用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置
技术领域
本实用新型涉及分子生物学技术领域,尤其是涉及一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置。
背景技术
在医学领域中,遗传医学,个性化医学和基因靶向治疗已成为现代医学中有希望的新突破点。为此,需要将来自靶组织(FFPE组织切片中由专业人员确定和标记的需要进一步检测的特定区域)的核酸(DNA和RNA)分离出来,以用于临床医学或生物科学研究中的基因分析。此处的FFPE组织切片意指福尔马林固定石蜡包埋组织切片。
一般公认,从新鲜组织中提取的核酸在核酸质量方面更适合基因分析;然而,使用新鲜组织的主要限制是时间和可获得性,特别是从患者收集内脏器官组织。因此,在多数情况下可利用的组织以穿刺活检或手术中获得的经FFPE处理的组织切片为主。FFPE组织具有在室温下储存几十年仍可抽提其核酸(DNA和RNA)并且可用于基因检测的优点。已有许多报道证实了从FFPE组织中提取DNA和RNA的满意的可用性;提取的核酸常用于PCR、定量PCR、单核苷酸多态性(SNP)分析、SANGER测序和新一代基因测序。在可预见的未来,FFPE组织仍是临床实践中保存组织样品的首选。
FFPE组织中的核酸的提取相对于用新鲜组织更困难,是一个多步骤过程;包括FFPE组织脱蜡、干燥、刮取和核酸的抽提,每一步对于所提取的核酸的质量和产量都是重要的。目前市场上已有许多商业的FFPE组织的核酸提取试剂盒供应,然而对于固定于病理载玻片上的靶组织和面积较小的组织,特别是细小的穿刺活检(其尺寸可以小到几个mm2),却没有高效的方法和设备。人工的FFPE组织切片的核酸提取要有多个人工的步骤:首先要人工脱蜡多次,要在脱蜡罐中翻转,取出组织切片后在空气中自然干燥,在FFPE组织切片上加上核酸提取溶液,使用无菌手术刀片刮取组织并通过移液管收集标本。此人工的方法是目前生物医学实验室中的最常规的方法。很显然的,这些人工操作步骤耗费时间,手工强度大(手指和手腕的频繁运动),特别是当有中等或大数量的样本需要及时处理时困难会更大。此外,当将多个组织切片放置在用于脱蜡罐中时,存在组织交叉污染的风险。激光微分离技术是另一种用于在载玻片上分离FFPE组织的方法,激光微分离的优点是能够精确地分离微小的组织,但与常规手工法相比,应用成本太高,而且更耗时,每一张切片都要20分钟左右,这显然不能满足现实的大量样品处理的需要。此外还有几种市售的“自动的FFPE组织核酸抽提系统”,然而,FFPE组织样本的分离并不是自动化的一部分,要从组织蜡块上切取5-10片组织,用的组织量大,不适合穿刺活检的FFPE组织,而且不能在组织切片上选择性地分离靶组织区。因此上述人工的FFPE组织核酸提取方法仍然是生物医学实验室中最常用的技术。
因此,如何避免人工的FFPE组织切片核酸提取方法的缺点并且保留其优点,获得更好的工作效率,降低工作强度和达到更低的成本是目前本领域技术人员亟需解决的技术问题。
实用新型内容
本实用新型的目的是提供一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置,该取样装置用于向FFPE组织切片经过脱蜡处理之后得到的组织切片上转移提取液以及从脱蜡处理后得到的组织切片上分离得到组织样品,避免人工的FFPE组织切片核酸提取方法的缺点并且保留其优点,获得更好的工作效率,降低工作强度和达到更低的成本。
为解决上述的技术问题,本实用新型提供的技术方案为:
一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置,包括外管、内管、活塞、活塞杆、按压帽、电动机、第一压簧、取样吸头以及用于安装所述取样吸头的锥状管;
所述内管套设于所述外管中,所述外管的底管口由第一封盖封堵,所述锥状管穿透所述第一封盖进入所述外管内部且通过轴承固定于所述第一封盖上,且所述内管的底管口与所述锥状管的顶管口密封连接;
所述按压帽设置于所述外管的上管口中,且所述按压帽与所述外管通过凸台与凹槽的相互配合使得所述按压帽仅能沿所述外管上下往复滑动但无法旋转;
所述电动机设置于所述按压帽中,所述电动机的外壳与所述按压帽的内壁固定连接,所述电动机的输出轴与所述活塞杆的上端通过联轴器传动连接,所述电动机的电源线的内端穿透所述按压帽与所述电动机电连接;
所述活塞设置于内管中且与所述内管的内表面密封接触,所述活塞设置于所述活塞杆的下端上;
所述内管的顶管口由第二封盖封堵,所述内管的顶管口与所述第二封盖固定连接,所述活塞杆穿透所述第二封盖插入所述内管中,所述第二封盖与所述活塞杆通过凸台与凹槽的相互配合使得所述活塞杆能沿所述第二封盖上下往复滑动且带动所述第二封盖及内管旋转;
所述活塞杆的露在所述内管之外的部分上套设有用于推动所述按压帽恢复至初始上位的第一压簧,所述第一压簧的上端抵住所述联轴器,所述第一压簧的下端抵住所述第二封盖;
所述取样吸头可拆卸地套设于所述锥状管的锥尖上,且所述取样吸头的下端外周向面上设置有用于增加所述取样吸头与组织切片之间的摩擦力以及减少对组织切片的损伤的涂层。
优选的,所述按压帽的外壁上设置有凸台,所述外管的内表面上设置有凹槽,所述按压帽上的凸台嵌入所述外管上的凹槽中使得所述按压帽仅能沿所述外管上下往复滑动但无法旋转。
优选的,所述活塞杆的外表面上设置有凸台,所述第二封盖上的通孔的周向孔面上设置有凹槽,所述活塞杆的凸台嵌入所述第二封盖上的凹槽中使得所述活塞杆能沿所述第二封盖上下往复滑动且带动所述第二封盖旋转。
优选的,还包括用于将取样吸头从所述锥状管上卸下的卸载组件;
所述卸载组件包括手压杆、套环、第二压簧以及支撑管;
所述支撑管固定于所述外管的外表面上,所述支撑管的顶管口以及底管口分别由第三封盖与第四封盖封堵;
所述手压杆从上到下依次穿过所述第三封盖、所述支撑管以及第四封盖;
所述手压杆的位于所述支撑管内的部分上设置有挤簧片,所述第二压簧套设于所述手压杆上,所述第二压簧的上端抵住所述挤簧片,所述第二压簧的下端抵住所述第四封盖;
所述套环设置于所述手压杆的底端上,且所述套环套设于所述锥状管上,且所述套环的内径小于所述取样吸头的上端的外径。
优选的,所述取样吸头的下端面为与所述取样吸头的轴向中心线垂直的平面。
优选的,所述按压帽的外周向表面上设置用于将所述按压帽的下移量转换为所述取样装置的吸液量的液量刻度线。
本申请提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置,包括外管、内管、活塞、活塞杆、按压帽、电动机、第一压簧、取样吸头以及锥状管;该取样装置具有类似于注射器工作原理的移液功能以及旋转摩擦分离样品功能,先利用该取样装置的移液功能抽取提取液滴在脱蜡且干燥后的组织切片上,然后用旋转的取样吸头在浸泡在提取液中的组织切片上旋转摩擦取样,再然后利用取样装置的移液功能将混有组织样品的混合液转移到样品收集试管中;本申请通过整合除脱蜡之外的所有人工FFPE组织切片的核酸提取的步骤,避免了人工的FFPE组织切片核酸提取方法的缺点并且保留了其优点,获得了更好的工作效率,降低了工作强度和达到了更低的成本,且该取样装置结构简单,使用方便,快速,成本低。
附图说明
图1为本实用新型的实施例提供的一种用于从组织切片中提取组织样品的取样装置的结构示意图(图1中为了看图方便不引起歧义,联轴器、活塞杆、手压杆以及套环未剖面);
图2为图1中的第二封盖的放大俯视图。
图中:1外管,101凹槽,2内管,3活塞,4活塞杆,401凸台,5按压帽,6电动机,7第一压簧,8取样吸头,9锥状管,10手压杆,11套环,12第二压簧,13支撑管,14挤簧片,15联轴器,16第一封盖,17第二封盖,18轴承,19涂层。
具体实施方式
为使本实用新型实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本实用新型实施例中的附图,对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本实用新型的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本实用新型保护的范围。
在本实用新型的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“轴向”、“径向”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本实用新型和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本实用新型的限制。
参照图1,图1为本实用新型的实施例提供的一种用于从组织切片中提取组织样品的取样装置的结构示意图;图2为图1中的第二封盖的放大俯视图。
本申请提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样装置,包括外管1、内管2、活塞3、活塞杆4、按压帽5、电动机6、第一压簧7、取样吸头8以及用于安装所述取样吸头8的锥状管9;
所述内管2套设于所述外管1中,所述外管1的底管口由第一封盖16封堵,所述锥状管9穿透所述第一封盖16进入所述外管1内部且通过轴承18固定于所述第一封盖16上,且所述内管2的底管口与所述锥状管9的顶管口密封连接;
所述按压帽5设置于所述外管1的上管口中,且所述按压帽5与所述外管1通过凸台与凹槽的相互配合使得所述按压帽5仅能沿所述外管1上下往复滑动但无法旋转;
所述电动机6设置于所述按压帽5中,所述电动机6的外壳与所述按压帽5的内壁固定连接,所述电动机6的输出轴与所述活塞杆4的上端通过联轴器15传动连接,所述电动机6的电源线的内端穿透所述按压帽5与所述电动机6电连接;
所述活塞3设置于内管2中且与所述内管2的内表面密封接触,所述活塞3设置于所述活塞杆4的下端上;
所述内管2的顶管口由第二封盖17封堵,所述内管2的顶管口与所述第二封盖17固定连接,所述活塞杆4穿透所述第二封盖17插入所述内管2中,所述第二封盖17与所述活塞杆4通过凸台与凹槽的相互配合使得所述活塞杆4能沿所述第二封盖17上下往复滑动且带动所述第二封盖17及内管2旋转;
所述活塞杆4的露在所述内管2之外的部分上套设有用于推动所述按压帽5恢复至初始上位的第一压簧7,所述第一压簧7的上端抵住所述联轴器15,所述第一压簧7的下端抵住所述第二封盖17;
所述取样吸头8可拆卸地套设于所述锥状管9的锥尖上,且所述取样吸头8的下端外周向面上设置有用于增加所述取样吸头8与组织切片之间的摩擦力以及减少对组织切片的损伤的涂层19。
在本申请的一个实施例中,所述按压帽5的外壁上设置有凸台,所述外管1的内表面上设置有凹槽101,所述按压帽5上的凸台嵌入所述外管1上的凹槽101中使得所述按压帽5仅能沿所述外管1上下往复滑动但无法旋转。
在本申请的一个实施例中,所述活塞杆4的外表面上设置有凸台401,所述第二封盖17上的通孔的周向孔面上设置有凹槽,所述活塞杆4的凸台401嵌入所述第二封盖17上的凹槽中使得所述活塞杆4能沿所述第二封盖17上下往复滑动且带动所述第二封盖17旋转。
在本申请的一个实施例中,还包括用于将取样吸头8从所述锥状管9上卸下的卸载组件;
所述卸载组件包括手压杆10、套环11、第二压簧12以及支撑管13;
所述支撑管13固定于所述外管1的外表面上,所述支撑管13的顶管口以及底管口分别由第三封盖与第四封盖封堵;
所述手压杆10从上到下依次穿过所述第三封盖、所述支撑管13以及第四封盖;
所述手压杆10的位于所述支撑管13内的部分上设置有挤簧片14,所述第二压簧12套设于所述手压杆10上,所述第二压簧12的上端抵住所述挤簧片14,所述第二压簧12的下端抵住所述第四封盖;
所述套环11设置于所述手压杆10的底端上,且所述套环11套设于所述锥状管9上,且所述套环11的内径小于所述取样吸头8的上端的外径。
在本申请的一个实施例中,所述取样吸头8的下端面为与所述取样吸头8的轴向中心线垂直的平面。
在本申请的一个实施例中,所述按压帽5的外周向表面上设置用于将所述按压帽5的下移量转换为所述取样装置的吸液量的液量刻度线。
本申请还提供了一种用于从FFPE组织切片中提取样品的取样方法,使用上述中的任意一项所述的取样装置,且包括以下步骤:
1)按压所述取样装置中的按压帽5,然后将所述取样吸头8的下端浸入提取液中,然后松开所述按压帽5以将提取液吸入所述内管2中,然后将所述取样吸头8的下端从提取液中抽出,然后再次按压所述按压帽5将之前抽吸储存在所述内管2中的提取液滴在脱蜡且干燥后的组织切片上,待提取液排净后松开所述按压帽5;
2)通电运转所述电动机6,所述电动机6通过传动连接最终带动所述取样吸头8旋转,用旋转的取样吸头8在浸泡在提取液中的组织切片上旋转摩擦,旋转摩擦分离下来的组织样品混入提取液中得到混合液;
3)按压所述按压帽5,然后将所述取样吸头8的下端浸入步骤2)得到的混合液中,然后松开所述按压帽5,然后将所述取样吸头8的下端从混合液中抽出,然后再次按压所述按压帽5将之前抽吸储存在所述内管2中的混合液排入样品收集试管中,待混合液排净后松开所述按压帽5。
本申请中未详尽描述的方法和装置均为现有技术,不再赘述。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本实用新型的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本实用新型原理的前提下,还可以对本实用新型进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本实用新型权利要求的保护范围内。
对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本实用新型。对于这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说是显而易见的,本文所定义的一般原理可以在不脱离本实用新型的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本实用新型将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽范围。