CN207391433U - 用于荧光原位杂交的变性杂交盒 - Google Patents
用于荧光原位杂交的变性杂交盒 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型提供一种用于荧光原位杂交技术的变性杂交盒，属于生物技术领域。该变性杂交盒包括盒盖和盒体，盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板。该变性杂交盒结构简单，价格低廉，可与实验室常规的加热设备（如水浴锅、培养箱等）联合使用，替代昂贵的荧光原位杂交仪，便捷地完成FISH的变性和杂交操作，极大地降低了FISH检测的成本，并且还能同时处理更多的样本，极大地提高了工作效率。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种变性杂交盒,尤其指一种用于荧光原位杂交技术的变性杂交盒，属于生物技术领域。
背景技术
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术。FISH的原理是：根据核酸碱基互补配对原理，用半抗原标记DNA或者RNA探针与经过变性的单链核酸序列互补配对，通过带有荧光基团的抗体去识别半抗原进行检测，或者用荧光基团对探针进行直接标记并与目标序列结合，最后利用荧光显微镜直接观察目标序列在细胞核、染色体或切片组织中的分布情况。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。
FISH技术主要包括以下几个步骤：（1）样本玻片的制备；（2）样本玻片的预处理；（3）探针与样本的变性和杂交；（4）玻片洗涤；（5）结果观察。在FISH检测的整个过程中，探针与样本的变性和杂交是实验最关键的步骤，对检测结果的成功与否起了决定性的作用。
为了完成FISH的杂交试验，很多实验室通常选择荧光原位杂交仪。一般的原位杂交仪包括变性/杂交、杂交和固定温度等几个操作模式，价格为5～10 万元人民币。这些杂交仪在进行FISH试验时，使用成本很高。而且一台荧光原位杂交仪最大能检测12个样本，当样本量过多时需要配置更多的荧光原位杂交仪或调整实验步骤，极大地增加了实验室的负担。
发明内容
针对上述问题，本实用新型的目的是提供一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，替代目前昂贵的荧光原位杂交仪，方便快捷地实现FISH实验中的变性和杂交操作，同时还能实现大量样本的批量检测，极大地降低了FISH检测的成本。
为实现上述目的，本实用新型采用以下技术方案：
一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体，盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板。
作为优选，横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接。如此，根据玻片的宽度和个数，可以自由调整竖向限位板的间距和个数，以实现玻片的位置限定，防止玻片在盒体内滑动，同时对不同的玻片进行隔离，避免样品间污染。
更进一步地，竖向限位板的边缘距离盒体内壁的最短距离为0.5-1.5cm。即竖向限位板的边缘并没有像横向限位板那样，与盒体内壁接触，而是有0.5-1.5cm的距离，方便玻片的取放。
作为优选，在盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹。湿条固定夹可以通过固定不同数量和规格大小的湿条，以实现玻片在变性和杂交过程中的不同湿度要求。为实现更大的湿度范围，以及为玻片提供更均匀的湿度环境，在盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。
作为优选，在盒盖外部上表面的四周设置凹陷围槽，盒体外部的下表面的四周设置与凹陷围槽相互配合的凸起围槽。凹陷围槽与凸起围槽相互配合，使得两个及以上的变性杂交盒形成稳固重叠。方便同时转移多个杂交变性盒。
作为优选，盒体的外部两侧设置把手，方便操作人员取放变性杂交盒。
作为优选，盒盖外部上表面的中央设置把手，方便盒盖的打开与关闭。为了方便多个变性杂交盒重叠，在盒盖上设置一个可以收纳把手的凹槽。
作为优选，在盒体内部的底面设置温度感应器，对盒体底部的温度进行计量，以保证与盒体底部接触的玻片的杂交变性温度。
与现有技术相比，本实用新型具有以下有益效果 ：
（1）本实用新型提供的用于荧光原位杂交的变性杂交盒，在盒体内设置可拆卸的玻片限位架，对玻片进行位置限定，避免样品间污染。同时，在完成变性和杂交实验后，可以将玻片限位架取出，方便盒体内部的清洗，避免因清洗不彻底而造成检测批次间样品污染的情况。
（2）本实用新型的横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接。由于不同规格的玻片具有不同的宽度，横向限位板的上边缘有若干个凹槽，可以通过调整竖向限位板插入横向限位板上边缘凹槽的位置来实现与玻片宽度的一致性；此外，对于一些小规模试验，玻片样本较少，可以适当减少竖向限位板的个数，减少竖向限位板清洗的工作量，同时延长其使用寿命。
（3）在本实用新型中，在盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹，可以通过固定不同数量和规格大小的湿条，以实现玻片在变性和杂交过程中的不同湿度要求。为实现更大的湿度范围，以及为玻片提供更均匀的湿度环境，在盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。
（4）一般的荧光原位杂交仪最大能检测12个样本。本实用新型提供的变性杂交盒，每个杂交盒里就可以同时放置12个样本。并且本实用新型还在盒盖和盒体上设置相互配合的凹凸围槽，可以实现两个及以上的变性杂交盒形成稳固重叠，方便同时转移多个杂交变性盒，即可以同时实现更多样本的FISH检测，极大地提高了工作效率。
（5）FISH实验的杂交变性温度变化一般为：常温→75℃→42℃。目前常用的荧光原位杂交仪，为了实现不同温度的转换，含有风扇和加热装置，但仍需要较长时间的升温和降温过程。而本实验新型提供的变性杂交盒，能够根据实验需求，将其快速转移到目的温度的仪器设备（如水浴锅、培养箱等）中，迅速实现实验所需要的温度。
（6）本实用新型提供的用于荧光原位杂交的变性杂交盒，结构简单，价格低廉，可与实验室常规的加热设备（如水浴锅、培养箱等）联合使用，替代昂贵的荧光原位杂交仪，便捷地完成FISH的变性和杂交操作，极大地降低了FISH检测的成本，并且还能同时处理更多的样本，极大地提高了工作效率。
附图说明
图1为变性杂交盒的盒体内部俯视图；
图2为变性杂交盒的盒体结构示意图；
图3为变性杂交盒的盒盖内表面示意图a；
图4为变性杂交盒的盒盖内表面示意图b；
图5为变性杂交盒的盒盖内表面示意图c；
图6为变性杂交盒的盒盖外部上表面的结构示意图；
其中，1为盒盖；2为盒体；3为玻片限位架；11为湿条固定夹；12为凹陷围槽；13为盒盖把手；21为湿条限位卡槽；22为凸起围槽；23为盒体把手；31为横向限位板；311为横向限位板凹槽；32为竖向限位板；321为竖向限位板凹槽；湿条4。
具体实施方式
本实用新型结合附图和具体实施例作进一步说明。应该理解，这些实施例仅用于说明目的，而不用于限制本实用新型范围。
实施例1
一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体。如图1所示，盒体2内设置可拆卸的玻片限位架3，玻片限位架3包括一个横向限位板31及若干个与横向限位板31呈十字交叉的竖向限位板32。图1中竖向限位板32的个数为4个，可以放置10个玻片样本，在盒体内部的底板上还有玻片样本位置编号，避免玻片样本混淆。
变性杂交盒的盒体结构如图2所示，在横向限位板31的上边缘有若干个横向限位板凹槽311，在竖向限位板32上有一个竖向限位板凹槽321，横向限位板凹槽311与竖向限位板凹槽321相互配合，实现横向限位板31与竖向限位板32呈可拆卸的十字交叉式连接。此外，还可以通过调整竖向限位板的间距和个数，来适应不同的玻片宽度和数量。
图2中，竖向限位板32的边缘并没有像横向限位板31那样，与盒体内壁接触，而是有0.5-1.5cm的距离，方便玻片的取放。
如图2所示，在盒体2内部的四周设置湿条限位卡槽21，为玻片在变性和杂交过程中提供更均匀的湿度环境。
图2中，在盒体2外部的下表面的四周设置凸起围槽22。盒体2的外部两侧设置盒体把手23，方便操作人员取放变性杂交盒。
变性杂交盒的盒盖内表面结构如图3-5所示，在盒盖1内表面的四周设置若干个湿条固定夹11。由于不同玻片样本中变性和杂交过程中的湿度要求不同，可以通过湿条固定夹11固定不同数量和规格大小的湿条4来实现不同的湿度。
湿条固定夹11与图2中的湿条限位卡槽21相互配合，可对变性杂交盒内部的湿度进行更大范围的调节。
变性杂交盒的盒盖外部上表面的结构如图6所示，在盒盖1外部上表面的四周设置凹陷围槽12。凹陷围槽12与图2中的凸起围槽22相互配合，使得两个及以上的变性杂交盒形成稳固重叠，方便同时转移多个杂交变性盒。
图6中，盒盖1外部上表面的中央设置盒盖把手13，方便盒盖的打开与关闭。为了方便多个变性杂交盒重叠，可以在盒盖上设置一个可以收纳把手的凹槽（图6中未显示）。
为了对盒体底部的温度进行计量，以保证与盒体底部接触的玻片的杂交变性温度，可以在盒体内部的底面设置温度感应器（图中未显示）。为了监控盒体内部的湿度，还可以在盒体内设置湿度感应器（图中未显示）。
为了使玻片在变性杂交过程中受热更均匀，在变性杂交盒的盒体内底部、放置玻片的区域需要保证十分平整。为了使玻片能迅速地达到实验所需温度，变性杂交盒的材质可选择具有高热传导性的金属材料，如铝等。
实施例2
一种实施例1所述的变性杂交盒在荧光原位杂交技术中的应用，以检测尿液中脱落细胞的3号、7号、17号染色体的数目及9号染色体上p16基因位点的数目为例。
经尿液采集的脱落细胞，经低渗液及胃蛋白酶等预处理后，即可用于荧光原位杂交（FISH）分析。杂交操作流程包括：
在杂交开始前，准备好实施例1中所述的变性杂交盒，并根据实际的实验需求放入一定数量的湿条。
（1）探针准备。（杂交缓冲液8ul+探针2ul） 混匀后短暂离心。
（2）探针与样本的准备：将10µl探针混合物滴于玻片杂交区域，立即加盖盖玻片，用封片胶封边；
（3）探针与样本的变性：将已经封片完成的玻片，置于变性杂交盒内，盖好变性杂交盒盖子，将变性杂交盒置于75℃水浴锅中5分钟；可根据水浴锅的大小和数量，放置多个变性杂交盒同时进行变性；
（4）探针与样本的杂交：变性完成后，将一个或多个变性杂交盒重叠后转移到42℃保温箱中过夜杂交；
（5）杂交结束后将玻片从杂交盒取出，进行后续的洗脱步骤，观察杂交结果。
荧光显微镜结果显示 ：杂交结果良好，可以观察到探针上标记的荧光信号。
需要说明的是，本实用新型的说明书及其附图中给出了本实用新型的较佳的实施方式，但是，本实用新型可以通过许多不同的形式来实现，并不限于本说明书所描述的实施方式，这些实施方式不作为对本实用新型内容的额外限制，提供这些实施方式的目的是使对本实用新型的公开内容的理解更加透彻全面。然而在阅读了本实用新型的上述内容后，本领域技术人员可以对本实用新型作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (6)
1.一种用于荧光原位杂交的变性杂交盒，包括盒盖和盒体，其特征在于，所述盒体内设置可拆卸的玻片限位架，所述玻片限位架包括一个横向限位板及若干个与横向限位板呈十字交叉的竖向限位板；
所述横向限位板与竖向限位板通过凹槽形成可拆卸式连接；
所述盒盖内表面的四周设置若干个湿条固定夹；
所述盒体内部的底面设置温度感应器。
2.根据权利要求1所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒体内部的四周设置湿条限位卡槽。
3.根据权利要求1所述的变性杂交盒，其特征在于，所述竖向限位板的边缘距离盒体内壁的最短距离为0.5-1.5cm。
4.根据权利要求1所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒盖外部上表面的四周设置凹陷围槽，所述盒体外部下表面的四周设置与凹陷围槽相互配合的凸起围槽。
5.根据权利要求1所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒体的外部两侧设置把手。
6.根据权利要求1-5任一项所述的变性杂交盒，其特征在于，所述盒盖外部上表面的中央设置把手。
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| CN201721384070.7U CN207391433U (zh) | 2017-10-25 | 2017-10-25 | 用于荧光原位杂交的变性杂交盒 |
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Cited By (1)
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| CN107641597A (zh) * | 2017-10-25 | 2018-01-30 | 成都新基因格生物科技有限公司 | 用于荧光原位杂交的变性杂交盒及其使用方法 |
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2017
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