CN212379272U - 在线目标蛋白定量检测系统 - Google Patents

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Abstract

本实用新型适用于生物技术领域,提供了一种在线目标蛋白定量检测系统,包括:流通池,包括溶液流通道接口和光通道接口,所述溶液流通道接口与层析装置连接,所述光通道接口与所述蛋白浓度检测计算装置连接;层析装置,将含目标蛋白的溶液接入在线目标蛋白定量检测系统,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,获得目标蛋白溶液;蛋白浓度检测计算装置,对含目标蛋白的溶液的浓度进行检测,并实时计算含目标蛋白的溶液中的蛋白总量;蛋白质载量控制设备,根据蛋白总量控制层析装置的上样载量。借此,本实用新型实现了在目标蛋白纯化的过程中,对目标蛋白进行在线定量检测以及根据检测结果控制目标蛋白的上样载量。

Description

在线目标蛋白定量检测系统
技术领域
本实用新型涉及生物技术领域,尤其涉及一种在线目标蛋白定量检测系统。
背景技术
蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。
在蛋白质纯化过程中,需要采用UV(ultraviolet,紫外线)传感器对蛋白质吸收紫外线的数值进行检测。在现有技术中的在线UV传感器,如美国Pendotech 公司在线UV传感器和德国Optek公司在线UV检测器,具有单光程和可变光程的流通池供选择,但是可变光程范围相对较小,并且没有进行在线蛋白质定量检测功能,也无法实现生产自动控制。
综上所述,现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷,所以有必要加以改进。
实用新型内容
针对上述的缺陷,本实用新型的目的在于提供一种在线目标蛋白定量检测系统,以实现在目标蛋白纯化的过程中,对目标蛋白进行在线定量检测以及根据检测结果控制所述目标蛋白的上样载量。
为了实现本实用新型的一个发明目的,本实用新型提供了一种在线目标蛋白定量检测系统,包括:
流通池,包括溶液流通道接口和光通道接口,所述溶液流通道接口与层析装置连接,所述光通道接口与所述蛋白浓度检测计算装置连接;
层析装置,将含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,获得目标蛋白溶液;
蛋白浓度检测计算装置,对所述含目标蛋白溶液的浓度进行检测,并实时计算所述含目标蛋白的溶液中的蛋白总量;
蛋白质载量控制设备,与所述蛋白浓度检测计算装置和所述层析装置通信连接,根据所述蛋白总量控制所述层析装置的上样载量。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述层析装置包括:
层析设备,与所述流通池的溶液流通道接口连接,将所述含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统;
至少一个层析柱,与所述流通池的溶液流通道接口连接,对流经的所述含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,将所述含目标蛋白的溶液中的其他成分去除,获得目标蛋白溶液。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述蛋白浓度检测计算装置包括:
紫外线照射装置,与所述流通池的光通道接口连接,照射流经所述流通池的所述含目标蛋白的溶液;
光谱仪,与所述流通池的光通道接口连接,检测所述紫外线照射装置照射流经所述流通池的所述含目标蛋白的溶液的紫外线强度,并将紫外吸收值数据传送到蛋白质浓度计算设备;
蛋白质浓度计算设备,接收所述光谱仪的紫外吸收值数据,并根据预设的标定的标准曲线,实时计算所述蛋白质浓度以及单位时间流经流通池的目标蛋白总量;并将所述目标蛋白总量发送到所述蛋白质载量控制设备。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述蛋白质载量控制设备包括:
上样控制模块,将接收到的所述目标蛋白总量作为累计的上样量与预设的层析柱上样载量进行实时对比,并在所述累计的上样量与预设的所述层析柱上样载量相等时,控制所述层析设备停止上样;以及
选择调用模块,执行选择并调用所述预设的标定的标准曲线、UV调零信号、目标蛋白累计命令以及目标蛋白定量累计上限设定的控制操作。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述蛋白质浓度计算设备为工控机;
所述蛋白质载量控制设备为DCS系统。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述流通池的溶液流通道接口包括设置于所述流通池横向两端的溶液流入接口和溶液流出接口;所述光通道接口包括设置于所述流通池纵向两端的上端接口和下端接口,并且在所述流通池的中部具有供所述含目标蛋白的溶液通过的光径口;
所述流通池的溶液流入接口与所述层析设备连接,所述流通池的溶液流出接口与所述层析柱连接;所述上端接口与所述紫外线照射装置连接,所述下端接口与所述光谱仪连接。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述的流通池为可变光程流通池;所述可变光程流通池的光程由调整所述光径口的大小调整;
所述光径口由所述流通池的中部设置的两根光纤的间距构成,所述两根光纤的间距为0.1mm~10mm。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述上端接口和下端接口为光纤接口,所述两根光纤通过所述上端接口和下端接口与所述流通池连接,并且与所述上端接口连接的所述光纤与所述紫外线照射装置的发光光源连接;与所述下端接口连接的所述光纤与所述光谱仪连接。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述光纤为抗紫外石英光纤,所述光纤的芯径为450微米;所述两根光纤通过SMA905接头与所述流通池连接。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述紫外线照射装置的发光光源包括氙灯、氘灯、LED灯或者汞灯;所述紫外线照射装置的发光光源的发射光波长范围为200nm-400nm;
所述光谱仪包括:紫外光谱仪,紫外-可见光谱仪;所述光谱仪的吸光值范围为0-2AU。
根据所述的在线目标蛋白定量检测系统,所述紫外线照射装置的发射光波长范围为270nm-320nm;
所述光谱仪的吸光值范围为在0.05AU-1.6AU;
所述目标蛋白为单抗。
本实用新型的通过将在线目标蛋白定量检测系统设置包括:流通池,层析装置,蛋白浓度检测计算装置以及蛋白质载量控制设备,包括溶液流通道接口和光通道接口的流通池的分别与层析装置和蛋白浓度检测计算装置连接;层析装置将含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,蛋白浓度检测计算装置对所述含目标蛋白的溶液的浓度进行检测,并实时计算所述含目标蛋白的溶液的蛋白总量;蛋白质载量控制设备与所述蛋白浓度检测计算装置通信连接,根据所述蛋白总量控制所述层析装置的上样载量,由此,实现了对目标蛋白进行在线定量检测以及根据检测结果控制所述目标蛋白的上样载量。此外,本实用新型采用的光谱仪性能更好,最短积分时间10微秒,响应更快,更加适合在线检测的需要,氘灯发光更稳定。本实用新型采用1个流通池实现了0.1-10mm的光程变化,结构更简单,可测量浓度范围更广。采用SMA-905接口为标准接口,适应性强;当料液通过流通池时,由于流过光纤狭缝中的料液很少,大部分从外部空间通过,不会造成阻力。多个装置间采用工业通信协议更稳定可靠;以及本实用新型提供更多在线控制功能。
附图说明
图1是本实用新型实施例提供的在线目标蛋白定量检测系统组成示意图;
图2是本实用新型实施例提供的在线目标蛋白定量检测系统组成示意图;
图3是本实用新型实施例提供的在线目标蛋白定量检测系统中流通池与系统其他装置的连接示意图;
图4是本实用新型实施例提供的在线目标蛋白定量检测系统中的流通池的结构示意图;
图5是图4中的A处放大图。
具体实施方式
为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本实用新型,并不用于限定本实用新型。
参见图1~图3,在本实用新型的一个实施例中,提供了一种在线目标蛋白定量检测系统100,包括:
流通池10,包括横向的溶液流通道接口(11,12)和纵向的光通道接口(13,14),所述溶液流通道接口(11,12)与层析装置20,所述光通道接口(13,14)与所述蛋白浓度检测计算装置30连接;该流通池10连接在线目标蛋白定量检测系统 100多个设备,含目标蛋白的溶液从系统100的前端设备经过该流通池到达系统 100的后端设备;
层析装置20,将含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统100,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,获得含目标蛋白的溶液;层析装置20将所述含目标蛋白的溶液中的其他成分去除,所述含目标蛋白的溶液中的其他成分包括一些其他蛋白的杂质;
蛋白浓度检测计算装置30,对所述含目标蛋白的溶液的浓度进行检测,并实时计算所述含目标蛋白的溶液的蛋白总量;
蛋白质载量控制设备40,与所述蛋白浓度检测计算装置30和所述层析装置 20通信连接,根据所述蛋白总量控制所述层析装置20的上样载量。计算所述含目标蛋白的溶液的蛋白总量后,蛋白质载量控制设备40将根据接收到的该信息控制所述层析装置20的上样载量。具体的说,在所述含目标蛋白的溶液的蛋白总量达到预设值后,停止目标蛋白的溶液上样,由此实现了在线目标蛋白定量检测系统100对目标蛋白的在线定量检测。在本实用新型中,优选的所述目标蛋白为单克隆抗体(以下简称“单抗”)。即在线目标蛋白定量检测系统100 实现了在线单抗定量检测。
在本实用新型的一个实施例中,所述层析装置20包括:
层析设备21,与所述流通池10的溶液流通道接口(11,12)连接,将所述含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统100;
至少一个层析柱22,与所述流通池19的溶液流通道接口连接(11,12),对流经的所述含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,将所述含目标蛋白的溶液中的其他成分去除,获得目标蛋白溶液。
层析柱22可以包括多个,设置在不同的位置,当用于检测进入层析柱22前的蛋白浓度,并控制上样量时,流通池10设置于层析柱22在流通管道上游的位置,当需要用于检测层析柱22流出溶液中蛋白浓度时,流通池10可以放在层析柱22下游的位置。如在单抗纯化过程中,将流通池10接入层析装置20管路(例如GE Akta设备)中,并位于层析柱22前,层析柱22是对蛋白进行分离的一种柱型装置,含目标蛋白的溶液流过该柱,使蛋白与其他成分分离。由此,蛋白质载量控制设备40将根据接收到的该信息控制所述层析装置20的上样载量,具体是在单抗层析过程中对层析柱22载量进行控制。
参见图2,在本实用新型的一个实施例中,蛋白浓度检测计算装置30包括:
紫外线照射装置31,与所述流通池10的光通道接口(上端接口)13连接,照射流经所述流通池10的所述含目标蛋白的溶液;所述紫外线照射装置31的发光光源包括氙灯、氘灯、LED灯或者汞灯;所述紫外线照射装置31的发光光源的发射光波长范围为200nm-400nm;
光谱仪32,与所述流通池10的光通道接口(下端接口)14连接,吸收所述紫外线照射装置31照射流经所述流通池10的所述含目标蛋白的溶液的紫外线,并将所述光谱仪32的紫外吸收值数据传送到蛋白质浓度计算设备33;紫外线照射装置31照射所述含目标蛋白的溶液,所述含目标蛋白的溶液吸收紫外线,光谱仪32检测所述含目标蛋白的溶液吸收紫外线的强度,并将该紫外吸收值数据传送到蛋白质浓度计算设备33;所述光谱仪32包括:紫外光谱仪32,紫外- 可见光谱仪32;所述光谱仪32的吸光值范围为在0-2AU。优选的,所述紫外线照射装置31的发射光波长范围为270nm-320nm;所述光谱仪32的吸光值范围为在0.05AU-1.6AU;
蛋白质浓度计算设备33,接收所述光谱仪32的紫外吸收值数据,并根据预设的标定的标准曲线,实时计算所述蛋白质浓度以及单位时间流经流通池10的目标蛋白总量;并将所述目标蛋白总量发送到所述蛋白质载量控制设备40;优选的,蛋白质浓度计算设备33为工控机。
在本实用新型的一个实施例中,所述蛋白质载量控制设备40包括:
上样控制模块41,将接收到的所述目标蛋白总量作为累计的上样量与预设的层析柱22上样载量进行实时对比,并在所述累计的上样量与预设的所述层析柱22上样载量相等时,控制所述层析设备21停止上样;以及
选择调用模块42,执行选择并调用所述预设的标定的标准曲线、UV调零信号、目标蛋白累计命令以及目标蛋白定量累计上限设定的控制操作。
在该实施例中,上样控制模块41将接收到的所述累计的上样量与预设的层析柱22上样载量进行实时对比,并在所述累计的上样量与预设的所述层析柱22 上样载量相等时,控制所述层析设备21停止上样。其中,蛋白质浓度计算设备 33根据所述蛋白质浓度及所述含目标蛋白的溶液的流速,对单位时间流经流通池10的目标蛋白总量进行计算,并将所述单位时间流经流通池的目标蛋白总量发送到所述蛋白质载量控制设备40,所述目标蛋白总量作为累计的上样量。
在本实用新型的一个优选实施例中,所述蛋白质载量控制设备40为DCS 系统。在层析装置20运行时,蛋白质浓度计算设备33会根据实时测量的浓度,层析设备21上样流速,及上样时间,实时计算累计的上样量,并将该数据即时传给DCS系统。DCS系统将该数据与事先设定的层析柱22上样载量进行对比,如果两者相等,则DCS系统会控制层析设备21停止上样,进入后续的纯化步骤。从而防止上样量超过层析柱22载量。
在本实用新型的一个实施例中,实际操作时首先在采用缓冲液清洗层析装置20时,对紫外光谱仪32进行调零,以便进行浓度测量。从层析装置20流出的含目标蛋白的溶液经过流通池10时,产生紫外吸收峰,其吸收强度与含目标蛋白的溶液浓度的关系在一定范围内符合朗伯比尔定律,可由公式1计算得到。
Figure BDA0002431411800000071
公式1中c是单抗浓度,A是紫外吸光值,ε为消光系数,L是流通池10光程。对于已知的含目标蛋白的溶液,如单抗样品,其摩尔消光系数,流通池10光程均为定值。因此可根据紫外吸收值A计算单抗浓度c。光谱仪32的紫外吸收值数据传输至工控机,由工控机根据事先标定的标准曲线,实时计算出单抗浓度。单位时间内,流过流通池10的单抗总量,可以由公式2进行计算:
Figure BDA0002431411800000072
公式2中,V是含目标蛋白的溶液流速,m是单抗总量,t为时间。含目标蛋白的溶液流速由层析设备21实时流速得到,时间积分运算由工控机进行实时计算。实时计算出的单抗总量,由工控机发送给DCS系统,用于对层析设备21上样载量进行控制。工控机发送给DCS(Distributed Control System,分布式计算机控制系统)。系统之间的通信协议采用工业通信协议(ModBus RTU)。层析装置20和蛋白浓度检测计算装置30之间采用OPC通信协议。
参见图3~图5,在本实用新型的一个实施例中,流通池10的溶液流通道接口(11,12)包括设置于所述流通池横向两端的溶液流入接口11和溶液流出接口 12;所述光通道接口(13,14)包括设置于所述流通池纵向两端的上端接口13和下端接口14,并且在所述流通池10的中部具有供所述含目标蛋白的溶液通过的光径口15;优选的,所述的流通池10为可变光程流通池;所述可变光程流通池的光程由调整所述光径口15的大小来实现,调整可通过游标卡尺进行调整;具体的,所述光径口15由所述流通池10的中部设置的两根光纤151的间距构成,所述两根光纤151的间距为0.1mm~10mm。调整两根光纤151的间距,即可改变所述可变光程流通池10的光程,而改变流通池10光程是为了可以调整仪器可测量单抗浓度的范围,其可测量的单抗浓度范围在100g/L至0.1g/L之间。
参见图4和图5,优选的,流通池10的溶液流入接口11与层析设备21连接,流通池10的溶液流出接口12与层析柱22连接;所述上端接口13与所述紫外线照射装置31连接,所述下端口14与所述光谱仪32连接。由层析设备21 提供样品流(即所述含目标蛋白的溶液流)。样品经过流通池10后,从溶液流出接口12流出,溶液流出接口12与层析柱22连接。上端接口13为光纤接口,通过光纤151与光源连接。下端接口14为光纤接口,通过光纤151与光谱仪32连接。紫外线照射装置31的光源发射的光,被流通池10中流经两根光纤151 之间的单抗吸收,光谱仪32检测透过的光。单抗样品浓度与紫外吸收强度成正比,因此可计算出单抗浓度。而且当光纤在流路中,由于流过光纤狭缝中的料液很少,大部分料液从光线周围空间通过,不会造成流动阻力。
此外,所述两根光纤151通过螺纹接口与所述流通池10连接,并且其与上端接口13连接的所述光纤151与所述紫外线照射装置31的发光光源连接;发光光源优选采用HeraeusFiberLight(氘灯),氘灯发光更稳定。与溶液流出接口12连接的所述光纤151与所述光谱仪32连接。此外,所述光纤151为抗紫外石英光纤,所述光纤151的芯径为450微米;所述两根光纤151通过SMA905 接头与所述流通池10连接。
该流通池10材质为不锈钢,两根光纤151采用螺纹接口(例如SMA905) 与流通池10连接。其中上端接口13连接的一根光纤151连接光源,用于提供特定波长的紫外光(例如280nm),另一根与下端接口14连接的光纤151连接光谱仪32,用于将单抗吸收后的光信号传输至光谱仪32,从而得到吸光值A。光谱仪32选用OCEAN-FX-UV-VIS-ES单波长光谱仪,可手动任意设定波长(200 nm-850nm);光谱仪32的检测时间在10微秒-10秒,光谱仪32的检测的检测范围在0-2AU,流通池10光程可由改变两根光纤151之间的间距来进行调节,通常可在0.1毫米至10毫米之间调节。其可测量的单抗浓度在100g/L至0.1g/L 之间。
在本实用新型的其他实施例中,发光光源在光源机中,光源机为紫外线照射装置31,紫外线照射装置31照射流通池10的两光纤151之间的蛋白溶液。本实用新型所述的发光光源,包括但不限于氙灯,氘灯,LED灯,汞灯等,其发射光波长范围应包含200nm-400nm,优选波长在270nm-320nm之间。以及本实用新型所述的光谱仪32包括但不限于紫外光谱仪,紫外-可见光谱仪等,其吸光值范围通常在0-2AU之间。为防止光谱仪32出现信号饱和导致灵敏度下降,通常其可用的吸光值范围为0.05-1.6AU。普通石英光纤在较强紫外光(300nm 以下)的照射下会在光纤内形成缺陷中心,导致光纤透射率下降。本实用新型所用的光纤为抗紫外石英光纤,芯径450微米,材质为抗紫外辐照石英XSR 190-1100nm,所述两根光纤通过接头SMA905与流通池10连接。
在本实用新型的一个实施例中,所述系统100还包括:
在本实用新型的一个实施例中,在线目标蛋白定量检测系统100进行目标蛋白定量检测,具体的:
流通池10:不锈钢流通池,可变光程(游标卡尺手动调整至约0.5mm,即两根光纤151之间的距离)
样品:Mab1
1、系统平衡后调零,建立标准曲线;选取了4个点建立标准曲线
Figure BDA0002431411800000091
表1
2、标准曲线准确度测定
Figure BDA0002431411800000092
表2
3、在线目标蛋白定量检测系统100对单位时间内的蛋白累计量测定
Figure BDA0002431411800000093
Figure BDA0002431411800000101
表3
测定结果参见表1~表3,由此可见在线目标蛋白定量检测系统100的3个循环次数上样过程UV值基本稳定,蛋白累计误差较小。本次测试中实现了UV 调零和蛋白累计调零的自动控制。
在本实用新型的一个实施例中,在线目标蛋白定量检测系统100进行目标蛋白定量检测,具体的,流通池10:不锈钢流通池,可变光程(游标卡尺手动调整至约0.15mm,即两根光纤151之间的距离);样品:Mab2
1、系统平衡后调零,建立标准曲线;选取了4个点建立标准曲线
Figure BDA0002431411800000102
表4
2、标准曲线准确度测定
Figure BDA0002431411800000103
表5
3、在线目标蛋白定量检测系统100对单位时间内的蛋白累计量测定
Figure BDA0002431411800000104
表6
测定结果参见表4~表6,由此可见2个Cycle上样过程UV值基本稳定,蛋白累计误差较小,本次测试中实现了UV调零和蛋白累计调零的自动控制。
由此可见,在线目标蛋白定量检测系统100对单位时间内的蛋白累计量测定,测量速度快,最快可达到1ms。其他方案在1s或以上。可测量范围广,单个流通池10就可测量0.1g/L至100g/L浓度范围。可以与DCS系统进行数据通信;可以对一定时间内流过流通池10的单抗量进行计算。
综上所述,本实用新型通过将在线目标蛋白定量检测系统设置包括:流通池,层析装置,蛋白浓度检测计算装置以及蛋白质载量控制设备,包括溶液流通道接口和光通道接口的流通池的分别与层析装置和蛋白浓度检测计算装置连接;层析装置将含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,蛋白浓度检测计算装置对所述含目标蛋白的溶液的浓度进行检测,并实时计算所述含目标蛋白的溶液的蛋白总量;蛋白质载量控制设备与所述蛋白浓度检测计算装置通信连接,根据所述蛋白总量控制所述层析装置的上样载量,由此,实现了对目标蛋白进行在线定量检测以及根据检测结果控制所述目标蛋白的上样载量。此外,本实用新型采用的光谱仪性能更好,最短积分时间10微秒,响应更快,更加适合在线检测的需要,氘灯发光更稳定。本实用新型采用1个流通池实现了0.1-10mm的光程变化,结构更简单,可测量浓度范围更广。采用SMA-905接口为标准接口,适应性强;当料液通过流通池时,由于流过光纤狭缝中的料液很少,大部分从外部空间通过,不会造成阻力。多个装置间采用工业通信协议更稳定可靠;以及本实用新型可提供更多在线控制功能。
当然,本实用新型还可有其它多种实施例,在不背离本实用新型精神及其实质的情况下,熟悉本领域的技术人员当可根据本实用新型作出各种相应的改变和变形,但这些相应的改变和变形都应属于本实用新型所附的权利要求的保护范围。

Claims (11)

1.一种在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,包括:
流通池,包括溶液流通道接口和光通道接口,所述溶液流通道接口与层析装置连接,所述光通道接口与所述蛋白浓度检测计算装置连接;
层析装置,将含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统,并对流经的含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,获得目标蛋白溶液;
蛋白浓度检测计算装置,对所述含目标蛋白溶液的浓度进行检测,并实时计算所述含目标蛋白的溶液中的蛋白总量;
蛋白质载量控制设备,与所述蛋白浓度检测计算装置和所述层析装置通信连接,根据所述蛋白总量控制所述层析装置的上样载量。
2.根据权利要求1所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述层析装置包括:
层析设备,与所述流通池的溶液流通道接口连接,将所述含目标蛋白的溶液接入所述在线目标蛋白定量检测系统;
至少一个层析柱,与所述流通池的溶液流通道接口连接,对流经的所述含目标蛋白的溶液进行蛋白分离,将所述含目标蛋白的溶液中的其他成分去除,获得目标蛋白溶液。
3.根据权利要求2所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述蛋白浓度检测计算装置包括:
紫外线照射装置,与所述流通池的光通道接口连接,照射流经所述流通池的所述含目标蛋白的溶液;
光谱仪,与所述流通池的光通道接口连接,检测所述紫外线照射装置照射流经所述流通池的所述含目标蛋白的溶液的紫外线强度,并将紫外吸收值数据传送到蛋白质浓度计算设备;
蛋白质浓度计算设备,接收所述光谱仪的紫外吸收值数据,并根据预设的标定的标准曲线,实时计算所述蛋白质浓度以及单位时间流经流通池的目标蛋白总量;并将所述目标蛋白总量发送到所述蛋白质载量控制设备。
4.根据权利要求3所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述蛋白质载量控制设备包括:
上样控制模块,将接收到的所述目标蛋白总量作为累计的上样量与预设的层析柱上样载量进行实时对比,并在所述累计的上样量与预设的所述层析柱上样载量相等时,控制所述层析设备停止上样;以及
选择调用模块,执行选择并调用所述预设的标定的标准曲线、UV调零信号、目标蛋白累计命令以及目标蛋白定量累计上限设定的控制操作。
5.根据权利要求4所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,
所述蛋白质浓度计算设备为工控机;
所述蛋白质载量控制设备为DCS系统。
6.根据权利要求4所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述流通池的溶液流通道接口包括设置于所述流通池横向两端的溶液流入接口和溶液流出接口;所述光通道接口包括设置于所述流通池纵向两端的上端接口和下端接口,并且在所述流通池的中部具有供所述含目标蛋白的溶液通过的光径口;
所述流通池的溶液流入接口与所述层析设备连接,所述流通池的溶液流出接口与所述层析柱连接;所述上端接口与所述紫外线照射装置连接,所述下端接口与所述光谱仪连接。
7.根据权利要求6所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述的流通池为可变光程流通池;所述可变光程流通池的光程由调整所述光径口的大小调整;
所述光径口由所述流通池的中部设置的两根光纤的间距构成,所述两根光纤的间距为0.1mm~10mm。
8.根据权利要求7所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述上端接口和下端接口为光纤接口,所述两根光纤通过所述上端接口和下端接口与所述流通池连接,并且与所述上端接口连接的所述光纤与所述紫外线照射装置的发光光源连接;与所述下端接口连接的所述光纤与所述光谱仪连接。
9.根据权利要求8所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述光纤为抗紫外石英光纤,所述光纤的芯径为450微米;所述两根光纤通过SMA905接头与所述流通池连接。
10.根据权利要求3所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述紫外线照射装置的发光光源包括氙灯、氘灯、LED灯或者汞灯;所述紫外线照射装置的发光光源的发射光波长范围为200nm-400nm;
所述光谱仪包括:紫外光谱仪,紫外-可见光谱仪;所述光谱仪的吸光值范围为0-2AU。
11.根据权利要求10所述的在线目标蛋白定量检测系统,其特征在于,所述紫外线照射装置的发射光波长范围为270nm-320nm;
所述光谱仪的吸光值范围为在0.05AU-1.6AU;
所述目标蛋白为单抗。
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WO2022251194A1 (en) * 2021-05-25 2022-12-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Titer method using uv measurement for continuous biological production

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