CN207851087U - 一种犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片 - Google Patents
一种犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型涉及一种犬科病毒二联快速定量检测的微流控芯片，由基板、上盖板与下盖板组成；基板上设置进样孔，反应室，试剂插槽，三角阀，微流道与排气道；上盖板留出对应进样孔、试剂插槽、和排气孔的位置，键合于基板上表面；下盖板键合后将基板下表面全部封闭，下盖板对应试剂插槽孔位置中部设置有短针；基板、上盖板与下盖板共同构成反应室的容纳空间、微流道和排气道的管道；反应室通过基板底部的微流道分别与进样孔、试剂插槽连通；反应室通过位于基板上部的排气道与排气孔连接。本实用新型基于光激化学发光(LiCA)实验原理设计，可以同时实现两种病毒的快速定量检测；避免了反复冲洗的步骤，操作快速便捷；试剂包组可任意更换，灵活性强。
Description
技术领域
本实用新型涉及动物疫病检测技术领域，具体涉及一种犬科病毒二联快速定量检测的微流控芯片。
背景技术
与其他微生物相比，病毒在结构、化学组成、繁殖方式及对药物敏感性方面均有显著区别。动物病毒病具有传染性强、流行广泛、危害严重和发病率高的特点，因此如何快速诊断、定量诊断成了控制和治疗这些动物病毒病的关键因素。
当前情况下，各兽医实验室检测动物病毒病主要利用血清学试验、分子生物学试验以及基于胶体金原理设计的试纸卡片或ELISA。但这些方法均存在弊端，血清学试验、分子生物学试验往往耗时较长，起不到快速检测的作用；而胶体金试纸虽能够实现快速检测，却无法实现病毒的定量检测；ELISA仅能够定性检测病毒，且操作过程中需长时间孵育和冲洗，耗时较长。
基于上述缺陷，发明人设计出一种犬科病毒二联快速定量检测的微流控芯片，基于光激化学发光(LiCA)原理，可以同时实现两种犬科病毒的快速定量检测，同时避免了类似于ELISA 操作过程中需反复冲洗的步骤，操作快速便捷。
实用新型内容
本实用新型所要解决的技术问题是：如何快速且定量的检测犬科动物病毒，并同时实现二联检测。
为解决上述问题，本实用新型提供了一种犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，所述微流控芯片由基板、上盖板与下盖板组成；基板上设置有两个进样孔，两个反应室，两个试剂插槽A，两个试剂插槽B，一个试剂插槽C、微流道、两个排气道和一个三角阀；上盖板留出对应进样孔、试剂插槽、三角阀和排气孔的位置，键合于基板之上表面；下盖板键合于基板之下表面，将基板下表面全部封闭，下盖板对应试剂插槽孔位置中部设置有短针；基板、上盖板与下盖板共同构成反应室的容纳空间、微流道和排气道的管道；反应室的容积为20-100μl；反应室通过位于基板底部的微流道分别与进样孔、试剂插槽C和三角阀相连通；试剂插槽A、试剂插槽B通过微流道分别与三角阀相连通，通过三角阀的转动，能够将试剂插槽A或试剂插槽B在三角阀内的微流道出口与三角阀通向反应室的微流道出口接通，从而使不同试剂按次分别注入反应室；反应室通过位于基板上部的排气道与排气孔连接；微流道的宽度和/或深度为50-300μm。排气道的宽度和/或深度为30-60μm。
所述微流控芯片优选常规载玻片规格76×26mm，亦可根据需要制作为其他规格。
所述基板、上盖板和下盖板的材质可选自玻璃、PMMA、PC、COC或COP。上盖板或下盖板的厚度为0.2-0.5mm。反应室底面、微流道内表面可进行亲水或疏水处理。
所述的犬科病毒快速定量检测微流控芯片，还包含试剂包，试剂包上下外壳为柔性材料制作，中部外沿或底部外沿设挡板，挡板下设卡扣，另其使用时可架在试剂插槽上；对应试剂插槽A的试剂包A为犬科病毒抗体I包被的发光微球，对应试剂插槽B的试剂包B为生物素化的犬科病毒抗体II，对应试剂插槽C的试剂包C为链霉亲和素包被的感光微球。
所述的犬科病毒快速定量检测微流控芯片，还包括封闭进样孔的鲁尔塞或堵头。
所述的犬科病毒快速定量检测微流控芯片，还可以在反应室内预置磁力转子，便于使用磁力搅拌仪对反应试剂进行充分混合。
本实用新型所述犬科病毒可选自犬瘟热病毒、犬细小病毒、狂犬病毒、犬冠状病毒、犬脑心肌炎病毒、犬副流感病毒或犬腺病毒。
本实用新型与现有技术相比具有下述优点：
1、本实用新型能够一步实现两种犬科病毒的高灵敏度、快速、定量检测。
2、本实用新型操作过程免冲洗，简便快捷。
3、本实用新型免除对芯片反应室的抗体包被，试剂包组可根据检测病毒的需求任意更换，灵活性强。
附图说明
图1是本实用新型犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片的正面结构示意图，图中标记： 10-基板，11-进样孔，12-反应室，13-试剂插槽A，14-试剂插槽B，15-试剂插槽C，16-微流道，17-排气道，18-三角阀，21-排气孔，31-短针，反应室中黑色块表示磁力转子。
图2是本实用新型犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片的上盖板结构示意图，图中标记： 20-上盖板，21-排气孔。
图3是本实用新型犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片试剂插槽C侧的剖面结构示意图，图中标记：10-基板，20-上盖板，30-下盖板，40-试剂包，12-反应室，15-试剂插槽C， 16-微流道，31-短针，50-磁力转子。
图4是本实用新型犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片的排气道剖面结构示意图，图中标记：10-基板，20-上盖板，30-下盖板，12-反应室，17-排气道，21-排气孔。
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本实用新型作进一步描述。应当注意，实施例中未详细说明的常规条件和方法，均按照所属领域人员常规采用的实验条件和方法进行。
实施例：
如图1-图4所示，一种犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，所述微流控芯片由基板 (10)、上盖板(20)与下盖板(30)组成；基板(10)上设置有两个进样孔(11)，两个反应室(12)，两个试剂插槽A(13)，两个试剂插槽B(14)，一个试剂插槽C(15)、微流道(16)、两个排气道(17)和一个三角阀(18)；上盖板(20)留出对应进样孔(11)、试剂插槽、三角阀(18)和排气孔(21)的位置，键合于基板(10)之上表面；下盖板(30)键合于基板 (10)之下表面，将基板(10)下表面全部封闭，下盖板(30)对应试剂插槽孔位置中部设置有短针(31)；基板(10)、上盖板(20)与下盖板(30)共同构成反应室(12)的容纳空间、微流道(16)和排气道(17)的管道；反应室(12)的容积为20-100μl；反应室(12)通过位于基板底部的微流道(16)分别与进样孔(11)、试剂插槽C(15)和三角阀(18)相连通；试剂插槽A(13)、试剂插槽B(14)通过微流道(16)分别与三角阀(18)相连通，通过三角阀(18)的转动，能够将试剂插槽A(13)或试剂插槽B(14)在三角阀(18)内的微流道出口与三角阀(18)通向反应室(12)的微流道出口接通，从而使不同试剂按次分别注入反应室(12)；反应室(12)通过位于基板上部的排气道(17)与排气孔(21)连接；所述基板(10)、上盖板(20)和下盖板(30)的材质可选自玻璃、PMMA、PC、COC或COP。上盖板(20)和下盖板(30)的厚度为0.2mm。微流道(16)的宽度为80μm，深度为100μm。排气道(17)的宽度和/或深度为30-60μm。
如图3所示，所述微流控芯片还包含试剂包(40)，试剂包上下外壳为柔性材料制作，中部外沿设挡板，挡板下设卡扣，另其使用时可卡在试剂插槽上；对应试剂插槽A(13)的试剂包A内含犬科病毒抗体I包被的发光微球，对应试剂插槽B(14)的试剂包B内含生物素化的犬科病毒抗体II，对应试剂插槽C(15)的试剂包C内含链霉亲和素包被的感光微球。
可根据检测病毒的需要，更换针对不同病毒的不同的试剂包组，试剂包组之间使用的发光微球、感光微球相同，包被所使用的抗体I、和生物素化的抗体II可自现有技术中已有的犬科病毒抗体组中筛选。所述犬科病毒选自犬瘟热病毒、犬细小病毒、狂犬病毒、犬冠状病毒、犬脑心肌炎病毒、犬副流感病毒或犬腺病毒。
本实用新型所述犬科病毒快速定量检测微流控芯片的使用方法：
1、将对应试剂插槽A的内含犬科病毒抗体I包被的发光微球试剂包A安装在试剂插槽A 内，将对应试剂插槽B的内含生物素化的犬科病毒抗体II试剂包B安装在试剂插槽B内，将对应试剂插槽C的内含链霉亲和素包被的感光微球试剂包C安装在试剂插槽C内；
2、撕开进样孔处的保护膜，将动物血清、唾液、尿液等待测样品自进样孔注入反应室内，反应室内空气从排气孔排出，尽量避免在反应室内吹出气泡，使用鲁尔塞或堵头封闭进样孔；
3、转动三角阀将试剂插槽A在三角阀内部的微流道出口与通向反应室的微流道出口接通，轻轻挤压试剂插槽A的试剂包，短针刺破试剂包，将发光微球注入反应室，轻轻晃动微流控芯片混匀，孵育；若使用带有磁力转子的芯片，可将芯片置于磁力搅拌仪上，利用磁力搅拌使反应试剂混合均匀；
4、转动三角阀将试剂插槽B的微流道出口与通向反应室的微流道出口接通，轻轻挤压试剂插槽B的试剂包，将抗体试剂注入反应室，轻轻晃动微流控芯片混匀，孵育；
5、轻轻挤压试剂插槽C的试剂包，挤压过程中尽量保持芯片水平，将感光微球试剂分别注入两侧反应室，轻轻晃动微流控芯片，显色；
6、仪器读数，根据标准曲线计算病毒数量。
以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，所述微流控芯片由基板(10)、上盖板(20)与下盖板(30)组成；基板(10)上设置有两个进样孔(11)，两个反应室(12)，两个试剂插槽A(13)，两个试剂插槽B(14)，一个试剂插槽C(15)、微流道(16)、两个排气道(17)和一个三角阀(18)；上盖板(20)留出对应进样孔(11)、试剂插槽、三角阀(18)和排气孔(21)的位置，键合于基板(10)之上表面；下盖板(30)键合于基板(10)之下表面，将基板(10)下表面全部封闭，下盖板(30)对应试剂插槽孔位置中部设置有短针(31)；基板(10)、上盖板(20)与下盖板(30)共同构成反应室(12)的容纳空间、微流道(16)和排气道(17)的管道；反应室(12)的容积为20-100μl；反应室(12)通过位于基板底部的微流道(16)分别与进样孔(11)、试剂插槽C(15)和三角阀(18)相连通；试剂插槽A(13)、试剂插槽B(14)通过微流道(16)分别与三角阀(18)相连通，通过三角阀(18)的转动，能够将试剂插槽A(13)或试剂插槽B(14)在三角阀(18)内的微流道出口与三角阀(18)通向反应室(12)的微流道出口接通，从而使不同试剂按次分别注入反应室(12)；反应室(12)通过位于基板上部的排气道(17)与排气孔(21)连接；所述基板(10)、上盖板(20)和下盖板(30)的材质可选自玻璃、PMMA、PC、COC或COP。
2.根据权利要求1所述的犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，上盖板(20)或下盖板(30)的厚度为0.1-0.5mm。
3.根据权利要求1所述的犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，微流道(16)的宽度和/或深度为50-300μm；排气道(17)的宽度和/或深度为30-60μm。
4.根据权利要求1所述的犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，还包含试剂包(40)，试剂包上下外壳为柔性材料制作，中部外沿或底部外沿设挡板，挡板下设卡扣，另其使用时可卡在试剂插槽上。
5.根据权利要求1所述的犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，还可以在反应室(12)内预置磁力转子(50)，便于使用磁力搅拌仪对反应试剂进行充分混合。
6.根据权利要求1-5任一项所述的犬科病毒二联快速定量检测微流控芯片，其特征在于，所述犬科病毒选自犬瘟热病毒、犬细小病毒、狂犬病毒、犬冠状病毒、犬脑心肌炎病毒、犬副流感病毒或犬腺病毒。
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