CN207159217U - 一种微生物接种样品杯 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及一种微生物接种样品杯及其使用方法，包括：（1）样品杯上有偏向一侧的盖子与杯体通过螺旋密封；（2）样品杯肩部垂直面设计一个高压气体进入口与气体接入管末端匹配；（4）气体进入口通过一段L型导管与肩部上平面内侧壁相连，开口处以纱网覆盖；（5）导管水平段有虹吸管向下通向样品杯底部，形成三通管；（6）样品杯内有一层隔离网。均质化样品与残渣分离，被吸入虹吸管，随高压气体从接种口喷出，被雾化并接种到平板上，可获得更多单个菌落。本实用新型可用于自动化微生物接种仪，亦可用于微生物检验自动化流水线，具有广阔应用空间。

Description

一种微生物接种样品杯

技术领域

本实用新型属于微生物检验技术领域，特别涉及一种用于微生物样品接种的样品杯。

背景技术

细菌分离培养是进行细菌鉴定和药物试验的前提基础。利用接种环分区划线以获取单个菌落，是经典的细菌接种方法。由于对仪器、设备等工作条件要求较低而便于推广，该方法一直沿用至今。但该方法也存在一些弊端。首先，该方法对个人操作水平要求较高，必须做到无菌操作，通过严格培训和长期操作实践，才能获得比较理想的分离效果；其次，在接种标本的过程中，需要点燃酒精灯、电炉等明火，用以接种环快速灭菌，而使用明火会对生物安全柜的气流产生影响，并且在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险；再次，人工接种方法，总体效率低，并受操作者个人水平和接种习惯影响，难以进行全程质量控制，不符合实验室对自动化、标准化的要求；另外，在接种过程中，标本完全暴露于空气中，操作者与标本近距离接触，自身健康受到威胁，不符合实验室生物安全越来越高的要求。

细菌接种的自动化和标准化是临床微生物实验室研究和发展的主要方向之一。目前，临床微生物学实验室很少配备自动化细菌接种仪。国际上，除少量大型实验室配备全自动细菌分离培养系统外，仅有少数几种自动化细菌接种仪投放市场，而且多数仍处于逐步完善阶段。就实际应用而言，自动化细菌接种仪远没有生化分析仪或血细胞计数仪等成熟。

部分自动化接种仪也存在一些明显缺陷。如，在接种过程中，完全打开的平皿开口向上暴露于空气中，易于受到周围空气中细菌污染；其次，对平板外观质量要求较高，必须使用标准平板，自制培养基可能无法接种。培养皿中琼脂的厚度、平整度、表面光滑程度，以及有无空泡等，对接种效果的影响均很大，如，接种针/环无法充分、有效接触平板造成培养假阴性；或接种针/环接触高速旋转中的平板，可能把平板中稍不规则的琼脂卷起，使接种失败；再次，在整个接种过程中使用的是同一根接种针/环，尽管采用了新技术，并且每次接种后都进行清洗、消毒，但，由于部分细菌对消毒剂具有很强的抵抗力，尤其是能够形成芽胞的细菌，要在很短时间内彻底杀灭所有细菌，几乎是不可能的；同时，由于标本自身的特点，在处理含杂菌量较大的粪便、痰液等粘稠性标本时，通过快速清洗、消毒，很难完全杜绝交叉污染的发生，另外,接种针还有可能携带残余消毒剂，对后续标本中的细菌生长产生抑制。操作简便、工作效率高是自动化仪器的突出优点。尽管部分自动化接种仪一次接种过程仅数十秒，这仅仅是指接种需要的时间，细菌标本不同于生化、免疫标本，大部分标本要进行预处理（如痰液），而且由于人工更换平板时需要停顿，多个标本连续操作的过程实际上难以实现连续全速进行。另外，该仪器为单臂（单通道）接种仪，每次只能处理一份标本，每个工作循环（包括清洗消毒、吸样、接种过程）也只能完成1块平板接种，1份标本可能接种3块不同的平板，需要人工更换3次平板。如果每天处理100份标本，就可能要暂停并人工更换平板300次，不仅严重影响仪器的工作效率，而且，要求正确、快速并频繁地更换不同平板，会增加工作人员的劳动强度。尽管实现了自动加样、自动接种、自动消毒等自动化过程，但在实际操作过程中，仍然要求至少1名工作人员寸步不离地协助，自动化的优势无法充分发挥出来。特别是，现有微生物接种仪鲜有令人满意的自动化样本均质化功能，而要实现对标本中细菌单个菌落的准确定量检测，缺乏均质化过程显然是难以实现的；其次，基于接种针/环划线接种，很难将平板上接种起始部位的样本分离出单个菌落，而此处为菌落最多、最集中区域，因此，难以实现对样品中菌落准确定量。

发明内容

本实用新型所要解决的技术问题，是提供一种微生物接种样品杯及其使用方法。该样品杯不仅能够实现对拟接种样品的自动均质化处理，而且可以获得更多单个菌落，可用于自动化微生物接种仪，亦可用于组装自动化微生物检验流水线，具有广阔的应用空间。

本实用新型发明内容包括一种微生物接种样品杯的结构及其使用方法

第一部分，本实用新型的一种微生物接种样品杯的结构，包括：

（1）一个由PVC制作的长方体杯体，样品杯上方偏向一侧为样品杯口，上有盖子与杯体通过螺旋可以密封；（2）在样品杯口的一侧有部分杯体向上凸起形成一个肩部并与杯体内相通；（3）在该该肩部的垂直面设计一个凹槽，凹槽中央开一个小孔，作为高压气体进入口，用于与外部的高压气体接入管末端连接并与之匹配；（4）小孔开口处通过一段L型导管与样品杯肩部上平面内侧壁相连，使L型导管上部末端的开口处即接种口与外部相通并以纱网覆盖接种口，纱网外用无菌防水不干胶纸封闭，接种样品时临时解开不干胶纸；（5）L型导管的水平段，设计1根虹吸管垂直向下通向样品杯底部，并且虹吸管在接近样品杯底部处开口，从而与L型导管一起形成一个三通管；（6）在样品杯内设计一层隔离网，并使通向样品杯底部的虹吸管下端穿过该隔离网；（7）以隔离网为界，整个样品杯被分为隔离网上面的样品预处理室和隔离网下面的预接种室两部分。

所述结构（1）中样品杯长10-40mm、宽10-40mm、高10-50mm，且长、宽、高可根据拟盛放样品的量和/或配套仪器规格进行调节；

所述结构（1）中制作样品杯的材料可以为玻璃或各种塑料；

所述结构（2）中肩部可高于样品杯盖子0—20mm；

所述结构（3）中凹槽可位于样品杯肩部的4个垂直面中任意1个垂直面上，距离上缘1-45mm，直径5-10mm，凹槽中央小孔直径1-5mm；

所述结构（4）中L型导管内直径1-5mm；

所述结构（5）中虹吸管内直径为0.5-2.0mm；

所述结构（5）中L型导管部分也可以为水平导管，与垂直的虹吸管一起构成三通管；接种口也可位于样品杯4个垂直面中任意1个垂直面上；

所述结构（6）中隔离网距离杯体底部1-15mm，隔离网孔径20-120目。

附图说明

附图给出本实用新型一种微生物接种样品杯主要部件的组成及结构侧视平面示意图

1.样品杯盖子；2.样品预处理室；3.预处理液面；4.隔离网；5.预接种室；

6.接种口；7.三通管；8.高压气体进入口；9.样品杯肩部；10.虹吸管

第二部分，本实用新型的一种微生物接种样品杯的使用方法，包括：

（1）打开样品杯盖子，根据拟接种样品种类不同，向其中预加入相应的适量样品均质化预处理液，使其预处理液面高于样品杯中的隔离网；

（2）向样品杯中加入适量拟接种样品，并使其浸在样品均质化预处理液中，室温或35℃预放置一段时间，期间可以根据需要选择必要震荡，促使样品液化、均质化；

（3）自动化微生物接种仪平板架上放置拟接种的平板后，手持样品杯向左右用力甩动3次，以除去样品未均质化前虹吸管内虹吸进去的液体，解开样品杯接种口上的无菌防水不干胶纸，将样品杯放入接种仪样品杯仓内，使样品杯的高压气体进气口与仪器的高压气体接入管末端连接；

（4）按下仪器接种键1次，气体通路控制弹簧开关打开1次并瞬间自动关闭，高压气体从样品杯的进气口进入并从接种口喷出，此时，虹吸管中部分已均质化的样品随高压气体一起喷出，遇到外部空气后迅速雾化，并喷涂至平板表面，完成样品接种。

所述步骤（1）中应根据拟接种样品种类确定是否需要加入样品均质化预处理液，已经液化和均质化的样品可以不加，如抗凝血液和脑脊液，尿液等；

所述步骤（2）中，根据样品种类不同，液化、均质化时间为5-30min；

所述步骤（1）-（2）中应注意在生物安全柜内无菌操作；

所述步骤（3）-（4）中应在负压实验室，或具有定向气流或可形成局部负压环境的接种仪操作。

有益效果

采用本实用新型一种微生物接种样品杯，液化、均质化后的样品通过隔离网过滤进入预接种室，自动与样品残渣分离，并被自动吸入虹吸管，随高压气体从接种口喷出，遇到外部的空气被雾化，并直接喷涂到平板上，从而达到比接种环/针更好的接种效果，可以获得更多的单个菌落。与现有自动化微生物接种仪的样品杯不同，本实用新型采用创新设计，使样品的均质化和接种更为简便、快速；与现有单通道（单个接种单元）微生物接种仪相比，采用本实用新型的样品杯，结合连通器原理，很容易实现多个接种通道同时接种，使接种速度更快，接种效果更好。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本实用新型。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本实用新型讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本实用新型作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

本实用新型一种微生物接种样品杯：

以PVC材料制作本实用新型样品杯，长40mm、宽40mm、高50mm，样品杯上方偏向一侧为样品杯口，上有盖子与杯体通过螺旋密封；在样品杯口的一侧有部分杯体向上凸起形成一个肩部并与杯体内相通，该肩部高于样本杯盖子2mm；在该肩部远离样品杯口的垂直面增厚至2mm，并在该面距离上缘15mm处设计一个直径8mm的凹槽，凹槽中央开一个直径5mm小孔，用于与外部的高压气体接入管末端连接并与其匹配；小孔开口处通过一段直径5mm L型导管与样品杯肩部上平面内侧壁相连，使L型导管上部的末端与外部相通并以40目纱网覆盖导管口，纱网外用无菌防水不干胶纸封闭；L型导管的水平段中部，设计一根内直径为1.0mm的虹吸管垂直向下通向样品杯底部，并且虹吸管接近样品杯底部开口，从而与L型导管一起形成一个三通管；在样品杯内距离杯体底部10mm处设计一层孔径30目隔离网，并使通向样品杯底部的虹吸管下端穿过该隔离网。

本实用新型一种微生物接种样品杯的使用方法：

（1）打开样品杯盖子，向其中预加入预稀释后的商品化痰液消化液6ml，其液面高于样品杯中的隔离网；

（2）按照痰液消化液：样品为3:1比例，嘱志愿者用样品杯中留取约2ml痰液样品，盖上杯盖后立刻混匀，使痰液浸在痰液消化液中，室温25℃放置30min，期间置高速振荡器上振动3次，每次1-2min促使样品液化、均质化；

（3）手持样品杯向左右用力甩动3次，解开样品杯接种口上的无菌防水不干胶纸，在生物安全柜内，将样品杯高压气体进气口与压力为0.25Mpa的高压气体接入管末端连接、压紧,将样品杯接种口对准平板架上已打开的血平板；也可将样品杯放入自动化多通道微生物接种仪样品杯仓，用仪器接种；

（4）按下弹簧开关1次，完成样品接种；

（5）同一时间留取该志愿者另1份痰液样品，采用常规手工接种方法做对照；

（6）每种方法接种3块平板，将接种后的血平板置35℃、5%CO₂孵育箱中，24h后观察接种效果。

实验结果：

（1）采用2种方法均从该志愿者痰液样品中成功分离到细菌单个菌落；

（2）新型样品杯组3个血平板上共分离出401个单个菌落（cfu），平均每个血平板上分离出134个单个菌落（cfu）；对照组3个血平板上共分离出63个单个菌落（cfu），平均每个血平板上分离出21个单个菌落（cfu），见下表；

（3）实验结果表明，采用本实用新型样品杯接种样品，获得的单个菌落更多，分离效果更好。

Claims (1)

1.一种微生物接种样品杯，其特征包括

（1）一个由PVC制作的长方体杯体，样品杯上方偏向一侧为样品杯口，上有盖子与杯体通过螺旋可以密封；

（2）在样品杯口的一侧有部分杯体向上凸起形成一个肩部并与杯体内相通；

（3）在该肩部的垂直面设计一个凹槽，凹槽中央开一个小孔，作为高压气体进入口，用于与外部的高压气体接入管末端连接并与之匹配；

（4）小孔开口处通过一段 L型导管与样品杯肩部上平面内侧壁相连，使L型导管上部末端的开口处即接种口与外部相通并以纱网覆盖接种口，纱网外用无菌防水不干胶纸封闭，接种样品时临时解开不干胶纸；

（5）L型导管的水平段，设计1根虹吸管垂直向下通向样品杯底部，并且虹吸管在接近样品杯底部处开口，导管与虹吸管内径比为2:1-10:1，二者内部相通形成一个三通管；

（6）在样品杯内设计一层隔离网，并使通向样品杯底部的虹吸管下端穿过该隔离网；

（7）以隔离网为界，整个样品杯被分为隔离网上面的样品预处理室和隔离网下面的预接种室两部分。