CN216919260U - 一种高度近视基因多态性检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

一种高度近视基因多态性检测试剂盒，包括盒盖和盒体，所述盒盖设置在所述盒体上，所述盒盖内壁设置有多组安装槽，所述安装槽内设有紫外灯，所述盒体的内部设置有保护海绵，所述保护海绵上设有5个插孔，每个所述插孔内设置有夹持装置，所述夹持装置包括固定架、夹持板、限位柱和弹簧，所述夹持装置的两侧均设有所述固定架，所述两个固定架的内侧设有所述夹持板，所述固定架与所述夹持板之间通过所述限位柱连接，所述限位柱上套有所述弹簧，所述盒体的中心位置安装有制冷仓，所述制冷仓上端有制冷盖，所述插孔内放置试剂管，所述试剂管的下方设置有缓冲板，所述缓冲板的下表面通过缓冲弹簧连接在所述盒体上，所述盒体上设置有采样装置。

Description

一种高度近视基因多态性检测试剂盒

技术领域

本实用新型属于生物基因检测设备技术领域，具体涉及一种高度近视基因多态性检测试剂盒。

背景技术

高度近视（pathological myopia），又称病理性近视、恶性近视，它是指近视度数在600度以上，眼轴异常延长，近视度数持续加深，且常伴有白内障、青光眼、视网膜脱离等严重并发症的一类近视。高度近视起病较早，5～10岁间发病，进行性发展至30岁左右甚至更晚，是致盲的主要疾病之一，部分国家在新的致盲病因调查中，将其列为主要致盲眼病之一。

高度近视的发生是遗传易感性和环境暴露之间复杂相互作用的结果。环境因素主要包括近距离工作、户外运动时间、饮食、受教育程度和地域差异等。近视遗传关联研究的候选基因主要涉及两大类：巩膜细胞外基质生长和重塑相关基因，如血管活性肠肽类受体等；视网膜视觉信号处理和传输相关基因，如转录因子类基因、释放因子类受体等。

研究发现，VIPR2、PAX6、RASGRF1三个基因与中国人群高度近视的发生有着重要的关联关系，通过高度近视相关基因的检测，个性化评估高度近视发生的风险，进行个性化的干预，可以达到预防高度近视的目的。

但是，现有技术只公开了VIPR2、PAX6、RASGRF1基因与高度近视的发生有着重要的关系，基因的应用也是独立的。在实际应用过程中，经常会出现采用各种基因评估高度近视结果不一致的情况，因此，需要一种能采用多种基因联合检测，高效评估高度近视发生的风险的基因检测试剂盒。

同时，基因检测常涉及一些引物和各种酶类等，传统的试剂盒无法维持内部较低的温度，容易导致试剂失效；试剂盒在运输与使用过程中，难免会出现晃动，而传统的试剂盒多为简单的单层包装盒，缺少防护措施、缓冲性能差、不能很好的对试管进行固定，容易造成试管破损、试剂质变、试剂散落、试剂盒被污染等问题。

针对上述问题，需要一种既能够联合基因检测，又能够结构简单，方便储存和携带，对试剂有冷藏和保护作用的试剂盒。我们提出一种高度近视基因多态性检测试剂盒用于解决上述问题。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种高度近视基因多态性检测试剂盒，所述的试剂盒解决了联合基因检测的问题，也解决了在运输及使用过程中的低温问题、试管的缓冲和固定问题。

为实现以上目的，本实用新型提供如下技术方案：

一种高度近视基因多态性检测试剂盒，包括盒盖和盒体，所述盒盖设置在所述盒体上，所述盒盖内壁设置有多组安装槽，所述安装槽内设有紫外灯，所述盒体的内部设置有保护海绵，所述保护海绵上设有5个插孔，每个所述插孔内设置有夹持装置，所述夹持装置包括固定架、夹持板、限位柱和弹簧，所述夹持装置的两侧均设有所述固定架，所述两个固定架的内侧设有所述夹持板，所述固定架与所述夹持板之间通过所述限位柱连接，所述限位柱上套有所述弹簧，所述盒体的中心位置安装有制冷仓，所述制冷仓上端有制冷盖，所述插孔内放置试剂管，所述试剂管的下方设置有缓冲板，所述缓冲板的下表面通过缓冲弹簧连接在所述盒体上，所述盒体上设置有采样装置。

优选的，所述盒盖通过旋转轴与所述盒体连接，另一端通过所述盒盖上的锁头和所述盒体上的锁扣连接。

优选的，所述盒体的外侧对称固定安装有连接环，两个连接环的外侧共同设置有转动把手。

优选的，所述采样装置为鼻拭子、咽拭子、肛拭子的一种或多种。

优选的，所述盒体的形状为半圆柱体、长方体、正方体、圆柱体、椭圆体中的一种。

优选的，所述插孔上方放置有与试管对应的铭牌。

优选的，所述试剂管包括样本保存管、引物管、检测反应液管、探针管、对照组DNA管，各个所述试剂管贯穿于所述保护海绵内部，所述试剂管围绕在所述制冷仓的四周。

优选的，所述夹持装置位于所述插孔内的所述保护海绵的的底部，所述缓冲板的上表面均匀设置有与所述插孔相对应的凹槽，所述凹槽与所述试剂管的下端位置一一对应。

优选的，所述盒体设置有开关和二维码，所述开关与所述紫外灯连接，手机扫描所述二维码可获知产品的相关信息。

优选的，所述制冷仓上的仓壁上设置有螺旋纹，内部放置制冷棒，所述制冷棒上设置有螺旋纹。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果如下：

1、本实用新型提供的试剂盒使用联合基因的方法，单管可一次性检测3个高度近视位点，通量高，避免了对同一样本进行多管检测，降低了成本，同时避免了使用单独基因造成的检测结果不统一、存在误差等，可以高效、准确进行高度近视检测。

2、本实用新型将试剂管插入插孔内，插孔下部的保护海绵、夹持装置的伸缩作用、试剂管的下端定位在缓冲板的凹槽中，均可对试剂管具有限位作用，缓冲板下端连接的缓冲弹簧可以起到减震的作用。通过上述的装置，可以有效的防止试剂管与盒壁碰撞，试管不会在盒体内晃动。

3、本实用新型设置有制冷装置，通过制冷装置提供较低的储存环境，维持试剂盒内部较低的温度，不需要特殊的冷藏车进行运输，降低了运输成本。

4、本实用新型可用于存放高度近视基因多态性检测的试剂管，实验过程中试剂可以一直放置在低温试剂盒中，能对试剂起到较好的保护作用，有效防止试剂失效。

5、本实用新型设置有紫外线灯，可以对试剂盒进行杀菌消毒。

附图说明

图1为本实用新型打开后俯视图；

图2为本实用新型立体结构示意图；

图3为本实用新型夹持装置示意图；

图中：盒盖1、盒体2、安装槽3、紫外灯4、保护海绵5、插孔6、夹持装置7、固定架8、夹持板9、限位柱10、弹簧11、制冷仓12、制冷盖13、试剂管14、缓冲板15、缓冲弹簧16、采样装置17、旋转轴18、锁头19、锁扣20、连接环21、转动把手22、采样拭子23、铭牌24、凹槽25、开关26、二维码27、制冷棒28；

图4为VIPR2基因的3种基因型GG、GT、TT在HEX荧光通道的熔解曲线图，当在65℃左右有且仅有一条峰时为野生型GG，当在65℃和58℃各有一条峰时为单突变型GT，当在58℃左右有且仅有一条峰时为突变型TT；

图5为PAX6基因的3种基因型CC、AC、AA在CY5荧光通道的熔解曲线图，当在67℃左右有且仅有一条峰时为野生型CC，当在67℃和61℃各有一条峰时为单突变型AC，当在61℃左右有且仅有一条峰时为突变型AA；

图6为RASGRF1基因的3种基因型GG、GT、TT在FAM荧光通道的熔解曲线图，当在61℃左右有且仅有一条峰时为野生型GG，当在61℃和55℃各有一条峰时为单突变型GT，当在55℃左右有且仅有一条峰时为突变型TT。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

本实用新型提供了如图1-3所示的一种高度近视基因多态性检测试剂盒，包括盒盖1和盒体2，盒盖1设置在盒体2上，盒盖1内壁设置有多组安装槽3，安装槽3内设有紫外灯4，盒体2的内部设置有保护海绵5，保护海绵5上设有5个插孔6，每个插孔6内设置有夹持装置7，夹持装置7包括固定架8、夹持板9、限位柱10和弹簧11，夹持装置7的两侧均设有固定架8，两个固定架8的内侧设有夹持板9，固定架8与夹持板9之间通过限位柱10连接，限位柱10上套有弹簧11，盒体2的中心位置安装有制冷仓12，制冷仓12上端有制冷盖13，插孔6内放置试剂管14，试剂管14的下方设置有缓冲板15，缓冲板15的下表面通过缓冲弹簧16连接在盒体2上，盒体2上设置有采样装置17。

盒盖1通过旋转轴18与盒体2连接，另一端通过盒盖1上的锁头19和盒体2上的锁扣20连接，通过旋转轴18配合锁头19、锁扣20，可以使得盒盖1在盒体2上进行开合，有效防止在运输过程中盒盖1打开。

盒体2的外侧对称固定安装有连接环21，两个连接环21的外侧共同设置有转动把手22，利用转动把手22便于对该试剂盒携带。

采样装置17提供采样拭子23，采样拭子23为鼻拭子、咽拭子、肛拭子中的一种或多种。

盒体2的形状为半圆柱体、长方体、正方体、圆柱体、椭圆体中的一种。

插孔6上方放置有与试管对应的铭牌24，通过铭牌24可以对试管进行编号，方便对试管进行识别。

试剂管14包括样本保存管、引物管、检测反应液管、探针管、对照组DNA管，各个试剂管14贯穿于保护海绵5内部，试剂管14围绕在制冷仓12的四周，可以使试剂管14在降温过程中降温速度快，降温效果好。

夹持装置7位于插孔6内的保护海绵5的的底部，通过弹簧11配合限位柱10的设置，使得两个夹持板9可以在固定架8内进行伸缩，从而方便对不同粗细的试剂管14进行固定限位，缓冲板15的上表面均匀设置有与插孔6相对应的凹槽25，凹槽25与试剂管14的下端位置一一对应，可以起到支撑和固定试剂管14的作用。

盒体2设置有开关26和二维码27，开关26与紫外灯4连接，可以对试剂盒进行杀菌消毒，手机扫描二维码27可获知产品的相关信息，如产地、生产日期、产品的使用方法以及注意事项等，与现有的说明书单一放置相比，避免了长时间使用而使说明书遗失，解决了说明书占用空间的效果。

制冷仓12上的仓壁上设置有螺旋纹，内部放置制冷棒28，制冷棒28上设置有螺旋纹，使制冷棒28能够螺旋插入制冷仓12中，螺旋结构能够使制冷棒28固定。

工作原理：本实用新型在使用时，用力下按锁头19，使锁头19与锁扣20分离，通过旋转轴18打开盒盖1，接着打开制冷盖13，向制冷仓12中旋转加入未使用的制冷棒28，把制冷盖13盖好，保证试剂盒内的低温环境。将采集到的DNA装入样本保存管中，检测试剂装入到相应的试剂管14中，将全部的试剂管14插入到保护海绵6中，试剂管14的下端通过夹持装置7贴合在缓冲板15上表面的凹槽20中，在打开盒盖1时，试剂管14会在缓冲弹簧16的挤压下上升，并且由于夹持装置的限位，使得试管会在通孔内缓慢上升，然后可以直接取出试管，通过这样的设置，方便对试管进行保存和取出，将盒盖1通过旋转轴18翻转盖上，然后将锁头17扣在锁扣18上，通过转动把手22将试剂盒提起，将试剂盒转运到检测点进行使用。

使用方法：

步骤一：以口腔采样为例，撕开口腔拭子的外包装，取出拭子；将拭子在口中内腮上下刮拭40次以上，力度以腮不微凸为准；采样后用手推拭子后杆，使拭头落入样本保存管，旋紧试管盖。

步骤二：在上述低温与消毒的环境下，打开试剂盒，在每一个PCR反应孔中依次加入引物1 μl，检测反应液7.5 μl，探针0.1 μl，然后各试管中加入待检测的样本基因组DNA2μl，最后一个试管将待检测的样本基因组DNA2 μl替换为2 μl的对照组DNA，用灭菌重蒸馏水补足15 μl，得到混合液，离心。

步骤三：检测在上海宏石的全自动医用PCR仪进行：95℃预热10分钟；再进行50个循环的95℃、30秒，60℃、30秒，72℃、30秒；72℃、5分钟；95℃ 3分钟；40℃ 2分钟后进行荧光信号采集，反应条件为40℃之后85℃，升温速率0.05℃/S（40-85℃之间需荧光采集）。

步骤四：应用PCR仪配套软件SLAN分析结果，基于形成的杂交峰所显示的Tm值差异展现不同的基因型：所述分子信标探针法实时荧光定量PCR检测的荧光通道选择为：VIPR2位点基因多态性检测选择结果检测HEX通道，PAX6位点基因多态性检测结果选择CY5检测通道，RASGRF1位点基因多态性检测结果选择FAM检测通道，参比荧光设置为none。

步骤五：VIPR2、PAX6、RASGRF1三个基因都可检测出特异的熔解曲线信号，各位点相应基因型所对应的野生型和突变型的溶解温度参考值如表1所示。

表1 VIPR2、PAX6、RASGRF1的熔解曲线温度参考值

基因多态性位点	检测通道	突变位点	野生型熔解温度参考值（±1.5℃）	突变型熔解温度参考值（±1.5℃）
					VIPR2 rs2730260	HEX	G>T	65	57
PAX6 rs3026393	CY5	C>A	67	61
					RASGRF1rs8027411	FAM	G>T	61	55

熔解曲线如图4至图6所示。

Claims (10)

1.一种高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，包括盒盖（1）和盒体（2），所述盒盖（1）设置在所述盒体（2）上，所述盒盖（1）内壁设置有多组安装槽（3），所述安装槽（3）内设有紫外灯（4），所述盒体（2）的内部设置有保护海绵（5），所述保护海绵（5）上设有5个插孔（6），每个所述插孔（6）内设置有夹持装置（7），所述夹持装置（7）包括固定架（8）、夹持板（9）、限位柱（10）和弹簧（11），所述夹持装置（7）的两侧均设有所述固定架（8），两个所述固定架（8）的内侧设有所述夹持板（9），所述固定架（8）与所述夹持板（9）之间通过所述限位柱（10）连接，所述限位柱（10）上套有所述弹簧（11），所述盒体（2）的中心位置安装有制冷仓（12），所述制冷仓（12）上端有制冷盖（13），所述插孔（6）内放置试剂管（14），所述试剂管（14）的下方设置有缓冲板（15），所述缓冲板（15）的下表面通过缓冲弹簧（16）连接在所述盒体（2）上，所述盒体（2）上设置有采样装置（17）。

2.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述盒盖（1）通过旋转轴（18）与所述盒体（2）连接，另一端通过所述盒盖（1）上的锁头（19）和所述盒体（2）上的锁扣（20）连接。

3.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述盒体（2）的外侧对称固定安装有连接环（21），两个所述连接环（21）的外侧共同设置有转动把手（22）。

4.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述采样装置（17）提供采样拭子（23），所述采样拭子（23）为鼻拭子、咽拭子、肛拭子一种或多种。

5.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述盒体（2）的形状为半圆柱体、长方体、正方体、圆柱体、椭圆体的一种。

6.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述插孔（6）上方放置有与试管对应的铭牌（24）。

7.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述试剂管（14）包括样本保存管、引物管、检测反应液管、探针管、对照组DNA管，各个所述试剂管（14）贯穿于所述保护海绵（5）内部，所述试剂管（14）围绕在所述制冷仓（12）的四周。

8.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述夹持装置（7）位于所述插孔（6）内的所述保护海绵（5）的底部，所述缓冲板（15）的上表面均匀设置有与所述插孔（6）相对应的凹槽（25），所述凹槽（25）与所述试剂管（14）的下端位置一一对应。

9.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述盒体（2）设置有开关（26）和二维码（27），所述开关（26）与所述紫外灯（4）连接，手机扫描所述二维码（27）可获知产品的相关信息。

10.根据权利要求1所述的高度近视基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述制冷仓（12）上的仓壁上设置有螺旋纹，内部放置制冷棒（28），所述制冷棒（28）上设置有螺旋纹。

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