电脉冲，所述点形电极包括点形正电极和点形负电极，所述点形正电极和点形负电极均设置于所述六孔板体内部。

作为优选地，还包括供电模块，所述供电模块为所述控制电路提供脉冲电源。

作为优选地，所述控制电路将所述脉冲电源与所述点形正电极和点形负电极连接。

作为优选地，所述脉冲电源输送至点形正电极和点形负电极处，提供均匀稳定的电场。

作为优选地，所述点形电极排列方式为两排三列。

作为优选地，所述点形电极按分散点状均匀排列。

作为优选地，所述点形电极相邻两个电极之间的距离相等。

作为优选地，所述板盖的外型长宽均大于所述六孔板体。

本实用新型的有益效果体现在：

本实用新型针对目前电转染管体处理量局限和重复操作过多的问题，采用多排同时进液进行电转染，保证每腔样品获得较均匀的电转染，液体进入后充满腔体后进行电转染，同时电转染时产生的气泡也可以及时的随着六孔板体上部的小孔排出，电转染完成后，液体流出腔体，腔体再次形成大气平衡，实现重复式进液，能够适应较样品较多时候的电转染需求。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中，类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中，各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。

图1本实用新型一种利用六孔板的点式电转染装置的整体结构示例图；

图2本实用新型一种利用六孔板的点式电转染装置的盖板结构示例图；

图3本实用新型一种利用六孔板的点式电转染装置的前视图；

图4本实用新型一种利用六孔板的点式电转染装置的左视图。

附图中，1—点形正电极，2—控制电路，3—负电极，4—六孔板体，5—板盖。

具体实施方式

下面将结合附图对本实用新型技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本实用新型的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本实用新型的保护范围。

需要注意的是，除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本实用新型所属领域技术人员所理解的通常意义。

如图1所示，一种利用六孔板点式转染装置，包括六孔板体4、板盖5、点形电极和控制电路2，所述的点形电极为多排列电极，所述多排列电极施加周期性电极电脉冲，所述点形电极包括点形正电极1和点形负电极3，所述点形正电极1和点形负电极3均设置于所述六孔板体4内部。

更为具体地，还包括供电模块，所述供电模块为所述控制电路提供脉冲电源。

更为具体地，所述控制电路将所述脉冲电源与所述点形正电极1和点形负电极3连接。

更为具体地，所述脉冲电源输送至点形正电极1和点形负电极3处，提供均匀稳定的电场。

如图1、3、4所示，更为具体地，所述点形电极排列方式为两排三列。

更为具体地，所述点形电极按分散点状均匀排列。

更为具体地，所述点形电极相邻两个电极之间的距离相等。

如图2所示，更为具体地，所述板盖5的外型长宽均大于所述六孔板体4。

收集处于对数生长期293T细胞(人肾上皮细胞)，转速1000转/分，离心5分钟，弃去上清液，加入电转染缓冲液，使得细胞呈现悬浮状，调整细胞密度为1×10⁷个/mL。加入电转质粒pCDNA3.1-GFP，使得质粒为20-50ug/mL，轻柔混合均匀；

使用本实用新型所提出的电转染装置，在制备细胞电转染仪器中进行电转染实验，在适宜条件下，配合电转染仪使用，使用条件如下：电压180-220v，脉冲宽度6-20ms，脉冲次数为2次，脉冲间隔为1次。

电转染实验完成后，将电转染后的细胞悬液放置于离心管中，转速为1000转/分钟，离心5分钟，弃去上清液，加入CD-OptiCHO选择培养基，使得细胞处于悬浮状态。接种于锥形瓶中，放置在摇床上培养，摇床转速为200转/分，其中培养条件控制在37℃，二氧化碳浓度为5-8％，培养24小时，24小时后在荧光显微镜下观察，并用流式细胞仪检测电转染效率和细胞存活率。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本实用新型的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本实用新型进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本实用新型各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本实用新型的权利要求和说明书的范围当中。

Claims (8)

1.一种利用六孔板点式转染装置，其特征在于：包括六孔板体(4)、板盖(5)、点形电极和控制电路(2)，所述的点形电极为多排列电极，所述多排列电极施加周期性电极电脉冲，所述点形电极包括点形正电极(1)和点形负电极(3)，所述点形正电极(1)和点形负电极(3)均设置于所述六孔板体(4)内部。

2.根据权利要求1所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：还包括供电模块，所述供电模块为所述控制电路提供脉冲电源。

3.根据权利要求2所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述控制电路将所述脉冲电源与所述点形正电极(1)和点形负电极(3)连接。

4.根据权利要求3所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述脉冲电源输送至点形正电极(1)和点形负电极(3)处，提供均匀稳定的电场。

5.根据权利要求1所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述点形电极排列方式为两排三列。

6.根据权利要求5所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述点形电极按分散点状均匀排列。

7.根据权利要求6所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述点形电极相邻两个电极之间的距离相等。

8.根据权利要求1所述的利用六孔板点式转染装置，其特征在于：所述板盖(5)的外型长宽均大于所述六孔板体(4)。

Images