CN208087608U - 一种用于大体积核酸提取的吸附柱 - Google Patents

一种用于大体积核酸提取的吸附柱 Download PDF

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周秋霞
迟海洋
谭杰峰
陈永恒
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Abstract

本实用新型公开了一种用于大体积核酸提取的吸附柱,包括压圈、筛板、吸附膜、外管、套在外管内的内管以及螺旋盖,内管的上端设有螺纹,螺纹与所述螺旋盖相配合,内管内从上至下依次设有压圈、筛板和吸附膜。本实用新型通过优化封盖结构,用螺旋盖替代封盖,提高了封盖与内管的接触紧密性,增强了吸附柱在高速离心过程中的耐受力与抗压力,同时具有安全性高、紧密性好的特点;本实用新型适用于10~50毫升的样本提取,可一次性提取大量核酸,降低了污染的风险。

Description

一种用于大体积核酸提取的吸附柱
技术领域
本实用新型涉及核酸提取技术领域,尤其是一种用于大体积核酸提取的吸附柱。
背景技术
核酸的提取纯化是进行分子生物学各项研究的基础,特别是在分子诊断领域,PCR、RT-PCR、Northern blot、RT-Qpcr、cDNA文库的构建、酶切等技术手段都需要高纯度、完整性好的核酸。因此,核酸提取的质量和纯度及效率都成为各种相关实验的基础和关键。
现有的核酸提取吸附柱容量主要为2ml,用于小量核酸提取,包括外管、内管及吸附膜,封盖上设有一密封环,主要靠密封环与外管口段内径配合安装。现有吸附柱主要是靠密封环与外口径在压力作用下连接,连接不方便,甚至在离心过程中容易脱落,造成试剂被甩出,导致提取核酸失败。
实用新型内容
基于上述问题,本实用新型的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种用于大体积核酸提取的吸附柱,其连接方便,离心时不会脱落。
为实现上述目的,本实用新型采取的技术方案为:一种用于大体积核酸提取的吸附柱,包括压圈、筛板、吸附膜、外管、套在外管内的内管以及螺旋盖,所述内管的上端设有螺纹,所述螺纹与所述螺旋盖相配合,所述内管内从上至下依次设有压圈、筛板和吸附膜。其中,吸附膜优选为硅胶膜。
作为上述方案的进一步优化,所述外管的末端设有底座。
作为上述方案的进一步优化,所述底座内填充有重金属。由于吸附柱整体是比较细长的,当吸附柱放在工作台面上时,容易因为轻微的震动而倒下来,如果螺旋盖拧的不紧时或还没有盖上时,内管里的溶液会流到桌面,造成污染和浪费;底座填充有重金属后,吸附柱的质量增加,可以避免吸附柱因为轻微的震动而倾倒;底座内除了可以填充重金属,还可以填充石块等密度大于吸附柱材质的物质,以增加底座的质量;另外,吸附柱的质量增加后,吸附柱在离心时,两个吸附柱的内管内溶液的量的差距对离心过程的影响会被降低。
作为上述方案的进一步优化,所述重金属为铜、铅或银。更优选为铅。其中,铅的密度更大,成本更低。
作为上述方案的进一步优化,所述底座上设有漏斗。应当说明的是,漏斗优选设于底座中间,当漏斗的下底位于铅垂线上时,吸附柱可以更稳定地立于台面上。
作为上述方案的进一步优化,所述漏斗是封闭的。由此,避免漏斗内的重金属泄漏。
作为上述方案的进一步优化,所述筛板厚度为8.75~11.25mm,筛板内孔径为1.125~1.375mm,筛板孔隙率为10~15%,所述吸附膜的孔径为20~30μm。
综上所述,本实用新型的有益效果为:
本实用新型通过优化封盖结构,用螺旋盖替代封盖,提高了封盖与内管的接触紧密性,增强了吸附柱在高速离心过程中的耐受力与抗压力,实现了内管样品与外界完全隔离,防止在离心过程中液体飞出,避免了交叉污染,同时具有安全性高、紧密性好的特点;本实用新型适用于10~50毫升的样本提取,可一次性提取大量核酸,降低了污染的风险。
附图说明
图1为本实用新型的中内管的结构示意图;
图2为本实用新型的中外管的结构示意图;
图3为实施例1的吸附柱的结构示意图;
其中,1、外管,2、内管,3、螺旋盖,4、压圈,5、筛板,6、吸附膜,7、鲁尔接口,8、底座,9、漏斗。
具体实施方式
为更好的说明本实用新型的目的、技术方案和优点,下面将结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步说明。
实施例1
如图1~3所示,一种用于大体积核酸提取的吸附柱,包括外管1、套在外管1内的内管2以及螺旋盖3,内管2的上端设有螺纹,螺纹与螺旋盖3相配合,外管1的末端设有底座8,底座8上设有漏斗9,漏斗9是封闭的,漏斗9内充满重金属,重金属为铜、铅或银,优选为铅。
本实施例的吸附柱可用于大体积核酸样品的提取,内管内还包括从上至下依次设置的压圈4、筛板5及吸附膜6,其中,外管1、内管2和螺旋盖3均由聚丙烯材料制成,增强了有机溶液与酸碱的耐受性,内管2上面设有螺纹,螺旋盖正好盖在螺纹上,拧紧即可,提高了安全性,保证试剂在离心过程中不会飞出来;内管2底部设有一鲁尔接口7,方便试剂流出,筛板5用于支撑吸附膜6,在高速离心过程中可以提高吸附膜6的完整性,提高提取效率,筛板5采用纤维材料制成,具备很好的酸碱和有机溶剂的耐受性,筛板5厚度为8.75~11.25mm,筛板5内孔径为1.125~1.375mm,筛板5孔隙率为10~15%,吸附膜6孔径为20~30μm,压圈4用于固定筛板5和吸附膜6。
其中,吸附膜6采用硅基质膜。筛板5厚度优选为10.5mm,筛板5内孔径优选为1.25mm,筛板5孔隙率优选为15%。吸附膜6孔径优选为25μm。
传统的硅胶膜离心柱只能容纳2毫升以下样品,只适用于微量核酸的提取,在大量核酸提取时需多次重复进行,增加了污染的风险,有很大的不便。本实施例的吸附柱适用于10~50毫升的样本提取,方便一次性大量核酸的提取,也降低了污染的风险,实现了可持续发展。
本实施例的吸附柱应用于人全血基因组的提取纯化,可采用如下步骤:
1、转移100微升蛋白酶k至离心管中,转移2.4毫升抗凝全血至离心管中,震荡混匀10秒。转移2.4毫升裂解液至样品中,涡旋混匀15秒。
2、将离心管至于恒温水浴锅72℃孵育10分钟。
3、加入3毫升无水乙醇至离心管中,涡旋混匀15秒,短暂离心收集壁上的液体。
4、将离心管中所有液体转至硅膜吸附柱内管2中,拧紧螺旋盖3,将内管2至于外管1中,12000rpm离心1-2分钟。
5、弃滤液,把内管2装回外管1中,向内管2中加入3毫升洗涤液1,12000rpm离心1-2分钟。
6、弃滤液,把内管2装回外管1中,向内管2中加入3毫升洗涤液2,12000rpm离心1-2分钟。
7、弃滤液,把内管2装回外管1中,向内管2中加入3毫升洗涤液2,12000rpm离心1-2分钟。
8、弃废液,把内管2套回外管1,13000rpm离心空转3分钟,甩干内管2。
9、将内管2转移至新的外管1,打开内管2盖子,72℃放置2分钟(使用干式恒温器,不能使用水浴锅)。
10、加入100微升预热至72℃的洗脱液至内管2的膜中央。14000rpm离心2分钟。
11、弃内管2,得到核酸溶液,可直接用于PCR或-20℃保存。
最后所应当说明的是,以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非对本实用新型保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本实用新型作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本实用新型技术方案的实质和范围。

Claims (8)

1.一种用于大体积核酸提取的吸附柱,其特征在于,包括压圈、筛板、吸附膜、外管、套在外管内的内管以及螺旋盖,所述内管的上端设有螺纹,所述螺纹与所述螺旋盖相配合,所述内管内从上至下依次设有压圈、筛板和吸附膜。
2.根据权利要求1所述的吸附柱,其特征在于,所述外管的末端设有底座。
3.根据权利要求2所述的吸附柱,其特征在于,所述底座内填充有重金属。
4.根据权利要求3所述的吸附柱,其特征在于,所述重金属为铜、铅或银。
5.根据权利要求3所述的吸附柱,其特征在于,所述重金属为铅。
6.根据权利要求2所述的吸附柱,其特征在于,所述底座上设有漏斗。
7.根据权利要求6所述的吸附柱,其特征在于,所述漏斗是封闭的。
8.根据权利要求1所述的吸附柱,其特征在于,所述筛板厚度为8.75~11.25mm,筛板内孔径为1.125~1.375mm,筛板孔隙率为10~15%,所述吸附膜的孔径为20~30μm。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109439656A (zh) * 2018-12-26 2019-03-08 广州奕昕生物科技有限公司 一种大体积样品基因组提取试剂盒

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