CN205691851U - 用于培养和显微观察单层细胞的载片及载片盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种用于培养和显微观察单层细胞的载片及载片盒，其中载片包括基体，在基体上开有若干培养液储存槽，在每一个培养液储存槽旁边分别开有单层细胞液储存槽，单层细胞液储存槽与培养液储存槽连通且深度浅于培养液储存槽，在培养液储存槽和单层细胞液储存槽的上方设有一观察窗，观察窗与基体采用整体式结构，观察窗在对应于培养液储存槽的位置设有加液口，观察窗在对应于单层细胞液储存槽的位置处设有加样口。载片盒包括盒体和盒盖，在盒体内设有若干载片卡位，在载片卡位的一端设有用于放入手指取出载片的凹槽，在载片卡位下方设有吸水保湿材料。本实用新型可以制作单层细胞用于即时观察和计数，又能较长时间培养细胞并持续观察。

Description

用于培养和显微观察单层细胞的载片及载片盒

技术领域

本实用新型属于显微容器技术领域，尤其涉及一种用于培养和显微观察单层细胞的载片及载片盒。

背景技术

细胞分裂和分化发育是生命科学中的重要研究内容，明确细胞形态变化过程是这些研究的基础工作。微生物、动物和植物等相关研究都会涉及到这一研究内容。观察细胞分裂和分化发育往往需要对某一固定的细胞进行长时间跟踪观察。但如何能够跟踪一个指定的细胞，并保证它在长时间的被观察过程中是活的、保持正常生长状态？这是科研人员进行此类研究时常常遇到的问题。目前往往借助荧光标记、转基因标记等复杂且昂贵的技术才能达到这一目的。因此，该研究领域需要一种经济、简单易用的器具以方便科研人员能做此类常规实验。

现阶段，科研人员一般都是使用普通载玻片和盖玻片通过人工制作单层细胞用于细胞形态观察。制作步骤如下：首先把待观察的细胞培养到预定的阶段，然后将适量的含细胞的液滴滴在载玻片上；再用盖玻片进行压片使液滴被压成极薄的液膜，以便形成单层细胞；最后进行显微观察。这种方式的缺点是：a、待观察的细胞培养到预定阶段后才能取样用于制作单层细胞并立即观察，被观察的对象只能是某一个时间点的细胞状态；要观察细胞的形态变化过程，需要培养细胞群体严格的同步性，并要在全程时间内密集的取样制片观察；无法观察同一个细胞个体的变化，实验误差大。b、基于（a）这样的取样特点，科研人员只能大量的连续取样观察，对一类细胞的形态变化过程进行大量的分析归类，最终总结出细胞形态变化规律，工作量较大。c、基于（a）这样的取样特点，科研人员每次取样观察到的对象都是不同的细胞个体，无法对同一细胞个体进行长时间观察，因此在细胞形态变化的数据记录实验误差较大。d、由于观察一种细胞形态变化过程需要不停取样制作单层细胞，对实验人员的技术稳定性要求较高，难以保证每次实验条件的稳定性，实验的人为误差增大。

授权公告号为CN2801789Y的中国专利，公开了一种微孔细胞培养载片，由若干圆形凹孔构成，该凹孔孔深为800微米～4000微米，可以加入含有足够培养液的细胞样剂，实现较长时间的细胞培养和观察。上述技术的缺点是：如果要长时间观察细胞，随着培养时间的增加，细胞数量分裂变多，分裂后的细胞将会在凹孔培养液中交叠，不会形成单层细胞；由于一般的细胞（包括细菌、真菌和人类细胞等）的大小一般在一微米到一百微米之间，如需人工在这凹孔中滴上含细胞的液滴，使之形成单层细胞便于显微观察，技术难度又非常大。所以，该技术难以达到单层细胞观察的目的。

不论是上述哪种载玻片，为确保携带和储存的安全，一般都会放置在载玻片盒中进行保存。而现有载玻片盒基本采用中空的结构，内部环境与外界空气无异，达不到细胞培养所需的湿度，无法阻止细胞液的挥发，只适合空载片的存放，对含有细胞液的载玻片则难以实现长期的活性储存。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种用于培养和显微观察单层细胞的载片及载片盒，既能实现单层细胞的即时观察，又能对单层细胞进行长时间培养实现持续观察。

本实用新型提供的这种用于培养和显微观察单层细胞的载片，包括基体，在该基体上开有若干培养液储存槽，在每一个培养液储存槽旁边还分别开有单层细胞液储存槽，该单层细胞液储存槽与培养液储存槽连通且深度浅于培养液储存槽，在培养液储存槽和单层细胞液储存槽的上方设有一观察窗，所述观察窗与基体采用整体式结构，观察窗在对应于培养液储存槽的位置设有加液口，观察窗在对应于单层细胞液储存槽的位置处设有加样口，所述加液口用于向培养液储存槽内添加培养液，加样口用于向单层细胞液储存槽内滴入细胞液并自动形成单层细胞。

为使本实用新型适合一般细胞的观察，所述单层细胞液储存槽的深度为1～100微米。

为方便本实用新型向单层细胞液储存槽内加样，所述加样口采用中间宽两端窄的结构。

所述观察窗与基体一次成型。

所述观察窗与基体固接成一整体。

为使本实用新型可满足无菌培养单层细胞的实验要求，所述基体与观察窗由耐高温、耐高压、透明的高分子材料制成。

一种与上述用于培养和显微观察单层细胞的载片配套使用的载片盒，包括盒体和盒盖，在盒体内设有若干载片卡位，在载片卡位的一端设有用于放入手指取出载片的凹槽，在载片卡位下方设有吸水保湿材料。

为方便本实用新型可以高温灭菌，实现无菌培养的实验要求，所述盒体和盒盖由耐高温、耐高压的材料制成。

为确保本实用新型在培养过程中的无菌效果，所述盒盖内沿环绕有密封圈，该密封圈与盒体上口外沿密封连接。

与现有技术相比，本实用新型具有以下优点：

一、只要将合适细胞浓度的培养液滴到加样口中就能在单层细胞液储存槽与观察窗之间的微小夹层中自动形成单层细胞，直接用于观察，省去用盖玻片进行人工压片的手工步骤，且单层技术稳定；

二、培养液储存槽与单层细胞液储存槽是连通的，可以提供一定量的营养成分使被观察的细胞在较长一段时间（约24小时或更长的时间）内保存活性状态（在这段时间内可保持细胞分裂或形态分化等变化），由于单层细胞液储存槽中的液体几乎不流动，因此细胞位置尽可能的被固定下来，可以长时间对载片中同一个细胞个体的形态变化过程进行固定跟踪观察，增加了实验结果的准确性；

三、观察窗与培养液储存槽和单层细胞液储存槽的个数相匹配，基体上可以制作数个重复结构单元；可同时对多个细胞样品进行培养观察，增加了单个载片的样品通量，非常方便科研人员对不同处理细胞样品的对照观察；

四、制作一配套的载片盒，通过吸水保湿材料可在一定程度上延缓载片中培养液的挥发，延长了细胞活体观察时间。

本实用新型结构简单，操作方便，既可以制作单层细胞用于即时观察和计数，又能较长时间的培养细胞并对同一细胞个体进行持续观察其形态变化。

附图说明

图1为本实用新型用于培养和显微观察单层细胞的载片的结构示意图一。

图2为图1A-A处局部剖视结构示意图。

图3为本实用新型用于培养和显微观察单层细胞的载片的结构示意图二。

图4为本实用新型载片盒的剖视结构示意图。

图5为本实用新型用于培养和显微观察单层细胞的载片置于盒体内的结构示意图。

具体实施方式

以下是本实用新型中用于培养和显微观察单层细胞的载片的实施例一

从图1和图2可以看出，本实用新型这种用于培养和显微观察单层细胞的载片，包括基体1和观察窗2，在基体1上开有若干成阵列排布的培养液储存槽11，在每一个培养液储存槽11的同一边分别开有单层细胞液储存槽12，单层细胞液储存槽12与培养液储存槽11连通，单层细胞液储存槽12的深度浅于培养液储存槽11的深度，观察窗2设在培养液储存槽11和单层细胞液储存槽12的上方，基体1与观察窗2通过一次成型的方式形成整体式结构，在培养液储存槽11上方与基体1相接处的观察窗2上设有加液口21，在单层细胞液储存槽12上方与基体1相接处的观察窗2上设有加样口22。

从图1还可以看出，本实用新型的加液口21和加样口22分别设在观察窗2的两端。

从图1还可以看出，本实用新型的加样口22可采用中间宽两端窄的燕尾形。

在本实用新型中，基体1与观察窗2均由耐高温、耐高压、透明的高分子材料制成，单层细胞液储存槽12的深度一般为1～100微米，也可针对不同的细胞类型进行制定不同深度，如用于一般细菌时，单层细胞液储存槽12的深度为1～10微米；如用于一般真菌、动物或植物细胞时，单层细胞液储存槽12的深度为10～30微米；也可针对一些个体大的细胞制定单层细胞液储存槽12的深度为30～60微米或60～100微米等。

以下是本实用新型中用于培养和显微观察单层细胞的载片的实施例二

从图3可以看出，实施例二与实施例一的不同点在于，基体1与观察窗2通过固定连接的方式形成一个整体。

在上述实施例中，加样口22还可采用中间宽两端窄的圆弧形。

以下是本实用新型中载片盒的实施例

从图4和图5可以看出，本实用新型这种载片盒，包括盒体3和盒盖4，在盒体3内沿水平方向设有若干载片卡位31，在载片卡位31的一端设有凹槽32，在载片卡位31下方设有吸水保湿材料33, 在盒盖4内沿环绕有密封圈41，盒盖4安装盒体3上，密封圈41与盒体3上口外沿密封连接。

本实用新型的盒体3和盒盖4由耐高温、耐高压的材料制成，吸水保湿材料33由无菌水或其他保湿材料制成。

本实用新型用于制作并立即观察单层细胞的过程如下：

1、将含有适当细胞数量的微量培养液（如10微升）从加样口22滴入到单层细胞液储存槽12中，培养液会由于毛细现象被自动吸入并充满单层细胞液储存槽12，单层细胞样品即制作完成。

2、将上述样品置于显微镜下，通过观察窗2观察单层细胞液储存槽12内的单层细胞即可。立即观察而不需要长时间培养的样品，无需在培养液储存槽11中加培养液。

本实用新型用于长时间培养观察单层细胞的过程如下：

1、将含有适当细胞数量的微量培养液从加样口22滴入到单层细胞液储存槽12中，培养液会由于毛细现象被自动吸入并充满单层细胞液储存槽12；

2、将微量的新鲜培养液从加液口21滴入至培养液储存槽11内，培养单层细胞样品即制作完成；

3、取出盒体3，在载片卡位31下方加入无菌的吸水保湿材料33，把上述样品载片放到盒体3的载片卡位31中，盖上盒盖4，放入合适温度的培养箱中培养。观察时，只需打开盒盖4，将手指从凹槽32内放入取出相应的载片即可。

Claims (9)

1.一种用于培养和显微观察单层细胞的载片，包括基体（1），在该基体（1）上开有若干培养液储存槽（11），其特征是：在每一个培养液储存槽（11）旁边还分别开有单层细胞液储存槽（12），该单层细胞液储存槽（12）与培养液储存槽（11）连通且深度浅于培养液储存槽（11），在培养液储存槽（11）和单层细胞液储存槽（12）的上方设有一观察窗（2），所述观察窗（2）与基体（1）采用整体式结构，观察窗（2）在对应于培养液储存槽（11）的位置设有加液口（21），观察窗（2）在对应于单层细胞液储存槽（12）的位置处设有加样口（22），所述加液口（21）用于向培养液储存槽（11）内添加培养液，加样口（22）用于向单层细胞液储存槽（12）内滴入细胞液并自动形成单层细胞。

2.根据权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片，其特征在于：所述单层细胞液储存槽（12）的深度为1～100微米。

3.根据权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片，其特征在于：所述加样口（22）采用中间宽两端窄的结构。

4.根据权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片，其特征在于：所述观察窗（2）与基体（1）一次成型。

5.根据权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片，其特征在于：所述观察窗（2）与基体（1）固接成一整体。

6.根据权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片，其特征在于：所述基体（1）与观察窗（2）由耐高温、耐高压、透明的高分子材料制成。

7.一种与权利要求1所述的用于培养和显微观察单层细胞的载片配套使用的载片盒，其特征在于：包括盒体（3）和盒盖（4），在盒体（3）内设有若干载片卡位（31），在载片卡位（31）的一端设有用于放入手指取出载片的凹槽（32），在载片卡位（31）下方设有吸水保湿材料（33）。

8.根据权利要求7所述的载片盒，其特征在于：所述盒体（3）和盒盖（4）由耐高温、耐高压的材料制成。

9.根据权利要求7所述的载片盒，其特征在于：所述盒盖（4）内沿环绕有密封圈（41），该密封圈（41）与盒体（3）上口外沿密封连接。