CN205687905U - 直接pcr扩增试剂盒 - Google Patents

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汪天杰
王晨光
朱鹏宇
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Abstract

本实用新型公开了一种直接PCR扩增试剂盒,要解决的技术问题是便于携带、使用方便且能够避免试剂污染。本实用新型试剂盒包括盒体,所述试剂盒还包括离心管、分别分装有直接PCR扩增所需的若干个试剂的胶囊体以及研磨杵;所述离心管的盖子的中心处设有用于刺破胶囊体上下两端端面的刺针,胶囊体的横截面为圆形,胶囊体的横截面的直径与离心管的内径相等,在胶囊体的外周壁上端设有一周环形的凸边。与现有技术相比,本实用新型直接PCR扩增试剂盒可以避免试剂被污染;而且能够根据需要携带相应量的胶囊体,且在离心管上设置可刺破胶囊体的刺针,使用方便,而且成本低,能够给免DNA提取PCR带来巨大的改变,因此具有很好的市场应用前景。

Description

直接PCR扩增试剂盒
技术领域
本实用新型涉及一种生物实验技术领域,特别是一种直接PCR扩增试剂盒。
背景技术
目前,传统的直接PCR扩增试剂盒,通常包含有分别装有溶液A、溶液B以及PCRMagicMix 3.0的各种试剂管,而每种试剂管内一般装有足够检测100次的试剂,而且其包含的研磨杵以及实验需要使用的离心管均是分散设置,在使用时,将试剂通过吸管从容器中吸出放入离心管内混合,这种方式虽然简单,但是多次使用或携带容易造成试剂污染而失效的问题,而且各试剂和耗材均是分散设置,使用时还需要配合不同规格的移液枪和枪头,操作不太方便。
发明内容
本实用新型的目的是提供一种直接PCR扩增试剂盒,要解决的技术问题是便于携带、使用方便且能够避免试剂污染。
为解决上述问题,本实用新型采用以下技术方案实现:一种直接PCR扩增试剂盒,所述试剂盒包括盒体,所述试剂盒还包括离心管、分别分装有直接PCR扩增所需的若干个试剂的胶囊体以及研磨杵;所述离心管的盖子的中心处设有用于刺破胶囊体上下两端端面的刺针,胶囊体的横截面为圆形,胶囊体的横截面的直径与离心管的内径相等,在胶囊体的外周壁上端设有一周环形的凸边。
本实用新型所述的直接PCR扩增试剂盒所需的若干个试剂包括溶液A、溶液B以及PCR MagicMix 3.0试剂。
本实用新型的每个胶囊体放置在与其形状适配且容易被挤出至离心管的小盒管中。
本实用新型所述的胶囊体的下端为弧面。
本实用新型所述的胶囊体的上端设有薄膜面。
本实用新型所述的盒体内设有将盒体的内腔划分为至少五个分隔腔的隔板,所述离心管、胶囊体以及研磨杵分别放置在分隔腔内。
本实用新型的放置研磨杵的分隔腔内设有研磨杵盒,研磨杵放置在研磨杵盒内,研磨杵盒上设有盖子。
本实用新型的放置装有PCR MagicMix 3.0试剂的胶囊体的分隔腔的腔体内设有保温隔热板。
本实用新型所述的放置离心管的分隔腔内设有离心管支架,所述离心管支架上设有至少一个用于将离心管插入后竖立放置的放置孔。
本实用新型直接PCR扩增试剂盒与现有技术相比,采用各个分区将免DNA提取PCR所需的耗材和试剂统一集中隔置,再用一个盒体将各个分区容纳进来,便于携带;采用将一定量的免DNA提取PCR所需的若干个试剂分别封装在胶囊体中,可以避免试剂被污染;而且能够根据需要携带相应量的胶囊体,且在离心管上设置可刺破胶囊体的刺针,使用方便,而且成本低,能够给免DNA提取PCR带来巨大的改变,因此有很好的市场应用前景。
附图说明
图1是本实用新型试剂盒的结构示意图。
图2是本实用新型离心管的剖视图。
图3是本实用新型胶囊体的剖视图。
图4是本实用新型使用时的离心管与胶囊体的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步详细说明。
如图1所示,本实用新型的试剂盒包括盒体1,在盒体1上设有能够将盒体1的敞口封闭的盒盖12,盒盖12与盒体1通过现有技术的卡扣结构实现相互扣合。
该试剂盒还包括离心管2、分别装有直接PCR扩增所需要的溶液A、溶液B和PCRMagicMix 3.0的胶囊体3以及研磨杵4;其中的装有溶液A、溶液B以及PCR MagicMix 3.0的胶囊体3的容量可根据实际测试所使用的剂量进行灌装;本实用新型的免DNA提取PCR试剂盒中的溶液A、溶液B以及PCR MagicMix 3.0试剂来源于宝曼公司生产的型号为130985-100型免DNA提取PCR试剂盒中的试剂。
如图2所示,在离心管2的盖子的中心处设有用于刺破胶囊体3上下两端端面的刺针5;在离心管2的盖子上与离心管2的管腔开口相对的一侧端面上还设有与离心管2的管腔开口相适配连接的凸台13。
如图3所示,胶囊体3的横截面为圆形,其横截面的直径与离心管2的内径相等,胶囊体3的下端为弧面,弧面可以引导胶囊体3中的液体从胶囊体3的刺破孔中流入离心管2的管腔内;而胶囊体3的上端设有厚度小于胶囊体3其余部分厚度的薄膜面15。在胶囊体3的外周壁上端设有一周环形的凸边6,当胶囊体3放入离心管2内时,凸边6的下端边缘与离心管2的管体上端边缘相互抵靠,从而使胶囊体3不会掉入离心管2的管腔内。每个胶囊体3可以放置在与其形状适配且可容易挤出至离心管的小盒管中,以避免在存放或时间时受到污染,使用时只需通过挤压小盒管的底部将胶囊体3的一头挤入离心管,利用小盒管将胶囊体3压入离心管中即可。
如图1所示,盒体1内设有将盒体1的内腔划分为至少五个分隔腔的隔板7,优选为5个,分别为设于盒体1左边上侧的离心管分隔腔16、设于盒体1左边下侧的研磨杵分隔腔17、设于盒体1右边上侧的用于放置装有溶液A的胶囊体的第一胶囊体分隔腔18、设于盒体1右边中部的用于放置装有溶液B的胶囊体的第二胶囊体分隔腔19以及设于盒体1的右边下侧的用于放置装有PCR MagicMix 3.0的胶囊体的第三胶囊体分隔腔20,离心管2放置在离心管分隔腔16,胶囊体3根据装在的不同试剂分别放置在三个胶囊体分隔腔18、19、20中,研磨杵4放置在研磨杵分隔腔17内。
因PCR MagicMix 3.0需要低温保藏,在放置装有PCR MagicMix3.0的胶囊体3的分隔腔(即第三胶囊体分隔腔20)的腔体内设有保温隔热板9,该保温隔热板9由PE棉外包塑料材料制成,在第三胶囊体分隔腔20上还可以设有由保温隔热板制作而成的盖板14,使第三胶囊体分隔腔20形成一个可用于低温保藏的腔体。当需要外出携带时,将放置于-20℃的包含有胶囊体3的小盒管取出放入本实用新型免DNA提取PCR试剂盒中,或者将提前放置于-20℃保存的已保存有胶囊体3的本实用新型直接PCR扩增试剂盒中直接取出,因在装有PCRMagicMix 3.0的胶囊体3的分隔腔的腔体内设有保温隔热板9,即便外出,还能够使其维持在低温环境,避免失效。
在放置离心管2的分隔腔(即离心管分隔腔16)内设有离心管支架10,离心管支架10的两端固定在离心管分隔腔相对两侧的腔壁上,在离心管支架10上设有至少一个用于将离心管2插入后竖立放置的放置孔11。
在研磨杵分隔腔17内还可以设有可取出的研磨杵盒8,研磨杵盒8上设有盖子,可以使得研磨杵3更干净,免受污染。
如图4所示,根据试剂的添加顺序,将胶囊体3放入离心管2内,当盖合离心管2的盖子时,刺针5依次刺破胶囊体3的上端面以及下端面,使得胶囊体3内的试剂从下端面上的刺破孔流入离心管2内,进一步将离心管2的盖子紧压在离心管2的管体上时,由于凸台13的表面对胶囊体3的上端面的挤压,使胶囊体3中的试剂被完全推送至离心管2的管腔内,然后取出胶囊体3,重复上述步骤,使三种试剂均被挤入离心管2的管腔内。
具体使用方法如下:
1.首次使用本产品时需要详细检查溶液A和溶液B的胶囊体3是否有结晶析出。如果有需要37℃溶解后摇晃均匀待用。未开封的装有溶液A和溶液B胶囊体3可以放常温保存。
2.根据材料不同参考下表取少量样品到1.5mL塑料的离心管2中。
样品种类 取用量
动物组织 1-5mg
鼠尾 2mm长
血液样品 不超过20uL
植物叶片 1-5mg
植物种子(去皮) 1-5mg
酵母培养物 0.2-0.5mL培养物沉淀
细菌培养物 0.2-0.5mL培养物沉淀
注意:未列出样品,用户需要自己摸索最佳用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花),组织使用量最好不要超过0.5mg。
3.加入100uL溶液A,将装有溶液A的胶囊体3放在离心管2上,盖上盖子,使刺针5刺破薄膜面15以及胶囊体3的下端面,让溶液A流入离心管2中,按压离心管2盖子,确保胶囊体3中的溶液A完全被挤出并确保溶液A完全将样品淹埋,并取出用过的胶囊体3。
4.研磨杵4小心将样品在离心管内捣碎。血液一般捣碎30秒即可;实体组织需要捣碎到溶液的颜色变浑浊(植物叶片的话,溶液的颜色将变成绿色)。如需更多研磨杵4,可另购。对棘手的样品,还可以增加95℃保温10-60分钟一步,待温度冷却到室温后再进入下一步。残留的实体组织碎片不会影响后续试验。
5.加入100uL溶液B,将装有溶液B的胶囊体3放在离心管2上,盖上盖子,使刺针5刺破薄膜面15以及胶囊体3的下端面,让溶液B流入离心管2中,按压离心管2盖子,确保胶囊体3中的溶液B完全被挤出,取出用过的胶囊体3,离心管2震荡10秒混匀。
6.常温12000rpm离心2分钟。
7.将上清液转移到一个干净的1.5mL离心管中。如果不用,可以放-80℃长期保存。如果用于后续PCR,请直接进入下步。
8.直接用裂解液作为模板设置30uL体系的PCR反应体系如下:
成分 用量
PCR MagicMix3.0 15uL
细胞裂解液(来于上步) 1-5uL
自备PCR引物1(10uM) 1uL
自备PCR引物2(10uM) 1uL
补水到 30uL
注意:装有PCR MagicMix3.0的胶囊体3需要放入离心管2中,刺破,使试剂流入离心管内,裂解液体积最好不要超过PCR体积的1/10。如果需要增加模板的加入量,则PCR体系应该相应的增加。如果加入5uL裂解液,则可以使用50uL的PCR体系。

Claims (9)

1.一种直接PCR扩增试剂盒,所述试剂盒包括盒体(1),其特征在于:所述试剂盒还包括离心管(2)、分别分装有直接PCR扩增所需的若干个试剂的胶囊体(3)以及研磨杵(4);所述离心管(2)的盖子的中心处设有用于刺破胶囊体(3)上下两端端面的刺针(5),胶囊体(3)的横截面为圆形,胶囊体(3)的横截面的直径与离心管(2)的内径相等,在胶囊体(3)的外周壁上端设有一周环形的凸边(6)。
2.根据权利要求1所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:所述直接PCR扩增试剂盒所需的若干个试剂包括溶液A、溶液B以及PCR MagicMix 3.0试剂。
3.根据权利要求1所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:每个胶囊体(3)放置在与其形状适配且容易被挤出至离心管(2)的小盒管中。
4.根据权利要求2所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:所述胶囊体(3)的下端为弧面。
5.根据权利要求4所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:所述胶囊体(3)的上端设有薄膜面(15)。
6.根据权利要求5所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:所述盒体(1)内设有将盒体(1)的内腔划分为至少五个分隔腔的隔板(7),所述离心管(2)、胶囊体(3)以及研磨杵(4)分别放置在分隔腔内。
7.根据权利要求6所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:放置研磨杵(4)的分隔腔内设有研磨杵盒(8),研磨杵(4)放置在研磨杵盒(8)内,研磨杵盒(8)上设有盖子。
8.根据权利要求7所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:放置装有PCR MagicMix3.0试剂的胶囊体(3)的分隔腔的腔体内设有保温隔热板(9)。
9.根据权利要求8所述的直接PCR扩增试剂盒,其特征在于:所述放置离心管(2)的分隔腔内设有离心管支架(10),所述离心管支架(10)上设有至少一个用于将离心管(2)插入后竖立放置的放置孔(11)。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108641899A (zh) * 2018-05-24 2018-10-12 金陵科技学院 一种离心管的预分盖
CN113941384A (zh) * 2021-11-21 2022-01-18 洛阳职业技术学院 一种可应用于快速无损分析的胶囊式二次离心管

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