CN210394394U - 一种透气袋正反向灌流细胞培养装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，包括2升透气细胞培养袋、透气袋灌流正反转向阀、蠕动泵、中空纤维柱正反转向阀和中空纤维柱，2升透气细胞培养袋的上端设置有透气细胞培养袋补液口，2升透气细胞培养袋的下出口通过管道与透气袋灌流正反转向阀连接。本实用新型透气袋正反向灌流细胞培养装置，选用一次性的2升透气细胞培养袋、透气袋灌流正反转向阀、蠕动泵、中空纤维柱正反转向阀和中空纤维柱可实现管道化无菌封闭系统，保证细胞培养安全性，透气袋灌流正反转向阀和中空纤维柱正反转向阀组成的四路两通阀方便正反向灌流培养及中空纤维柱正反向冲洗，实现长时间高密度灌流培养，结构简单，操作方便。
Description
技术领域
本实用新型涉及T细胞扩增培养技术领域，具体为一种透气袋正反向灌流细胞培养装置。
背景技术
一次性透气袋广泛用于细胞治疗中培养扩增T细胞，随着细胞增多，营养消耗，代谢废物增多，由于透气袋培养体积有限，无法实现生产更多细胞以及更换培养液，透气袋并联中空纤维柱实现灌流培养，去除废物的同时补充新鲜培养液，但长时间高密度细胞扩增，透气袋中需要高效换液，中空纤维柱也有堵塞现象。
实用新型内容
本实用新型的目的在于提供一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，采用四路两通阀实现透气袋正反向灌流培养提高混合效率，中空纤维柱正反向切向流防止柱子堵塞，目标超过千万细胞/ml细胞密度，1升透气袋收获10^9到10^10细胞总数，可以解决现有技术中的问题。
为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，包括2升透气细胞培养袋、透气袋灌流正反转向阀、蠕动泵、中空纤维柱正反转向阀和中空纤维柱，所述2升透气细胞培养袋的内侧设置有培养液，所述2升透气细胞培养袋的上端设置有透气细胞培养袋补液口，所述2升透气细胞培养袋的下出口通过管道与透气袋灌流正反转向阀连接，所述透气袋灌流正反转向阀通过管道与蠕动泵连接，所述蠕动泵通过管道与中空纤维柱正反转向阀连接，所述中空纤维柱正反转向阀通过管道与中空纤维柱的下端连接，所述中空纤维柱上设置有中空纤维柱侧透出液出口，所述中空纤维柱的上端通过管道与中空纤维柱正反转向阀连接，所述中空纤维柱正反转向阀通过管道与透气袋灌流正反转向阀连接，所述透气袋灌流正反转向阀通过管道与2升透气细胞培养袋的上端连接。
优选的，所述2升透气细胞培养袋的接种种子细胞密度为10^5细胞/ml，放在二氧化碳细胞培养箱中静置培养3-5天。
优选的，所述中空纤维柱采用美国WATERSEP辐照灭菌的中空纤维柱。
与现有技术相比，本实用新型的有益效果如下：
本实用新型透气袋正反向灌流细胞培养装置，选用一次性的2升透气细胞培养袋、透气袋灌流正反转向阀、蠕动泵、中空纤维柱正反转向阀和中空纤维柱可实现管道化无菌封闭系统，保证细胞培养安全性；透气袋灌流正反转向阀和中空纤维柱正反转向阀组成的四路两通阀方便正反向灌流培养及中空纤维柱正反向冲洗，实现长时间高密度灌流培养；结构简单，操作方便，只在传统透气袋培养加上中空纤维柱实现灌流培养，加上两个四口两路阀实现2升透气细胞培养袋细胞正反灌流，中空纤维柱正反向冲洗；如果是2升透气细胞培养袋灌流培养杂交瘤细胞，细胞分泌的抗体可以随着透出液，实现连续化生产，细胞密度是普通培养的5-10倍，分泌的抗体可以24小时源源不断的离开37度环境，防止抗体聚集，提高了抗体质量；2升透气细胞培养袋灌流培养T细胞，细胞密度比静置培养高5-10倍，1升培养体积可以到达病人治疗需要的10^9-10细胞总数。
附图说明
图1为本实用新型的透气袋正反向灌流细胞培养装置的正向灌流培养；
图2为本实用新型的透气袋正反向灌流细胞培养装置的反向冲洗。
图中：1、2升透气细胞培养袋；11、培养液；12、透气细胞培养袋补液口；2、透气袋灌流正反转向阀；3、蠕动泵；4、中空纤维柱正反转向阀；5、中空纤维柱；51、中空纤维柱侧透出液出口。
具体实施方式
下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
请参阅图1-2，一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，包括2升透气细胞培养袋1、透气袋灌流正反转向阀2、蠕动泵3、中空纤维柱正反转向阀4和中空纤维柱5，细胞培养液从2升透气细胞培养袋1下出口连接透气袋灌流正反转向阀2，蠕动泵3在透气袋灌流正反转向阀2和中空纤维柱正反转向阀4之间，从中空纤维柱5下端进入中空纤维柱5，细胞代谢废物小分子从中空纤维柱侧透出液出口51排出系统，细胞从中空纤维柱5上端返回中空纤维柱正反转向阀4、透气袋灌流正反转向阀2回到2升透气细胞培养袋1上端进口，从透气细胞培养袋补液口12补充新鲜的培养液，速度与中空纤维柱侧透出液出口51速度一致，维持细胞高密度为10^7/ml，2升透气细胞培养袋1由美国CORNING公司生产，2升透气细胞培养袋1的接种种子细胞密度为10^5细胞/ml，放在二氧化碳细胞培养箱中静置培养3-5天，当细胞密度达到10^6/ml，从透气细胞培养袋补液口12补充新鲜培养液，直到2升透气细胞培养袋1中的培养液11接近一升，开始准备灌流培养，2升透气细胞培养袋1中的细胞液泵入中空纤维柱5，小分子代谢物透出中空纤维柱5，细胞循环回到2升透气细胞培养袋1，由于中空纤维柱5排出了液体，2升透气细胞培养袋1中可以补充新鲜的培养基，维持细胞生长，灌流24小时后，随着透过时间增加，培养液11中的核酸大分子在中空纤维柱5膜表面形成凝胶层，阻碍了透出速度，这时可以转动中空纤维柱正反转向阀4，实现中空纤维柱5流向逆转，反向切向流可以去除膜表面的凝胶层恢复中空纤维膜的通透性，保持生产效率，透气袋灌流正反转向阀2也可同时反转，改变2升透气细胞培养袋1中液体流动方向，起到高效混合交换的效果，每过24小时翻转2个阀门，保持细胞高密度生长状态，直至达到10^7/ml，采用四路两通阀实现2升透气细胞培养袋1正反向灌流培养提高混合效率，中空纤维柱5正反向切向流防止柱子堵塞，目标超过千万细胞/ml细胞密度，1升透气袋收获10^9到10^10细胞总数，2升透气细胞培养袋1的内侧设置有培养液11，2升透气细胞培养袋1的上端设置有透气细胞培养袋补液口12，2升透气细胞培养袋1的下出口通过管道与透气袋灌流正反转向阀2连接，透气袋灌流正反转向阀2通过管道与蠕动泵3连接，蠕动泵3通过管道与中空纤维柱正反转向阀4连接，中空纤维柱正反转向阀4通过管道与中空纤维柱5的下端连接，中空纤维柱5采用美国WATERSEP辐照灭菌的中空纤维柱，选用美国WATERSEP辐照灭菌的中空纤维柱5，修饰聚醚砜膜材质，不吸附蛋白，易清洗，转动中空纤维柱正反转向阀4，冲洗膜表面凝胶层，保持膜通量，选择0.45um或0.65um中空纤维柱5可以透出杂交瘤抗体，实现小培养体积，高杂交瘤细胞密度，连续长时间收获高抗体浓度，中空纤维柱5上设置有中空纤维柱侧透出液出口51，细胞代谢废物小分子从中空纤维柱侧透出液出口51排出系统，如果是2升透气细胞培养袋1灌流培养杂交瘤细胞，细胞分泌的抗体可以随着透出液，实现连续化生产，细胞密度是普通培养的5-10倍，分泌的抗体可以24小时源源不断的离开37度环境，防止抗体聚集，提高了抗体质量，2升透气细胞培养袋1灌流培养T细胞，细胞密度比静置培养高5-10倍，1升培养体积可以到达病人治疗需要的10^9-10细胞总数，中空纤维柱5的上端通过管道与中空纤维柱正反转向阀4连接，中空纤维柱正反转向阀4通过管道与透气袋灌流正反转向阀2连接，透气袋灌流正反转向阀2通过管道与2升透气细胞培养袋1的上端连接，选用一次性的2升透气细胞培养袋1、透气袋灌流正反转向阀2、蠕动泵3、中空纤维柱正反转向阀4和中空纤维柱5可实现管道化无菌封闭系统，保证细胞培养安全性，透气袋灌流正反转向阀2和中空纤维柱正反转向阀4组成的四路两通阀方便正反向灌流培养及中空纤维柱5正反向冲洗，实现长时间高密度灌流培养，结构简单，操作方便，只在传统透气袋培养加上中空纤维柱5实现灌流培养，加上两个四口两路阀实现2升透气细胞培养袋1细胞正反灌流，中空纤维柱5正反向冲洗。
工作原理：选用美国CORNING公司生产的2升透气细胞培养袋1，接种种子细胞密度为10^5细胞/ml，放在二氧化碳细胞培养箱中静置培养3-5天，当细胞密度达到10^6/ml，从透气细胞培养袋补液口12补充新鲜培养液，直到2升透气细胞培养袋1中的培养液11接近一升，开始准备灌流培养，2升透气细胞培养袋1中的细胞液泵入中空纤维柱5，小分子代谢物透出中空纤维柱5，细胞循环回到2升透气细胞培养袋1，由于中空纤维柱5排出了液体，2升透气细胞培养袋1中可以补充新鲜的培养基，维持细胞生长，灌流24小时后，随着透过时间增加，培养液11中的核酸大分子在中空纤维柱5膜表面形成凝胶层，阻碍了透出速度，这时可以转动中空纤维柱正反转向阀4，实现中空纤维柱5流向逆转，反向切向流可以去除膜表面的凝胶层恢复中空纤维膜的通透性，保持生产效率，透气袋灌流正反转向阀2也可同时反转，改变2升透气细胞培养袋1中液体流动方向，起到高效混合交换的效果，每过24小时翻转2个阀门，保持细胞高密度生长状态，直至达到10^7/ml。
综上所述：本实用新型透气袋正反向灌流细胞培养装置，选用一次性的2升透气细胞培养袋1、透气袋灌流正反转向阀2、蠕动泵3、中空纤维柱正反转向阀4和中空纤维柱5可实现管道化无菌封闭系统，保证细胞培养安全性；透气袋灌流正反转向阀2和中空纤维柱正反转向阀4组成的四路两通阀方便正反向灌流培养及中空纤维柱5正反向冲洗，实现长时间高密度灌流培养；结构简单，操作方便，只在传统透气袋培养加上中空纤维柱5实现灌流培养，加上两个四口两路阀实现2升透气细胞培养袋1细胞正反灌流，中空纤维柱5正反向冲洗；如果是2升透气细胞培养袋1灌流培养杂交瘤细胞，细胞分泌的抗体可以随着透出液，实现连续化生产，细胞密度是普通培养的5-10倍，分泌的抗体可以24小时源源不断的离开37度环境，防止抗体聚集，提高了抗体质量；2升透气细胞培养袋1灌流培养T细胞，细胞密度比静置培养高5-10倍，1升培养体积可以到达病人治疗需要的10^9-10细胞总数。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (2)
1.一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，包括2升透气细胞培养袋(1)、透气袋灌流正反转向阀(2)、蠕动泵(3)、中空纤维柱正反转向阀(4)和中空纤维柱(5)，其特征在于：所述2升透气细胞培养袋(1)的内侧设置有培养液(11)，所述2升透气细胞培养袋(1)的上端设置有透气细胞培养袋补液口(12)，所述2升透气细胞培养袋(1)的下出口通过管道与透气袋灌流正反转向阀(2)连接，所述透气袋灌流正反转向阀(2)通过管道与蠕动泵(3)连接，所述蠕动泵(3)通过管道与中空纤维柱正反转向阀(4)连接，所述中空纤维柱正反转向阀(4)通过管道与中空纤维柱(5)的下端连接，所述中空纤维柱(5)上设置有中空纤维柱侧透出液出口(51)，所述中空纤维柱(5)的上端通过管道与中空纤维柱正反转向阀(4)连接，所述中空纤维柱正反转向阀(4)通过管道与透气袋灌流正反转向阀(2)连接，所述透气袋灌流正反转向阀(2)通过管道与2升透气细胞培养袋(1)的上端连接。
2.根据权利要求1所述的一种透气袋正反向灌流细胞培养装置，其特征在于：所述中空纤维柱(5)采用美国WATERSEP辐照灭菌的中空纤维柱。
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