CN210803498U - 检测人cd23蛋白的即用型免疫组化试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开一种检测人CD23蛋白的即用型免疫组化试剂盒,包括:盒体、第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器,所述第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器放置于所述盒体内;所述第一容器内为人CD23特异性单克隆抗体,所述第二容器内为可与所述人CD23特异性单克隆抗体结合的二抗;所述显色剂容器内为免疫组化显色剂;所述底物缓冲液容器内为底物缓冲液,用于给待检测组织提供显色环境。本实用新型的试剂盒简化了实验步骤,优化了实验流程,从而使检测程序更加方便、快捷、准确,且能保证实验的一致性和可重复性。
Description
技术领域
本实用新型属于医疗器械领域,具体的涉及到一种检测人CD23蛋白的即用型免疫组化试剂盒。
背景技术
淋巴瘤是我国最常见的恶性肿瘤之一,根据瘤细胞的类型可分为非霍奇金淋巴瘤(NHL)和霍奇金淋巴瘤(HL)两类。HL类按照病理类型分为经典型和结节性淋巴细胞为主型的两大类型,NHL类以弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(MALT)、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤/(CLL/SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)5种最为常见,占非霍奇金淋巴瘤的3/4。
CD23抗原作为一种在多种造血细胞中表达的跨膜糖蛋白,在大多数CLL/SLL呈CD23阳性,在MCL则通常为CD23阴性。临床研究已证实,CD23可用于区分CLL/SLL和MCL。因此,用免疫组织化学技术检测CD23表达对于鉴别以上淋巴瘤具有重要的参考意义。
免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、定性及相对定量。目前实验过程中所需的试剂、抗体等均需现配,因此较为费时费力。
实用新型内容
本实用新型的目的在于提供一种检测人CD23蛋白的免疫组化试剂盒,可用于石蜡包埋的细胞和组织中人CD23蛋白的快速检测,操作简便、快捷。
为达前述目的,本实用新型提供一种检测人CD23蛋白的即用型免疫组化试剂盒,包括:盒体、第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器,所述第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器放置于所述盒体内;
所述第一容器内为人CD23特异性单克隆抗体,所述第二容器内为可与所述人CD23特异性单克隆抗体特异性结合的二抗,所述二抗带有显色标记;所述显色剂容器内为免疫组化显色剂,用于使显色标记显色;所述底物缓冲液容器内为底物缓冲液,用于给待检测组织提供显色环境。
作为一个优选的实例,所述人CD23特异性单克隆抗体为兔源单克隆抗体。
作为一个优选的实例,所述二抗为羊抗鼠/兔IgG二抗。
作为一个优选的实例,所述羊抗鼠/兔IgG二抗为辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鼠/兔IgG二抗;优选地,为多聚体HRP偶联的二抗。所述免疫组化显色剂为DAB(3,3’-二氨基联苯胺)染色液,所述DAB染色液的形式为DAB色原浓缩液,所述底物缓冲液容器内为DAB底物缓冲液。
作为一个优选的实例,所述试剂盒还包括可开启/关闭的盒盖,所述盒盖与盒体是相连接的或相互独立的。
作为一个优选的实例,所述盒体内设置有内衬,所述内衬设置至少四个容器固定位,所述容器固定位呈圆筒形凹陷,其外形与各所述容器的外形相匹配;用于放置和固定所述容器。
作为一个优选的实例,所述内衬为纸板、海绵块、泡沫块或塑料块。
作为一个优选的实例,所述第一容器为6mL滴瓶,其材质可选用高压聚乙烯(LDPE)。
作为一个优选的实例,所述第二容器为6mL滴瓶,其材质可选用高压聚乙烯(LDPE)。
作为一个优选的实例,所述显色剂容器为3mL滴瓶,所述滴瓶不透光;具体的,所述滴瓶为棕色瓶,其材质可选用高压聚乙烯(LDPE)。
作为一个优选的实例,所述底物缓冲液容器为15mL试剂瓶,其材质可选用高密度聚乙烯(HDPE)。
作为一个优选的实例,所述试剂盒还包括说明书,所述说明书记载有所述试剂盒的组成信息和使用方法。
本实用新型的试剂盒中所包含的试剂均无需稀释或调整抗体使用浓度,可直接用于检测,简化了实验步骤,优化了实验流程,从而使检测程序更加方便、快捷,且能保证实验的一致性和可重复性。
所述试剂盒采用兔抗人CD23单克隆抗体和多聚体HRP偶联的羊抗鼠/兔IgG二抗可提供检测灵敏度,扩大免疫组化信号。
附图说明
图1为本实用新型的试剂盒的结构示意图
图2为本实用新型的试剂盒的结果示例
附图中符号标记说明:
1 第一容器
2 第二容器
3 显色剂容器
4 底物缓冲液容器
5 盒体
6 盒盖
7 生发中心
8 套区B细胞
9 套区T细胞
具体实施方式
下面将对本实用新型的技术方案进行清楚、完整的描述,显然,所描述的实施例是本实用新型的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本实用新型保护的范围。
如图1所示,本实用新型实施例提供一种检测人CD23蛋白的即用型免疫组化试剂盒,包括:盒体5、第一容器1、第二容器2、显色剂容器3和底物缓冲液容器4,所述容器1、2、3、4放置于盒体5内。
所述试剂盒还包括盒盖6,盒盖6与盒体5配合可开启/关闭试剂盒,在本实施例中,盒盖6与盒体5是相连接的;在其他的实施例中,盒盖5与盒体1也可以是相互独立的。
盒体5内设置有内衬,所述内衬设置至少四个容器固定位,所述容器固定位呈圆筒形凹陷,其外形与各所述容器的外形相匹配;用于放置和固定所述容器。所述内衬的材质可为纸板、海绵块、泡沫块或塑料块。
在本实施例中,第一容器1为6mL滴瓶,其内装有兔抗人CD23蛋白单克隆抗体(一抗);第一容器1的材质可选用塑料,例如高压聚乙烯(LDPE)。
第二容器2为6mL滴瓶,其内装有多聚体辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鼠/兔IgG二抗,所述二抗可与第一容器1的一抗特异性结合;第二容器2的材质可选用塑料,例如高压聚乙烯(LDPE)。
显色剂容器3为3mL的不透光的棕色滴瓶,其内装有DAB(3,3’-二氨基联苯胺)色原浓缩液;显色剂容器3的材质可选用塑料,例如高压聚乙烯(LDPE)。
底物缓冲液容器4为15mL试剂瓶,其内装有DAB底物缓冲液,为含稳定剂、增强剂的过氧化氢溶液,pH6~8。底物缓冲液容器4的材质可选用塑料,例如高密度聚乙烯(HDPE)。
容器1、2、3、4内的试剂均无需调整使用浓度,可直接用于检测。
在本实用新型的一种具体实施方式中,该试剂盒还包括说明书,说明书记载有试剂盒的组成信息和使用步骤。
一个典型的本实用新型的组成信息实例为:
1)第一容器:即用型兔抗人CD23单克隆抗体;2)第二容器:即用型多聚体HRP偶联的羊抗鼠/兔IgG二抗;3)显色剂容器:DAB色原浓缩液;4)底物缓冲液容器:DAB底物缓冲液。
其使用步骤为:
1、样品前处理:
1)样本脱蜡与水化:将3~5μm的石蜡切片置于二甲苯中浸泡脱蜡,重复两次,随后分别置于浓度为100%、95%、85%和70%的乙醇中各水化3分钟,再用纯化水冲洗两次;
2)抗原修复:将切片置于pH9.0 EDTA抗原修复液中,采用95~99℃高温热修复20分钟或高压修复3分钟,取出冷却至室温;用纯化水冲洗两次;
3)内源性过氧化物酶灭活:滴加200μL 3%过氧化氢于切片至完全覆盖组织,室温孵育5~15分钟后,用纯化水冲洗两次,用PBS溶液冲洗3分钟。
2、免疫组化处理(本试剂盒):
4)一抗孵育:加入1~3滴第一容器中的即用型兔抗人CD23单克隆抗体至完全覆盖组织,室温孵育0.5~1小时后,用PBS溶液冲洗三次;
5)二抗孵育:加入1~3滴第二容器中的即用型多聚体HRP偶联的羊抗鼠/兔IgG二抗至完全覆盖组织,室温孵育0.5小时后,用PBS冲洗三次,用纯化水冲洗两次;
6)DAB显色:用显色剂容器中的DAB色原浓缩液和底物缓冲液容器中的DAB底物缓冲液配制DAB工作液(按一滴DAB色原浓缩液加入800μLDAB底物缓冲液的比例),在切片上滴加DAB工作液至完全覆盖组织进行显色,依据颜色变化终止染色,再用纯化水冲洗两次。
3、封片
7)苏木素复染:采用苏木素进行复染,再用PBS或自来水进行冲洗返蓝;
8)脱水透明:将切片依次浸泡于浓度为70%、85%、95%、100%、100%的乙醇中,每次浸泡3分钟;再将切片浸泡于二甲苯中使其透明,重复两次;
9)用中性树胶对样品进行封片。
所得封片结果示例如图2所示,图中为扁桃体组织切片,其中,生发中心9的滤泡树突状细胞染色颜色较深,为强细胞膜染色,表明CD23表达量高;在滤泡套区的套区B细胞10染色颜色较浅,为中等强度的细胞膜染色,表明CD23表达较低;套区T细胞11则无染色,表明不表达CD23;染色结果符合理论预期。
综上所述,上述各实施例仅为本实用新型的较佳实施例而已,并不用以限定本实用新型的保护范围,凡在本实用新型的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换、改进等,皆应包含在本实用新型的保护范围内。
Claims (10)
1.一种检测人CD23蛋白的即用型免疫组化试剂盒,其特征在于,包括:盒体、第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器,所述第一容器、第二容器、显色剂容器和底物缓冲液容器放置于所述盒体内;
所述第一容器内为人CD23特异性单克隆抗体,所述第二容器内为可与所述人CD23特异性单克隆抗体特异性结合的二抗,所述二抗带有显色标记;所述显色剂容器内为免疫组化显色剂,用于使所述显色标记显色;所述底物缓冲液容器内为底物缓冲液,用于为待检测组织提供显色环境。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述人CD23特异性单克隆抗体为兔源单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述二抗为羊抗鼠/兔IgG二抗。
4.如权利要求1或3所述的试剂盒,其特征在于,所述二抗为辣根过氧化物酶标记的二抗;所述免疫组化显色剂为DAB染色液;所述底物缓冲液为DAB底物缓冲液。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括可开启/关闭的盒盖,所述盒盖与盒体是相连接的或相互独立的。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述盒体内设置有内衬,所述内衬设置至少四个容器固定位;所述容器固定位呈圆筒形凹陷;所述内衬为纸板、海绵块、泡沫块或塑料块。
7.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述第一容器为6mL滴瓶。
8.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述第二容器为6mL滴瓶。
9.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述显色剂容器为3mL滴瓶,所述滴瓶的材质不透光。
10.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述底物缓冲液容器为15mL试剂瓶。
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CN112964877A (zh) * | 2021-03-09 | 2021-06-15 | 河南赛诺特生物技术有限公司 | 一种用于鉴别套细胞淋巴瘤的免疫组化多重染色试剂盒及染色程序 |
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