CN211771286U - 一种带滤膜的细胞分离瓶 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供一种带滤膜的细胞分离瓶，细胞分离瓶本体设有瓶身，瓶身顶部设有开口，瓶身底部连接导通管，在瓶身距底端45mm的位置有一层滤膜，滤膜将瓶身分隔为上腔体和下腔体两个腔体，上腔体为过滤腔，下腔体为沉淀腔，细胞分离瓶由分离瓶瓶身、旋盖、底部易折式导通管以及内置滤膜组成，分离瓶浓缩造血干细胞实现存储的方法，该方法基于羟乙基淀粉沉淀法分离造血干细胞，通过增加滤膜使传统的分离红细胞和浓缩白细胞的复杂操作得到简化，变成易于操作的方式，同时大大提高造血干细胞的回收率。

Description

一种带滤膜的细胞分离瓶

技术领域

本实用新型涉及造血干细胞移植及实验室设备领域，确切地说是一种带滤膜的细胞分离瓶。

背景技术

目前，我国造血干细胞移植治疗恶性血液病的医疗技术已经成熟，国内外医院已有很多应用造血干细胞治疗白血病的成功病例。由于非血缘关系随机志愿者数量少且HLA配型成功率极低，而脐带血造血干细胞有易获取、免疫原性低、易于配型、移植后移植物抗宿主病发生率低等优点，比骨髓造血干细胞更具有应用价值。因此脐带血造血干细胞的存储具有积极的临床应用价值。

新鲜采集的脐带血内含有丰富的有核细胞，包括造血干细胞，但同时也有大量的红细胞、血小板和血浆等不利于移植应用的成分。传统存储方法是使用羟乙基淀粉沉淀法尽量去除脐血中的红细胞、血小板，然后通过去除血浆来控制储存体积。这种方法能够很好的保存脐血中的造血干细胞，为其HLA配型应用提供了大量有效的有核细胞。但这种传统的制备方法比较繁琐、费时费力，且对操作人员的经验、技术等有着比较高的要求，不利于规模化制备。尤其是加入羟乙基淀粉离心后分离红细胞的过程，对操作人员的经验依赖性非常大，极易造成有核细胞与红细胞分界不清而损失大量造血干细胞。

为解决有核细胞与红细胞分界不清、操作复杂的问题，本实用新型结合膜分离技术与羟乙基淀粉沉淀法，提出一种带滤膜的细胞分离瓶及其分离造血干细胞的方法。其特征在于，该细胞分离瓶顶端为旋盖，底端为易折式导通管，在距底端20mm-45mm的位置有一层孔径8um-20um的滤膜，将分离瓶隔离上下两个部分，从旋盖处加入羟乙基淀粉和固定体积的血样后颠倒混匀，然后正置离心，此时仅有红细胞会沉淀至下层，而有核细胞均被滤膜截留在上层，从而达到98%以上的有核细胞回收率。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是传统存储方法是使用羟乙基淀粉沉淀法尽量去除脐血中的红细胞、血小板，然后通过去除血浆来控制储存体积。这种方法能够很好的保存脐血中的造血干细胞，为其HLA配型应用提供了大量有效的有核细胞。但这种传统的制备方法比较繁琐、费时费力，且对操作人员的经验、技术等有着比较高的要求，不利于规模化制备。尤其是加入羟乙基淀粉离心后分离红细胞的过程，对操作人员的经验依赖性非常大，极易造成有核细胞与红细胞分界不清而损失大量造血干细胞。

为解决上述技术问题，本实用新型采用如下技术手段：

一种带滤膜的细胞分离瓶，包括细胞分离瓶本体；所述的细胞分离瓶本体设有瓶身，瓶身顶部设有开口，瓶身底部连接导通管，在瓶身距底端45mm的位置有一层滤膜，滤膜将瓶身分隔为上腔体和下腔体两个腔体，上腔体为过滤腔，下腔体为沉淀腔，所述的滤膜上设有滤孔，滤孔的数量为多个，均匀分布在滤膜上，滤孔的孔径为8um-20um，所述的的开口处设有瓶盖，所述的导通管一端连接瓶身底部，导通管另一端设有出口。

作为优选，本实用新型更进一步的技术方案是：

所述的开口的尺寸和瓶盖的大小相互匹配，开口外侧设有外螺纹，瓶盖内侧设有内螺纹，外螺纹和内螺纹可以将瓶口密封或打开。

所述的瓶身为圆柱体，滤膜形状为圆形，滤膜的直径长度和瓶身内径长度相互匹配。

所述的导通管为易折式设置。

所述的瓶身设有刻度指示，瓶身的容积为120ml。

所述的过滤腔过滤后为核细胞保藏区，所述的沉淀腔沉淀后为红细胞保藏区。

所述的出口材质为塑料出口。

本实用新型提供一种带滤膜的细胞分离瓶及其用于细胞浓缩存储的方法。所述细胞分离瓶由分离瓶瓶身、旋盖、底部易折式导通管以及内置滤膜组成。本实用新型还公开了使用该分离瓶浓缩造血干细胞实现存储的方法，该方法基于羟乙基淀粉沉淀法分离造血干细胞，通过增加滤膜使传统的分离红细胞和浓缩白细胞的复杂操作得到简化，变成易于操作的方式，同时大大提高造血干细胞的回收率。本实用新型提供的细胞分离瓶及方法可以使特殊血库和细胞生物学研究中的造血干细胞分离过程更简化、操作更容易。

附图说明

图1为本实用新型的一种具体实施例的结构示意图。

图2为本实用新型的滤膜的结构示意图。

附图标记说明：1－瓶身；2－瓶盖；3－滤膜；4－导通管；5－出口；6－滤孔。

具体实施方式

下面结合实施例，进一步说明本实用新型。

参见图1、图2可知，本实用新型一种带滤膜的细胞分离瓶，包括细胞分离瓶本体；所述的细胞分离瓶本体设有瓶身1，瓶身1顶部设有开口，瓶身1底部连接导通管4，在瓶身1距底端45mm的位置有一层滤膜3，滤膜3将瓶身1分隔为上腔体和下腔体两个腔体，上腔体为过滤腔，下腔体为沉淀腔，所述的滤膜3上设有滤孔6，滤孔6的数量为多个，均匀分布在滤膜3上，滤孔6的孔径为8um-20um，所述的的开口处设有瓶盖2，所述的导通管4一端连接瓶身1底部，导通管4另一端设有出口5，开口的尺寸和瓶盖2的大小相互匹配，开口外侧设有外螺纹，瓶盖2内侧设有内螺纹，外螺纹和内螺纹可以将瓶口密封或打开，瓶身1为圆柱体，滤膜3形状为圆形，滤膜3的直径长度和瓶身1内径长度相互匹配，导通管4为易折式设置，瓶身1设有刻度指示，瓶身1的容积为120ml，过滤腔过滤后为核细胞保藏区，所述的沉淀腔沉淀后为红细胞保藏区，出口5材质为塑料出口5。

具有实施例2：

参见图1、图2可知，本实用新型提供一种带滤膜的细胞分离瓶及其用于造血干细胞浓缩存储的方法。所述细胞分离瓶为一次性使用的无菌产品，由分离瓶瓶身1、旋盖、底部易折式导通管4以及内置滤膜3组成。本实用新型还公开了使用该分离瓶浓缩造血干细胞实现存储的方法，该方法基于羟乙基淀粉沉淀法分离造血干细胞，通过增加滤膜3使传统的分离红细胞和浓缩白细胞的复杂操作得到简化，变成易于操作的方式，同时大大提高造血干细胞的回收率。

该细胞分离瓶顶端为旋盖，底端为易折式导通管4，在距底端45mm的位置有一层孔径8um-20um的滤膜3，将分离瓶隔离上下两个部分，瓶身1带有刻度指示120ml容积，从旋盖处加入羟乙基淀粉和固定体积的血样后颠倒混匀，然后正置离心，此时仅有红细胞会沉淀至下层，而有核细胞均被滤膜3截留在上层，从而达到95%以上的有核细胞回收率。

具体实施例3：

参见图1、图2可知，本实用新型结合膜分离技术与羟乙基淀粉沉淀法，提出一种带滤膜3的细胞分离瓶及其分离造血干细胞的方法。其具体实施办法为：

在无菌条件下，将细胞分离瓶的瓶身1固定在专用夹台上，打开旋盖2，依次加入20ml羟乙基淀粉和全部血样，然后补加生理盐水至120ml刻度线。

轻轻颠倒混匀5-8次，800g离心10分钟。此时滤膜3以下为血小板和红细胞，滤膜3以上为有核细胞和血浆以及少量红细胞和血小板。

将易折式导通管4掰开，将底部红细胞和血小板放出，然后将导通管4热合密封。

将旋盖打开，将滤膜3上方液体吸走至距滤膜315mm。

剩余细胞液轻晃涮洗滤膜3，然后从瓶口倒至50ml离心管，添加冻存保护剂后转移至冻存袋，即可实现有核细胞的浓缩存储。

该血样制备前后均检测有核细胞数量，计算有核细胞回收率%=（制备后有核细胞数/制备前有核细胞数）%，用本方法制备的有核细胞回收率为97%，而传统的血袋分离回收率平均值约为83%，该实施例的回收率远高于传统方法。同时红细胞残留量非常低，仅为8%，远低于传统方法（30%-40%）。另外，本方法操作简便，仅需一次离心，且易于重复，能够稳定的实现较高的有核细胞回收率。

由于以上所述仅为本实用新型的具体实施方式，但本实用新型的保护不限于此，任何本技术领域的技术人员所能想到本技术方案技术特征的等同的变化或替代，都涵盖在本实用新型的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种带滤膜的细胞分离瓶，包括细胞分离瓶本体；其特征在于：所述的细胞分离瓶本体设有瓶身，瓶身顶部设有开口，瓶身底部连接导通管，在瓶身距底端45mm的位置有一层滤膜，滤膜将瓶身分隔为上腔体和下腔体两个腔体，上腔体为过滤腔，下腔体为沉淀腔，所述的滤膜上设有滤孔，滤孔的数量为多个，均匀分布在滤膜上，滤孔的孔径为8um-20um，所述的开口处设有瓶盖，所述的导通管一端连接瓶身底部，导通管另一端设有出口。

2.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的开口的尺寸和瓶盖的大小相互匹配，开口外侧设有外螺纹，瓶盖内侧设有内螺纹，外螺纹和内螺纹可以将瓶口密封或打开。

3.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的瓶身为圆柱体，滤膜形状为圆形，滤膜的直径长度和瓶身内径长度相互匹配。

4.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的导通管为易折式设置。

5.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的瓶身设有刻度指示，瓶身的容积为120ml。

6.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的过滤腔过滤后为核细胞保藏区，所述的沉淀腔沉淀后为红细胞保藏区。

7.根据权利要求1所述的一种带滤膜的细胞分离瓶，其特征在于：所述的出口材质为塑料出口。

Images